一种预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。其是通过以下方法制备的：中药原料：包括旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子；A、药汁煎煮：将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子加入到水中煎煮，滤取药汁，然后再在药汁中加入马来酸氯苯那敏，浓缩药汁，得到A混合溶液；B、包被：将A混合溶液包被后得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。本发明能有效的治疗预防与治疗因饲料中鱼粉不新鲜导致黄颡鱼黑体色缺失出现的症状，而且对于鱼粉不新鲜造成的胃和肠道损伤也有较好的修复作用。因此具有广泛的应用前景。
【专利说明】
一种预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂
技术领域
[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
【背景技术】
[0002]黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)是一种优质名贵经济鱼类。正常情况下，黄颡鱼体色呈古铜色。在人工养殖条件下，由于饲料原料质量下降，容易出现体色变化，如黑色素消失，形成黄化黄颡鱼，俗称“香蕉黄”，2013年以来连续三年，广东香蕉黄颡鱼占了个体总数的10%-15%，而个别养殖户，体色异常率更是在30%-50%。香蕉黄相对于正常黄颡鱼，抗病力差，生长慢，成活率较低，而且造成消费者心理恐慌，成鱼无法售出，给养殖户带来经济损失。
[0003]水产养殖饲料中，鱼粉是饲料中最主要的动物蛋白源，黄颡鱼饲料中，鱼粉用量一般不低于25%，鱼粉的新鲜度通常使用组胺、挥发性盐基氮含量以及酸价等指标来评定，新鲜鱼粉组胺、挥发性盐基氮含量低，酸价正常。我们在前期养殖实验中，使用高组胺含量饲料诱导体色正常的黄颡鱼体色发生变异，黑色素细胞中黑色素合成减少，体色发白，说明饲料中组胺含量较高是黄颡鱼体色异常的原因之一。
[0004]组胺是一种重要的化学递质，通过激活体内组胺受体，起到相应的作用。组胺受体有4种不同亚型的(H1、H2、H3、H4) (Baumer ,2010)。这4种受体均为G蛋白耦联受体。
[0005]黑色素合成过程中，酪氨酸酶(tyrosinase，TYR)是其中的限速酶。TYR催化黑色素细胞从血液中摄取的酪氨酸，经高尔基复合体变成多巴，通过合成途径合成黑色素(Mueller,2014)。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0007]本发明的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂，其是通过以下方法制备的:
[0008]中药原料:包括旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子；
[0009]A、药汁煎煮:将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子加入到水中煎煮，滤取药汁，然后再在药汁中加入马来酸氯苯那敏，浓缩药汁，得到A混合溶液；
[0010]B、包被:将A混合溶液包被后得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0011]优选，是通过以下方法制备的:
[0012]中药原料，按质量分数计，包括旱莲草24%、无花果24%、丹皮24%、潼蒺藜20%和蛇床子8%;
[0013]A、药汁煎煮:将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子按各组份的质量分数一起加入中药原料总质量6-8倍的水中煎煮，然后滤取药汁，再加入中药原料总质量33.3%的马来酸氯苯那敏到药汁中溶解，然后浓缩药汁，得到A混合溶液；
[0014]B、包被:将A混合溶液包被后得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0015]进一步优选，所述的包被为:将微孔淀粉置于沸腾干燥装置的流化床上沸腾，将A混合溶液从沸腾干燥装置的上方以高压气雾的方式喷到淀粉载体上，待其干燥后，形成A初始体，然后将氯化钠溶液间歇式喷到A初始体上，待其干燥后，得到B初始体，然后再将明胶溶液喷到B初始体上，干燥，取出后冷却得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0016]更进一步优选，所述的步骤A和步骤B为:
[0017]A、药汁煎煮:将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子按各组份的质量分数一起加入中药原料总质量6-8倍的水中，加温至30°C浸泡30分钟，然后加温至100°C煮沸，保持I小时，滤取药汁，再加入中药原料总质量33.3 %的马来酸氯苯那敏到药汁中溶解，100°C浓缩药汁至中药原料总质量的3倍，得到A混合溶液；
[0018]B、包被:将微孔淀粉置于沸腾干燥装置的流化床上沸腾，将A混合溶液从沸腾干燥装置的上方以高压气雾的方式喷到淀粉载体上，待其干燥后，形成A初始体，然后将质量分数10%的氯化钠溶液间歇式喷到A初始体上，氯化钠包覆用量为淀粉质量的10%，待其干燥后，得到B初始体，然后再将质量分数10%的明胶溶液喷到B初始体上，明胶用量为淀粉质量的1.5%，80°C干燥，取出后冷却得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0019]本发明通过实验证实组胺通过结合特异性受体，降低了黑色素细胞内黑色素合成途径，c AMP中关键酶酪氨酸酶(TYR)的酶活，对cAMP途径起到干扰作用。本发明使用特异性受体拮抗剂作为治疗制剂，另外，还要考虑作为饲料添加制剂，需要满足便于加工、副作用少、残留少、价格等因素。同时还要提高酪氨酸酶活以促进黑色素缺失的修复，本发明使用旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜、蛇床子等促进酪氨酸酶活，且副作用少的中草药作为辅料，用于因鱼粉新鲜度较差导致黄颡鱼黑体色缺失症状的预防和治疗。本发明能有效的治疗预防与治疗因饲料中鱼粉不新鲜导致黄颡鱼黑体色缺失出现的症状，而且对于鱼粉不新鲜造成的胃和肠道损伤也有较好的修复作用。因此具有广泛的应用前景。
【附图说明】
:
[0020]图1是各组皮肤黑色素含量，相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同字母表示差异显著(P〈0.05)，以下同；
[0021 ]图2是各组皮肤酪氨酸酶含量；
[0022]图3是C组、Z组与H组皮肤外观；
[0023]图4是C组、Z组与H组皮肤色素镜检结果(10X );
[0024]图5是C组、Z组与H组肠道切片结果(200 X );
[0025]图6是C组、Z组与H组胃切片结果(200 X )；
[0026]图7是各组皮肤黑色素含量；
[0027]图8是各组皮肤酪氨酸酶含量。
【具体实施方式】
:
[0028]以下实施例是本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0029]实施例1:
[0030]丨、饲料制备:
[0031 ] 基础饲料配方(每kg添加量):鱼粉300g，豆柏325g，α-淀粉290g，豆油40g，磷酸二氢钙20g，复合维生素5g，矿物盐预混剂20g，将上述组份混合均匀后得到基础饲料。
[0032]复合维生素配方(每kg添加量):维生素A2.28;维生素03 0.888;维生素1(3 2.2g；维生素E 17.6g;维生素Bi 2.69g;维生素B2 1.38g;维生素B6 1.33g;维生素B12 1.1g;烟酰胺7.78g;叶酸0.45g; D-泛酸钙2.24g;生物素0.66g;维生素C磷化脂314.29g;肌醇22.45g;米糠622.75g，将上述组份混合均匀后得到复合维生素。
[0033]矿物盐预混剂配方(每kg添加量):CoSO40.19g；FeS04.H2O 38.13g；ZnSO4.H2O19.07g；MnS04.H2O 7.63g；Na2SeO3 1.91g；MgS04.7H20 160.45g;Ca(103)2 4.39g；CuS04.5H20 1.338;沸石粉766.98。
[0034]C组饲料:C组饲料与上述基础饲料基本相同，只是鱼粉使用的是进口鱼粉，其他与基础饲料相同，制成饲料后，实测组胺含量为34.2mg/kg。
[0035]Z组饲料:Z组饲料与基础饲料基本相同，只是鱼粉使用的是低质鱼粉，其他与基础饲料相同，制成饲料后，实测组胺含量为1008.6mg/kg。
[0036]Z+HRa组饲料:是在Z组饲料的基础上添加其质量1%。的特异受体拮抗剂I 一马来酸氯苯那敏。
[0037]Z+HRb组饲料:是在Z组饲料的基础上添加其质量2%。的特异受体拮抗剂2—马来酸氯苯那敏。
[0038]2、实验鱼及管理:
[0039]实验鱼的驯化，用基础饲料定时、定量投喂，待鱼不怕人时，即为驯化成功。
[0040]实验鱼分缸，当鱼生长至8cm左右时，进行分缸处理。分缸前进行初始体重测定，以10尾为一组，带水测定体重，分缸尽量挑选大小相近的鱼进行分缸，每缸分30尾。其余过大或者过小的鱼在备用缸中饲养。
[0041 ]投喂量计算，按照鱼饱食的80 %量来计算，饱食量则按照20分钟内多次投喂，鱼不再食额外的食物为基准，每两周进行一次调整。每天投喂一次，实验持续2个月。
[0042]将实验鱼分成4组，分别为C组、Z组、Z+HRa组和Z+HRb组，相应分别按上述投喂量投喂C组饲料、Z组饲料、Z+HRa组和Z+HRb组饲料。
[0043]3、试验结果:
[0044]试验结果如图1和图2所示，从图1和图2可以看出，Z组与Z+HRa组黑色素含量、酪氨酸酶活显著低于对照组。Z+HRb组与C组差异不显著(图1和图2)。
[0045]由此可以看出，组胺通过结合特异性受体，降低了黑色素细胞内黑色素合成途径，cAMP中关键酶酪氨酸酶(TYR)的酶活，对cAMP途径起到干扰作用。
[0046]实施例2:
[0047]1、本实施例的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂的制备:
[0048]A.药液蒸煮:按质量百分比:将中药旱莲草24%、无花果24%、丹皮24%、潼蒺藜20%、蛇床子8%加入多功能提取罐内，再加入这5味药材总质量的6倍水，加温至30°C浸泡30分钟，然后加温至100°C煮沸，保持I小时，期间至少每隔20分钟搅拌一次，滤取药汁。再加入中药原料总质量的33.3%的马来酸氯苯那敏溶解在药汁中，100°C浓缩药汁至加入的中药原料总质量3倍重量，得到A混合溶液。
[0049]B.包被:将微孔淀粉置于沸腾干燥装置的流化床上，沸腾0.5h，将A混合溶液从沸腾装置的上方以高压气雾的方式喷到等质量的淀粉载体上，待其干燥后，得到A初始体，将质量分数10%的氯化钠溶液间歇式喷到A初始体上，氯化钠包覆用量为淀粉质量的10%，待其干燥后，得到B初始体，将质量分数10 %的明胶溶液喷到B初始体上，用量为淀粉质量的1.5%，80°C干燥，取出后自然冷却，得到本实施例的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0050]包埋率为82.8%，有效成分含量:81.2%
[0051]2、本预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂在饲料中的应用方法
[0052]2.1饲料制备:
[0053]基础饲料配方(每kg添加量):鱼粉300g，豆柏325g，α-淀粉290g，豆油40g，磷酸二氢钙20g，复合维生素5g，矿物盐预混剂20g，将上述组份混合均匀后得到基础饲料。
[0054]复合维生素配方(每kg添加量):维生素A2.2g;维生素D3 0.88g;维生素K3 2.2g；维生素E 17.6g;维生素Bi 2.69g;维生素B2 1.38g;维生素B6 1.33g;维生素B12 1.1g;烟酰胺7.78g;叶酸0.45g; D-泛酸钙2.24g;生物素0.66g;维生素C磷化脂314.29g;肌醇22.45g;米糠622.75g，将上述组份混合均匀后得到复合维生素。
[0055]矿物盐预混剂配方(每kg添加量):CoSO40.19g；FeS04.H2O 38.13g；ZnSO4.H2O19.07g；MnS04.H2O 7.63g；Na2SeO3 1.91g；MgS04.7H20 160.45g;Ca(103)2 4.39g；CuS04.5H20 1.338;沸石粉766.98。
[0056]C组饲料:C组饲料与上述基础饲料基本相同，只是鱼粉使用的是进口鱼粉，其他与基础饲料相同，制成饲料后，实测组胺含量为34.2mg/kg。
[0057]Z组饲料:Z组饲料与基础饲料基本相同，只是鱼粉使用的是低质鱼粉，其他与基础饲料相同，制成饲料后，实测组胺含量为1008.6mg/kg。
[0058]H组饲料:劣质鱼粉(与Z组饲料相同)300g，豆柏325g，a-淀粉289g，本实施例的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂lg、豆油40g，磷酸二氢钙20g，复合维生素5g，矿物盐预混剂20g，将上述组份混合均匀后得到H组饲料。
[0059]2.2实验鱼及管理:
[0060]实验鱼的驯化，用基础饲料定时、定量投喂，待鱼不怕人时，即为驯化成功。
[0061 ] 实验鱼分缸，当鱼生长至8cm左右时，进行分缸处理。分缸前进行初始体重测定，以10尾为一组，带水测定体重，分缸尽量挑选大小相近的鱼进行分缸，每缸分30尾。其余过大或者过小的鱼在备用缸中饲养。
[0062]投喂量计算，按照鱼饱食的80 %量来计算，饱食量则按照20分钟内多次投喂，鱼不再食额外的食物为基准，每两周进行一次调整。每天投喂一次，养殖实验持续2个月。
[0063]将实验鱼分成3组，分别为C组、Z组和H组，相应分别按上述投喂量投喂C组饲料、Z组饲料和H组饲料。
[0064]3本预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂的实际应用效果:
[0065]从外观上看，相对于Z组，H组黑色素缺失症状不明显，接近于C组。而镜检结果显示，H组黑色素均匀分布于皮肤当中，是体色接近正常(图3，图4)。
[0066]从肠道结构上看，相对于Z组，H组肠道皱襞明显在Z组破损的基础上有所修复，无论皱襞数量、高度、紧密程度都比Z组有所改善，也接近于C组。胃结构方面，Z组出现明显水肿，而H组水肿症状不明显，接近于C组(图5，图6)。
[0067]Z组黑色素含量、酪氨酸酶活显著低于C组。而H组与C组黑色素含量与皮肤酪氨酸酶活差异不显著(图7，图8)。
[0068]综上所述，本预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂能有效预防与治疗因饲料中鱼粉不新鲜导致黄颡鱼黑体色缺失出现的症状，而且对于鱼粉不新鲜造成的胃和肠道损伤也有较好的修复作用。
[0069]实施例3:
[0070]本实施例的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂与实施例2的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂的制备方法基本相同，只是在药液煎煮步骤，其是按质量百分比:将中药旱莲草24%、无花果24%、丹皮24%、潼蒺藜20%、蛇床子8%加入多功能提取罐内，再加入这5味药材总质量的7倍水，其他相同。
[0071]由此得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
[0072]实施例4:
[0073]本实施例的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂与实施例2的预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂的制备方法基本相同，只是在药液煎煮步骤，其是按质量百分比:将中药旱莲草24%、无花果24%、丹皮24%、潼蒺藜20%、蛇床子8%加入多功能提取罐内，再加入这5味药材总质量的8倍水，其他相同。
[0074]由此得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
【主权项】
1.一种预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂，其特征在于，其是通过以下方法制备的: 中药原料:包括旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子； A、药汁煎煮:将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子加入到水中煎煮，滤取药汁，然后再在药汁中加入马来酸氯苯那敏，浓缩药汁，得到A混合溶液； B、包被:将A混合溶液包被后得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。2.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，其是通过以下方法制备的: 中药原料，按质量分数计，包括旱莲草24%、无花果24%、丹皮24%、潼蒺藜20 %和蛇床子8% ； A、药汁煎煮:将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子按各组份的质量分数一起加入中药原料总质量6-8倍的水中煎煮，然后滤取药汁，再加入中药原料总质量33.3%的马来酸氯苯那敏到药汁中溶解，然后浓缩药汁，得到A混合溶液； B、包被:将A混合溶液包被后得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。3.根据权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述的包被为:将微孔淀粉置于沸腾干燥装置的流化床上沸腾，将A混合溶液从沸腾干燥装置的上方以高压气雾的方式喷到淀粉载体上，待其干燥后，形成A初始体，然后将氯化钠溶液间歇式喷到A初始体上，待其干燥后，得到B初始体，然后再将明胶溶液喷到B初始体上，干燥，取出后冷却得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。4.根据权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述的步骤A和步骤B为: A、药汁煎煮:将旱莲草、无花果、丹皮、潼蒺藜和蛇床子按各组份的质量分数一起加入中药原料总质量6-8倍的水中，加温至30°C浸泡30分钟，然后加温至100°C煮沸，保持I小时，滤取药汁，再加入中药原料总质量33.3 %的马来酸氯苯那敏到药汁中溶解，100 °(:浓缩药汁至中药原料总质量的3倍，得到A混合溶液； B、包被:将微孔淀粉置于沸腾干燥装置的流化床上沸腾，将A混合溶液从沸腾干燥装置的上方以高压气雾的方式喷到淀粉载体上，待其干燥后，形成A初始体，然后将质量分数10%的氯化钠溶液间歇式喷到A初始体上，氯化钠包覆用量为淀粉质量的10%，待其干燥后，得到B初始体，然后再将质量分数10%的明胶溶液喷到B初始体上，明胶用量为淀粉质量的1.5%，80°C干燥，取出后冷却得到预防和治疗黄颡鱼因饲料新鲜度差致黑体色缺失症状的制剂。
【文档编号】A23K20/174GK106074745SQ201610567150
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年7月15日
【发明人】许国焕, 程炜轩, 张丽, 韩木兰, 陈金涛, 魏逸峰, 郭莹姿, 谭文俊
【申请人】广东省微生物研究所, 广东碧德生物科技有限公司