一种染料木素溶液及制备方法和应用
【专利摘要】本发明公开了一种染料木素溶液及制备方法和应用，由一定比例的精氨酸、染料木素、阿斯巴甜、小苏打原料制成。步骤是：A、称取一定份量的精氨酸加入3?10倍水，30?58℃搅拌溶解，备用；B、将染料木素加入步骤A溶液中，在30?58℃继续搅拌5h，过滤，滤液备用；C、称取阿斯巴甜、小苏打加入步骤B溶液中，室温搅拌溶解，过滤，100ml/瓶，分装即得。解决了染料木素不溶于水的问题，再辅配以赖氨酸等，具有提高平滑肌细胞 SOD 活性和降低脂质过氧化物 MDA含量等，能抗氧化、提高人体免疫力,延缓身体退化速度，防止肌肤衰老，达到延年益寿。
【专利说明】
一种染料木素溶液及制备方法和应用
技术领域
[0001]本发明属于生物医药、保健品领域，更具体涉及一种染料木素溶液，同时还涉及一 种染料木素溶液的制备方法，还涉及一种染料木素溶液的用途。
【背景技术】
[0002]抗氧化是指抗氧化自由基的简称，英文Anti-Oxidant。人体因为与外界的持续接 触，包括呼吸(氧化反应）、外界污染、放射线照射等因素不断的在人体体内产生自由基。科 学研究表明，癌症、衰老或其它疾病大都与过量自由基的产生有关联。研究抗氧化可以有效 克服其所带来的危害，所以抗氧化被保健品、化妆品企业列为主要的研发方向之一，也是市 场最重要的功能性诉求之一。
[0003] 抗氧化就是任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质，其作用机 理可以是直接作用在自由基，或是间接消耗掉容易生成自由基的物质，防止发生进一步反 应。人体在不可避免地产生自由基的同时，也在自然产生着抵抗自由基的抗氧化物质，以抵 消自由基对人体细胞的氧化攻击。研究证明，人体的抗氧化系统是一个可与免疫系统相比 拟的、具有完善和复杂功能的系统，机体抗氧化的能力越强，就越健康，生命也越长。
[0004] 人体的抗氧化物质有自身合成的，也有由食物供给的。酶和非酶抗氧化物质在保 护由于运动引起的过氧化损伤中起至关重要的作用。补充植物活性硒增强抗氧化有利于运 动机体减少自由基的产生或加速其清除，以对抗自由基的副作用，因而对一般人和运动员 的健康都有益，可能延缓运动性疲劳发生和加快体能恢复，年龄大的体力活动者比年轻者 服用抗氧化剂效果更好。
[0005] 越来越多的研究显示抗氧化是预防衰老的重要步骤，因为自由基或氧化剂会将细 胞和组织分解，影响代谢功能，并会引起不同的健康问题。如果能够消除过多的氧化自由 基，对于许多自由基引起的及老化相关疾病都能够预防。例如常见的癌症、动脉硬化、糖尿 病、白内障、心血管病、老年痴呆、关节炎等，这些疾病都被认为与自由基相关。
[0006] 应摄取足够的抗氧化剂，延缓身体退化速度，防止肌肤衰老，并时刻保持青春神 采。抗氧化剂能在自然饮食中找到，是被称为抗氧化物质的生物类黄酮、维生素E、维生素C、 和胡萝卜素等。他们可以利用自身结构的特性来稳定自由基多余的电子，防止对细胞造成 老化。但在繁忙的都市里，亦可选择天然营养补充品来摄取足够的抗氧化剂。
[0007] 生物类黄酮能够有效清除体内的自由基(Free Radical)及毒素，预防、减少疾病 的发生;消炎、抗过敏、广谱抗菌、抗病毒作用。解除醇中毒、保肝护肝。清热解毒、祛风湿、强 筋骨、抗妇女更年期综合症等功效。
[0008] S0D是Super Oxide Dimutese缩写，中文名称超氧化物歧化酶，是生物体内重要的 抗氧化酶，广泛分布于各种生物体内，如动物，植物，微生物等。S0D具有特殊的生理活性，是 生物体内清除自由基的首要物质。S0D在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指 标;现已证实，由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗氧自由基对细胞造成的损害， 并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。
[0009]染料木素(Genistein)又称金雀异黄素、染料木黄酮、5，7，f -三羟基异黄酮，主要 是从大豆、三叶草、葛根、槐花、槐角、染料木(金雀花)和广豆根等豆科植物中提取出来的活 性成分，大豆异黄酮被称为植物激素，其与内源性雌激素分子结构相似，染料木素即为其中 的1种。有关研究表明 [1]染料木素在保护心脑血管的作用以及降低心血管疾病的发生等具 有良好的效果，能够提高平滑肌细胞SOD活性和降低脂质过氧化物MDA含量，并因抗纤维细 胞增殖作用，广泛应用于制药、保健品等领域。
[0010] 但由于染料木素具强疏水性，几乎不溶于水、稀盐酸(O.lmol ? L-1)、十二烷基硫 酸钠水溶液（十二烷基磺酸钠水溶液）、人工肠液pH: 6.8 )，在一般的有机溶媒中溶解度较 差，而易溶于二甲基亚砜，在甲醇、乙醇中亦有一定的溶解度，结构中含有酚羟基而显弱酸 性，溶于稀碱。由于染料木素的亲脂性、亲水性均较弱，故影响了其在体内的吸收，直接口服 生物利用度低，存在较强的首过效应，难以达到临床治疗疾病的目的，限制了其临床应用。
[0011] 精氨酸是营养增补剂，是鸟氨酸循环中的一个组成成分具有极其重要的生理功 能，精氨酸是碱性氨基酸，在动物体内有重要的生理生化功能，其不仅是细胞质和核酸蛋白 的主要成分，还是将天门冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、聚胺(腐胺、精脒、精胺)等转换 为高能磷酸化合物肌酸磷酸的中间体，是肌酐酸唯一的氨来源;在机体的匀质代谢方面也 起着重要的作用，可用于多种代谢途径，包括精氨酸酶、一氧化氮合酶、精氨酸/甘氨酸胍基 转移酶(AGAT)等，也是蛋白质合成的重要原料，同时也是机体内肌酸、多胺和一氧化氮(N0) 等物质的合成前体，在动物体营养代谢与调控过程中发挥着重要作用，是新生哺乳动物的 必需氨基酸，也是成年哺乳动物的条件性必需氨基酸，具有改善性欲、免疫调节功能、促进 肠道发育、抗肿瘤和抗肥胖等。
【发明内容】
[0012] 本发明的目的是在于提供了一种染料木素溶液，配方合理，使用方便，解决了染料 木素不溶于水的问题，将其制备成口服水溶液剂，避免了首过效应，提高了生物利用度;染 料木素作为一种大豆提取物，原料来源广泛，价格低廉。
[0013] 本发明的另一个目的是在于提供了一种染料木素溶液的制备方法，方法易行，操 作简便。反应在常压下进行，且反应温度20~60°C，故能耗低，设备操作简单，投资省。
[0014] 本发明还有一个目的是在于提供了一种染料木素溶液在抗氧化中（方面)的应用， 本发明制备的溶液剂，口服后具有提高平滑肌细胞S0D活性和降低脂质过氧化物MDA含量 等，能抗氧化、提高人体免疫力，延缓身体退化速度，防止肌肤衰老，达到延年益寿，生活质 量提尚等目的。
[0015] 为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：
[0016] 其构思是：以染料木素为主要原料，辅以精氨酸，添加适量矫味剂阿斯巴甜、稳定 剂小苏打等，研制了一种具有提高平滑肌细胞S0D活性和降低脂质过氧化物MDA含量等，能 抗氧化、提高人体免疫力，为人民健康服务。
[0017] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成： 原料 重量份 染料木素 2-22
[0018] 精氨酸 7-45 阿斯巴甜 0.02-0.08 小苏打 0. 02-0, 09 〇
[0019] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成(优选范围）： 原料 重量份
[0020] 染料木素 5-20 精氨酸 8-40 阿斯巴甜 0.03-0.07
[0021] 小苏.打 0. 03-0. 08 〇
[0022] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成(较好范围）： 原料 童量份 染料木素
[0023] 精氨酸 18-38 阿斯巴甜 （).025-0. 065 小苏打 0.04-0.游
[0024] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成(好范围）： 原料 重量份 染料木素 7-1:5
[0025] 精氨酸 25-35 阿斯巴甜 G.Q3-0.(m 小苏打 04-0. 065。
[0026] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成(最好范围）： 原料 重量份 染料木素 8-12
[0027] 精氨酸 20-30 阿斯巴甜 0.04-0,05 小苏打 0.05-0.06。
[0028] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成(最佳值）： 原料 重量份 染料木素 9
[0029] 精氨酸 25 阿斯巴甜 0. 05 小苏打 0.06。
[0030] 一种染料木素溶液制备及其应用，其制备步骤是：
[0031] A、称取一定比例的精氨酸加入3-10倍水，30-58 °C搅拌溶解，备用；
[0032] B、称取一定比例的染料木素加入上述步骤A溶液中，在30-58°C继续搅拌5 - 7h，过 滤，滤液备用；
[0033] C、称取一定比例的阿斯巴甜、小苏打加入上述步骤B溶液中，室温(20 - 25°C )搅拌 溶解，过滤，按照1 〇〇ml/瓶，分装，即得一种染料木素溶液。
[0034]本发明提供了一种染料木素的溶液，并将其与精氨酸制备成溶液剂服用，解决了 其不溶于水的问题，再辅配以阿斯巴甜、小苏打等，具有提高平滑肌细胞S0D活性和降低脂 质过氧化物MDA含量等，能抗氧化、提高人体免疫力，延缓身体退化速度，防止肌肤衰老，达 到延年益寿，生活质量提尚等目的。
[0035] -种染料木素溶液在抗氧化中的应用，其步骤是：
[0036] A、通过选取一定量小鼠，随机均分为对照组、染料木素溶液低剂量组、染料木素溶 液中剂量组和染料木素溶液高剂量组，观察不同剂量组的染料木素对小鼠心肌组织、脑组 织和肝组织中S0D活性和MDA含量的影响。
[0037] B、染料木素溶液低剂量组、中剂量组和高剂量组均能提高小鼠心肌组织、脑组织 和肝组织中S0D活性，降低心肌组织、脑组织和肝组织中MDA含量;与对照组两两比较，其差 异有统计学意义，其剂量呈现依赖性。
[0038] C、发明的染料木素溶液对小鼠具有良好的抗氧化作用，能够明显提高小鼠心肌组 织、脑组织和肝组织中S0D活性，降低MDA含量。
[0039] 本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：
[0040] 解决了染料木素不溶于水的问题，将其制备成口服水溶液剂，避免了首过效应，提 高了生物利用度;染料木素作为一种大豆提取物，原料来源广泛，价格低廉。方法易行，操作 简便。反应在常压下进行，且反应温度20~60°C，故能耗低，设备简单，投资省。本发明制备 的溶液剂，口服后具有提高平滑肌细胞S0D活性和降低脂质过氧化物MDA含量等，能抗氧化、 提高人体免疫力，延缓身体退化速度，防止肌肤衰老，达到延年益寿，生活质量提高等目的。
[0041] 本发明提供了一种染料木素的水溶液，解决了其不溶于水的问题，再辅配以精氨 酸等，具有提高平滑肌细胞S0D活性和降低脂质过氧化物MDA含量等，能抗氧化、提高人体免 疫力，延缓身体退化速度，防止肌肤衰老，达到延年益寿，生活质量提高等目的。
【具体实施方式】 [0042] 实施例1:
[0043] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成： 原料 重量份 染料木素 9
[0044] 精氨酸 25 阿斯巴甜 0.05 小苏打 Q..:Q.6
[0045] -种染料木素溶液，其制备步骤是：
[0046] A、称取一定比例的的精氨酸加入3或5或7或9或10倍水，30或35或38或42或48或52 或56或58°C搅拌溶解，备用；
[0047] B、将一定比例的染料木素加入上述A溶液中，在30或36或40或44或47或51或55或 58 °C继续搅拌4或5或6h，过滤，滤液备用；
[0048] C、称取一定比例的阿斯巴甜、小苏打加入上述步骤B溶液中，室温（20或22或24或 25 °C)搅拌溶解，过滤，100ml/瓶分装即得。
[0049] 实施例2:
[0050] -种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成： 原料 重量份_ 染料木素 8
[0051 ] 精氨酸 30 阿斯巴甜 0.05 小苏打 0.06
[0052]其制备步骤与实施例1相同。
[0053] 实施例3:
[0054] 一种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成： 原料 重量份 染料木素 1:0
[0055] 精氨酸 35 阿斯巴甜 0.J5 小苏打 0.06
[0056]其制备步骤与实施例1相同。
[0057] 实施例4:
[0058] 一种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成： 原料 童量份 染料木素 14
[0059] 精氨酸 35 阿斯巴甜 0.&5 小苏打 0.04
[0060] 其制备步骤与实施例1相同。
[0061 ] 实施例5:
[0062] A、通过选取80只小鼠，随机均分为对照组、染料木素溶液低剂量组、染料木素溶液 中剂量组和染料木素溶液高剂量组，观察不同剂量组的染料木素对小鼠心肌组织、脑组织 和肝组织中S0D活性和MDA含量的影响。
[0063] B、染料木素溶液低剂量组、中剂量组和高剂量组均能提高小鼠心肌组织、脑组织 和肝组织中S0D活性，降低小鼠心肌组织、脑组织和肝组织中MDA含量;与对照组两两比较， 其差异有统计学意义，其剂量呈现依赖性。
[0064] C、发明的染料木素溶液对小鼠具有良好的抗氧化作用，能够明显提高小鼠心肌组 织、脑组织和肝组织中S0D活性，降低MDA含量。
[0065] 本发明染料木素溶液的抗氧化实验：
[0066] 1.1试验动物
[0067]选取80只清洁级小鼠作为研究对象，雌雄各半，平均体质量为（25.3±2.26)g。将 80只小鼠随机均分为对照组、染料木素溶液低剂量组、染料木素溶液中剂量组和染料木素 溶液高剂量组。4组小鼠在雌雄比例、平均体质量等方面无差异，符合试验要求。
[0068] 1.2试验材料
[0069] 染料木素溶液(本单位自制）、超氧化物歧化酶(S0D)(购于隋和生物工程(厦门）有 限公司）和丙二醛(MDA)试剂盒(购于上海酶联生物科技有限公司）。
[0070] 1.3实验用样品的制备
[0071] 除对照组小鼠给予0.9%氯化钠液外，其余各组小鼠均给予腹腔注射给药(按含染 料木素高剂量组为30 ? Omg/kg，中剂量组为10 ? Omg/kg，低剂量组为5 ? Omg/kg，1次/d，连续给 药10天）；各组分别于末次给药后处死小鼠，取其心肌、脑和肝组织，置水浴内将其分别制成 1 〇 %匀浆，并于-80 °C低温保存，待检生物指标。
[0072] 1.4生化指标的测定
[0073]取上述实验用匀浆，采用超氧化物歧化酶(S0D)和丙二醛(MDA)试剂盒，按试剂盒 说明书方法操作，测定S0D活性及MDA含量。
[0074]采用Prism4.0版统计软件对各剂量组与对照组之间进行单因素方差分析，各组数 据以均数土标准差（i±s )表示;组间用两两比较采用q检验，P<0.05为其差异有统计学意 义。
[0075] 2试验结果
[0076] 2.1染料木素对小鼠心肌组织中S0D性及MDA含量的影响
[0077] 试验结果显示不同剂量组(低剂量组、中剂量组和高剂量组)的染料木素溶液均能 够提高小鼠心肌组织中S0D活性并能降低MDA含量，不同剂量组与对照组比较，其差异有统 计学意义(P<〇.05)，并呈剂量依赖性。结果见下表1:
[0078] 表1不同剂量组染料木素溶液对小鼠心肌组织中S0D活性及MDA含量的测定结果 _( X. 士 s)
[0080]注:与对照组比较(#1P<0.05，#2P<0.01)。
[0081 ] 2.2染料木素溶液对小鼠脑组织中SOD性及MDA含量的影响
[0082]试验结果显示不同剂量组(低剂量组、中剂量组和高剂量组)的染料木素溶液均能 够提高小鼠脑组织S0D活性，并能降低MDA含量，不同剂量组与对照组比较，其差异有统计学 意义(P<0.05 )，并呈剂量依赖性。不同剂量组染料木素溶液对小鼠脑组织中S0D活性及MDA 含量的影响，见下表2:
[0083] 表2不同剂量组染料木素溶液对小鼠脑组织中S0D活性及MDA含量的测定结果 .(x土 s)
[0085] 注:与对照组比较(#1P<0.05，#2P<0.01)。
[0086] 2.3染料木素溶液对小鼠肝组织中SOD性及MDA含量的影响
[0087] 试验结果显示不同剂量组(低剂量组、中剂量组和高剂量组）的染料木素溶液均能 够提高小鼠肝组织S0D活性，并能降低MDA含量，不同剂量组与对照组比较，其差异有统计学 意义(P<0.05 )，并呈剂量依赖性。不同剂量组染料木素溶液对小鼠肝组织中S0D活性及MDA 含量的影响，见下表3:
[0088] 表3不同剂量组染料木素溶液对小鼠肝组织中S0D活性及MDA含量的测定结果 .(X 土 s).
[0090] 注：与对照组比较(#1P<0.05，#2P<0.01)。
[0091] 通过试验结果表明染料木素溶液具有良好的抗氧化保护作用，其通过直接或间接 作用提高小鼠平滑肌细胞S0D活性和降低MDA含量的效果。
【主权项】
1. 一种染料木素溶液，它由以下重量份的原料制成： 原料 重量份 染料木素 2-22 精氨酸 7-45 阿斯巴甜 0.02-0.08 小苏打 0.02-0.09。2. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 5-20 精氨酸 8-40 阿斯巴甜 0.03-0.07 小苏打 0.03-0.08。3. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 6-18 精氨酸 18-38 阿斯巴甜 0.025-0.065 小苏打 0.04-0.07。4. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 7-15 精氨酸 25-35 阿斯巴甜 0.03-0.06 小苏打 0.04-0.065。5. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 8-12 精氨酸 20-30 阿斯巴甜 0.04-0.05 小苏打 0.05-0.06。6. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 9 精氨酸 25 阿斯巴甜 0.05 小苏打 0.06。7. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 8 精氨酸 30 阿斯巴甜 0.05 小苏打 0.06。8. 根据权利要求1所述的一种染料木素溶液，其特征在于： 原料 重量份 染料木素 10 精氨酸 35 阿斯巴甜 0.05 小苏打 0.06。9. 权利要求1所述的一种染料木素溶液的制备方法，其步骤是： A、 称取一定比例的精氨酸加入3-10倍水，30-58°C搅拌溶解， 备用； B、 称取一定比例的染料木素加入步骤A溶液中，在30-58 °C继续搅拌5 - 7h，过滤，滤液 备用； C、 称取一定比例的阿斯巴甜、小苏打加入步骤B溶液中，室温搅拌溶解，过滤，分装，得 一种染料木素溶液。10. 权利要求1所述的一种染料木素溶液在抗氧化中的应用。
【文档编号】A61K47/18GK105853350SQ201610349181
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月24日
【发明人】杨成雄, 余建清
【申请人】荆楚理工学院