专利名称：新型氨基－取代的二氢嘧啶并[4,5－d]嘧啶酮衍生物、其制备方法及其作为药剂的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型二环-取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮，涉及其制备方法、含有它们的药物及其制备方法以及这些化合物作为药物活性剂的应用。
本领域中已知某些取代的二环氮杂环的蛋白激酶及其酪蛋白激酶抑制活性。WO 01/29042和WO 01/29041中公开了具有p38抑制活性的烷氨基-取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮衍生物。WO 99/61444描述了被芳基和杂芳基胺类、硫化物、亚砜类和砜类取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮类作为依赖细胞周期蛋白的激酶(cdks)和酪氨酸激酶的抑制剂。WO 00/24744中还描述了芳基和杂芳基胺取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮类作为T-细胞酪氨酸激酶p56lck抑制剂。
本发明的衍生物为如下通式的新化合物及其药物上可接受的盐或N-氧化物 其中R1表示氢或全部任选被取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳基烷基；R2表示卤素、氰基、CF3；R3独立为卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任选被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氢、烷基、烷氧基、氰基；且A为如下通式的基团 或 R5为氢、卤素、羟基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-MH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此独立地表示氢、烷基或氧代；R7为氢、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任选被羟基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此独立地表示氢、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任选被氢、羟基、氰基、吡咯烷-1-基、吗啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基团NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′独立为氢、烷基或环烷基；X为氧或S(O)m；
虚线为任选的第二个化学键；n为0、1或2；m为0、1或2；p为0、1或2；条件是当R8和R8’表示氧代基团时，该氧代基团不与S(O)m基团邻接。
本发明的化合物表现出作为蛋白激酶抑制剂、特别是src家族酪氨酸激酶抑制剂的活性且由此可以用于治疗由所述酪氨酸激酶介导的疾病。酪氨酸激酶家族通过使肽和蛋白质的酪氨酸残基磷酸化在调节细胞信号传导和细胞增殖中起重要作用。已知酪氨酸激酶不适宜的活化涉及各种疾病状态，包括炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或肿瘤疾病或骨疾病。
本发明的化合物可以用作预防和治疗如下疾病的活性剂例如移植排斥、炎性肠综合征、类风湿性关节炎、银屑病、再狭窄、变应性哮喘、早老性痴呆、帕金森病、中风、骨质疏松症、癌症和良性增生。
令人意外地发现与本领域中已知的化合物相比，本发明的化合物表现出改善的体内药动学参数和至少相同的对src-酪氨酸激酶的抑制活性且由此可以提供增强的生物利用度。
本发明的目的在于式I的化合物及其药物上可接受的盐及其对映体形式、上述化合物的制备方法、含有它们的药物及其制备方法以及上述化合物在控制或预防疾病、尤其是上述疾病和病症中的应用或在制备相应药物中的应用。
本文所用的术语″烷基″单独时指的是含有1-6个、优选1-4个碳原子的直链或支链烷基，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基、正戊基、正己基及其异构体。
本文所用的术语″烷氧基″指的是直链或支链烃氧基，其中″烷基″部分为如上述所定义的烷基。实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基和正戊氧基和正己氧基及其异构体。
术语″烷氧基烷基″指的是被如上述所定义的烷氧基取代的如上述所定义的烷基，这类基团例如有甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、丙氧基丙基、甲氧基丁基、乙氧基丁基、丙氧基丁基、丁氧基丁基、叔-丁氧基丁基、甲氧基戊基、乙氧基戊基、丙氧基戊基，包括其异构体。
术语″环烷基″指的是含有3-8个、优选3-6个碳原子的饱和单环，即环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。
在术语″烷氧羰基″中，烷氧基具有上述含义。这类基团的实例为甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、异丙氧羰基、正丁氧羰基、2-丁氧羰基、叔丁氧羰基以及正戊氧羰基和正己氧羰基及其异构体。
术语″酰基″和″酰氨基″指的是基团R′-C(O)-和R′-C(O)-NH-，其中R′为如上述所定义的烷基。
本文所用的术语″芳基″表示苯基和萘基，例如1-萘基、2-萘基。
本文所用的术语″芳烷基″表示如上述所定义的、与带有1-3个碳原子的直链亚烷基连接的芳基。这类基团的实例为苄基、1-苯乙基、2-苯乙基以及苯丙基和苯丁基及其异构体。
术语″杂芳基″指的是含有可达3个独立地选自N、O或S的杂原子的6或5元芳环。这类杂芳基的实例为吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、呋喃基、三唑基。
本文所用的术语″杂芳基烷基″表示如上述所定义的与带有1-3个碳的直链亚烷基连接的杂芳基。
除非另有说明，与上述基团相关的术语″任选取代的″指的是未被取代或被如下基团取代一次或几次卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2。
术语″卤素″指的是氟、氯、溴或碘。
本发明的优选实施方案为式I的化合物及其药物上可接受的盐或N-氧化物，其中R1表示氢或全部任选被取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳基烷基；R2表示卤素、氰基、CF3；R3独立地为卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任选被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氢、烷基、烷氧基、氰基；且A为如下通式的基团 或 R5为氢、卤素、羟基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此独立地表示氢、烷基或氧代；R7为氢、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任选被羟基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此独立地表示氢、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任选被氢、氰基、吡咯烷-1-基、吗啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基团NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′独立地为氢、烷基或环烷基；X为氧或S(O)m；虚线为任选的第二个化学键；
n为0、1或2；m为0、1或2；p为0、1或2；条件是当R8和R8’表示氧代基团时，该氧代基团不与S(O)m基团邻接。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物，其中R2表示溴且n＝0。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物，其中R2和R3彼此独立地表示氟、氯、溴或碘且n＝1。优选式I的化合物，其中R2表示溴且R3表示氟。最优选R3位于苯环的6-位上。还优选式I的化合物，其中R2和R3均表示氯且n＝1。
本发明的另一个实施方案为化合物及其药物上可接受的盐，其中A为如上述所定义的式A-1、A-2、A-3、A-4、A-5或A-6的基团；R1为任选取代的烷基或芳基；R2为卤素或氰基；R3为卤素；n为0或1；R5为氢；且R4为氢或甲基。
这类化合物例如为7-(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮或2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-苄腈。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物，其中A为如上述所定义的基团A-1。尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-1，其中R5为氢；R7如上述所定义；p为0；且R1为烷基；R2为卤素；
R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
这类化合物例如为3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-氰基甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物，其中A为如上述所定义的基团A-2。尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-2，其中R5为氢；X为氧；R8、R8’独立地表示氢；或任选被氢、氰基、吡咯烷-1-基、吗啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基团NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′独立地为氢、烷基或环烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；且R4为氢。
这类化合物例如为3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
3-(2-溴-苯基)-7-(2-环丙氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1 H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
另外优选的是式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-2，其中R5为氢；X为氧；R8为氢；且R8’为被羟基取代的烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；且R4为氢。
这类化合物例如为3-(2-溴-苯基)-7-(2-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；或3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
此外，尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-2，其中R5为氢；X为S(O)m；m为0、1或2；R8、R8′表示氢；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
这类化合物例如为3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为如上所述的基团A-3。尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-3，其中R5为氢；R7为氢或烷基；X为S(O)m；m为0、1或2；
R8、R8’独立地表示氢、氧代或烷氧基，条件是当R8、R8’之一为氧代基团时，虚线不存在，而当R8、R8’为氢或烷氧基时，虚线可以表示形成双键的另一个键；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
这类化合物例如为3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，3-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-甲氧基-4-甲基-1-氧代-1，4-二氢-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为如上所述的基团A-4。尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-4，其中R5为氢；R6、R6′独立地表示氢或氧代；R7为氢；或任选被羟基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
这类化合物例如为5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-异吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮盐酸盐；5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-异吲哚-1，3-二酮；
5-[6-(2-溴-6-氟-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-异吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-[2-(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基]-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮盐酸盐。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为如上所述的基团A-5。尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-5，其中R5为氢；X为氧；R8、R8’彼此独立地表示氢或烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
这类化合物例如为7-(苯并[1，3]二氧代-5-基氨基)-3-(2-溴-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
此外，尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-5，其中R5为氢；X为S(O)m；m为0、1或2；R8、R8’彼此独立地表示氢或烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；
n为0或1；R4为氢。
这类化合物例如为3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氢-3λ*6*-苯并[1，3]氧杂硫羟-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氢-3λ*6*-苯并[1，3]氧杂硫羟-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
本发明的另一个实施方案为式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为如上所述的基团A-6。尤其优选式I的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-6，其中R5为氢；R6、R6′、R7具有上述含义；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
另一个实施方案为式I的化合物3-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-3-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体2；3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；对映体2；
3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1；和2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-3-氟-苄腈。
本发明的另一个实施方案为制备本发明式I的氨基-取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮衍生物的方法。可以通过下列步骤制备所述的化合物(a)使通式(II)的化合物与通式(III)的胺反应， 其中R1-R4和n如上述所定义，任何羟基或氨基可以以被保护的形式存在，且L表示离去基团，诸如例如作为苄基磺酰基、苯基磺酰基、烷磺酰基这类的磺酰基衍生物；例如作为对甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基这类的磺酰氧基衍生物；烷亚磺酰基；或卤素，诸如氯、溴、碘、氟； 其中A如上述所定义；且如果需要，使反应产物上存在的被保护羟基或被保护氨基脱保护；或b)使式(II)的化合物与氨反应或与被保护的胺、诸如苄胺反应且随后裂解下保护基而得到式IV的氨基衍生物
其中所示的符号如上述所定义；然后使该化合物与式V的二环化合物反应 其中L′表示如对L所定义的离去基团，优选卤素，诸如氯、溴、碘或例如作为对甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基这类的磺酰氧基衍生物；且A如上文所定义；可以使用本领域中公知的过渡金属催化剂催化(IV)与(V)的反应；和c)如果需要，用酸将获自a)或b)的式I的碱性化合物转化成药物上可接受的盐或用碱将获自a)或b)的式I的酸性化合物转化成药物上可接受的盐；和d)如果需要，通过与氧化剂如3-氯-过苯甲酸、三氟过乙酸或二甲基二环氧乙烷的氧化反应将式I的化合物转化成N-氧化物。
可以在有或没有溶剂存在下进行方法(a)中式II化合物与式III的胺的反应。当使用溶剂时，它通常可以为卤化脂族烃，例如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷；开链醚，例如乙醚或二异丙醚或二甘醇二甲醚；环醚，例如四氢呋喃(THF)；任选卤化芳香烃，例如苯、甲苯、二甲苯或氯苯；或甲酰胺，例如二甲基甲酰胺(DMF)；或N-甲基吡咯烷酮(NMP)或二甲亚砜(DMSO)；或环丁砜。
该反应适宜在约0℃-约200℃、优选约100℃-约200℃的温度范围内进行。该反应可以在酸、如盐酸(HCl)、甲苯磺酸、三氟乙酸或间氯苯甲酸存在下进行。此外，可以使式III的二环苯胺类作为预先形成的盐参与反应。备选地，该反应可以在碱存在下进行，如碳酸钾、三乙胺、叔丁醇钾、氢化钠、二异丙基酰胺锂(LDA)、丁基锂(buthyl lithium)或六甲基二硅叠氮化锂。当使用强碱时，该反应还可以在-20℃-50℃的低温下进行。
可以任选按照本领域中公知的方法保护存在于式II或III原料上的羟基或氨基或羧酸部分。例如，可以以醚、例如烷基醚或甲硅烷基醚或酯、例如烷基酯的形式保护羟基。就被保护的氨基而言，苯二酰亚氨基是这类基团的实例。例如，被保护的羧酸为酯，例如烷基酯。
可以通过本身公知的方式使经式II化合物与式III的胺反应所得产物上存在的这类被保护基团脱保护。因此，例如，可以通过用氢溴酸处理将诸如烷基醚这类醚转化成羟基；且可以使用碱金属氢化铝、诸如氢化铝锂将诸如烷基酯这类酯转化成羟基。此外，例如，可以通过用肼水合物处理将苯二酰亚氨基转化成氨基。例如，可以通过用碱金属氢氧化物裂解将被保护的羧酸、诸如酯、例如烷基酯转化成游离羧酸基团。
在b)方法中，使式II的化合物与氨或被保护的胺反应而生成式IV的2-氨基-衍生物。可以使用本身公知的方法裂解保护基，诸如4-甲氧基苄基。例如，可以使用三氟乙酸、便利的是在升温、优选在反应混合物的回流温度下进行裂解。
可以按照与WO2001 4425类似的方法、例如通过在碱存在的惰性溶剂中使用Pd-膦复合物催化使式IV的2-氨基衍生物与式V的二环残基偶联，其中所述的Pd-膦复合物如Pd(OAc)2/BINAP、Pd(dba)2/P(叔-Bu)3或Xantphos，所述的碱如Cs2CO3、NaOtert-Bu、NaOPh或K3PO4，所述的惰性溶剂如甲苯或二甲苯或THF或NMP，反应温度为50-180℃。
例如，可以通过两步反应由带有相应羟基-烷基取代基的式I化合物制备其中A为基团A-1、A-2、A-3、A-4、A-5或A-6且基团R7、R8或R8’之一为任选取代的氨基烷基的式I的化合物，所述的两步反应通过在例如有甲苯磺酰氯或亚硫酰氯存在下用卤素或甲苯磺酰氧基取代羟基且随后使氯化物或甲苯磺酸酯与任选取代的氨基如反应方案I中所示进行反应来进行。
方案1 还可以通过在有本领域中公知的催化剂、诸如W-、V-或Mo化合物或其它氧化试剂存在下用3-氯过苯甲酸(MCPBA)、过硫酸氢钾制剂、2-苯基磺酰基-3-苯基氧丙啶、高碘酸钠或H2O2按照标准步骤氧化相应的式I的硫烷基化合物来制备式I的化合物，其中任意A-2、A-3或A-5的基团或其任意的取代基含有氧化形式的硫原子-S(O)-或-S(O)2-。
按照所述方法的步骤c)，式I的碱性化合物可以与无机酸或与有机酸成盐，所述的无机酸例如有氢卤酸，诸如盐酸或氢溴酸；硫酸；硝酸；或磷酸；所述的有机酸例如有甲酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、富马酸、苹果酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、水杨酸、甲磺酸、乙磺酸、4-甲苯磺酸等。式I的酸性化合物可以与碱成盐，例如无机碱，诸如碱金属和碱土金属；或有机碱，诸如胺类。无机碱的实例为用作阳离子的金属，如钠、钾、镁、钙等。合适的胺类的实例为乙二胺，2-羟乙胺、二(2-羟乙基)胺、乙胺等。可以按照本身公知的方式形成和分离这些盐。优选式I的碱性化合物与酸形成的盐。
已知式II的原料来自WO 00/24744，其中L为烷基-、苯基-或苄基磺酰基。可以如方案2中对L＝甲基磺酰基所述制备它们
方案2 其中R1和R4如上述所定义且Ar为如下残基 其中R2、R3和n如上述所定义。
步骤1使式VI的化合物与胺R1-NH2反应而得到式VII的化合物。该反应便利的是在反应条件下惰性的溶剂中进行，优选卤化脂族烃，尤其是二氯甲烷，任选的卤化芳香烃、开链或环醚、甲酰胺或低级链烷醇。该反应适宜在约-20℃-约120℃下进行。
步骤2步骤2包括还原式VII的化合物而得到式VIII的醇。使用氢化铝锂、按照本身公知的方式进行该还原反应，例如在还原条件下惰性的溶剂中，优选开链或环醚，尤其是四氢呋喃，反应温度约-20℃-约70℃，优选约0℃-约室温。
步骤3将式VIII的醇氧化成式IX的甲醛。使用二氧化锰、按照本身公知的方式、便利的是在氧化条件下惰性的溶剂中进行该氧化反应，所述的溶剂优选卤化烃、尤其是二氯甲烷或任选卤化的芳香烃。该氧化反应适宜在约0℃-约60℃下进行。
步骤3a对通式IX的醛进行亲核加成得到通式VIIIa的取代醇类。可以在0℃-回流温度下使用格利雅试剂、如溴化甲基或乙基锰在惰性溶剂、如乙醚或THF中进行这类加成。可以将其它亲核体、例如三甲代甲硅烷基氰化物或三丁基甲锡烷基氰化物加入到在惰性溶剂、如二氯甲烷或甲苯或THF中的醛中。备选地，可以在乙酸存在下使用氰化钠。这些加成反应可以在-20℃-150℃的温度下进行。
步骤4使式IX的甲醛与式XIII的胺反应而得到式X的亚胺。该反应在酸、例如芳族磺酸、优选4-甲苯磺酸存在下进行，其中通过共沸除去反应过程中形成的水。该反应便利地在反应条件下惰性的溶剂中进行，优选任选卤化的芳香烃，尤其是甲苯，反应温度约为70℃-约150℃，尤其是溶剂的回流温度。
步骤5步骤5包括将式X的亚胺还原成式XI的化合物。使用硼氢化钠、氢化铝锂或三乙酰氧基硼氢化钠、按照本身公知的方式进行这种还原。优选不纯化式X的化合物，而是浓缩制备的反应混合物并将得到的浓缩物吸收在还原条件下惰性的溶剂中，优选开链或环醚，尤其是四氢呋喃或任选的卤化芳香烃或低级链烷醇，且然后用上述还原剂处理。该还原反应适于在约0℃-约100℃、优选约25℃下进行步骤5a备选地，可以通过下列步骤将式VIII或VIIIa的醇转化成式XI的胺首先按照与Okuda，Price在《有机化学杂志》(J.Org.Chem.)24(1959)14中所述类似的方式用亚硫酰氯氯化式VIII或VIIIa的醇并在有如碘化钠这类催化剂存在的惰性溶剂、如乙腈、DMF、THF或NMP中用式XIII的芳族胺取代氯。该取代反应可以在15℃-200℃、优选室温-120℃的温度范围内进行。
步骤5b备选地，按照与步骤3a类似的方式可以对式X的亚胺进行亲核加成而得到式XI的亚胺。与如步骤3a中所述相同的试剂和条件在本文中也是合适的。此外，可以使用更具反应性的亲核体，如甲基-或乙基锂。还可以用过渡金属盐、如Yb(OTf)3或Zr(OtBu)4催化甲硅烷基氰化物或氰化锡试剂对所述亚胺的加成。在具体的变化形式中，可以如Kinko，K.等在《加拿大化学杂志》(Can.J.Chem.)51(1973)333-337中所述在惰性溶剂、如苯或二氯甲烷中用光气环化式X的亚胺而得到R4＝Cl的式XII的中间体。在这类中间体中，可以适于在碱、如碳酸氢钠、碳酸钾、乙基-二异丙胺或氢化钠存在下用低级醇类取代所述的氯而得到R4＝烷氧基的式XII的化合物。
步骤6环化式XI的化合物而得到通式XII的化合物。这种环化通过按照本身公知的方式在叔有机碱存在的溶剂中与光气或氯甲酸三氯甲酯反应来进行，所述的叔有机碱优选三(C1-C6-烷基)胺，尤其是三乙胺，且所述的溶剂在反应条件下是惰性的，优选开链或环醚，尤其是THF，任选卤化的芳香烃或卤化的脂族烃。备选地，可以在较强碱、如氢化钠或叔丁醇钾存在的溶剂、如THF、NMP或DMF中使用光气的等价物，如羰二咪唑。便利的是该反应在约-20℃-约50℃、优选约0℃-约室温下进行。
步骤7用3-氯过苯甲酸氧化式XII的化合物而得到式II-A的原料，即式II的化合物，其中L为烷基-S(O)m。按照本身公知的方式、便利的是在溶剂中进行这种氧化反应，所述的溶剂在氧化条件下是惰性的，优选卤化脂族烃，尤其是二氯甲烷，且反应温度约-20℃-约50℃，优选约0℃-约室温。
可以通过用碱金属氢化物、尤其是氢化钠处理且随后与通式R1a-L″的化合物反应对方案2中的式XII化合物或式II的原料进行N-取代，其中R1表示氢，在通式R1a-L″中，Rla具有上文R1的任意值，但不包括氢、芳基或杂芳基，且L″表示如对L所定义的离去基团，诸如磺酰基衍生物，诸如苄基磺酰基、苯基磺酰基、烷磺酰基；磺酰氧基，诸如对-甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基和烷亚磺酰基；或卤素，诸如氯、溴、碘或氟。L″优选表示碘。
N-取代便利的是在溶剂中进行，所述的溶剂在反应条件下是惰性的，优选甲酰胺，尤其是二甲基甲酰胺、开链或环醚或任选的卤化芳香烃。该反应适宜在约50℃-约200℃、优选在约50℃-约150℃下进行。
当R1包括含氮杂芳基时，该方法可以导致N-氧化物形成。可以通过标准方法、例如通过与三苯膦反应将这种N-氧化物转化成游离N化合物。
式(III)的原料和胺类R1-NH2是已知的或可以通过本领域中公知的标准步骤制备。例如，可以通过用H2/Pd-C、Sn/HCl或NaS2O4还原由相应的硝基化合物或通过霍夫曼或库尔提斯重排由相应的苯甲酸衍生物制备芳族胺类。
式(V)的原料是己知的或可以通过标准步骤制备。例如，如果L为Cl或Br，那么可以通过卤化芳香环引入它。如果L为OSO2CF3，那么可以通过在有碱存在下使相应的苯酚与三氟甲磺酸酐或N，N-双-三氟甲基磺酰基-苯胺反应制备它。
还可以通过用例如NaBH4、LiAlH4、DIBAL或BH3SMe2将羰基部分还原成-CH2-或-CHOH-部分而将在式A-1-A-6的环上含有氧代基团的式III和V的中间体转化成式III和V的化合物。这类还原反应适于在0℃-150℃的温度范围内和醚、THF或二氯甲烷中进行。备选地，还可以用式I的化合物进行这类还原反应。
可以将基团A-1-A-6上的取代基R5-R8引入式III或V的原料或可以选择将它们在随后的反应步骤中加入而得到相应的式I的化合物。例如，可以通过使氨基-或-S(O)m-CH2部分与亲电子试剂在碱存在下反应而引入所述的取代基。合适的亲电子试剂为C1-C6-烷基卤，例如MeI；醛类和酮类，例如甲醛或丙酮；环氧化物，例如环氧乙烷；或酰化试剂，例如乙酐等。合适的碱可以为氢化钠、叔丁醇钾、丁基锂、三乙胺、吡啶、碳酸钾等。可以通过标准步骤将式III或IV的中间体中基团A-1-A-6上的羟基烷基残基转化成离去基团，例如氯烷基或甲苯磺酰氧基-烷基部分，且随后被氰化物、胺类、醇类或硫醇类取代。这些取代反应适于在碱存在的溶剂中反应，所述的碱如烷醇钠、乙基-二异丙胺、碳酸钾或氢化钠，所述的溶剂如THF、DMF、NMP、DMSO或乙醇，反应温度范围为0℃-180℃。
在含有未氧化形式的硫原子的式III或IV的中间体和式I的化合物中，可以用标准试剂在V或W或Ru催化剂存在下将这些硫原子氧化成亚磺酰基和磺酰基部分，所述的标准试剂例如有3-氯过苯甲酸、三氟过乙酸、过硫酸氢钾制剂、高碘酸钠、二甲基环氧乙烷或过氧化氢。
本发明的另一个实施方案为通式A-1-I的化合物
其中R5、R6、R7和p具有上述含义；且X为NO2或任选被保护的NH2基团。
本发明的另一个实施方案为通式A-1-I的化合物作为制备通式I化合物的中间体的应用。通过使用本领域技术人员众所周知的适宜保护基可以使所述的NH2基团任选以被保护形式存在。
通式I的化合物可以含有一个或几个手性中心且随后可以以外消旋或旋光形式存在。可以按照公知的方法将外消旋物分离成对映体。例如，通过与旋光酸反应可以由外消旋混合物形成可以通过结晶分离的非对映体盐，所述的旋光酸例如有D-或L-酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或樟脑磺酸。另一方面，还可以通过使用商购的手性HPLC-相进行的色谱法分离对映体。当使用手性相Chiracel OD-CSP(来自Daicel的20μm商品材料；洗脱剂庚烷/异丙醇1∶1)分离外消旋物时，本文所用的术语″对映体1″和″对映体2″分别表示第一次和第二次洗脱的对映体。因此，该术语用于原料或中间体以及从相应的原料或中间体得到的终产物。
本发明的化合物可以以其药物上可接受的盐形式存在。术语″药物上可接受的盐″指的是保持式I化合物的生物有效性和特性且由适宜的非毒性有机酸或无机酸或有机碱或无机碱形成的常用酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐包括例如来源于无机酸和那些来源于有机酸的那些酸加成的盐，所述的无机酸诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；所述的有机酸诸如对-甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等。碱加成的盐包括那些来源于铵、钾、钠的盐和季铵氢氧化物，诸如氢氧化四甲基铵。将药物化合物化学修饰成盐是药物化学工作者众所周知的技术，目的是为使化合物获得改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。例如，Ansel，H.等在《药物剂型和药物传递系统》(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)第6版1995，pp.196和1456-1457中描述了该项技术。
可以将本发明的化合物及其药物上可接受的盐作为药剂使用，例如药物制剂形式。可以通过口服、例如以片剂、包衣片、锭剂、硬胶囊和软胶囊、溶液、乳剂或混悬剂形式给予所述药物制剂。然而，还可以通过直肠、例如以栓剂形式或通过非肠道、例如以注射液形式进行给药。
还可以通过用药物上惰性的无机或有机载体加工本发明的化合物而得到上述药物制剂。例如，可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐等用作片剂、包衣片、锭剂和硬胶囊的载体。用于软明胶胶囊的适宜载体例如植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇类等。然而，随活性物质特性的不同，就软明胶胶囊而言通常不需要载体。用于生产溶液和糖浆剂的适宜载体例如有水、多元醇类、甘油、植物油等。用于栓剂的适宜载体例如有天然或硬化油、蜡、脂肪、半固体或液体多元醇类等。
此外，药物制剂可以含有防腐剂、加溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、增甜剂、着色剂、调味剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧化剂。它们还可以含有其它治疗上有价值的物质。
通过使用下列步骤得到优选的药物制剂1.将4.0g玻璃珠称入定制的4cm GL 25管(珠填充半支管)。
2.加入50mg化合物、用刮刀(spatulum)分散并涡旋。
3.加入2ml明胶溶液(珠∶明胶溶液＝2∶1称重)并涡旋。
4.加盖并用铝箔包封以避光。
5.为研磨物制备平衡重。
6.在Retsch研磨机中以20/s研磨4小时(对某些物质以30/s研磨达24小时)。
7.通过以400g离心2分钟在与接收小瓶连接的过滤储蓄器上用两层滤膜(100μm)从珠上提取混悬剂。
8.将提取物移入量筒。
9.用小体积反复洗涤(本文为1ml步骤)至达到终体积或提取物澄清。
10.用明胶填充至终体积并匀化。
上述描述的制备产生具有1-10μm颗粒大小的式I化合物的微混悬剂。该混悬剂适合于口服应用且用于下述体内药动学测试。
通过使用下列试验证实本发明化合物作为src-家族酪氨酸激酶抑制剂的活性。
SRC-抑制剂-试验参数反应混合物
ATP 5μM肽(Ro+Jal33-Ro) 10μMJal33-Ro 196nMRo9.8μMPT66 230ng/ml试验缓冲液 4mM MgCl22mM TCEP50mM HEPES0，1％Tween 20pH7.3酶 2.5U/ml抑制剂 最大值25μM最小值0.42nM材料Eu-标记的磷酸酪氢酸抗体-Lck Cisbio Mab PT66-K；-Src EG&G Wallac PT66 Eu-W1024(均为商购)。
肽类RoNH2-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2；和Jal33-RoJal33-G-氨基辛酸-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，其中Jal33为LightCycler-Red640-N-羟基琥珀酰亚胺酯；由此通过最优化固相肽合成方案、用Zinsser SMP350肽合成仪合成两种肽类(Merrifield，Fed.Proc.Fed.Amer. Soc.Exp.Biol.21(1962)412)。简单的说，通过反复偶联20倍过量的氨基酸将所述肽固定在160mg(22.8μmol级)Rink-Linker修饰的聚苯乙烯固相上，其中所述的氨基酸随侧链功能的不同而各自被临时的哌啶不稳定的Fmoc-和永久的酸不稳定的叔-Bu-、BOC-和Otert-Bu-基团保护。底物序列AEEEIYGEFEAKKKK在N-末端还固定有间隔基氨基酸、即氨基辛酸和甘氨酸。在裂解N-末端临时保护基后，用1.5倍量的LightCycler-Red 640-N-羟基琥珀酰亚胺酯(购自RocheDiagnostics GmbH)和三乙胺标记仍然连接和被保护的肽。3小时后，用二甲基甲酰胺和异丙醇洗涤树脂，直到蓝色树脂的洗脱液变无色为止。从固相中取出完全被保护和标记的肽并通过用80％三氟乙酸、10％乙二硫醇、5％硫代茴香醚和5％水的混合物处理使其从永久保护基上释放。最终通过制备型反相HPLC纯化分离底物。该纯化步骤得到12.2mg RP-HPLC单峰的纯蓝色物质(冻干物)。通过MALDI质谱证实同一性[2720.0]。
酶Upstate Lck(p56lck，活性)、Upstate Src(p60c-src，部分纯化)购自BI。
时间分辨荧光试验读出器Perkin Elmer，Wallac Viktor 1420-040多标记计数器；液相操作系统Beckman Coulter，Biomek 2000。
ATP、Tween 20、HEPES购自Roche Molecular Biochemicals；MgCl2和MnCl2购自Merck Eurolab；TCEP购自Pierce，384 Well低体积荧光板购自Falcon。
分析描述首先将所述酶在15℃下的含有相应量本发明抑制剂的水溶液中预保温15分钟。然后通过加入含有ATP、肽和PT66的反应混合物且随后进行振摇启动磷酸化反应。立即使用时间分辨荧光光谱法在合适的孔平板读出器上监测反应的进行情况。
可以通过使用非线性曲线拟合(Excelfit)由反应速率得到IC50-值。
试验结果
药动学研究按照下列步骤证实本发明的化合物的改进药动学特性对29-35g体重的雄性NMRI小鼠口服给予作为微混悬剂的30mg/kg剂量的本发明化合物(7.5％修饰的明胶和0.22％NaCl)(药物浓度3mg/mL。给药体积10mL/kg)并作为单剂量给药。
研究方案在给予化合物后达4小时使动物禁食过夜。对每个口服单剂量而言，将小鼠分成3组，每组4只动物。在0.5、3和24小时时从第1组中、在1和6小时时从第2组中且在2和8小时时从第3组中采集血样。
通过眼眶后穿刺得到约200μl血样。通过在室温下离心从肝素化/EDTA血液中得到血浆样品并将其冷冻储存在-20℃下至分析为止。
分析使血浆脱蛋白且随后通过化合物特异性HPLC-MS法分析化合物的血浆浓度。将WinNonlinTM用于计算药动学参数。
结果
通过下列非限制性制备实施例进一步解释本发明，其中使用如下的缩写TCL薄层色谱法HPLC高效液相色谱法MS质谱法TFA三氟乙酸NMPN-甲基吡咯烷酮DMFN，N-二甲基甲酰胺THF四氢呋喃mCPBA间-氯-过苯甲酸LAH氢化铝锂制备实施例原料a)2-羟甲基-6-硝基-1，4-苯并二噁烷用己烷洗涤1.93g 60％氢化钠并悬浮于90ml DMF中。在5℃下和15分钟内滴加5.15g 4-硝基儿茶酚在30ml DMF中的溶液。随后在15分钟内加入在10ml DMF中的5.00g表溴醇(epibromohydrine)。在室温下持续搅拌30分钟、然后在80℃下再搅拌3小时。将该混合物分部分倾入冰水并用二乙醚提取。干燥有机相并蒸发且使残余物从甲苯中重结晶。在室温下将第一批产生的晶体(2.78g)悬浮于20ml MeOH、过滤并蒸发滤液而得到1.65g标题产物。
从甲苯母液中又得到0.5g第二批产量。
b)2-羟甲基-6-氨基-1，4-苯并二噁烷在大气压和室温下用10％Pd-C将在120ml MeOH中的4.2g上述硝基化合物氢化3小时。过滤该混合物并蒸发滤液而得到3.13g标题化合物。
c)1′-乙酰基-5-硝基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]将156g 65％硝酸与40ml乙酸混合，同时冷却。在4-8℃下和50分钟内加入在60m乙酸中的19.8g 1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]。将该混合物在5℃下搅拌1.5小时、然后倾入冰水并用乙酸乙酯提取。用碳酸氢钠水溶液洗涤合并的有机相并蒸发至得到17.5g标题产物。
d)5-氨基-1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]在环境压力和温度下在THF中用Pd-C将上述硝基化合物氢化5小时。过滤并蒸发滤液而得到12.35g标题化合物。
e)5-氨基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]将5g 5-氨基-1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶](来自d))和5.317g氢氧化钾在30ml乙醇和10ml水的混合物中回流18小时。在冷却至室温后，该混合物固化并用20ml水稀释且用CH2Cl2提取3次。干燥合并的有机相并蒸发至得到3.45g标题化合物。
f)5-氨基-1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]将1.134g上述化合物悬浮于30ml THF中并加入0.782g乙基-二异丙胺。在10℃下滴加在3ml THF中的0.764g 2-甲氧基溴乙烷并在室温下持续搅拌3.5小时，然后将该混合物加热至50℃下68小时。加入3ml浓碳酸氢钠水溶液并蒸发THF。再用10ml水稀释残余物并用CH2Cl2提取产物且通过硅胶色谱法纯化(CHCl3/MeOH 95/5)。
产率0.543g标题化合物。
g)6-硝基-2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-4，4-二氧化物在0℃下混合2.554g 66％H2SO4和1.454g 65％硝酸。在0℃下分部分加入2.395g 2，3二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-4，4-二氧化物。在搅拌30分钟后，用水稀释该混合物并通过过滤分离产物。进行硅胶色谱而得到1.6g标题化合物和0.37g 0.58g的8-硝基异构体。
h)6-氨基-2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-4，4-二氧化物在大气氢气压力和室温下在20ml THF和20ml MeOH的混合物中用0.90g 5％Pd-C将0.917g 6-硝基-2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-4，4-二氧化物(来自g))氢化90分钟。过滤出催化剂，蒸发滤液并对残余物进行硅胶色谱而得到370mg标题化合物。
i)6-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮在室温下用0.695g 95％氢化钠分部分处理在50ml DMF中的4.5g 6-氨基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮。30分钟后，在0℃下滴加3.548g甲基碘且再持续搅拌30分钟。将该混合物倾入冰和氯化铵溶液并用CH2Cl2提取。进行硅胶色谱而得到3.1g粗产物，通过与二乙醚一起研磨进一步纯化。
产率3.00g标题化合物。
j)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮将7.3g 7-硝基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮悬浮于65ml DMF中并用1.6g55％氢化钠分部分处理。在室温下持续搅拌0.5小时，然后(than)滴加在15ml DMF中的5.2g甲基碘。再经过3小时后，将该混合物倾入冰水并通过过滤分离标题产物，产率为7.5g。
k)7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮在室温下用10％Pd-C在THF中氢化3.7g上述硝基化合物。过滤和蒸发溶剂而得到3.07g标题产物。
l)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪在室温下用在THF中的67.57ml 2M硼烷二甲硫复合物逐滴处理在10ml THF中的7g 7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮(来自j))。16小时后，将该混合物倾入饱和碳酸氢钠水溶液并用乙酸乙酯提取。蒸发溶剂并将固体残余物与乙醚一起研磨。
产率5.80g标题化合物。
m)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-1，1-二氧化物向在70ml CH2Cl2中的3g 7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪(来自l))中滴加8.62g 60％mCPBA在100ml CH2Cl2中的溶液、用硫酸钠干燥。在室温下搅拌16小时后，用亚硫酸钠和碳酸钠水溶液洗涤该混合物，然后蒸发并进行硅胶色谱。
产率2.55g标题化合物和0.34g相应的亚砜。
n)7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-1，1-二氧化物如实施例k中所述氢化2.4g上述硝基化合物并通过硅胶色谱法纯化。
产率1.15g标题化合物o)7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮-1，1-二氧化物在室温下用5.387g 60％mCPBA在150ml CH2Cl2中的干燥的溶液处理在30ml CH2Cl2中的2g 7-硝基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮(来自j))。搅拌16小时后，用亚硫酸氢钠和碳酸钠水溶液洗涤该混合物、干燥并蒸发。将残余物与乙醚一起研磨。
产率2.18g标题化合物。
p)7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮-1，1-二氧化物在大气压下和70ml THF中用3g 10％Pd-C氢化1.5g上述硝基化合物。2小时后，过滤该混合物并蒸发滤液。将固体残余物与乙醚一起研磨。
产率1.03g标题化合物。
q)2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基胺将2.643g 4-氨基-N-甲基苯邻二甲酰亚胺悬浮于50ml THF中并在室温下加入到在50ml THF中的1.328g氢化铝锂中。将该混合物回流3小时，然后在室温下再搅拌3天。通过加入水处理过量的LAH并将该混合物通过硅藻土过滤。分离水相并用CH2Cl2提取。干燥合并的有机相并蒸发。将残余物与在MeOH中的HCl一起搅拌并蒸发至得到1.6g标题化合物，为盐酸盐。
r)2-(1，1-二甲基-2-羟乙基)-5-硝基-2，3-二氢-1H-异吲哚将20g 4-硝基-邻苯二甲酸酐和8.94g 2-氨基-2-甲基丙醇加热至170℃下30分钟。冷却后，加入水和CH2Cl2并分离有机相、浓缩并通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂CH2Cl2/MeOH 97/3)。
s)2-(1，1-二甲基-2-羟乙基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基胺在室温和大气压下用2.2g Pd/炭(10％)在130ml THF中氢化1.1g上述硝基-化合物。2.5小时后，过滤该混合物并蒸发滤液而得到0.78g标题化合物。
t)1-(4-甲氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-基)-乙醇将1.5g 4-甲氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-醛溶于30ml THF并在低于5℃下滴加14ml溴化甲基镁在乙醚中的1.4M溶液。在0℃下搅拌1小时后，在30分钟内再加入14ml格利雅溶液。在0℃下持续搅拌30分钟且最终在RT下搅拌25小时。用饱和氯化铵溶液使该混合物猝灭并用乙酸乙酯提取。
产率1.57g粗标题产物。
u)[5-(1-氯-乙基)-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基]-甲胺将来自实施例t)的0.25g产物溶于10ml氯仿并滴加0.30g亚硫酰氯。将该混合物回流2小时并蒸发至得到0.31g标题产物，为盐酸盐。
v)5-[1-(2-溴-苯基氨基)-乙基]-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基-甲胺将在10ml中的0.25g来自实施例u)的产物和34mg碘化钠在RT下搅拌15分钟。在RT下将所得混悬剂滴加到0.21g 2-溴苯胺和0.33g N-乙基-二-异丙胺在5ml乙腈中的混合物中。持续搅拌16小时并用20ml水稀释该混合物且用二氯甲烷提取。进行硅胶色谱(洗脱剂CHCl3)而得到158mg标题产物。
w)2-[(4-甲氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-基甲基)-氨基]-苄腈按照与实施例v)类似的方式由1.0g(5-氯甲基-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-甲胺盐酸盐和0.527g 2-氰基-苯胺得到0.4g标题产物。
x)2-羟甲基-7-硝基-1，4-苯并二噁烷在10℃下200ml DMF中搅拌17.6g 4-硝基儿茶酚和11.0g碳酸氢钾。滴加在10ml DMF中的13.99g表溴醇并在60℃下再持续搅拌17小时。蒸发DMF并用50ml水稀释残余物且用乙酸乙酯提取。用苛性钠和水洗涤合并的有机相、干燥并蒸发。将粗油状产物与200ml甲苯一起加热至90℃并从不溶性部分中笔洗上清液。在冷却至RT后，再次从不溶性油状物中笔洗该溶液并保持在RT下3天。得到第一批0.75g晶体标题产物。蒸发母液并在RT下将残余物溶于20二氯甲烷。种晶并冷却至0℃而又得到2.78g晶体标题产物。
y)2-氯甲基-7-硝基-1，4-苯并二噁烷在4ml甲苯中用2.06g亚硫酰氯处理在50ml甲苯中的3.5g来自实施例x)的产物并回流1.5小时。再加入0.5g亚硫酰氯并持续回流7小时。再加入0.5g亚硫酰氯并再持续回流9小时。在冷却至RT后，加入1.6ml吡啶并将该混合物加热至60-70℃下16小时，同时用TLC控制。再加入0.2ml吡啶并再持续加热4小时。最终用水和碳酸钠溶液洗涤该混合物、干燥并蒸发至得到3.05g粗标题产物，不经进一步纯化将其用于随后的反应。
z)4-(7-硝基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-2-基甲基)-吗啉将在2.5ml NMP中的来自实施例x)的0.80g氯甲基化合物、0.61g吗啉和50mg碘化钠加热至100℃下21小时。用10ml水和1ml饱和碳酸钠溶液稀释该混合物并用乙酸乙酯提取。对粗产物进行硅胶色谱而得到0.67mg标题产物。
za)3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-甲基硫烷基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1+2向在10ml干DMF中的1.1g来自实施例v)的产物中加入0.236氢化钠(95％)，同时冷却。在RT下搅拌20分钟后，将该混合物冷却至5℃并用总计1.01g羰二咪唑分小部分处理。在5℃下持续搅拌30分钟并在RT下搅拌过夜。然后通过在冷却环境下加入少量水处理过量的氢化钠。用水稀释该混合物、用乙酸乙酯提取并蒸发合并的有机相。
对粗产物进行手性相Chiracel OD-CSP(来自Daicel的20μm商品材料；洗脱剂庚烷/异丙醇1∶1)色谱而得到各470mg标题产物的两种分离的对映体，为淡黄色粉末。第一次和第二次洗脱的对映体分别称作′对映体1′和′对映体2′。同样，来源于两种对映体原料之一的手性终产物的相应对映体也分别称作′对映体1′或′对映体2′。
zb)3-(2-溴-苯基)-7-甲磺酰基-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1将0.628g商品间-氯过苯甲酸(77％)溶于50ml CH2Cl2并通过用硫酸钠过滤干燥该溶液。在RT下将干燥的MCPBA溶液滴加到0.437g来自实施例za)的对映体1在20ml CH2Cl2中的溶液中并持续搅拌过夜。通过用稀亚硫酸氢钠溶液处理过量的过酸。用碳酸氢钠水溶液洗涤有机相、干燥并蒸发。使用乙酸乙酯/庚烷进行硅胶色谱而得到430mg标题产物。
终产物实施例13-(2-溴-苯基)-7-(2-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮将1.2g 3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1 H)-酮和1.54g 2-羟甲基-6-氨基-1，4-苯并二噁烷(原料b))在20ml NMP中混合。加入0.348g TFA并将该混合物加热至140℃下7小时。将该混合物倾入10％HCl水溶液并用乙酸乙酯提取。将水相调节至pH＞9并用CH2Cl2提取。合并有机相并蒸发。在室温下将残余物悬浮于CH2Cl2并过滤出固体杂质。再用水洗涤滤液以除去剩余的NMP、然后蒸发。将残余物与水一起研磨、过滤并干燥至得到0.6g标题产物(mp156-158℃)。
NMR(CDCl3，以ppm计的6)2.03(宽峰s，1H)；3.48(s，3H)；3.89(dd，1H)；3.95(dd，1H)；4.15(dd，1H)；4.28(m，1H)；4.33(dd，1H)；4.55(d，1H)；4.71(d，1H)；6.89(d，1H)；6.98(m，2H)；7.25(m，1H)；7.40(m，3H)；7.71(d，1H)；7.98(s，1H)。
MS(APCI+)498(M+1)，420(M-Br)实施例23-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(2-氯甲基苯并二噁烷-6-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮将170mg来自实施例1的产物悬浮于20ml甲苯中。在100℃下加入45mg亚硫酰氯并将该混合物加热至回流。在几小时后，TLC和HPLC显示转化完全并在90℃下通过施加少许真空蒸馏出溶剂。不经进一步纯化而使用由此获得的氯甲基衍生物。
实施例33-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮将来自实施例2的85mg氯甲基化合物和130mg吗啉在8ml NMP中混合。加入24mg溴化四丁基铵并将该混合物加热至50℃下18小时。再加入24mg溴化四丁基铵并使温度升至100℃下16小时，然后再升至130℃下6小时。通过HPLC-MS分离粗混合物而得到40mg标题化合物。
实施例43-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-[2-(对-甲苯磺酰基)氧基甲基-苯并二噁烷-6-基]氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮将520mg来自实施例1的产物溶于20ml CHCl3。加入213mg甲苯磺酰氯和13mg 4-二甲氨吡啶并将该混合物冷却至5℃。滴加166mg吡啶并在室温下持续搅拌3小时。将该混合物在60℃下搅拌1小时，然后再加入105mg甲苯磺酰氯并在室温下持续搅拌16小时。用50ml CHCl3稀释该混合物并用0.5M HCl洗涤、干燥并蒸发。进行硅胶色谱而得到180mg标题化合物。
实施例53-(2-溴-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮用0.62ml 2M在THF中的二甲胺处理在8ml NMP中的90mg来自实施例4的甲苯磺酸盐并在室温下搅拌3天。将该混合物加热至50℃下4小时、然后再加热至65℃下2小时。在45℃下持续搅拌过夜。通过HPLC-MS进行分离而得到污染有NMP的粗产物，通过溶于CHCl3并用水洗涤而将其进一步纯化。
产率27mg标题化合物。
实施例63-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮用23mg TFA处理在0.8ml NMP中的80mg 3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和207mg 5-氨基-1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶](原料d))并在N2环境中加热至140℃下15小时。通过制备型HPLC-MS进行纯化，随后将该体系溶于乙酸乙酯并用稀HCl水溶液洗涤而得到57mg标题化合物(mp200-201℃)。
实施例73-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮在0℃下将在2ml THF中的82mg 5-氨基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶](原料e))加入到0.4ml 1M六甲基二硅叠氮化锂在THF中的溶液中并搅拌20分钟。在0℃下加入作为在2ml THF中的混悬液的89mg3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮并在室温下持续搅拌16小时。将该混合物倾入水并用乙酸乙酯提取。浓缩有机相并通过制备型HPLC-MS纯化。将含有产物的级分溶于CH2Cl2并用氢氧化钠水溶液洗涤、然后干燥并蒸发。
产率5mg标题化合物(mp229-231℃)。
实施例83-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮0.2ml在乙醚中的2M HCl处理在0.8ml NMP中的83mg 3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和80mg6-氨基-2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-4，4-二氧化物(原料h))并加热至120℃下6小时。通过制备型HPLC-MS从该混合物中分离21mg标题产物(mp230-233℃)。
实施例 8a3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1可以按照与实施例8类似的步骤、但使用100mg来自实施例zb)的产物和145mg原料h)得到标题化合物，为淡黄色粉末。
产率25mg标题化合物。
实施例93-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮用92mg TFA处理在4ml NMP中的320mg 3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和626mg 7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮(原料k))并加热至140℃下12小时。用HCl水溶液稀释该混合物并通过过滤收集沉淀的产物。
产率245mg标题化合物。
实施例103-(2-溴-苯基)-7-(3-甲氧基-4-甲基-1-氧代-1，4-二氢-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮在室温下将100mg来自实施例9的化合物和108mg过硫酸氢钾制剂(oxone)在2ml MeOH中搅拌17小时。过滤该混合物并用THF洗涤残余物。浓缩合并的滤液并通过制备型HPLC-MS纯化而得到10mg标题化合物。
实施例113-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮用0.2ml 2M在乙醚中的HCl处理在0.8ml NMP中的83mg 3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和85mg7-氨基-4-甲基-4H-苯并[1，4]噻嗪-1，1-二氧化物(原料n))并加热至120℃下6小时。通过制备型HPLC-MS纯化该混合物而得到34mg标题化合物。
实施例123-(2-溴-6-氟-苯基)-7-[2-(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基]-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮盐酸盐将80mg 3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-甲磺酰基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮和82mg 2-(1，1-二甲基-2-羟乙基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基胺(原料s))在1ml干NMP中混合。加入0.2ml在乙醚中的2M HCl并将该混合物在N2气体环境中加热至120℃。通过制备型HPLC-MS从该混合物中分离产物并通过二次硅胶色谱法进一步纯化。将纯级分溶于CH2Cl2并用一个当量2M在乙醚中的HCl处理。蒸发而得到1.5mg标题产物的盐酸盐。
实施例13按照上文所述的制备方法和实施例得到下列其它化合物
13-13-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-25-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-异吲哚-1，3-二酮；13-33-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮盐酸盐；13-43-(2-溴-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氢-3λ*6*-苯并[1，3]氧杂硫羟-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-53-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，3-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-63-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-73-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-87-(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-3-(2-溴-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-93-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-103-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；
13-115-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-异吲哚-1，3-二酮；13-123-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(mp145-149℃)；13-133-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-143-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1’-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-153-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1’-乙氧羰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-165-[6-(2-溴-6-氟-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-异吲哚-1，3-二酮；13-173-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氢-3λ*6*-苯并[1，3]氧杂硫羟-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-183-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-193-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-203-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
13-213-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(mp201-203℃)；13-223-(2-溴-苯基)-7-(2-环丙氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-233-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-243-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-253-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-263-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮(mp250-251℃)；13-273-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-283-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-293-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；(mp271-275℃)；13-303-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-313-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-323-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-333-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-347-(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-353-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(mp191-195℃)；13-363-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-氰基甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-373-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-383-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-393-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-403-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-413-(2-溴-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-423-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-433-(2-溴-苯基)-7-(3-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-443-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-453-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；13-463-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；NMR(CDCl3，以ppm计的δ)2.00(m，4H)；3.07(m，4H)；3.45(s，3H)；4.58(s，2H)；6.71(d，1H)；6.83(dd，1H)；6.92(s，1H)；7.19(m，1H)；7.25(m，2H)；7.47(dd，1H)；7.96(s，1H)，MS(APCI+)541(M+1)，Mp146-153℃。
13-472-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-苄腈；13-483-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；
13-497-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-3-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；13-503-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体2；13-513-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体2；13-523-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1；13-532-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-3-氟-苄腈。
参考文献目录Ansel，H.等，《药物剂型与药物传递系统》(Pharmaceutical DosageForms and Drug Delivery Systems)，第6版，1995，pp.196和1456-1457；Kinko，K.等，《加拿大化学杂志》(Can.J.Chem.)51(1973)333；Merrifield，Fed.《美国食品与实验生物学协会学报》(Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.)21(1962)412；Okuda，Price，《有机化学杂志》(J.Org.Chem.)24(1959)14；WO 00/24744；WO 01/29041；WO 01/29042；WO 99/61444。
权利要求
1.式I的化合物及其药物上可接受的盐或N-氧化物 其中R1表示氢或全部任选被取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳基烷基；R2表示卤素、氰基、CF3；R3独立地为卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任选被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氢、烷基、烷氧基、氰基；且A为如下通式的基团 或 R5为氢、卤素、羟基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此独立地表示氢、烷基或氧代；R7为氢、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任选被羟基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此独立地表示氢、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任选被氢、羟基、氰基、吡咯烷-1-基、吗啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基团NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′独立地为氢、烷基或环烷基；X为氧或S(O)m；虚线为任选的第二个化学键；n为0、1或2；m为0、1或2；p为0、1或2；条件是当R8和R8’表示氧代基团时，该氧代基团不与S(O)m基团邻接。
2.权利要求1的式I的化合物及其药物上可接受的盐或N-氧化物，其中R1表示氢或全部任选被取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳基烷基；R2表示卤素、氰基、CF3；R3独立地为卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、酰氨基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2或全部任选被取代的烷基、烷氧基、烷氧基烷基；R4表示氢、烷基、烷氧基、氰基；且A为如下通式的基团 R5为氢、卤素、羟基、氰基、氨基、酰氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、-CONH2、-SO2NH2、-S(O)m-烷基、-NH-烷基、-N(烷基)2、-CONH(烷基)、-CON(烷基)2、-SO2NH(烷基)、-SO2N(烷基)2；R6、R6’彼此独立地表示氢、烷基或氧代；R7为氢、酰基、烷氧羰基、烷氧基烷基；或任选被羟基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；R8、R8’彼此独立地表示氢、氧代、烷氧基、烷氧基烷基；或任选被氢、氰基、吡咯烷-1-基、吗啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基团NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′独立地为氢、烷基或环烷基；X为氧或S(O)m；虚线为任选的第二个化学键；n为0、1或2；m为0、1或2；p为0、1或2；条件是当R8和R8’表示氧代基团时，该氧代基团不与S(O)m基团邻接。
3.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为如权利要求1所定义的式A-1、A-2、A-3、A-4、A-5或A-6的基团；R1为任选取代的烷基或芳基；R2为卤素或氰基；R3为卤素；n为0或1；R5为氢；且R4为氢或甲基。
4.权利要求3所述的化合物；7-(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基氨基)-3-(2，4-二氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-苄腈。
5.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-1，其中R5为氢；R7如权利要求2所定义；p为0；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
6.权利要求5所述的化合物，3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙酰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙氧羰基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-乙基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟苯基)-3，4-二氢-7-(1′-(2-甲氧基乙基)-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-苯基)-3，4-二氢-7-(1′-氰基甲基-螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮；3-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3，4-二氢-7-(螺[1，3-苯并间二氧杂环戊烯并-2，4′-哌啶]-5-基)氨基-1-甲基-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮。
7.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-2，其中R5为氢；X为氧；R8、R8’独立地表示氢；或任选被氢、氰基、吡咯烷-1-基、吗啉代、哌嗪-1-基、4-烷基-哌嗪-1-基、哌啶-1-基、-S(O)m-烷基或基团NR9R9’取代的烷基，其中R9和R9′独立地为氢、烷基或环烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；且R4为氢。
8.权利要求7所述的化合物3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-二甲氨基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(2-环丙氨基甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吗啉-4-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-吡咯烷-1-基甲基-2，3-二氢苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
9.权利要求1的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-2，其中R5为氢；X为氧；R8为氢；且R8’为被羟基取代的烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；且R4为氢。
10.权利要求9所述的化合物3-(2-溴-苯基)-7-(2-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；或3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(2-羟甲基-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧芑-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
11.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-2，其中R5为氢；X为S(O)m；m为0、1或2；R8、R8′表示氢；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
12.权利要求11所述的化合物3-(2-溴-苯基)-7-(2，3-二氢-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
13.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-3，其中R5为氢；R7为氢或烷基；X为S(O)m；m为0、1或2；R8、R8’独立地表示氢、氧代或烷氧基，条件是当R8、R8’之一为氧代基团时，虚线不存在，而当R8、R8’为氢或烷氧基时，虚线可以表示形成双键的另一个键；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
14.权利要求13所述的化合物3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，3-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3-甲氧基-4-甲基-1-氧代-1，4-二氢-1λ*4*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1-二氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-1-甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
15.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-4，其中R5为氢；R6、R6′独立地表示氢或氧代；R7为氢；或任选被羟基、氰基、-S(O)m-烷基、氨基、-NH-烷基或-N(烷基)2取代的烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
16.权利要求15所述的化合物5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-异吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-苯基)-1-甲基-7-(2-甲基-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮盐酸盐；5-[6-(2-溴-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-异吲哚-1，3-二酮；5-[6-(2-溴-6-氟-苯基)-8-甲基-7-氧代-5，6，7，8-四氢-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-基氨基]-2-甲基-异吲哚-1，3-二酮；3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-[2-(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基]-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮盐酸盐。
17.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-5，其中R5为氢；X为氧；R8、R8’彼此独立地表示氢或烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
18.权利要求17所述的化合物7-(苯并[1，3]二氧代-5-基氨基)-3-(2-溴-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
19.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-5，其中R5为氢；X为S(O)m；m为0、1或2；R8、R8’彼此独立地表示氢或烷基；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
20.权利要求19所述的化合物3-(2-溴-6-氟-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氢-3λ*6*-苯并[1，3]氧杂硫羟-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(3，3-二氧代-2，3-二氢-3λ*6*-苯并[1，3]氧杂硫羟-5-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮。
21.权利要求2的化合物及其药物上可接受的盐，其中A为基团A-6，其中R5为氢；R6、R6′、R7具有权利要求2所给出的含义；且R1为烷基；R2为卤素；R3为卤素；n为0或1；R4为氢。
22.权利要求2所述的化合物3-(2-溴-5-甲氧基-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-3-(2-氟-6-甲氧基-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1；3-(2-溴-苯基)-7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1，4-二甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体2；3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮；对映体2；3-(2-溴-苯基)-1，4-二甲基-7-(4-甲基-1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢-1λ*6*-苯并[1，4]噻嗪-7-基氨基)-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮，对映体1；和2-[7-(4，4-二氧代-3，4-二氢-2H-4λ*6*-苯并[1，4]氧硫杂环己二烯-6-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基]-3-氟-苄腈。
23.通式A-1-I的化合物 其中R5、R6、R7和p具有权利要求1中所述的含义；且X为NO2或任选被保护的NH2基团。
24.权利要求1-22之一的式I化合物的制备方法，包括(a)使通式(II)的化合物与通式(III)的胺反应， 其中R1-R4和n如权利要求1所定义，任何羟基或氨基可以以被保护的形式存在，且L表示离去基团，如苄基磺酰基、苯基磺酰基、烷磺酰基、对甲苯基磺酰氧基、甲磺酰氧基、或三氟甲磺酰氧基、烷亚磺酰基、或卤素如氯、溴、碘、氟； 其中A如权利要求1所定义；且如果需要，使反应产物上存在的被保护羟基或被保护氨基脱保护；或b)使式(II)的化合物与氨反应或与被保护的胺、诸如苄胺反应且随后裂解下保护基而得到式IV的氨基衍生物 其中所示的符号如权利要求1所定义；然后使该化合物与式V的二环化合物反应 其中L′表示如对L所定义的离去基团，且A如权利要求1所定义；可以使用本领域中公知的过渡金属催化剂催化(IV)与(V)的反应，和c)如果需要，用酸将获自a)或b)的式I的碱性化合物转化成药物上可接受的盐或用碱将获自a)或b)的式I的酸性化合物转化成药物上可接受的盐；和d)如果需要，通过与氧化剂如3-氯-过苯甲酸、三氟过乙酸或二甲基二环氧乙烷的氧化反应将式I的化合物转化成N-氧化物。
25.一种药物，含有权利要求1-22中任何一项的一种或多种化合物作为活性组分以及药物上可接受的辅药。
26.权利要求25的药物在治疗由src家族酪氨酸激酶不适当的激活介导的疾病中的应用。
27.权利要求25的药物在治疗炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或骨疾病中的应用。
28.权利要求25的药物在治疗癌症中的应用。
29.利要求1-22中任何一项的一种或多种化合物在制备用于治疗由src家族酪氨酸激酶不适当的激活介导的疾病的药物中的应用。
30.权利要求1-22中任何一项的一种或多种化合物作为src家族酪氨酸激酶抑制剂的应用。
31.权利要求1-22中任何一项的一种或多种化合物作为细胞信号传导调节剂和抗增殖剂的应用。
32.权利要求1-22中任何一项的一种或多种化合物在治疗炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或骨疾病中的应用。
33.权利要求1-22中任何一项的一种或多种式I的化合物在治疗癌症中的应用。
34.如权利要求24中所述方法或通过等同方法制备的权利要求1-22中任何一项的化合物。
35.如上文所述的本发明。
全文摘要
本发明描述了通式(I)的化合物、其制备方法、含有它们的药物及其制备方法以及这些化合物作为药物活性剂的应用。所述的化合物表现出作为蛋白激酶抑制剂、特别是src家族酪氨酸激酶抑制剂的活性且由此可以用于治疗由所述酪氨酸激酶介导的疾病。
文档编号C07D491/10GK1711265SQ200380102849
公开日2005年12月21日 申请日期2003年11月3日 优先权日2002年11月4日
发明者蔡建平, N·迪穆蒂斯, K·霍诺尔德, 陆建春, S·沙伊布勒赫, H·祖德加特, G·蒂芬塔勒, O·托恩 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司