一种抑制和/或预防流感病毒继发细菌感染的产品的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药领域，涉及一种抑制和/或预防流感病毒继发细菌感染的产品O
【背景技术】
[0002]A型流感病毒(influenza A virus, IAV)引起的感染是造成世界上发病率和死亡率最高的疾病之一，每年造成约500万人感染，25-50万人死亡。继发细菌性肺炎是流感病人死亡的主要原因。2008年美国国家卫生院重新检测来自58例死于1918流感的尸检肺组织切片，证实了主要病变是严重细菌性肺部感染。科学家们检索了 1919-1929年发表的所有有关1918流感死亡的尸检研究共8000多例，来自15个国家，发现80%流感死亡病人的胸膜液为细菌培养阳性，其中主要是肺炎链球菌(S.pneumococcus)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)和A型链球菌(S.pyogenes)。由此得出结论:1918年的世界流感大流行造成5000万人死亡的主要原因不是流感病毒本身而是流感继发细菌性肺炎。与其相似，肺炎球菌和链球菌的继发感染也是2009年HlNl流行的主要并发症和死亡原因。
[0003]目前，对于流感病毒继发细菌感染的机制并不明确，缺乏针对性预防和治疗方法。严重影响了对流感重症和死亡的预防和控制。因此，迫切需要开发安全、有效、广谱、和易于推广应用的预防和/或治疗新方法。
[0004]TGF- β属于TGF- β超家族成员。TGF- β与TGF- β超家族其它成员有30?40%同源性。目前在哺乳动物中发现有TGF- β 1、TGF- β 2、TGF- β 3、TGF- β I β 2四个亚型。各亚型间同源性很高:TGF-f3 I与TGF-13 2有71%氨基酸同源性，TGF-β I与TGF-13 3有77%同源性，TGF-13 2与TGF-13 3有80%同源性。TGF-β各亚型功能相似，结合细胞表面相同的受体(TGF- β R)。目前发现TGF- β R存在着1、I1、111型三种形式，分布在几乎所有的组织细胞表面。其中，I型和II型受体参与信号的转导，III型受体不直接参与信号转导。TGF-β是一种多向性、多效性的细胞因子，以自分泌或旁分泌的方式通过细胞表面受体信号转导途径，调节细胞的增值、分化、凋亡，对细胞外基质蛋白的合成、创伤的修复、免疫功能等有重要的调节作用。TGF- β以无生物活性的休眠复合体形式存在:由25KD的同源二聚体TGF- β (生物活性部分)，潜活性相关蛋白(LAP)和潜在的TGF-β结合蛋白(LTBP)组成。在蛋白酶或其他分子的裂解作用下，将有活性TGF-β从复合体中释放出来，与膜表面受体异二聚体结合(I型受体可以激活Smads，II型受体与TGF-β结合)；进而活化下游的受体调节型SMAD蛋白(R-Smad)，包括Smad2和Smad3，将信号传导至胞浆内；R_Smad与共同调节型SMAD蛋白(Common mediator Smad, Co-Smad ;目前发现的仅有Smad4)结合后，复合物转移至细胞核，与革G基因(包括整合素(integrin)和纤粘蛋白(Fibronectin，Fn))结合，促进革El基因的表达。此外，TGF-β还可通过Smad非依赖的信号转导通路活化靶基因，如JNK信号通路。
【发明内容】
[0005]本发明的一个目的是提供一种TGF-β信号通路抑制剂的新用途。
[0006]本发明所提供的新用途为抑制转化生长因子β (transforming growthfactor-beta,TGF-0)信号通路抑制剂在制备抑制和/或预防流感病毒继发细菌感染的产品中的应用。
[0007]在本发明中，该新用途具体体现为:TGF-β信号通路抑制剂在制备具有如下
(1)-(4)中至少一种功能的产品中的应用:
[0008](I)抑制流感病毒感染所导致的肺细胞表面与细菌粘附相关的基质蛋白的表达上调；
[0009](2)抑制流感病毒感染引起的呼吸系统致病菌对肺细胞的粘附；
[0010](3)抑制流感病毒感染引起的呼吸系统致病菌在肺部的定居和/或感染；
[0011](4)预防和/或治疗流感病毒继发的细菌性肺炎。
[0012]在本发明中，所述TGF-β信号通路抑制剂可为如下中至少一种:抗TGF-β的单克隆抗体、可溶性TGF-β受体、TGF-β反义寡核苷酸、抑制TGF-β表达或抑制其活性的抑制剂、TGF-β受体的小分子抑制剂、TGF-β信号通路下游因子的小分子抑制剂。
[0013]所述TGF-β 可为:TGF-β 1，TGF-β 2，TGF-β 3 或 TGF-β I β 2 等各个亚型。
[0014]所述抗TGF-β的单克隆抗体可为:人源TGF-β的鼠、兔或羊等单克隆抗体。
[0015]所述可溶性的TGF- β受体可为:TGF- β I型和/或TGF- β 11型和/或TGF- β III型受体可溶性蛋白质；或经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白质。
[0016]所述TGF- β反义寡核苷酸可为:TGF- β的反义DNA、TGF- β的RNA干扰(RNAi)片段、或携带所述TGF- β的反义DNA或所述TGF- β的RNA干扰片段的表达载体。
[0017]所述抑制TGF-β表达或抑制其活性的抑制剂可为Pirfenidone。
[0018]所述TGF-β受体可为:TGF-β I型和/或TGF-β II型和/或TGF-β III型受体；所述TGF-β受体的小分子抑制剂具体可为SB431542、LDN-193189、LY2157299、LY2109761、SB525334、DMHU LDN-212854、ML347、LDN-193189HC1、K02288、SB505124、GW788388、LY364947 或 R印Sox0
[0019]所述TGF-β信号通路下游因子为Smad 3、JNK或AP-1 ;所述TGF-β信号通路下游因子的小分子抑制剂具体可为 SIS3、SP600125、JNK-1N-8、JNK Inhibitor IX 或 SR11302。
[0020]所述呼吸系统致病菌可为各种血清型的A型链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌或卡他莫拉菌。
[0021]所述肺细胞表面与细菌粘附相关的基质蛋白具体可如纤维连接蛋白(Fibronectin, Fn)或各种与细菌粘附相关的整合素(integrin)，如整合素α 5。
[0022]在本发明中，所述肺细胞具体为肺泡上皮细胞(如Α549细胞)或取自小鼠的肺部细胞。
[0023]所述产品可为药物。
[0024]本发明的另一个目的是提供一种产品。
[0025]本发明所提供的产品，其活性成分为TGF-β信号通路抑制剂；所述产品的用途为如下中的至少一种:
[0026](a)抑制和/或预防流感病毒继发细菌感染；
[0027](b)抑制流感病毒感染所导致的肺细胞表面与细菌粘附相关的基质蛋白的表达上调；
[0028](c)抑制流感病毒感染引起的呼吸系统致病菌对肺细胞的粘附；
[0029](d)抑制流感病毒感染引起的呼吸系统致病菌在肺部的定居和/或感染；
[0030](e)预防和/或治疗流感病毒继发的细菌性肺炎。
[0031]在本发明中，所述TGF-β信号通路抑制剂可为如下中至少一种:抗TGF-β的单克隆抗体、可溶性TGF-β受体、TGF-β反义寡核苷酸、抑制TGF-β表达或抑制其活性的抑制剂、TGF-β受体的小分子抑制剂、TGF-β信号通路下游因子的小分子抑制剂。
[0032]所述TGF-β 可为:TGF-β 1，TGF-β 2，TGF-β 3 或 TGF-β I β 2 等各个亚型。
[0033]所述抗TGF-β的单克隆抗体可为:人源TGF-β的鼠、兔或羊等单克隆抗体。
[0034]所述可溶性的TGF- β受体可为:TGF- β I型和/或TGF- β 11型和/或TGF- β III型受体可溶性蛋白质；或经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白质。
[0035]所述TGF- β反义寡核苷酸可为:TGF- β的反义DNA、TGF- β的RNA干扰(RNAi)片段、或携带所述TGF- β的反义DNA或所述TGF- β的RNA干扰片段的表达载体。
[0036]所述抑制TGF-β表达或抑制其活性的抑制剂可为Pirfenidone。
[0037]所述TGF-β受体可为:TGF-β I型和/或TGF-β II型和/或TGF-β III型受体；所述TGF-β受体的小分子抑制剂具体可为SB431542、LDN-193189、LY2157299、LY2109761、SB525334、DMHU LDN-212854、ML347、LDN-193189HC1、K02288、SB505124、GW788388、LY364947 或 R印Sox0
[0038]所述TGF-β信号通路下游因子为Smad 3、JNK或AP-1 ;所述TGF-β信号通路下游因子的小分子抑制剂具体可为 SIS3、SP600125、JNK-1N-8、JNK Inhibitor IX 或 SR11302。
[0039]所述呼吸系统致病菌可为各种血清型的A型链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌或卡他莫拉菌。
[0040]所述肺细胞表面与细菌粘附相关的基质蛋白具体可为纤维连接蛋白(Fibronectin, Fn)或各种与细菌粘附相关有不同α或β链的整合素(integrin)，如整合素α 5。
[0041 ] 在本发明中，所述肺细胞具体为肺泡上皮细胞(如Α549细胞)或取自小鼠的肺部细胞。
[0042]所述产品可为药物。
[0043]所述药物的使用方式包括鼻腔吸入、口服、皮下注射、或皮内注射。
[0044]在本发明的实施例中，以上所有的所述流感病毒均具体为甲型流感病毒；所述甲型流感病毒具体为Hl型流感病毒，如HlNl型流感病毒，具体如毒株A/PuertoRico/08/1934(PR8)。
[0045]在本发明的实施例中，以上所有的所述A型链球菌(S.pyogenes)均具体为A型链球菌(S.pyogenes)Ml型；以上所有的所述肺炎链球