专利名称：一种用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液的制作方法
技术领域：
本发明涉及尿液化学分析检验技术中对尿液化学分析系统进行质量控制的质控液，具体涉及一种用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液。
背景技术：
在现有尿液(干化学)分析检验中，临床上都用质控液对尿液化学分析系统的工作质量状态进行质量控制，一般将检测结果分为NOiormal，阴性)，士(可疑态)，+1 (阳性)，+2(阳性)，+3(阳性)，+4(阳性)，+5(阳性)等。已有的质控液，分为阴性质控液 (含超低浓度的质控物或不含相应的质控物)、高阳性质控液或者高浓度质控液(含较高浓度的质控物)，阴性质控液是低于检测系统的检出限的状态，而高阳性质控液则处在检测范围的上端，这两者质控液组成一低一高两个质控浓度。在病变之初，尿液中与病理相关的各物质的变化是细微的，这一细微的变化，在尿常规检验中体现为各个监测检出物呈现出由无到有的变化，并以阴性向微弱的阳性显示。而现有的高阳性质控液对中低阳性浓度(具体指士(可疑态)和阳性等级为+1和+2的前两个浓度范围)检测的灵敏度不够高，检测结果不够准确。目前，市场上还没有由多个组分组成的中低浓度的质控液，较为常见的是阴性质控液、高阳性质控液或者高浓度质控液中的一个或两个组分为低浓度的质控物。如国家知识产权局2002年1月2日公开的公开号为CN 13^250A的中国发明专利，公开了一种尿液分析质控液及其配制方法，所述质控液由阴性质控液和阳性质控液组成，其中阳质控液中主要含有=PH为6. 0-7. 0的0. 2M磷酸钠缓冲液1000ml、2，4- 二甲基吡口各-3,5- 二羧酸钠50-1000mg、l-萘胺盐酸盐10-100mg、无水葡萄糖0. 99-1. 98g、酯酶20mg、血红蛋白 22-30mg、人血清白蛋白l_3g、直接胆红素120mg、亚硝酸钠31_50mg、乙酰乙酸镁1. 8mg。 该质控液可对酸碱度(PH)、白蛋白(PRO)、葡萄糖(GLU)、隐血(BLD)、酮体(KET)、尿比重 (SG)、胆红素(BIL)、尿胆原(URO)、亚硝酸盐(NIT)、白细胞(WBC) 10个项目进行质控。但上述质控液的稳定性不够好，其中的乙酰乙酸镁不稳定，在酯酶的作用下容易降解消耗；酯酶、白蛋白、血红蛋白等容易受到亚硝酸盐等化学物质的毒害而失活；直接胆红素在碱性溶解较好，但易受到光照等影响而变化，影响质控效果。阳性质控液在各个质控组分低值的情况下，稳定性较差，尤其是血红蛋白、人血清白蛋白、乙酰乙酸镁较为突出。此外，上述质控液选用的质控物来源不广，价格昂贵，具有较高的生物污染风险，如发明中人血清白蛋白和人血红细胞，来源于人体；乙酰乙酸镁由于制备困难，价格较为昂贵。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种灵敏度高、稳定性好的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液。本发明所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，它包括PH值为4. 5 8. 5的缓冲溶液，20 200mmol/L ；
表面活性剂，20 200mmol/L ；糖类保护剂，20 200mmol/L ；蛋白类保护剂，20 200mmol/L ；无水葡萄糖，300 990mg/L ；牛血清白蛋白，100 1000mg/L ；牛血红蛋白，0. 6 5mg/L ；酯酶，2 20mg/L;丙酮或乙酰乙酸锂或乙基乙酰乙酸钠或乙酰乙酸乙酯，50 900mg/L ；直接胆红素或萘胺盐，3 40mg/L。上述配方中缓冲溶液可为柠檬酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸-tris、蛋氨酸类-胺类缓冲液或GOOD ‘S生物缓冲液；其中，GOOD ‘S生物缓冲液可选自PIPES、M0PS0、MOPS、BES和 HEPES缓冲液中的一种或任意两种以上的组合。优选选用硼酸盐缓冲液、甘氨酸-tris或蛋氨酸类-胺类缓冲液，浓度为40 150mmol/L之间，PH为5. 7 7. 3 ；更为优选的，选用蛋氨酸类-胺类缓冲液，浓度为90 150mol/L，PH为5. 8 6. 8。所述的表面活性剂为吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-80、聚氧乙烯月桂醚 (Brij35)或曲拉通X-100。优选选用吐温-20、吐温-40或Brij35，浓度为25 120mmol/ L0更为优选的，选用Brij35，浓度为60 90mmol/L。所述的糖类保护剂为蔗糖、乳糖或海藻糖。优选为海藻糖或乳糖，浓度为50 130mmol/L ；更为优选的，选用乳糖，浓度为80 110mmol/L。所述的蛋白类保护剂为聚乙烯基吡咯烷酮(分子式为(C6H9N0)n，可以是K30或 K90)、明胶或球蛋白。优选选用K30或明胶，浓度为40 160mmol/L;更为优选的是明胶， 浓度为80 120mmol/L。所述的萘胺盐为盐酸萘乙二胺或1-萘胺盐酸盐。根据质控的项目，本发明所述阳性质控液还可进一步包括吡咯或2，4- 二甲基吡咯或2，5- 二甲基吡咯，5 80mg/L ；或者是包括吲哚类衍生物，30 1000mg/L ；所述的吲哚类衍生物选自2，3_苯并吲哚、4-羟基吲哚、5-羟基吲哚、1-甲基吲哚、2-甲基吲哚、3-甲基吲哚、4-甲基吲哚、5-甲基吲哚、6-甲基吲哚、7-甲基吲哚、1，2_ 二甲基吲哚、2，3_ 二甲基吲哚、5-氨基-2-甲基吲哚和1-甲基-6-羟甲基吲哚中的一种。在上述基础上，本发明阳性质控液还可包括亚硝酸盐，2 20mg/L ；和/或肌酐，300 2000mg/L ；和 / 或抗坏血酸，50 700mg/L ；和/或尿钙，200 2000mg/L。与现有技术相比，本发明的优点在于1、通过加入特定浓度范围的保护剂，有效减少各组分之间的相互干扰、降低个别组分受光照等条件约束造成的对质控效果的影响，使得各组分能共存并且稳定性好，灵敏度尚。
2、各组分毒性、生物风险性较小，而且来源广泛，生产成本低。3、在阴性和阳性的基础上对中低浓度阳性的质量控制范围进行细化，对尿液质控体系进行了有效的补充，另一方面控制弱阳性的检出质量，更加符合和贴近临床结果的情况，为医生对患者病情的观察、诊断提供更为准确可信的依据。以下通过试验说明本发明所述质控液的灵敏度一、材料1、质控液1)本发明所述的中低浓度的阳性质控液(以下简称中低浓度质控液)，由本申请人生产，批号为080085，有效期090715。2)某品牌市售的尿阳性质控液(该质控液为高值阳性质控液，以下简称市售质控液)，批号为61271，有效期20090731。2、主要器材四种不同的尿液分析系统(含两个批号的配套试纸条)。其中，尿液分析系统1 西门子公司Clinitek-500型尿液分析仪(编号6470-1008405) 及Bayer Multistix IOSG尿十项试纸(试纸1 批号8B23D ；试纸2 批号8B31D)；尿液分析系统2 德国罗氏公司toisys 1800型尿液分析仪(编号8003086)及罗氏宝灵曼Junior尿十项试纸条(试纸1 批号30975021 ；试纸2 批号309750 )；尿液分析系统3 爱科来医疗电子上海有限公司PU-4010尿液分析仪(编号40810217)及爱科来ARKRAY IOEA尿试纸条(试纸1 批号0EA8G90 ；试纸2 批号 0EA8G93)；尿液分析系统4 桂林优利特医疗电子有限公司toiteSt-500B型尿液分析仪(编号50B01132)及 Uritest IlG 尿试纸条(试纸 1 批号 G1309045 ；试纸 2 批号 G1309051)3、临床样本取自桂林医学院附属医院检验科的临床样本。取样后2小时内进行测试。二、实验及方法1、分析系统测试环境温度对质控结果及临床结果的对应性研究(临床样本为90 个)采用尿液分析系统1进行测试。首先调节测试环境温度为10士2摄氏度，将仪器、 试剂及临床尿样置于调节好温度的环境中稳定30分钟，在测试临床尿样之前用市售质控液和中低浓度质控液进行五次质控测试，记录质控结果后再进行临床尿样的测试；再分别将测试环境温度调节为25士2摄氏度和35士2摄氏度，在不同的温度下重复进行试验。最后，收集、整理数据，比较质控液测试及临床尿样的结果随温度变化的情况是不是具有相关性。在所有的测试之前，用厂家配套的校准灰条对仪器进行检测通过后再进行质控液和临床样本的测试。2、分析系统灵敏度变化的监测及临床对应性研究(临床样本为100个)在测试环境温度为25士3°C条件下，将仪器、试剂及临床尿样置于调节好温度的环境中稳定30分钟。在测试临床尿样之前用市售质控液和中低浓度质控液进行三次质控测试，记录质控结果后再进行临床尿样的测试。最后，收集、整理数据，比较质控液测试及临床尿样的结果随温度变化的情况是不是具有相关性。在所有的测试之前，用厂家配套的校准灰条对仪器进行检测通过后再进行质控液和临床样本的测试。三、实验结果1、不同测试环境质控结果与临床结果相关性1)市售质控液测试结果市售质控液在10°C、25°C、35°C三个不同的环境温度下进行质控测试，质控结果都保持一致(如表1所示)，反映不出环境温度对分析系统的影响。表1
权利要求
1.一种用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于它包括 PH值为4. 5 8. 5的缓冲溶液，20 200mmol/L ；表面活性剂，20 200mmol/L ； 糖类保护剂，20 200mmol/L ； 蛋白类保护剂，20 200mmol/L ； 无水葡萄糖，300 990mg/L ； 牛血清白蛋白，100 1000mg/L ； 牛血红蛋白，0. 6 5mg/L ； 酯酶，2 20mg/L;丙酮或乙酰乙酸锂或乙基乙酰乙酸钠或乙酰乙酸乙酯，50 900mg/L ；直接胆红素或萘胺盐，3 40mg/L。
2.根据权利要求1所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于所述的表面活性剂为吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-80、聚氧乙烯月桂醚或曲拉通X-100。
3.根据权利要求1所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于所述的糖类保护剂为蔗糖、乳糖或海藻糖。
4.根据权利要求1所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于所述的蛋白类保护剂为聚乙烯基吡咯烷酮、明胶或球蛋白。
5.根据权利要求1所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于该阳性质控液还包括吡咯或2，4- 二甲基吡咯或2，5- 二甲基吡咯，5 80mg/L。
6.根据权利要求1所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于该阳性质控液还包括吲哚类衍生物，30 1000mg/L。
7.根据权利要求6所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于所述的吲哚类衍生物选自2，3-苯并吲哚、4-羟基吲哚、5-羟基吲哚、1-甲基吲哚、2-甲基吲哚、 3-甲基吲哚、4-甲基吲哚、5-甲基吲哚、6-甲基吲哚、7-甲基吲哚、1，2_ 二甲基吲哚、2， 3-二甲基吲哚、5-氨基-2-甲基吲哚和1-甲基-6-羟甲基吲哚中的一种。
8.根据权利要求5或6所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于 该阳性质控液还包括亚硝酸盐，2 20mg/L ；和/或肌酐，300 2000mg/L ；和/或抗坏血酸，50 700mg/L ；和/或尿钙，200 2000mg/L。
9.根据权利要求1所述的用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，其特征在于该阳性质控液还包括亚硝酸盐，2 20mg/L ；和/或肌酐，300 2000mg/L ；和/或抗坏血酸，50 700mg/L ；和/或尿钙，200 2000mg/L。
全文摘要
本发明公开了一种用于尿液分析的中低浓度的阳性质控液，它包括pH值为4.5～8.5的缓冲溶液，20～200mmol/L；表面活性剂，20～200mmol/L；糖类保护剂，20～200mmol/L；蛋白类保护剂，20～200mmol/L；无水葡萄糖，300～990mg/L；牛血清白蛋白，100～1000mg/L；牛血红蛋白，0.6～5mg/L；酯酶，2～20mg/L；丙酮或乙酰乙酸锂或乙基乙酰乙酸钠或乙酰乙酸乙酯，50～900mg/L；直接胆红素或萘胺盐，3～40mg/L。还可根据需要添加相应项目的质控物。与现有技术相比，本发明所述质控液稳定性好，灵敏度高且各组分毒性较小，来源广泛，生产成本低。
文档编号G01N33/50GK102226805SQ20111009030
公开日2011年10月26日 申请日期2011年4月12日 优先权日2011年4月12日
发明者冼庆勇, 刘云鹏 申请人:桂林优利特医疗电子有限公司