北美金缕梅提取物的化妆品学和/或皮肤病学用图
【专利说明】北美金缕梅提取物的化妆品学和/或皮肤病学用途
[0001] 本发明涉及新的化妆品学和/或皮肤病学成分及其化妆品学或药物用途，特别是 其皮肤病学用途，用于增加细胞外基质纤维的形成以及皮肤和/或粘膜(特别是眼睛、唇和 牙龈粘膜)和/或头皮的弹性。
[0002] 皮肤老化(特别是光致老化)是一种复杂的现象，其与多种被广为研究的机制有 关，例如ROSs(活性氧）的产生，特别是负责氧化现象(脂质过氧化作用和蛋白质氧化作用） 的自由基，还例如酶的产生，例如负责破坏组织和纤维(例如胶原蛋白和弹性蛋白）的弹性 蛋白酶和金属蛋白酶。因此这些机制通常与结缔组织的破坏有关。
[0003] 因此，天然胶原纤维明确地可以被金属蛋白酶（MMPs)(特别是丽P-I)降解， 0.00IMED (最小红斑量)就可以诱导该酶的产生，即相当于仅仅暴露于太阳3分钟。该MMP-I 的产生以剂量依赖性模式与暴露的持续时间和强度相关。
[0004] 弹性的降低是暴露于阳光产生的主要问题之一，但更通常是皮肤老化的问题。在 皮肤中包括弹性蛋白原和微纤维成员的弹性纤维能够提供弹性功能。在老化过程中并且特 别是在UV压力的作用下，弹性纤维和胶原纤维的形成减少，MMPs和弹性蛋白酶导致的降解 增加。另外，MMPs和ROSs是导致皮肤损伤的促炎因子。
[0005] 这些机制在化妆品学和皮肤病学领域已经被广泛研究，因此，多种抗氧剂、抗MMPs 或抗弹性蛋白酶成分已经因其对结缔组织的保护作用而上市。然而，细胞外基质纤维(特别 是弹性纤维和胶原蛋白）的降解的预防和抑制并不足以预防内在的皮肤老化及其魅力下降 的外貌。另外，没有化妆品成分能够完全抑制氧化应激所导致的退化。当其发生时，已经观 察到的是，在氧化应激的作用下，在皮肤深处部分弹性蛋白的合成也有所增加并且以弹性 蛋白聚合物的形式无序集聚，因此促进了弹性的降低。此外，弹力素在氧化应激的情况下过 度表达，通过弹性纤维上的谷氨酰胺转氨酶而交联;其促进了弹性蛋白聚合物的形成。使用 术语日光性弹性组织变性(solar elastosis)。
[0006] 因此，申请人注意到，皮肤、粘膜和头皮的性能(特别是恢复它们的弹性及其坚固 性)的改善特别与增加细胞外基质纤维的质量和/或数量有关。
[0007] 因此，申请人发现，L0XL(-种为赖氨酰氧化酶(LOX)家族同工型的酶)是在成人弹 性组织生成中缺失的主要环节，它能够使得该赖氨酰氧化酶同工型的合成恢复活性以便于 获得对弹性组织生成的刺激作用。事实上已经证实，在重建的能够产生弹性纤维的皮肤模 型上，LOXL合成的激活使其能够重建功能性弹性组织生成。此外，申请人也证实了LOXL在疤 痕区域(cicatricial zones)的表达不足，同样在各个年龄段的人真皮中也是如此，因此在 老化过程中同样如此。LOXL是负责通过交联而使弹性蛋白成熟的酶，并因此形成功能性的 弹性纤维。因此，申请人已经鉴别了能够刺激LOXL表达的活性成分(专利申请FR 2855968和 FR 2855969，US 2004-0253220和US 2004-0258676)。
[0008] 因此，申请人一直在寻找既能够增加弹性纤维形成中弹性蛋白关键伙伴的成分 (特别是LOXL和腓骨蛋白5)，同时也能够抑制弹力素合成和/或活性的成分。
[0009] 对于寻找作为现有技术中所述那些成分的替代物的活性成分的事宜在化妆品学 和皮肤病学领域中一直受到人们的极大关注。此外，还非常需要具有下列性能的活性成分， 其具有增加 LOXL表达的性能，但其也能够作用于与弹性组织生成相关的其它通路，例如增 加腓骨蛋白5表达、降低弹力素表达，同时增加胶原纤维的形成和/或改善其组织。
[0010]申请人出乎意料并惊奇地刚刚发现了一种新的能够满足该需求的成分，因为其能 够增加细胞外基质纤维的形成，特别是弹性纤维和胶原纤维的形成，因为其在化妆品领域 和药学领域中具有多种其它令人产生极大兴趣的特性，其可以增加皮肤和/或粘膜和/或头 皮弹性和坚固性，特别是当所述皮肤或所述头皮或所述粘膜被时间性老化和/或UV-导致的 老化所改变时。本发明的成分实际上具有增加 LOXL表达的特性，具有抑制弹力素表达和/或 活性的特性，还具有刺激胶原蛋白和腓骨蛋白-5合成的特性。
[0011]因此，该成分自身能够独立提供完全、有效的并因而完全令人满意的解决方案，用 于恢复和/或增加因老化而改变的组织的弹性和/或坚固性，特别是皮肤老化，尤其是时间 性老化或光致老化。此外，它可以与现有技术中其它药物组合使用从而加强其特性。因此， 该成分能够特别有效地解决现有技术的问题。
[0012] 本发明的成分是一种植物提取物，因此其优点在于能够容易地以工业化规模生 产、易于配制并且具有非常高的稳定性。另外，其可以容易地自可再生资源提取获得，这使 其能够根据可持续发展的原则生产。
[0013] 本发明的成分为北美金缕梅(Hamamelis virginiana)植物的提取物。
[0014]北美金缕梅是源自北美东部地区的灌木，其生长在潮湿的区域。其也被称为"迷人 的榛子(witch hazel)"，因为其枝条在过去曾经用于鉴定水和黄金，如水探测杖(water-divining rod)。北美金缕梅是在美国西北地区常用的植物，因为其具有收敛的特性并且易 于广泛获取。其树皮中的五倍子单宁和儿茶素单宁可能是其收敛和止血特性的原因。其还 可以用于挫伤、肌肉酸痛、静脉曲张、痔疮、乳头疼痛和炎症。
[0015] 金缕梅树皮是收敛剂、止血剂、镇静剂和补药。其在体内（口服）用于治疗腹泻、结 肠炎、痢疾、痔疮、阴道分泌物、月经过多、内出血和器官下垂。顺式治疗药物(homeopathic remedy)生产自新鲜的树皮。其用于治疗流鼻血、痔疮和静脉曲张。
[0016] 其叶子也是收敛剂，已知可以用作抗菌剂。
[0017] 实验表明，叶子提取物能够增加血管阻力并降低毛细血管渗透性。
[0018] 已经公开了北美金缕梅提取物对皮肤组织的保护活性，其特别是作为抗蛋白酶成 分，尤其是通过抑制金属蛋白酶2、3、1和9而保护皮肤(W0 2006/53415)。而且，提取物以蒸 馏物的形式销售，称为"金缕梅"蒸馏物，特别用于抗炎、消毒和收敛作用。然而，北美金缕梅 提取物的这些已知特性没有能够预见到其通过使得细胞外间质纤维的形成而具有增加弹 性和/或坚固性的特性，特别是弹性纤维和胶原纤维的形成，或者其增加 LOXL表达、胶原蛋 白合成和腓骨蛋白5合成的特性和/或抑制弹力素表达和/或活性的特性，这些特性如本发 明内容中发现。
[0019] 本发明的北美金缕梅植物提取物的某些特性可以通过下文中所提供的关于其对 细胞外间质纤维(特别是弹性纤维和胶原纤维)活性的实施例中具体地证实。
[0020] 因此，本发明的主旨为北美金缕梅提取物的非治疗性化妆品学用途，用于增加皮 肤和/或粘膜和/或头皮的细胞外基质纤维的形成。
[0021] 本发明的主旨还包括北美金缕梅提取物在化妆品学组合物中的用途，特别是作为 活性成分，用于增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的细胞外基质纤维的形成。
[0022] 本发明的主旨还包括本发明的北美金缕梅提取物，用于在病理学状态的护理和/ 或皮肤病治疗中的局部用途，所述病理状态与弹性纤维和胶原纤维有关，优选与皮肤和/或 粘膜和/或头皮的坚固性和/或弹性的损失有关，例如酒糟鼻、毛细血管扩张、日光性弹力组 织变性、病态皮肤松弛症和/或妊娠纹。
[0023] 本发明的主旨还包括化妆护理和/或治疗方法或过程，其包括将本发明的北美金 缕梅提取物和/或含有此类提取物的化妆组合物局部施用于至少一处皮肤和/或粘膜和/或 头皮的区域，用于增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的细胞外基质纤维的形成。
[0024] 定义
[0025] 根据本发明，表述"增加细胞外基质纤维的形成"应当是指细胞外基质纤维的质量 和/或数量的增加。该增加可以分别相对于没有施用本发明提取物的细胞外基质纤维的质 量和/或数量进行测定。优选该增加可以通过弹性纤维和胶原纤维组织的可视化和量化方 法测定，具体描述于实施例3的免疫标记测定。相对于不存在本发明提取物情况下进行的测 定，优选该增加至少等于5%，更优选等于10%。
[0026] 根据本发明，术语"细胞外基质纤维"应当是指弹性纤维和/或胶原纤维的构成蛋 白。弹性纤维的构成蛋白优选为弹性蛋白、微管蛋白（特别是腓骨蛋白5)和原纤蛋白（特别 是原纤蛋白1)。
[0027] 根据本发明，术语"胶原蛋白"应当是指I、III、IV、V、VI、VII、XII、XIII、XIV、XVI、 XVII、XXIV和XXIX型胶原蛋白，优选皮肤和/或粘膜和/或头皮的那些蛋白，选自胶原蛋白I、 III、IV、V和VII，优选胶原蛋白I型、胶原蛋白II型和胶原蛋白V型，甚至更优选胶原蛋白I 型。
[0028] 根据本发明，表述"减少弹性蛋白聚合物的形成"应当是指增加腓骨蛋白5合成和/ 或增加 LOXL表达和/或减少弹力素合成和/或活性。用于测定弹力素表达的抑制的模型描述 于实施例4。
[0029]根据本发明，术语"L0XL"或"hLOXL"（也称为L0XL-1)应当是指赖氨酰氧化酶(LO) 家族的同工型，该家族包括5个成员：LOX、LOXL、L0XL2、L0XL3和L0XL4，具体描述于下列出版 物:Csiszar等人，赖氨酰氧化酶："一种新的多功能胺氧化酶家族"（Lysyl oxidases: "A novel multifunctional amine oxidase family"），Nucleic Acid Research and Molecular Biology,2001，第70卷，第2 - 28页。
[0030] 根据本发明，表述"增加 LOXL表达"应当是指增加基因编码的LOXL或其启动子的表 达，特别是刺激信使RNA编码的LOXL的合成，也可以是刺激源自该信使RNA的LOXL的合成。该 增加可以在包含至少一种具有LOXL表达功能的细胞类型的模型上测定，最好是成纤维细 胞，优选皮肤成纤维细胞，通过使得该细胞与本发明提取物接触测定，所述接触使得LOXL基 因和/或蛋白表达增加大于或等于10%，最好是大于或等于20%，这种增加是相对于对照模 型中基因和/或蛋白表达的水平而言的，对照模型即没有与本发明提取物接触的模型。该表 达的增加优选基因表达的增加。此类模型描述于实施例2。
[0031] 根据本发明，术语"胶原蛋白表达"应当是指胶原蛋白基因表达，即胶原蛋白mRNA (信使RNA)表达和/或胶原蛋白表达。优选胶原蛋白表达。
[0032] 根据本发明，表述"增加皮肤和/或粘膜和/或头皮的坚固性和/或弹性"应当是指 为了美容的目的而分别增加失去坚固性和/或弹性皮肤和/或粘膜和/或头皮的坚固性和/ 或弹性，特别是由于内在因素的作用而导致的失去，例如皮肤和/或粘膜和/或头皮的组织 老化，即时间性老化、细胞应激、非病理性生理性变化(例如饮食的改变）、激素变化，特别是 青春期、妊娠期、更年期或男性更年期。这种坚固性和/或弹性的丧失也可以是