本发明属于保健食品领域，具体涉及一种具有增强免疫作用的中药保健食品及其制备方法。
背景技术：
：免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等），处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞，以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力，是人体识别和排除“异己”的生理反应。免疫系统由外至里可分为四部分。第一部分是免疫组织，又称屏障结构，主要包括皮肤、黏膜、血脑屏障和胎盘屏障；第二部分是免疫器官，包括骨髓、胸腺、脾脏、淋巴结和扁桃体；第三部分是免疫细胞，包括T细胞、B细胞和吞噬细胞等；第四部分军是免疫分子，主要由抗体组成。免疫功能是靠以上四部分共同协作来抵抗外来侵入，保护机体不受伤害。其主要有三大功能：第一是防止病原微生物（细菌和病毒等）侵入肌体，减少疾病的发生；第二是消灭肌体内的“异己分子”；第三是自稳作用。免疫力低下的主要表现有：易疲劳、容易感染、感冒不断、肠胃娇气、旧病容易复发等。随着经济全球化的发展，激烈竞争的环境下，人们长期处在巨大的工作和精神压力之下，神经高度紧张、焦虑，免疫力下降，常处于亚健康状态。据数据调查，十个上班族人群中，有9个为亚健康状态。此外，人体机能在30岁以后开始逐渐下滑，如果不提前预防和积极干预，周围环境、心理因素以及其他因子等，加速机体的免疫力下降。目前，国产保健食品中增强免疫力产品所占份额较大，市场主要以蛋白质粉、虫草、人参、灵芝、蜂王浆以及一些具有补益类的中药提取物组成，产品种类多，琳琅满目，但是质量参差不齐。技术实现要素：本发明的目的是提供了一种具有增强免疫作用的中药保健食品及其制备方法。本发明的保健食品由以下重量份数比例的原料组成：黄芪85～350、牛蒡子40～120、桔梗50～200、枸杞子150～330。本发明的保健食品优选原料用量为：黄芪125、牛蒡子75、桔梗100、枸杞子75。本发明的保健食品制备方法，其特征是：包括以下步骤：1、取黄芪85～350重量份、牛蒡子40～120重量份、桔梗50～200重量份、枸杞子150～330重量份；2、将步骤1所取的黄芪、牛蒡子、桔梗、枸杞子混合，用10倍重量水加热提取3次，每次2h；3、将3次提取液过滤，合并，减压浓缩至相对密度为1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉；4、将浸膏干粉加入药用辅料，制成常规的口服剂型。本发明的积极效果是：加如牛蒡子为主要成分之一，与其余成分协同增效，提升了与黄芪、桔梗和枸杞子组合物免疫功能。本发明组合物疗效显著、无副作用，可长期服用，是一种安全有效的增强免疫力的保健食品。本发明的积极效果是：加如牛蒡子为主要成分之一，与其余成分协同增效，提升了与黄芪、桔梗和枸杞子组合物免疫功能。本发明组合物疗效显著、无副作用，可长期服用，是一种安全有效的增强免疫力的保健食品。本发明是基于：黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。具有补气升阳，益卫固表，托毒生肌，利水退肿之功效。研究表明，黄芪对体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫等免疫系统均具有正向调节作用（中国新药杂志，2008年，第17卷，第17期）；黄芪提取物可以增加脾脏、胸腺重量，提高黏膜免疫功能，调节与免疫相关的细胞因子含量，提高ＮＫ细胞的杀伤能力，促进巨噬细胞、树突状细胞的吞噬作用，增加Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞数量及活性，从而使特异性免疫和非特异性免疫具有不同程度的增强（亚太传统医药，2012年，第8卷，第7期）；黄芪多糖对免疫功能的调节作用不仅在于能够增强免疫器官和细胞的功能，还能刺激细胞因子的释放，影响神经-内分泌-免疫系统网络，促进相关基因的合成和表达（食品科学，2013年，第34卷，第11期）。牛蒡子为菊科草本植物牛蒡属牛蒡的干燥成熟果实。研究表明，牛蒡子含有丰富的蛋白质、钙、维生素、胡萝卜素，这些营养成分可促进新陈代谢，提高人体免疫力，促进新生细胞生长，延缓衰老（中国中医药现代远程教育，2010年，第8卷，第24期）；牛蒡子可使正常小鼠淋巴细胞转化率和小鼠的α-醋酸萘酯酶阳性率显著提高，并可明显增加抗体生成细胞的形成，增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，牛蒡子能够增强机休免疫功能（西北药学，1993年，第8卷，第2期）。牛蒡子苷元可能是通过调节免疫应答来对活性巨噬细胞、淋巴细胞包TNF-α、NO产生及淋巴细胞增殖起作用（中国现代药物应用，2009年，第3卷，第15期）。桔梗为桔梗科植物桔梗的干燥根。研究表明，桔梗水提物可以浓度依赖性地刺激巨噬细胞的增殖、吞噬以及NO的产生以增强机体的免疫应答，表明桔梗是潜在的巨噬细胞功能强化剂，具有免疫调节作用（中药药理与临床，2013年，第29卷，第2期）；贾林等用药理实验证明了桔梗多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠具有免疫增强调节作用（食品与机械，2012年，第28卷，第3期）；桔梗多糖在体外能够清除经基自由基和超氧阴离子自由基fH，在细胞水平具有一定的免疫调节作用（2012年，中国医药科学，第2卷，第9期）。枸杞子为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实。是滋阴助阳，益精补血的良药。研究表明，枸杞子中富含枸杞多糖、硒和类胡萝卜素等抗氧化物质，且活性很强，能够促进生物体内巨噬细胞的吞噬功能，具有促进调节免疫的功能（黑龙江医药，2013年，第6卷，第26期）；武晓群等用药理实验证明，高浓度枸杞子可升高衰老小鼠胸腺指数和脾指数，提高免疫球蛋白和C3的含量，而低浓度枸杞子可提高免疫球蛋白的含量，即枸杞子对D-半乳糖致衰小鼠具有免疫调节作用（江苏中医药，2007年，第39卷，第11期）。本发明的创新之处在于本发明与市售中药提取物复配产品相比，是在中医理论指导下，通过各药物间君臣佐使相互配合，协同增效，经药理实验证明，效果优于市售产品。本发明的另一创新之处在于方中牛蒡子的使用，经药理实验证明，本发明组合物的增免效果要优于仅以黄芪、桔梗和枸杞子的组合物，该配方是通过各药物间的相互协同作用来增效的，缺一不可。此外，经检索，目前国产保健食品中暂未出现以牛蒡子为原料的产品，而专利检索除中药外，未发现以牛蒡子为原料的保健食品，本方重用牛蒡子，经药理实验证实，效果显著。免疫效果实验受试药物为本发明组合物按照实施案例1制备得到；对照药为参杞黄胶囊，吉林一正药业集团有限公司,批号：20151003。实验动物：SPF级昆明雌性1月龄小鼠18-22g，来源：吉林大学白求恩医学院实验动物中心，合格证号：SCXK(吉)2014-0003。根据人口服推荐用量，设样品低、中、高剂量组分别3.35、6.7、13.4g/Kg·BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍），一个空白对照组、一个阳性对照组、一个牛蒡子阴性组（处方中不加牛蒡子），共6组，每组10只动物。采取灌胃法，每日灌胃一次，空白对照组灌蒸馏水。各组小鼠连续给灌胃30d，测定各项指标。对小鼠增强免疫力的作用，本实验主要测定ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验（MTT法）、小鼠的迟发型变态反应（耳肿胀法）、小鼠抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）、血清溶血素测定（血凝法）、小鼠碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶测定法）。免疫分组：每60只小鼠为1组，共6组。免疫Ⅰ组，进行ConA诱导鼠脾淋巴细胞转化实验；免疫Ⅱ组，进行迟发型变态反应实验；免疫Ⅲ组，进行体比值测定，血清溶血素测定和抗体生成细胞数测定；免疫Ⅳ-Ⅵ组，分别进行碳实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和NK细胞活性测定。结果如下：1、对小鼠体重的影响表1免疫Ⅰ组小鼠体重的增长变化（±S）名称动物数初始体重/g中期体重/g末期体重/g增重/g高剂量组1020.6±1.231.0±1.042.8±1.522.2±2.0中剂量组1020.2±1.531.3±1.243.7±1.823.5±2.5低剂量组1021.3±1.331.7±1.343.8±1.622.5±2.2空白对照组1020.1±1.331.4±1.342.8±1.822.7±2.3阳性药物组1020.5±1.232.0±1.043.6±1.423.1±2.5牛蒡子阴性组1020.4±1.331.5±1.243.2±1.522.8±2.2表2免疫Ⅱ组小鼠体重的增长变化（±S）名称动物数初始体重/g中期体重/g末期体重/g增重/g高剂量组1021.8±1.330.5±1.343.3±1.621.5±1.8中剂量组1020.4±1.231.6±1.243.4±1.523.0±2.0低剂量组1021.1±1.531.3±1.542.8±1.621.7±2.0空白对照组1020.7±1.231.0±1.242.2±1.621.5±1.8阳性药物组1020.3±1.331.6±1.342.6±1.522.3±2.0牛蒡子阴性组1021.4±1.231.8±1.243.0±1.621.6±2.2由表1和表2可知，不同免疫组的实验初期、实验中期以及实验末期样品各剂量组的小鼠体重及试验期间小鼠的体重增长与阴性对照组比较，均无显著性差异（P>0.05），结果表明，该样品对小鼠的体重增长无明显影响。2、对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响表3小鼠免疫器官脏器/体重比值（±S）名称动物数胸腺/体重/%脾脏/体重/%高剂量组100.228±0.610.45±0.40中剂量组100.218±0.480.41±0.56低剂量组100.215±0.750.44±0.39空白对照组100.207±0.660.46±0.83阳性药物组100.213±0.580.43±0.62牛蒡子阴性组100.211±0.630.42±0.46由表3可知，经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后，与空白对照组比较，各剂量组胸腺、脾脏/体重比值均无显著差异（P>0.05），表明该组合物对小鼠的免疫器官重量无明显影响。3、对小鼠细胞免疫的影响表4ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化及小鼠脾迟发型变态反应（DTH）实验结果（±S）名称动物数淋巴细胞增值能力（OD值）左右耳边重量差值/mg高剂量组100.218±0.063*13.21±1.55#中剂量组100.153±0.07411.13±1.60低剂量组100.148±0.08210.69±1.80空白对照组100.089±0.0779.91±1.30阳性药物组100.136±0.09912.34±1.50牛蒡子阴性组100.131±0.08510.13±1.60注：*与对照组比较有显著性差异（P<0.05）；#与对照组比较有极显著性差异（P<0.01）。由表4可知，经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后，与空白对照组比较，各组小鼠的淋巴细胞转化能力均高于阴性对照组，其中高剂量组具有显著性差异（P<0.05），表明该样品具有促进小鼠淋巴细胞增值、转化能力的作用；与空白对照组比较，各组小鼠的左右耳片重差值均高于阴性对照组，其中高剂量组具有极显著性差（P<0.01），表明该样品具有促进小鼠迟发型变态反应的作用。4、对小鼠体液免疫的影响表5小鼠抗体生成细胞数和血清溶血素的实验结果（±S）名称动物数溶血空斑数（1×10/106脾细胞）抗体积数高剂量组10262.0±61.2#218.6±13.4*中剂量组10232.0±56.7*206.3±17.6低剂量组10215.0±59.5204.9±11.8空白对照组10167.0±47.3188.5±22.3阳性药物组10228.0±52.8205.6±16.5牛蒡子阴性组10206.0±48.1195.7±24.2注：*与对照组比较有显著性差异（P<0.05）；#与对照组比较有极显著性差异（P<0.01）。由表5可知，经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后，与空白对照组比较，各组小鼠的抗体生成细胞数均高于阴性对照组，其中高、中剂量组与空白对照组的差异具有显著性（P<0.01和P<0.05），表明该样品具有促进小鼠抗体生成细胞增殖的作用；与空白对照组比较，各组小鼠的抗体积数均高于阴性对照组，其中高剂量组具有显著性差（P<0.05），表明该样品具有提高小鼠血清溶血素水平的作用。5、对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响表6小鼠单核-巨噬细胞碳廓清实验结果（±S）名称动物数吞噬指数高剂量组107.34±0.88*中剂量组106.14±1.20低剂量组106.06±1.35空白对照组105.80±1.10阳性药物组106.12±1.22牛蒡子阴性组105.97±0.90注：*与对照组比较有显著性差异（P<0.05）；#与对照组比较有极显著性差异（P<0.01）。由表6可知，经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后，与空白对照组比较，各组小鼠的吞噬指数均高于阴性对照组，其中高剂量组与空白对照组的差异具有显著性（P<0.05），表明该样品具有促进小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的作用。表7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结果（±S）名称动物数吞噬率（%）吞噬指数高剂量组1033.6±2.8*0.56±0.13#中剂量组1031.9±3.40.51±0.08低剂量组1030.7±3.00.49±0.11空白对照组1030.0±2.20.44±0.05阳性药物组1031.6±3.20.52±0.07牛蒡子阴性组1030.3±3.10.46±0.09注：*与对照组比较有显著性差异（P<0.05）；#与对照组比较有极显著性差异（P<0.01）。由表7可知，经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后，与空白对照组比较，各组小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数均高于阴性对照组，其中高剂量组的吞噬率和吞噬指数与空白对照组的差异具有显著性（P<0.05和P<0.01），表明该样品具有促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用。6、对小鼠NK细胞活性的影响表8小鼠NK细胞活性测定结果（±S）名称动物数NK细胞活性（%）NK细胞活性转换数据高剂量组1035.31±7.730.612±0.05中剂量组1030.79±8.110.562±0.08低剂量组1029.74±8.250.553±0.12空白对照组1028.18±7.240.542±0.06阳性药物组1031.27±5.280.566±0.11牛蒡子阴性组1028.56±7.460.547±0.13由表8可知，经口给予小鼠不同剂量的受试物30d后，与空白对照组比较，各组小鼠的NK细胞活性均高于空白对照组，但各剂量组与空白对照组的差异无显著性（P>0.05），表明该组合物对小鼠的NK细胞活性无明显的提高作用。综上，本发明组合物能够促进小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化作用，促进小鼠的抗体生成细胞增殖，提高小鼠的血清溶血素水平，促进小鼠的迟发型变态反应及其单核-巨噬细胞的吞噬功能，对小鼠的体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值及其NK细胞活性无明显影响，由此可判定该组合物具有增强免疫力的作用。此外，通过药理证明，含有牛蒡子的组合物的增强免疫力作用优于不加牛蒡子的组合物，证明牛蒡子在该方中具有重要的增免作用。具体实施方式实施例一：取黄芪3500g、牛蒡子400g、桔梗2000g、枸杞子1500g，用10倍量水加热提取2h，共三次，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉，加入白砂糖8800g，混合，70%乙醇制粒，干燥后整粒，分装，10g/袋，即得。口服：一日2次，2袋/次。实施例二：取黄芪850g、牛蒡子1200g、桔梗500g和枸杞子3300g，用10倍量水加热提取2h，共三次，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉，加入白砂糖8800g，混合，70%乙醇制粒，干燥后整粒，分装，10g/袋，即得。口服：一日2次，2袋/次。实施例三：黄芪1250g、牛蒡子750g、桔梗1000g和枸杞子750g，用10倍量水加热提取2h，共三次，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉，用80%乙醇制粒，干燥，整粒，混合，灌装胶囊，分装，0.5g/粒，即得。口服：一日3次，3粒/次。当前第1页1 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