专利名称：一种降解偏二甲肼的微杆菌m18及其降解偏二甲肼的方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种降解偏二甲胼的微杆菌M18及其降解偏二甲胼的方法。
背景技术：
偏二甲胼，英文名为Unsymmetrical Dimethylhydrazine，简称 UDMH，分子式为 (CH3)2NNH2，偏二甲胼分子量为60. 11，沸点为63°C，凝固点为-57. 2°C，密度为0. 791g/cm3, 具有良好的亲水性，可与水混溶，能和汽油、酒精以及其它有机溶剂混合使用。偏二甲胼是一种易燃、易挥发、具有强烈刺激性鱼腥臭味的无色或微黄色透明液体。它热值高、燃烧性能好，是一种性能优异的火箭推进剂。我国长征系列火箭就是以偏二甲胼为主体燃料的。偏二甲胼在我国导弹、卫星和神州系列飞船和嫦娥计划等航天器的发射实验中，发挥着重要的作用。偏二甲胼属于高毒物质，易通过吸入、接触和误食等引起中毒。同时，它是一种致癌物质，能够诱导机体产生肿瘤。长期接触低浓度偏二甲胼，尤其是直接进行生产、贮运、转注等相关工作的人员，随工作年限增长，会出现不同程度的注意力不集中、记忆力减退、食欲不振、肝功能异常等症状。在火箭发射过程中，产生大量偏二甲胼废水。偏二甲胼废水的来源主要有以下两种途径，一是偏二甲胼贮罐、运输车辆、管道的冲洗和管道的跑、冒、滴、漏；二是在发射火箭或导弹后，对四氧化二氮和偏二甲胼的燃烧产物进行消防冷却后的废水，以及试车过程中未燃烧的偏二甲胼随消防水进入导流槽而产生的偏二甲胼废水；三是突发事故中偏二甲胼发生泄漏时的洗消废水等。废水中的偏二甲胼本身存在一定的降解，但是降解速度缓慢。随着我国军事和民用航天事业的快速发展，大量的偏二甲胼投入使用，由此产生的废水废气治理及其他环境问题引起了人们的极大关注。目前对偏二甲胼废水的处理方法包括物理方法、化学方法、生物方法和一些新型的处理技术。这些偏二甲胼的处理方法存在能耗高、运行成本高、安全系数低、技术不成熟等问题。近年来的研究表明微生物降解偏二甲胼是可行的，关键是筛选和培养具有高效降解性能的微生物。
发明内容
为解决上述中存在的问题与缺陷，本发明提供了一种降解偏二甲胼的微杆菌M18 ； 并提供一种利用微杆菌M18降解偏二甲胼的方法。—种降解偏二甲胼的微杆菌M18，该微杆菌M18作为降解偏二甲胼的菌种，所述微杆菌M18的保藏编号为CGMCC No. 5187。上述微杆菌(MicrcAacterium)M18，已于2011年8月30日保藏于中国微生物菌种保藏管委理员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏单位地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No. 5187。采用微杆菌M18降解偏二甲胼的方法包括
将微杆菌M18的菌种接种于由胰蛋白胨、麦芽浸出膏、细菌蛋白胨、琼脂构成的斜面培养基，得到斜面培养物；将所述斜面培养物接种于装置有由胰蛋白胨、麦芽浸出膏、细菌蛋白胨构成的种子培养基的容器中，得到种子液；将所述种子液接种至装置有由蔗糖、NaCl, K2HPO4, KH2PO4, MgSO4, CaCl2, FeSO4, H3B03、ZnSO4及偏二甲胼构成的底物溶液的容器中培养，并在转速为100 200r/min，降解温度为28 37°C下降解72小时。本发明提供的技术方案的有益效果是对偏二甲胼的降解率高达88. 06%。
具体实施例方式为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明实施方式作进一步地详细描述实施例1本实施例提供了一种利用微杆菌M18降解偏二甲胼的方法，包括种子培养将所述微杆菌M18的菌种接种于斜面培养基，在M 37°C下培养12 30小时，得到斜面培养物。上述斜面培养基组成胰蛋白胨1 15g/L、麦芽浸出膏1 15g/ L、细菌蛋白胨1 15g/L和琼脂15g/L。取生长良好的斜面培养物接种至装有50 IOOmL种子培养基的250mL三角瓶中。 在摇瓶转速为150 200r/min、培养温度28 37°C的条件下，培养12 30小时，得到种子培养液。上述种子培养基组成胰蛋白胨1 15g/L、麦芽浸出膏1 15g/L和细菌蛋白胨 1 15g/L。降解偏二甲胼将15. 78mL种子液接种至装有300mL底物溶液的IOOOmL三角瓶中，并搅拌转速为140r/min，降解温度为观 37°C下降解72小时。上述底物溶液组成 蔗糖 0. 1 10g/L、NaCl 0. 5 10g/L、K2HPO4 0. 1 10g/L、KH2PO4 0. 1 10g/L、MgSO4 0. 1 5g/L、CaCl2 0. 001 0. lg/L,FeSO4 0. 001 0. 01g/L,H3BO3 0. 01 0. lmg/L,ZnSO4 0. 02 2mg/L 和偏二甲胼 10 300mg/L。上述斜面培养基、种子培养基及底物溶液的pH值为6 8。实施例2种子培养将所述微杆菌M18的菌种接种于由胰蛋白胨，麦芽浸出膏，细菌蛋白胨，琼脂构成的斜面培养基，在27°C下培养M小时，得到斜面培养物；上述斜面培养基组成胰蛋白胨3g/L、麦芽浸出膏3g/L、细菌蛋白胨5g/L和琼脂15g/L。取生长良好的斜面培养物接种至装有IlOmL种子培养基的250mL三角瓶中，在摇瓶转速为200r/min、培养温度30°C的条件下，培养18小时；上述种子培养基的组成胰蛋白胨3g/L、麦芽浸出膏3g/L和细菌蛋白胨5g/L。降解偏二甲胼将15. 78mL种子液接种至装有300mL底物溶液的IOOOmL三角瓶中，并搅拌转速为140r/min，降解温度为36°C下降解72小时；上述底物溶液的组成蔗糖 lg/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 lg/L、KH2PO4 lg/L、MgSO4 0. 2g/L、CaCl2 0. 01g/L、FeSO4 0. 005g/ L、H3BO3 0. lmg/L、ZnSO4 0. 2mg/L及偏二甲胼50mg/L。该实施例在底物降解完成后，利用
4GB/T14376对偏二甲胼的浓度进行检测，检测结果如表1所示表 1
权利要求
1.一种降解偏二甲胼的微杆菌M18，其特征在于，该微杆菌M18作为降解偏二甲胼的菌种，所述微杆菌M18的保藏编号为CGMCC No. 5187。
2.一种利用权利要求1降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述方法包括将微杆菌M18的菌种接种于由胰蛋白胨、麦芽浸出膏、细菌蛋白胨、琼脂构成的斜面培养基，经培养得到斜面培养物；将所述斜面培养物接种于装置有由胰蛋白胨、麦芽浸出膏、细菌蛋白胨构成的种子培养基的容器中，经培养得到种子液；将所述种子液接种至装置有由蔗糖、NaCl、K2HPO4, KH2PO4, MgSO4, CaCl2, FeSO4, Η3Β03、 ZnSO4及偏二甲胼构成的底物溶液的容器中培养，并在转速为100 200r/min，降解温度为 28 37°C下降解72小时。
3.根据权利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述接种于斜面培养基的微杆菌M18在温度为M 37°C下培养12 30小时。
4.根据权利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述斜面培养物接种至装有50 IOOmL种子培养基的容器中，并在转速为150 200r/min、培养温度为28 37°C 的条件下培养12 30小时。
5.根据权利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述种子培养液接种至装有50 500mL底物溶液的容器中培养，且接种的种子液体积为加入种子培养液和底物溶液混合后总体积的3% 10%。
6.根据权利要求2所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述斜面培养基中组分含量为胰蛋白胨1 15g/L、麦芽浸出膏1 15g/L、细菌蛋白胨1 15g/L及琼脂15g/L ；所述种子培养基中组分含量为胰蛋白胨1 15g/L、麦芽浸出膏1 15g/L及细菌蛋白胨1 15g/L ；所述底物溶液中组分含量为蔗糖0. 1 10g/L、NaCl 0. 5 10g/L、K2HP04 0. 1 IOg/ L、KH2P04 0. 1 10g/L,MgSO4 0. 1 5g/L、CaCl2 0. 001 0. lg/L,FeSO4 0. 001 0. Olg/ L、H3BO3 0. 01 0. lmg/L、ZnSO4 0. 02 2mg/L 及偏二甲胼 10 300mg/L。
7.根据权利要求2或6所述的降解偏二甲胼的方法，其特征在于，所述斜面培养基、种子培养基及底物溶液的PH值为6 8。
全文摘要
本发明公开了一种降解偏二甲肼的微杆菌M18，并提供了一种利用微杆菌M18降解偏二甲肼的方法。所述方法包括将微杆菌M18的菌种接种于由胰蛋白胨、麦芽浸出膏、细菌蛋白胨、琼脂构成的斜面培养基，经培养得到斜面培养物；将所述斜面培养物接种于装置有由胰蛋白胨、麦芽浸出膏、细菌蛋白胨构成的种子培养基的容器中，经培养得到种子液；将所述种子液接种至装置有由蔗糖、NaCl、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、CaCl2、FeSO4、H3BO3、ZnSO4及偏二甲肼构成的底物溶液的容器中培养，并在转速为100～200r/min，降解温度为28～37℃下降解72小时。本发明对偏二甲肼的降解率高达88.06％。
文档编号A62D101/26GK102367426SQ201110322108
公开日2012年3月7日 申请日期2011年10月21日 优先权日2011年10月21日
发明者丛继信, 夏本立, 彭清涛, 曹巧玲, 曹晔, 王力, 范春华 申请人:中国人民解放军总装备部后勤部防疫大队