限制脸部凹陷的化妆方法

专利名称：限制脸部凹陷的化妆方法
专利说明限制脸部凹陷的化妆方法 本发明涉及一种化妆方法，通过将一种组合物施加到脸部和/或颈部的皮肤上，减少脸部和/或颈部皮肤脂结构的熔化，和/或避免脸部体积松弛和/或凹陷，该组合物在生理上可接受的介质中，包含非结实(non-fruiting)非光合丝状细菌的至少一种提取物。
本发明也涉及一种化妆组合物，该组合物能用在本发明的方法中，在生理上可接受的介质中，包含(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物和(ii)至少一种C-糖苷衍生物。
它还涉及组合物中非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物的化妆用途，用于减少皮肤密度的损失和/或皮肤脂结构的熔化和/或避免脸部体积松弛和/或凹陷。
众所周知，皮肤的老化征兆有岁月因素(基因程序性老化)和其他恶化因子，比如暴露于UV射线下和绝经期出现的荷尔蒙缺乏。它们引起本质上基于皮肤功能的减慢和不均衡引起的皮肤状态的变化，导致了整个皮肤层的“萎缩”。因此可以观察到真皮(弹性蛋白、胶原、葡萄糖胺聚糖)质量的降低和细胞外基质稠度的损失；表皮厚度的降低(细胞更新的减慢)；表皮结构脂质和蛋白质产生的减慢；脱皮的不均衡；和皮肤水含量的减少。
特别地，尤其按照上述变化观察到皮肤的支持垫变弱和脂肪团熔化。这也称为皮肤“脂结构”的熔化。
“皮肤的脂结构”的表达理解为形成体积的脂质细胞的网状物，在该体积上，脸部皮肤依靠并成形。
脸部因此逐渐凹陷，皮肤失去了它的稠度和支持物，容易塌下；卵形区(oval)加重；并且观察到脸部体积的松弛和/或凹陷。
这种现象尤其可见于面颊上，其变得日益凹陷，于眼部轮廓上以及于脸部卵形区上，其界限不再那么分明(出现下颚垂肉(jowl))。
随着年龄增长这些现象越发明显，在具有成熟皮肤或者甚至非常成熟皮肤的人群中特别容易注意到，特别是绝经期女性中。
本发明的“成熟皮肤”的表达理解为至少40岁的对象的特殊皮肤。
本发明的“非常成熟皮肤”的表达理解为至少50岁的对象的特殊皮肤，特别是至少60岁，或者甚至65岁。
现在人们坚持不懈的寻找对抗、或者至少是延迟这些老化征兆出现的方法，特别是寻找新方法使以下成为可能 -减少皮肤密度的损失和/或皮肤脂结构的熔化，特别是面颊和眼部轮廓，和/或 -恢复皮肤的脂结构，和/或 -避免脸部体积松弛和/或凹陷，特别是面颊和眼部轮廓，和/或 -增加颊骨体积，和/或 -改善脸部和/或颈部皮肤下面的体积，特别是面颊、脸部卵形区和眼部轮廓，和/或 -改善皮肤密度、丰度和支持度，特别是面颊、脸部卵形区和眼部轮廓，和/或 -整形脸部特征，特别是脸部卵形区。
申请人:惊奇地没有预料到地发现一种非结实非光合丝状细菌的提取物具有刺激脂肪形成和促进脂肪细胞分化的性质，因此能够避免或减慢包含在皮肤支持组织中的脂肪的熔化，另外也被称为“皮肤脂结构的熔化”。
本申请文件中，申请人想到使用非结实非光合丝状细菌的这种提取物来对抗脸部和/或颈部凹陷和松弛的多种机制。
非结实非光合丝状细菌的提取物已知作为免疫促进剂(EP0604631)、P物质拮抗物(EP0761204)、刺激成纤维细胞增殖的试剂(EP0681831)、抗氧化剂(EP1354593)、或可替代的减肥剂(FR9900405)。
然而，据申请人所知，非结实非光合丝状细菌，特别是丝状透明颤菌(Vitreoscilla filiformis)的这些提取物，对刺激脂肪形成和/或脂肪细胞分化的效果，或者其在重塑脸部和/或颈部和/或限制与年龄相关的脸部凹陷方面的用途，从未被描述或建议。
因此本申请是一种化妆方法，它通过将一种组合物施加到脸部和/或颈部的皮肤上，减少脸部和/或颈部皮肤脂结构的熔化，和/或避免脸部体积松弛和/或凹陷，该组合物在生理上可接受的介质中，包含非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物。
特别地，用于增加颊骨体积。
特别地，用于重新限定脸部轮廓和/或卵形区，和/或避免下颚垂肉的形成和/或限制面颊和/或眼部轮廓的凹陷。
根据本发明的特殊实施方案，该组合物被施加于与年龄相关的脸部和/或颈部的凹陷和/或松弛或被施加于面颊和/或眼部轮廓凹陷和/或面颊松弛的人群。
这些与年龄相关的凹陷和/或松弛区域特别是面颊、眼部轮廓和/或脸部卵形区(脸部轮廓)。
面颊和/或眼部轮廓凹陷和/或颈部松弛的人可以是任何年龄的男性和女性，但特别是具有成熟皮肤(至少40岁)，或者非常成热皮肤(至少50岁或甚至60岁)的人，又特别是绝经期女性。
因此本发明的方法对于重塑脸部和/或颈部，限制拥有成熟或甚至非常成熟皮肤的人群的脸部凹陷特别具有优势。
它也对重塑脸部和/或颈部，限制绝经期女性的脸部凹陷具有优势。
非结实非光合丝状细菌的提取物 本发明可以使用的细菌提取物从非光合丝状细菌中制备，所述细菌根据伯杰氏系统细菌学手册的分类来定义(第3卷，22和23部分，第9版，1989)，其中可提到的细菌属于贝氏菌目(Beggiatoales)，更特殊的属于贝氏硫菌属(Beggiatoa)、透明颤菌属(Vitreoscilla)、柔发菌属(Flexithrix)或亮发菌属(Leucothrix)。
之前定义的以及其中一些已被广泛描述的细菌通常具有水生环境且特别能在海水和温泉水中找到。在可使用的细菌中，这些可被提及作为示例 丝状透明颤菌(Vitreoscilla filiformis)(ATCC 15551)类贝氏菌透明颤菌(Vitreoscilla

)(ATCC 43181) 白色贝日阿托菌(Beggiatoa alba)(ATCC 33555) 多萝柔发茵(Flexithrix dorotheae)(ATCC 23163) 毛霉亮发菌(Leucothrix mucor)(ATCC 25107) 浮游球衣菌(Sphaerotilus natans)(ATCC 13338) 优选地将使用丝状透明颤菌(Vitreoscilla filiformis)(ATCC15551)的提取物。
本发明“细菌提取物”的表达理解为细菌生物质的提取物或所述提取物的任何活性成分，特别地 (i)从培养基中分离的经过浓缩的细菌细胞，例如通过离心(“非稳定细胞提取物”)；或 (ii)浓缩的细菌细胞(i)，然后用本领域技术人员所知的任何方法进行破坏细菌细胞外膜的操作，比如超声波或优选高压灭菌(“稳定细胞提取物”)。“外膜”的表达理解为细胞壁和可选择的下方的细胞膜； (iii)稳定细胞提取物(ii)经过滤得到的上清液，或所述具有刺激脂肪形成和/或脂肪细胞分化效果的提取物的任何活性成分。
这种活性成分在脂肪形成和/或脂肪细胞分化方面的效果可以根据下面实施例中描述的方法之一估计，可以通过传统分馏方法获得，例如在溶剂的存在下提取、选择性沉淀或切面流超滤(TUF)。
这些提取物或级分可通过诸如对其冷冻的方法保存，解冻后使用。
细菌((i)和(ii))“细胞提取物”、所述提取物(iii)的“上清液”或“活性成分”的表达在说明书的剩余部分将会更加简单使用。
根据本发明的方法使用的组合物中的非结实非光合丝状细菌的提取物优选自细胞提取物、所述细胞提取物的上清液或所述细胞提取物的活性级分。
优选地，非结实非光合丝状细菌的提取物是丝状透明颤菌的提取物，更优选地仍然是丝状透明颤菌的细胞提取物。
为了制备根据本发明的细菌提取物，所述细菌可通过本领域技术人员公知的方法培养，或者可特别参考专利申请WO-A-94-02158的说明书。得到的细胞提取物的上清液可经过例如过滤离心而分离。可使用提取物的水溶液形式或冻干形式。下面的实施例1的实验会更详细描述该方案。
细菌提取物可以重新分馏，使用纯的或者是各种浓度的稀释。
根据本发明方法使用的组合物中，相对于组合物的总重量，非结实非光合丝状细菌的干提取物的重量通常为0.001-10％，特别是0.005-2％。
相对于组合物的总重量，非结实非光合丝状细菌的干提取物的重量范围优选0.01-2％。
这些组合物包含非结实非光合丝状细菌提取物的形式可以是分散在合适的载体中，例如水、有机溶剂、含油的脂肪物质及其混合物，特别是乳剂。
根据本发明方法使用的组合物通常适于局部施加于皮肤，因此常包含生理上可接受的介质，即是说，与皮肤和/或其表体生长相容的介质。优选化妆品中可接受的介质，即是说介质具有宜人颜色、气味和感觉，不会引起无法接受的不舒适(刺痛、紧绷、斑点)，从而使得消费者不使用该组合物。
根据本发明方法使用的组合物可以以常规用于局部施加的任何盖仑式形式提供，特别是化妆水或水凝胶状的分散形式；具有奶状类型的液体或半液体稠度的乳剂，通过将脂相分散到水相(O/W)或相反(W/O)而获得；具有乳霜、凝胶或精华素(serum)型的柔性、半固性或固性稠度的悬浮液或乳剂，或可替代的多相乳剂(W/O/W或O/W/O)；微乳剂；离子和/或非离子型的载体分散体；或蜡/水相分散体。这些组合物根据常规方法制备。
根据本发明的优选实施方案，该组合物以水包油(O/W)乳剂形式提供。
特别地为凝液(fluid)、乳霜、凝胶或精华素，例如日霜、晚霜、眼部轮廓精华素。
可用在根据本发明的组合物中的油类可被提及的有脂肪醇的脂肪酸酯；挥发(如环状聚二甲基硅氧烷)或非挥发(如聚二甲基硅氧烷)的硅油；支链脂肪醇如辛基十二烷醇；烃油如石油凝胶、角鲨烷、异十六烷和矿物油；植物油；和牛油树脂。油相也可以包括蜡如蜂蜡。
该组合物可以另外含有化妆品领域常用的各种辅剂，如多元醇，特别是甘油、丙二醇和聚乙二醇；乳化剂如聚乙二醇的脂肪酸酯、甘油基的脂肪酸酯、蔗糖的脂肪酸酯、聚乙二醇的脂肪醇醚、和可选择的甲基葡萄糖的氧乙烯化脂肪酸酯；辅助乳化剂如鲸蜡和硬脂醇；填料，特别是二氧化硅；和膨胀粉末如偏二氯乙烯、丙烯腈和异丁烯酸酯的三聚物形成的微球，由Kemanord Plast公司以名字EXPANCEL在市场销售；稠化剂和/或胶凝剂如多糖或硅酮橡胶、丙烯酰胺的均-和共聚物、丙烯酸的均-和共聚物和丙烯酰胺基甲基丙磺酸(AMPS)的均-和共聚物；防腐剂；螯合剂；pH调节剂如三乙醇胺、氢氧化钠或柠檬酸；乙醇；着色剂；珠光剂；和香料。
当然，本领域技术人员会仔细选择这种或这些任选的添加的化合物和/或它们的用量，使得本发明的组合物的优势特征不受到或基本不受到预期添加的破坏。
本发明方法中使用的组合物能够减缓脸部物质的损失，这些物质负责老化过程中脸部的凹陷和松弛。为了强化组合物的效果，后者可以另外含有至少一种选自以下的试剂促进皮层或表皮大分子合成的试剂、刺激角质化细胞增殖的试剂、促进表皮脂质合成的试剂、刺激细胞新陈代谢的试剂和促进微循环的试剂。
促进皮层或表皮大分子合成和/或阻止它们降解的试剂 -增加葡萄糖胺聚糖合成的试剂，比如普通乳酸菌(Lactobacillusvulgaris)的牛奶发酵产物，如BROOKS公司以商品名Biomin yogourth销售的产品；褐藻海扇藻(Padian pavonica)的提取物如ALBANMLLER公司以商品名HSP3销售的产品；特别从SILAB公司的商品Firmalift或LSN公司的商品Cytovitin中获得的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的提取物；从诸如SECMA公司的商品Laminaine中获得的Laminaria ochroleuca提取物；从诸如ROCHE公司的商品ETCA中获得的积雪草(Centella asiatica)提取物；从SILAB公司的商品Odraline中获得的水田芥(Nasturtium officinale)的提取物；Lucas Meyer的Mamaku香精；D-木糖，它的酯和含有D-木糖的寡糖，特别如申请WO99/24009所述；C-糖苷，如申请WO 02-051828所述，如C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷和它的盐和光学和几何异构体。增加优选的葡萄糖胺聚糖的合成的试剂是C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷和它的盐和光学和几何异构体。
-增加胶原质合成和/或阻止其降解的试剂，比如积雪草提取物、积雪草皂苷及衍生物；抗坏血酸或维生素C及其衍生物；合成肽如甘氨酸、组氨酸和赖氨酸的铜络合物(iamin)、生物肽CL或SEDERMA公司销售的棕榈酰寡肽；植物中提取的肽，如COLETICA公司以商品名Phytokine销售的大豆水解产物，或者SILAB公司以商品名Ridulisse销售的水解大豆蛋白质，和植物激素如生长素、木脂素类；类视黄醇及衍生物、COLETICA公司以商品名Collalift销售的麦芽提取物；覆盆子或迷迭香提取物；番茄红素。促进胶原质合成的优选试剂是SILAB公司以商品名Ridulisse销售的水解大豆蛋白质。
-促进表皮分子合成的试剂(如抗角蛋白微丝聚集蛋白(fillagrin)和角蛋白)，比如SILAB公司以商品名Structurine销售的羽扇豆提取物；GATTEFOSSE公司以商品名GatulineRC销售的欧洲山毛榉(Fagus sylvatica)芽提取物。
促进角质化细胞增殖的试剂 特别要提及间苯三酚；GATTEFOSSE公司销售的坚果油团提取物；和SEDERMA公司销售的马铃薯(Solanum tuberosum)提取物；查帕拉尔橡树(Larrea divaricata)提取物如Sederma的Capislow、木瓜混合物、橄榄和柠檬叶如Vincience的Xyleine、八仙花大斑(Hydrangea macrophylla)叶子提取物如Ichimaru Pharcos的Amachaliquid E、酵母提取物如CLR的Stimoderm。
促进表皮脂质合成的试剂 特别可提及抗坏血酸及其衍生物，和肉桂酸及其衍生物。
刺激细胞新陈代谢的试剂 既然试剂能刺激老化过程中减缓的细胞能量代谢，就特别可提及生物素，啤酒酵母(Saccharomyces cerevisaie)提取物如Sederma的Phosphovital、Solabia的Physiogenyl，锌、铜和镁的葡萄糖酸盐的混合物如Seppic的Sepitonic M3。
促进皮肤微循环的试剂 特别要提及咖啡因、假叶树(ruscus)提取物、马果树、常春藤、人参、黄香草木犀、Sederma的Kombuchka、碧萝芷(pycnogenol)、葡萄糖酸锰(Seppic的Givobio GMn)、Indena的氢吡豆素(Visnadin)、羽扇豆提取物(Silab的Eclaline)、Carilène实验室的Epaline100、代代花提取物(ilab的Remoduline)、维生素P及其衍生物如Sochibios的Permethol、烟酸盐及其衍生物、赖氨酸及其衍生物(如Solabia的Asparlyne)。优选试剂是咖啡固、假叶树和马果树提取物。
促进皮肤微循环的试剂在用于眼部轮廓的组合物中特别有优势。
这些添加试剂通常在组合物中出现的量以重量相对于组合物总重量计，范围在0.001-10％，优选相对于组合物总重量的重量为0.01-1％。
特别地，本发明方法使用的组合物包括(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物和(ii)增加葡萄糖胺聚糖的合成至少一种试剂，其作为促进皮肤和/或表皮大分子合成的试剂。
方便地，组合物另外包含三种活性试剂的组合，其组成为增加胶原质合成的试剂，其作为促进皮肤和/或表皮大分子合成的试剂，增加表皮脂质合成的试剂，和促进角质化细胞增殖的试剂。
根据特殊实施方案，除了这三种活性试剂的组合外，组合物可以包括刺激细胞新陈代谢的至少一种试剂和/或促进微循环的至少一种试剂。
刺激细胞微循环的试剂在晚间用的组合物中特别有优势，促进微循环的试剂在用于眼部轮廓的组合物中特别有优势。
优选地 -非结实非光合丝状细菌的提取物是丝状透明颤菌的提取物； -增加葡萄糖胺聚糖合成的试剂是C-糖苷衍生物，如申请WO02-051828所述，特别是C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷或它的盐或光学和几何异构体之一； -促进胶原质合成的试剂是水解大豆蛋白质如SILAB公司销售的商品RIDULISSE； -促进表皮大分子合成的试剂是欧洲山毛榉(beech Fagussylvatica)芽提取物如GATTEFOSSE公司销售的商品GatulineRC； -增加角质化细胞增殖的试剂是间苯三酚(1，3，5-三甲氧基苯)或其衍生物之一； -促进表皮脂质合成的试剂是肉桂酸或其衍生物之一； -刺激细胞新陈代谢的试剂是啤酒酵母提取物如Sederma的Phosphovital； -促进皮肤微循环的试剂是咖啡固。
本发明的组合物可以另外含有至少一种UVA和/或UVB遮蔽剂。这些遮光剂可以选自有机遮蔽剂、无机遮蔽剂和它们的混合物。
有机遮蔽剂更加特别优选自以下物质(引自CTFA命名法)水杨酸乙基己基酯、胡莫柳酯、甲氧基肉桂酸乙基己基酯、丁基甲氧基二苯甲酰甲烷、氰双苯丙烯酸辛酯、苯基苯并咪唑磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸二钠、二苯甲酮-3、二苯甲酮-4、二苯甲酮-5、4-甲基苯亚甲基樟脑、对苯二亚甲基二樟脑磺酸、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪、乙基己基三嗪酮、二乙基己基丁酰胺基三嗪酮、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚、甲酚曲唑三硅氧烷、聚硅氧烷-15，和来自下列(引用化学名)2-(4-二乙基氨基-2-羟基苯酰基)-苯甲酸正己酯、1，1-二羧基-(2，2′-二甲基-丙基)-4，4-二苯丁二烯、2，4-二-[5-1(二甲基丙基)苯唑-2-基-(4-苯基)-亚氨基]-6-(2-乙基己基)-亚氨基-1，3，5-三嗪、和它们的混合物。
无机遮蔽剂选自涂覆或未涂覆金属氧化物的色素或纳米色素(初级颗粒的平均尺寸，通常在5nm到100nm之间，优选在10nm到50nm之间)，例如氧化钛(金红石和/或锐钛矿的无定形或结晶形式)的纳米色素、氧化铁、锌、锆或铈的纳米色素。
本发明也涉及能用于以上权利要求的方法中的化妆组合物，在生理上可接受的介质中，包括(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物和(ii)至少一种C-糖苷衍生物。
非结实非光合丝状细菌的提取物优选丝状透明颤菌提取物，特别是丝状透明颤菌细胞提取物。
本发明的组合物中可以使用的C-糖苷衍生物如申请WO02-051828所述。
适合本发明的C-糖苷衍生物可以是下列通式(I)的化合物
其中 -R代表 -饱和的C1-C20，特别是C1-C10，或者不饱和的C2-C20，特别是C2-C10，线性烷基，或者是饱和或不饱和的C3-C20，特别是C3-C10，支链或环状烷基； -饱和的C1-C20，特别是C1-C10，或者不饱和的C2-C20，特别是C2-C10，线性，或饱和或不饱和的C3-C20，特别是C3-C10，支链或环状，氢氟-或全氟烷基； 对于组成所述基团的烃链，可以视需要被1、2、3个或更多的来自以下的杂原子中断 -氧， -硫， -氮，和 -硅， 且可任选地被选自以下至少一种基团取代 --OR4， --SR4， --NR4R5， --COOR4， --CONHR4， --CN， -卤素原子， -C1-C6氢氟-或全氟烷基 -C3-C8环烷基，和/或 R4和R5可以相互独立地代表氢原子，或饱和的C1-C30，特别是C1-C12，或者不饱和的C2-C30，特别是C2-C12，线性，或饱和或不饱和的C3-C30，特别是C3-C12，支链或环状，烷基，全氟烷或氢氟烷基；或C6-C10芳基， -X代表选自下列基团
R1，R2和R3相互独立地代表氢原子或R基，R如上定义，R’1代表氢原子、-OH基团或如上定义的R基，R1也可以表示C6-C10芳基； -S代表单糖或含有至多20个糖单元，特别是至多6个糖单元的多糖，以吡喃糖和/或呋喃糖形式和L和/或D型。所述的单-或多糖可以被必须是处于游离状态的羟基基团和任选地被任选保护的一个或多个氨基官能基团取代，和 -S-CH2-X键代表C-异头物性质的键，可以是α或β， 和它们在化妆品上可接受的盐，它们的溶剂合物如水合物及其异构体。
本发明申请中，“卤素”的表达理解为氯、氟、溴或碘。
术语“芳基”表示芳环如苯环，可任选被一个或多个C1-C4烷基取代。
术语“C3-C8环烷基”表示具有3-8个碳原子的脂肪环，包括例如环丙基、环戊基和环己基。
在适合实施本发明的烷基基团中，特别可提到甲基、乙基、异丙基、正-丙基、正-丁基、叔-丁基、异丁基、仲丁基、戊基、正-己基、环丙基、环戊基、环己基，和烯丙基基团。
根据本发明的实施方案，可以使用与通式(I)对应的C-糖苷衍生物，其中S可以代表含至多6个糖单元的单糖或多糖，以吡喃型和/或呋喃型形式且为L和/或D型，所述单-或多糖具有至少一个必须是处于游离状态的羟基官能基团和/或任选一个或多个必须被保护的胺基官能团，此外X和R保留以上所有限定。
有利地，本发明的单糖可选自D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、D-木糖、D-来苏糖、L-岩藻糖、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-葡糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-艾杜糖醛酸、N-乙酰基-D-葡糖胺、N-乙酰基-D-半乳糖胺和有利地表示D-葡萄糖、D-木糖、N-乙酰基-D-葡糖胺或L-岩藻糖，特别是D-木糖。
更特别地，本发明含至多6个糖单元的多糖可选自D-麦芽糖；D-乳糖；D-纤维二糖；D-麦芽三糖；结合糖醛酸和己糖胺的二糖，糖醛酸选自D-艾杜糖醛酸或D-葡糖醛酸，己糖胺选自D-半乳糖胺、D-葡糖胺、N-乙酰基-D半乳糖胺、N-乙酰基-D-葡糖胺；含有至少一个木糖的寡糖，其可有利地选自木二糖、甲基-β-木二糖苷、木三糖、木四糖、木五糖、和木六糖，特别是由两个通过1-4键连接的木糖分子组成的木二糖。
更特别地，S可以代表选自D-葡萄糖、D-木糖、L-岩藻糖、D-半乳糖、D-麦芽糖和特别是D-木糖的单糖。
根据本发明的另一个实施方案，可以使用与通式(I)对应的C-糖苷衍生物，其中X代表的基团选自-CO-、-CH(OH)-、-CH(NR1R2)-、-CH(R)-，特别是-CO-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-、-CH(NHCH2CH2CH2OH)-、-CH(NHPh)-、-CH(CH3)-，更特别是基团-CO-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-，优选基团-CH(OH)-，此外S和R保留以上所有限定。
根据本发明的另一个实施方案，可以使用与通式(I)对应的C-糖苷衍生物，其中R代表饱和的C1-C20，特别是C1-C10，或者不饱和的C2-C20，特别是C2-C10，线性烷基，或者是饱和或不饱和的C3-C20，特别是C3-C10，支链或环状烷基，可如上所述任选取代，此外S和R保留以上所有限定。优选地，R表示线性C1-C4，特别是C1-C3基团，任选由-OH、-COOH或-COOR”2取代，R”2是饱和的C1-C4烷基，特别是乙基。优选地，R表示未取代的C1-C4，特别是C1-C2，线性烷基，特别是乙基。
通式(I)的C-糖苷衍生物中，对于优选使用的那些 -R代表饱和的C1-C20，特别是C1-C10，或者不饱和的C2-C20，特别是C2-C10线性烷基，或者是饱和或不饱和的C3-C20，特别是C3-C10，支链或环状烷基，可如上所述任选取代； -S代表如上所述的单糖； -X代表如上所述的-CO-、-CH(OH)-、-CH(NR1R2)-、-CH(R)-。
优选地，对于所使用的通式(I)的C-糖苷衍生物 -R表示C1-C4，特别是C1-C3，任选地用-OH、-COOH或-COOR”2取代的线性烷基，R”2是饱和C1-C4烷基，特别是乙基； -S代表如上所述的单糖； -X代表的基团选自-CO-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-、-CH(NHCH2CH2CH2OH)-、-CH(NHPh)-、-CH(CH3)-，更特别的是基团-CO-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-，优选基团-CH(OH)-。
优选地，对于所使用的通式(I)的C-糖苷衍生物 -R表示不饱和C1-C4，特别是C1-C2，线性烷基，特别是乙基； -S代表如上所述的单糖；特别是D-葡萄糖、D-木糖、N-乙酰基-D-葡糖胺或L-岩藻糖，特别是D-木糖； -X代表的基团选自-CO-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-，优选基团-CH(OH)-。
本发明描述的组合物非治疗用途的可接受盐包括所述化合物的常规无毒盐，如从有机或无机酸形成的那些。例如，可以提到无机酸盐，如硫酸、盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硼酸的盐。也可以提到有机酸盐，它们可以包括一个或多个羧基、磺酸基或膦酸基基团。它们可以是线性、支链或环状的脂族酸或可替代的芳香族酸。这些酸可以另外包括一个或多个选自O或N的杂原子，例如以羟基的形式。也可以提到丙酸、醋酸、对苯二酸、柠檬酸和酒石酸。
当通式(I)的化合物包含了酸性基团，可以用无机碱去中和酸性基团(一种或多种)，如LiOH、NaOH、KOH、Ca(OH)2、NH4OH、Mg(OH)2或Zn(OH)2；或者用有机碱，如伯、仲、或叔烷基胺，例如三乙胺或氨基丁烷。这种伯、仲、或叔烷基胺可以包含一个或多个氮和/或氧原子且因此可以包括例如一个或多个醇基官能团；特别可提到2-氨基-2-甲基丙醇、三乙醇胺、2-二甲基氨基丙醇、2-氨基-2-(羟甲基)-1，3-丙二醇。也可以提到赖氨酸或3-(二甲基氨基)丙胺。
本发明描述的化合物的可接受的溶剂合物包括传统溶剂合物，比如因为溶剂的出现在所述化合物制备的最后一步期间形成的溶剂合物。例如，可提及由于水或诸如乙醇或异丙醇的线性或支链醇的存在的溶剂合物。
通过非限制性说明更加适合本发明的C-糖苷衍生物，可特别提到下述衍生物 -C-β-D-木吡喃糖苷-n-丙烷-2-酮， -C-α-D-木吡喃糖苷-n-丙烷-2-酮， -C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷， -C-α-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷， -1-(C-β-D-岩藻吡喃糖苷)-丙烷-2-酮， -1-(C-α-D-岩藻吡喃糖苷)-丙烷-2-酮， -1-(C-β-L-岩藻吡喃糖苷)-丙烷-2-酮， -1-(C-α-L-岩藻吡喃糖苷)-丙烷-2-酮， -1-(C-β-D-岩藻吡喃糖苷)-2-羟基-丙烷， -1-(C-α-D-岩藻吡喃糖苷)-2-羟基-丙烷， -1-(C-β-L-岩藻吡喃糖苷)-2-羟基-丙烷， -1-(C-α-L-岩藻吡喃糖苷)-2-羟基-丙烷， -1-(C-β-D-吡喃葡萄糖基)-2-羟基-丙烷， -1-(C-α-D-吡喃葡萄糖基)-2-羟基-丙烷， -1-(C-β-D-吡喃半乳糖基)-2-羟基-丙烷， -1-(C-α-D-吡喃半乳糖基)-2-羟基-丙烷， -1-(C-β-D-呋喃岩藻糖基)-丙烷-2-酮， -1-(C-α-D-呋喃岩藻糖基)-丙烷-2-酮， -1-(C-β-L-呋喃岩藻糖基)-丙烷-2-酮， -1-(C-α-L-呋喃岩藻糖基)-丙烷-2-酮， -C-β-D-吡喃麦芽糖苷-正-丙烷-2-酮， -C-α-D-吡喃麦芽糖苷-正-丙烷-2-酮 -C-β-D-吡喃麦芽糖苷-2-羟基-丙烷， -C-α-D-吡喃麦芽糖苷-2-羟基-丙烷，其异构体和混合物。
根据一个实施方案，C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷或C-α-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷，甚至更好为C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷，可以有利地用于本发明组合物的制备中。
根据一个特殊实施方案，C-糖苷衍生物是C-α-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷，以含30％重量的活性物质在水/丙二醇混合物(重量比60/40％)中的溶液形式，比如CHIMEX制造的商品名为“MEXORYL SBB”的产品。
当然，根据本发明，与通式(I)对应的C-糖苷衍生物可以单独使用，也可以与其他C-糖苷衍生物或以任何比例混合使用。
适合本发明的C-糖苷衍生物特别可以通过文件WO 02/051828描述的合成方法获得。
待用于本发明组合物中的C-糖苷衍生物的量取决于所需的化妆或治疗效果，因此可以广泛变化。
本领域技术人员靠他们的常识可以轻易确定合适的用量。
本发明的组合物可以包括相对于组合物总重量约0.0001％-约25％的活性物质重量，特别是约0.001％-约10％的活性物质重量的C-糖苷衍生物，更特别的是相对于组合物总重量的约0.05％-约5％的C-糖苷衍生物的活性物质重量。
本发明也涉及能用于以上权利要求的方法中的化妆组合物，在生理上可接受的介质中，包括(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物和(ii)促进葡萄糖胺聚糖合成的至少一种试剂和(iii)由增加胶原质合成的试剂、增加表皮脂质合成的试剂和促进角质化细胞增殖的试剂组成的三种活性试剂的至少一种组合。
每一类的试剂例子如以上说明书所述。
本发明优选的组合物包括至少一种丝状透明颤菌提取物、C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基-丙烷或其一种盐或光学和几何异构体、水解大豆蛋白质、肉桂酸或其一种衍生物，和间苯三酚或其一种衍生物。
本发明也涉及组合物中的非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物的化妆用途，用于降低皮肤密度的损失和/或皮肤脂结构的熔化和/或避免脸部体积松弛和/或凹陷，皮肤和/或支持物稠度的损失。
本发明也涉及组合物中的非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物的化妆用途，用于重新限定轮廓和/或脸部卵形区，和/或避免形成下颚垂肉和/或限制面颊和/或眼部轮廓凹陷。
现在将通过以下非限制的实施例说明本发明。在这些实施例中，含量以重量百分比表示。
实施例 实施例1-制备丝状透明颤菌提取物 丝状透明颤菌菌株(ATCC 15551)按照专利申请WO-A-94-02158描述的方法培养。
这涉及到连续培养方法。在26℃培养至少48小时直到获得600 nm的相应光学密度大于或等于1.5的合适的细菌浓度。菌株在2％V/V的新鲜培养基上传代培养约48小时直到获得稳定培养物。然后将4ml前面的培养物接种到装有200ml新鲜培养基的1升的锥形烧瓶中。锥形烧瓶中的培养在26℃100转/分钟振荡的培养台上进行。由此获得的原料作为50升发酵罐的接种物。生长出现于26℃，pH 7，100转/分钟，pO2≥15％。
生长30小时后，该生物质被转移到3000升工作体积的发酵罐，从而在相同条件下培养。生长48小时后，连续收获细胞。通过离心生物质浓缩了约50倍。获得的细胞在培养进行中被冷冻。这些细胞可以在解冻后使用(非稳定细胞提取物)或可替代地可在121℃高压灭菌20-40分钟来稳定(稳定细胞提取物)。然后在灭菌过程中细胞裂解，释放出胞质溶胶，使蛋白质与壁聚集，于是获得的产品是双相性的。
上清液相可以在0.22μm过滤从而除去颗粒(“上清液”)。
细胞提取物(稳定或不稳定)或上清液形式的细菌提取物可以使用其本身(水溶液形式)或根据传统技术冻干(冻干形式)。
实施例2丝状透明颤菌在脂肪形成和脂肪细胞分化中的性质证明 根据实施例1制备的丝状透明颤菌细胞提取物在局部脂肪形成方面的活性得到评估。对从腹部获得的人脂肪细胞进行研究。分析了多种代表脂肪细胞生理的参数 a)刺激脂肪形成，通过测量14C-醋酸盐引入脂质； b)刺激脂肪细胞分化，通过测量表达的脂肪细胞分化标记物LPL(脂蛋白脂肪酶，涉及脂肪储存)； c)监测脂质富集，通过特殊染色(AdipoRedTM)和成像； d)监测细胞大小/大小分布，通过流式细胞术和荧光标记(AdipoRedTM)。
检测根据实施例1制备的丝状透明颤菌提取物，在 -10％、1％和0.1％，针对脂肪形成效果； -0.25％和0.05％，针对脂肪细胞分化效果。
刺激脂肪形成，通过测量14C-醋酸盐引入脂质， 腹部整形手术后分离脂肪细胞，然后在胶原酶的存在下培养，然后洗涤，放入检测培养基。检测培养基包括 -待检测产物(不同浓度的丝状透明颤菌提取物/胆茶碱1mM/异丙肾上腺素1μM)，或什么都不添加的对照 -碳酸氢盐1.87mg/ml -青霉素/链霉素25IU/ml/25μg/ml -谷氨酰胺2mM -MEM，不含酚磺酞，适量至100％(v/v)，补充无脂小牛血清白蛋白0.5％(w/v)。
待检测产物和脂肪细胞在37℃预培养1h，然后加入50μCi/m14C-醋酸盐。处理4h后，用甲醇/氯仿/水提取脂质，用液体闪烁计算加入的放射性。
结果如下表所示。
检测到0.02mM的浅蓝菌素(脂肪酸合成酶FAS的抑制剂)能明显抑制醋酸盐引入脂质，证实了测试。
丝状透明颤菌提取物在检测的三个浓度中能明显刺激醋酸盐引入，但是在最高浓度下，产物干扰试验(淬灭)。
刺激脂肪细胞分化，通过测量表达的脂肪细胞分化标记物LPL或脂蛋白脂肪酶，涉及脂肪储存 普通人前脂肪细胞培养在PGM生长培养基中，37℃，5％CO2，直到融合。在融合时(D0)将细胞放置于分化培养基(系列1，分化细胞)或普通生长培养基(系列2，非分化细胞)，含有或不含有(对照)检测产物或参照(TNFa，分化抑制剂)。然后将细胞在37℃，5％CO2中培养4天。
处理的最后，除去上清液，用PBS漂洗细胞，每个孔中加入300μl体积的Tri-试剂。基于每一个处理中细胞菌苔提取的信使RNA，用RT-Q-PCR评估LPL标记物的表达。根据供应商的推荐使用LightCycler(Roche Molecular Systems Inc)系统。使用的引物对可以扩增下列特异性片段 -人β-肌动蛋白(GenBank No.X00351)作参照； -脂蛋白脂肪酶前体LPL(GenBank No.M15856)。
在PCR循环中持续检测扩增DNA中荧光的掺入。评估LPL标记物的相对表达值，根据下列公式以任意单位表达 (1/2循环数)×106 结果用与对照相比的相对表达％来表示。
LPL标记物受到丝状透明颤菌提取物刺激；表明对脂肪形成的积极效果，其确认了之前测试观察到的效果。
监测脂质富集，通过特殊染色(AdipoRedTM)和成像 处理的最后，用PBS漂洗细胞，然后用BioWhittaker的AdipoRed对胞内脂质进行染色。用带有spectramax reader的光学显微镜观察染色细胞。
结果用相对于对照的增加％表示。
分化细胞的测试 在分化培养基上培养4天后，脂肪细胞的胞内脂质水平相对于生长培养基增加到1.5倍。TNFa如预想一样降低了脂质水平。
丝状透明颤菌提取物诱导了前脂肪细胞脂质水平依赖于剂量的显著增加。
未分化细胞进行的相同试验也诱导前脂肪细胞脂质水平的显著增加，分别是0.25％浓度的细菌提取物相对于对照为564％，0.05％浓度的细菌提取物相对于对照为196％。
监测细胞大小/大小分布，通过流式细胞术和荧光标记(AdipoRedTM) 处理的最后，用PBS漂洗细胞，然后用BioWhittaker的AdipoRed对胞内脂质进行染色。
培养的最后，对细胞进行漂洗、胰蛋白酶作用然后用流式细胞仪分析。前脂肪细胞的分化在形态学水平上显示其胞浆内脂质小泡数量的增加和细胞尺寸的增加。
结果用相对于对照的增加％表示。
分化细胞的AdipoRed测试 该测试得到的结果确认了Speetramax reader测量得到的上述结果。
非分化细胞进行的相同试验也诱导前脂肪细胞脂质水平的显著增加，分别是0.25％浓度的细菌提取物相对于对照为131％，0.05％浓度的细菌提取物相对于对照为124％。
所有的试验显示了非结实非光合丝状细菌的提取物能影响脂肪形成和前脂肪细胞到脂肪细胞的分化。这种效果用在本发明的组合物从而阻止或减少年龄相关的脸部凹陷，特别是面颊和眼部轮廓。
实施例3配方 1)抗脸部和颈部凹陷护理霜 实施例1的丝状透明颤菌提取物 0.05％ 在60/40的水/1，2-丙二醇混合物中30％ 重量活性物质(AM)的C-β-D-木吡喃 糖苷-2-羟基-丙烷 1.0％，作为AM 1，3，5三甲氧基苯(间苯三酚) 0.01％ 反式肉桂酸 0.01％ 大豆蛋白质提取物(SILAB的Ridulisse) 0.5％ 油 12％ 硬脂醇 1.1％ 表面活性剂 9.0％ 乳化剂 8.0％ 防腐剂 0.75％ 香料 0.4％ 水 适量至(qs)100％ 抗脸部和颈部凹陷护理霜每日施用于脸部和颈部的皮肤，特别是面颊和颈部从而避免面颊和颈部皮肤的凹陷和/或松弛。
2)眼部轮廓的护理 咖啡因 0.2％ 实施例1的丝状透明颤菌提取物 0.1％ 1，3，5-三甲氧基苯 0.015％ 反式肉桂酸 0.015％ 大豆蛋白质提取物 1.0％ 二氧化硅 5.0％ 油 4.0％ 脂肪醇 3.0％ 硬脂酸 3.0％ 甘油 7.0％ 环六硅氧烷(Cyclohexasiloxane)6.0％ 表面活性剂 3.0％ 凝胶试剂 1.5％ 防腐剂 0.9％ 水 适量至100％ 眼部轮廓的护理产品每日用于眼部轮廓从而避免眼部轮廓的凹陷。
3)皮肤护理霜(O/W乳剂) 甘油 5％ EDTA二钠0.05％ 表面活性剂 4.0％ 防腐剂 0.85％ 辛酰基二醇 0.5％ 硬脂醇 1.1％ 硬脂酸 3.3％ 蜂蜡1％ 油 21％ 实施例1的丝状透明颤菌提取物 0.025％ 大豆蛋白质提取物(SILAB的Ridulisse)0.03％ 玉米淀粉3％ 羟丙基四氢吡喃三醇(Hydroxypropyl tetrahydropyrantriol) 0.35％ 香料0.4％ 丙烯酰胺/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物/ 异十六烷/聚山梨酯80(Simulgel 600) 1.26％ 水 适量至100％ 这种护理霜是如下所述的临床化妆检测的对象 方案 受试者数目38 选择标准65岁以下(平均年龄58岁)至少绝经3年的女性，至少6个月未接受HRT(激素替代治疗)，所有类型的肤质，脸部有紧致(firmness)问题。
治疗时间4周-每天两次 评估方法条纹投射 实验设计随机 结果 在实验条件下，条纹投射(或FOIST法)的测量证实颊骨体积显著增加。
权利要求
1.一种化妆方法，用于减少脸部和/或颈部皮肤脂结构的熔化，和/或用于避免脸部体积松弛和/或凹陷，通过向脸部和/或颈部皮肤施加在生理上可接受的介质中含有非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物的组合物。
2.根据权利要求1的化妆方法，其特征在于其用于增加颊骨体积。
3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于组合物被施加于面颊、眼部轮廓和/或脸部轮廓。
4.根据以上任意一项权利要求的化妆方法，其特征在于其用于重塑脸部和/或颈部，和/或限制具有成熟或甚至非常成熟皮肤的人群的脸部凹陷。
5.根据以上任意一项权利要求的化妆方法，其特征在于其用于重塑脸部和/或颈部，和/或限制绝经期女性的脸部凹陷。
6.根据以上任意一项权利要求的化妆方法，其特征在于非结实非光合丝状细菌提取物选自细胞提取物、所述细胞提取物的上清液或所述细胞提取物的活性级分。
7.根据以上任意一项权利要求的化妆方法，其特征在于非结实非光合丝状细菌提取物是丝状透明颤菌提取物。
8.根据以上任意一项权利要求的方法，其特征在于非结实非光合丝状细菌提取物在组合物中的含量范围相对于组合物总重量为0.001％-10％重量的细菌干提取物，优选相对于组合物总重量为0.005％-2％重量的细菌干提取物。
9.根据以上任意一项权利要求的方法，其特征在于组合物另外包含至少一种选自以下的额外试剂促进皮肤和/或表皮大分子合成的试剂，刺激角质化细胞增殖的试剂，促进表皮脂质合成的试剂，刺激细胞新陈代谢的试剂和促进微循环的试剂。
10.根据权利要求9的方法，其特征在于组合物包括(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物和(ii)增加葡萄糖胺聚糖合成的至少一种试剂，其作为促进皮肤和/或表皮大分子合成的试剂。
11.根据权利要求10的方法，其特征在于组合物另外包含由增加胶原质合成的试剂，其作为促进皮肤和/或表皮大分子合成的试剂，增加表皮脂质合成的试剂和促进角质化细胞增殖的试剂组成的三种活性试剂的组合。
12.根据权利要求11的方法，其特征在于组合物另外包含至少一种刺激细胞新陈代谢的试剂和/或至少一种促进微循环的试剂。
13.根据权利要求10-12任意一项的方法，其特征在于
-非结实非光合丝状细菌的提取物是丝状透明颤菌的提取物；
-增加葡萄糖胺聚糖合成的试剂是C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基丙烷或它的盐或光学和几何异构体之一；
-促进胶原质合成的试剂是水解大豆蛋白质；
-促进表皮大分子合成的试剂是欧洲山毛榉芽提取物；
-增加角质化细胞增殖的试剂是间苯三酚或其衍生物之一；
-促进表皮脂质合成的试剂是肉桂酸或其衍生物之一；
-刺激细胞新陈代谢的试剂是啤酒酵母提取物；
-促进皮肤微循环的试剂是咖啡因。
14.根据以上任意一项权利要求的方法，其特征在于组合物另外包含至少一种UVA和/或UVB遮蔽剂。
15.能用于根据以上任意一项权利要求的方法中的化妆组合物，在生理上可接受的介质中，包括(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物，(ii)至少一种C-糖苷衍生物。
16.根据以上权利要求的组合物，其中C-糖苷衍生物对应于下列通式(I)
其中
-R代表
-饱和的C1-C20，特别是C1-C10，或者不饱和的C2-C20，特别是C2-C10，的线性烷基，或者是饱和或不饱和的C3-C20，特别是C3-C10，的支链或环状烷基；
-饱和的C1-C20，特别是C1-C10，或者不饱和的C2-C20，特别是C2-C10，的线性，或饱和或不饱和的C3-C20，特别是C3-C10，支链或环状，的氢氟-或全氟烷基；
对于组成所述基团的烃链，可以视需要被1、2、3或更多的选自以下的杂原子中断
-氧，
-硫，
-氮，和
-硅，
并且可任选由选自以下的至少一种基团取代
--OR4，
--SR4，
--NR4R5，
--COOR4，
--CONHR4，
--CN，
-卤素原子，
-C1-C6氢氟-或全氟烷基
-C3-C8环烷基，和/或
R4和R5可以相互独立地代表氢原子，或饱和的C1-C30，特别是C1-C12，或者不饱和的C2-C30，特别是C2-C12，线性，或饱和或不饱和的C3-C30，特别是C3-C12，支链或环状的烷基，全氟烷基或氢氟烷基；或C6-C10芳基，
-X代表选自下列的基团
R1，R2和R3相互独立地代表氢原子或R基，R如上定义，R’1代表氢原子、-OH基团或如上定义的R基，R1也可以表示C6-C10芳基，
-S代表单糖或含有至多20个糖单元，特别是至多6个糖单元的多糖，以吡喃糖和/或呋喃糖形式和L和/或D型，所述的单-或多糖可以被必须是处于游离状态的羟基基团和任选被保护的任选的一个或多个胺官能团取代，和
-S-CH2-X键代表C-异头物性质的键，其可以是α或β，
和它们在化妆品上可接受的盐，它们的溶剂合物如水合物及其异构体。
17.根据以上权利要求的组合物，其中S代表选自D-葡萄糖、D-木糖、L-岩藻糖、D-半乳糖、D-麦芽糖和特别是D-木糖的单糖。
18.根据以上权利要求的组合物，其中X代表选自-CO-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-的基团，且优选代表基团-CH(OH)-。
19.根据以上权利要求的组合物，其中R表示线性C1-C4，特别是C1-C3基团，任选地用-OH、-COOH或-COOR”2取代，R”2是饱和C1-C4烷基，特别是乙基。
20.根据权利要求15-19任意一项的组合物，其特征在于C-糖苷衍生物选自C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基丙烷和C-α-D-木吡喃糖苷-2-羟基丙烷，更特别是C-β-D-木吡喃糖苷-2-羟基丙烷。
21.可用于根据权利要求1-14任意一项的方法中的化妆组合物，其在生理上可接受的介质中，包括(i)非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物和(ii)至少一种促进葡萄糖胺聚糖合成的试剂和(iii)由增加胶原质合成的试剂、增加表皮脂质合成的试剂和促进角质化细胞增殖的试剂组成的三种活性试剂的至少一种组合。
22.根据权利要求15-21之一的组合物，其特征在于所述试剂如权利要求13限定。
23.非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物在组合物中的化妆用途，所述组合物用于减少皮肤密度损失和/或皮肤脂结构的熔化，和/或避免脸部体积松弛和/或凹陷。
全文摘要
本发明涉及一种重塑脸部和/或限制脸部与年龄相关的凹陷的化妆方法，将一种组合物施加到脸部和/或颈部的皮肤上，该组合物在生理上可接受的介质中，包含非结实非光合丝状细菌的至少一种提取物。特别地，该细菌提取物为丝状透明颤菌提取物。
文档编号A61Q1/00GK101099721SQ200710127329
公开日2008年1月9日 申请日期2007年7月2日 优先权日2006年7月3日
发明者P·佩勒蒂尔, C·马里昂 申请人:莱雅公司