专利名称：用于制备顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的方法
技术领域：
本发明涉及一种用于制备肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的两种异构体即顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的方法。更具体地，本发明还涉及两种异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯用于在大鼠中阻滞炎症和减轻佐剂诱导的关节炎的评价。
背景技术：
肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯(CMO)是顺式-9-肉豆蔻烯酸十六烷基酯的常用名。CMO是顺式-9-十四碳烯酸(肉豆蔻烯酸)和1-十六烷醇(鲸蜡醇)的酯。肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯由于其抗关节炎的性质而是众所周知的。仅在非常有选择性的数量的动物物种，包括牛，鲸，海狸和小鼠中发现了顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯。在1972年，国家健康研究所 (National Institutes of Health)的研究者Harry W. Diehl从小鼠中分离了肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯(Diehl HW, May EL.药物科学杂志(J Pharm Sci) 1994 ；83 :296-9)。肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯已经被用于针对哺乳动物中的炎性类风湿关节炎的免疫化(Diehl，US 4，049，824， Levin,WO 01/41783)，类风湿关节炎的治疗(Diehl,US 4, 113,881)和骨关节炎(Diehl,US 5，569，676)。植物黄油基肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯还被用于治疗骨关节炎和其它肌肉骨骼病症和损伤(Le0nard，US 20030181521)。含有CMO的营养制品被广泛地用于减轻疼痛炎症，并且除此之外，一项报告提出了 cerasomol-CMO在患有纤维组织肌痛(fibromyalgia)的患者中的正面临床效果(Edwards AM. J. Nutr. Environ. Med. 2001 ； 11 :105-11)。由于 Swiss Albino小鼠是CMO的仅有天然来源，因此Kenneth等通过用1_十六烷醇将顺式_9_十四碳烯酸(tertadecenoic acid)(购自商业来源)酯化而通过化学方法合成了纯的顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯，并且在DBA/lLac J小鼠中的胶原诱导的关节炎模型中确认了其抗关节炎性质(Kenneth W. Hunter, Jr. ,Ruth A. Gault，Jeffrey S. Stehouwer, Suk-ffah Tam-Chang.药理学研究(Pharmacological Research) 2003 ；47 :43-47)。顺式 _9_ 肉豆蔻烯酸天然地作为在顺式-9-肉豆蔻烯酸含量为8%的牛脂脂肪(Lord G，W0 00/64436)和具有 20-30% 的顺式-9-肉豆蔻烯酸的 Pycnanthus Komb 的种子脂肪(Leonard，US20030181521) 中脂肪酸与其它脂肪酸的混合物获得。文献研究揭示的是，不存在报道顺式-9-肉豆蔻烯酸的合成途径。由于顺式-9-肉豆蔻烯酸的天然可获得性是不足的，因此本发明首次报道了从油酸甲酯的合成途径。由于难以从任何植物油来源分离纯油酸，因此本发明首次报道了从可商购原料即十一碳烯酸合成新的异构体顺式-10-肉豆蔻烯酸。然后通过将顺式-10-肉豆蔻烯酸甲酯和顺式-9-肉豆蔻烯酸甲酯分别与鲸蜡醇进行酯交换以制备肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯，并且关于抗炎症和抗关节炎活性进行评价。将新的异构体即顺式- ο-肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的抗炎症和抗关节炎性质与含有如上所述制备的顺式-9-肉豆蔻烯酸的已知CMO的抗炎症和抗关节炎性质进行比较。合成途径的第一步骤是从油酸合成顺式-9-肉豆蔻烯酸。油酸不能以纯的形式得到，并且必须通过采用例如脲加合或分馏蒸馏的方法而从富集油酸的油例如橄榄油制备。
4由于从天然来源分离纯油酸非常昂贵，基于顺式-9肉豆蔻烯酸的肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的成本也非常高。因此，需要辨别用于CMO的制备的肉豆蔻烯酸的备选来源。令人^(奇地，在关于顺式-9肉豆蔻烯酸的化学合成或用于CMO的制备的任何其它备选原料的方向没有报道很多工作。考虑到这些，本发明研究了用于制备肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的肉豆蔻烯酸的备选异构体的合成的可能性。在此方向上的一种吸引人的底物是用于顺式- ο肉豆蔻烯酸的制备的10-十一碳烯酸。10-十一碳烯酸是蓖麻油脂肪酸甲酯(蓖麻醇酸甲酯)的热解产物并且可以以纯的形式大量商购。在本发明中，从油酸甲酯和十一碳烯酸甲酯制备顺式-9 肉豆蔻烯酸的甲酯和顺式-10肉豆蔻烯酸的甲酯的异构体(3和7)，并且将其与鲸蜡醇进一步酯交换，以得到顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯4和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯 8。将顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯4和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯8关于抗关节炎性质进行评价，并且发现，顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯8在大鼠中在抑制炎症方面比得上顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯4并且在佐剂诱导的关节炎方面有效。发明目的本发明的主要目的是提供一种用于制备肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的两种异构体即顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的方法。本发明的再另一个目的是两种异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式- ο-十四碳烯酸十六烷基酯用于在大鼠中阻滞炎症和减轻佐剂诱导的关节炎的评价。发明概述因此，本发明提供一种用于制备肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的两种异构体即顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的方法，以及两种异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯用于在大鼠中阻滞炎症和减轻佐剂诱导的关节炎的评价。在本发明的一个实施方案中，提供一种用于制备具有通式1的肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的两种异构体即顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的方法，
权利要求
1. 一种用于制备具有通式1的肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的两种异构体即顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的方法，
2.根据权利要求1的步骤(a)中所述的方法，其中在步骤(a)中使用的有机溶剂为二氯甲烷或氯仿。
3.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤(a)中使用的油酸甲酯和在步骤(f)中使用的正戊基三苯基辚盐用于制备顺式-9-十四碳烯酸酯。
4.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤(a)中使用的十一碳烯酸甲酯和在步骤 (f)中使用的正丁基三苯基辚盐用于制备顺式- ο-十四碳烯酸酯。
5.根据权利要求1所述的方法，其中顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯的收率在88-95%的范围内。
6.根据权利要求1所述的方法，其中顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯的纯度在 92-95%的范围内。
7.根据权利要求1所述的方法，其中顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的收率在 80-90%的范围内。
8.根据权利要求1所述的方法，其中顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯的纯度在 90-95%的范围内。
9.根据权利要求1所述的方法，其中对所制备的异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯用于在大鼠中阻滞炎症和减轻佐剂诱导的关节炎进行评价。
10.根据权利要求1所述的异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯用于阻滞炎症和减轻佐剂诱导的关节炎的用途。
11.根据权利要求10所述的异构体用于阻滞炎症的用途，其中在剂量为400mg/kg体重的情况下，与对照组相比，异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯有效地将动物的炎症和水肿同等地减轻多达36%。
12.根据权利要求10所述的异构体用于减轻佐剂诱导的关节炎活性的用途，其中在100mg/kg体重的剂量的情况下，所述异构体顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯有效地将关节炎同等地减轻多达10至15%。
13.根据权利要求10所述的异构体用于抗关节炎活性的用途，其中所述异构体顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯对于80%的大鼠是21天内有效，而对于20%的大鼠是32 天内有效。
全文摘要
通常称为肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯(CMO)的顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯被用于治疗骨关节炎和其它关节炎性病症。顺式-9-十四碳烯酸(顺式-9-肉豆蔻烯酸)是用于制备CMO的主要前体。由于对于顺式-9-十四碳烯酸存在有限的天然植物来源，因此本发明的目的在于从油酸甲酯合成顺式-9-十四碳烯酸甲酯。由于油酸不能以纯的形式得到，因此必须从富集油酸的油例如橄榄油中分离油酸。顺式-10-十四碳烯酸甲酯，即顺式-9-十四碳烯酸的异构体，也从十一碳烯酸甲酯，即蓖麻油的衍生物制备。十一碳烯酸可以以纯的形式容易地商购。顺式-9-十四碳烯酸十六烷基酯和顺式-10-十四碳烯酸十六烷基酯分别通过顺式-9-十四碳烯酸甲酯和顺式-10-十四碳烯酸甲酯与1-十六烷醇(鲸蜡醇)的酶促酯交换制备。将肉豆蔻烯酸鲸蜡基酯的两种异构体用于大鼠中的抗关节炎，阻滞炎症和减轻佐剂诱导的关节炎进行评价。
文档编号C07C69/533GK102348482SQ201080011046
公开日2012年2月8日 申请日期2010年1月12日 优先权日2009年1月12日
发明者巴德里·纳拉亚纳·普拉萨德·拉沙普迪, 拉克希米·阿努·普拉瓦蒂·德维·贝瑟拉, 瑞马克瑞莎娜·希斯特拉, 瓦曼劳·迪万·普拉卡什, 纳皮·甘加达尔·卡特卡姆, 维贾亚拉希·昆库玛, 马杜苏哈纳·昆察 申请人:科学与工业研究委员会