专利名称：一种从枇杷叶中提取熊果酸的方法
技术领域：
一种从枇杷叶中提取熊果酸的方法，涉及到食品科学和天然产物分离提取领域。
背景技术：
枇杷叶为蔷薇科植物枇杷的干燥叶，枇杷叶归肺、胃经，为传统的药用植物，并且在《神农本草经》、《名医别录》及《本草纲目》等古籍和《中国药典》所收载，为传统的止咳平喘的中药，具有化痰止咳、和胃降逆之功效，在临床主要用于急慢性支气管炎等呼吸系统疾病的治疗。中国是世界上最主要的枇杷生产国，栽培面积和产量占世界的2/3以上，主产区为江苏、福建和浙江，而目前大多数的枇杷叶一般作为垃圾处理。枇杷叶中的活性物质有挥发油类、三萜酸类、黄酮类、皂甙类、有机酸类、多酚类等成分。在对于熊果酸的研究中，前人多采用的方法如溶剂提取法，超声辅助提取法，以及超临界萃取工艺，在对熊果酸的纯化方面，相廷英等人则是通过用石油醚结合活性炭脱色工艺，经过重结晶能得到熊果酸晶体，另外李丽等人通过碱性乙醇除杂、活性炭脱色以及大孔吸附树脂富集结合乙醇重结晶作用得到熊果酸晶体。以上方法均存在提取时间较长，熊果酸提取率较低等缺陷。
发明内容
本发明的目的是从枇杷叶中提取熊果酸，枇杷叶经干燥、蒸汽爆破处理、醇提、减压蒸馏浓缩、大孔吸附树脂富集、乙醇多重结晶得到熊果酸纯品。本发明的特点是采用独特的蒸气爆破方法，将被压缩的高压蒸汽渗进枇杷叶细胞组织内部，气体在毫秒级的范围内突发性释放完毕，充分将细胞壁破碎，使枇杷叶中熊果酸最大限度快速游离出来，因此只需加入乙醇溶液在较低温度即能大幅提高熊果酸提取率，整个处理过程中除乙醇外，无其他有毒有害试剂的加入，然后经过大孔吸附树脂富集纯化工艺，选择性的分离得到熊果酸粗品，减少了乙醇结晶的次数，提高了制备熊果酸的效率，使其具有更为广泛的应用前景。本发明的技术方案一种从枇杷叶中提取熊果酸的方法，主要以新鲜采摘的枇杷叶为原料，经干燥粉碎、蒸汽爆破处理、醇提、减压蒸馏浓缩、大孔吸附树脂富集、乙醇多重结晶得到熊果酸纯品；步骤如下
(1)枇杷叶的干燥粉碎将枇杷叶洗净，去除灰尘杂质，浙干水分，于20-80°C干燥 0. 5-5 h ；粉碎；
(2)蒸气爆破处理加水8-10L/Kg枇杷叶，蒸气压力为0. 5-5MPa，保压时间50_800s ；
(3)醇提将蒸气爆破后枇杷叶用质量浓度60%-100%乙醇水溶液提取，提取所用乙醇水溶液用量为5-10L/Kg枇杷叶，温度为20-80°C，提取时间为0. 5_3h，重复提取1_5次；合并提取液，离心分离后取上清液；
(4)减压蒸馏将(3)所得上清液于20-60°C减压蒸馏，除掉其中的有机溶剂乙醇；
(5)大孔吸附树脂富集将(4)所得提取物经大孔吸附树脂处理，采用质量浓度 10%-90%乙醇水溶液洗脱；(6)减压蒸馏对(5)所得到的洗脱液减压蒸馏，除去乙醇；并调节pH至2-5；
(7)对(6)所得到的溶液用乙醇结晶2-6次，得到的晶体即为熊果酸。所用大孔吸附树脂选用DM-130大孔吸附树脂或D-101大孔吸附树脂。本发明的有益效果采用独特的蒸气爆破方法，使熊果酸与枇杷叶中的蛋白质、纤维素、木质素等相关组分得以分离，熊果酸最大限度快速游离出来，结合醇提工艺和大孔吸附树脂富集以及重结晶技术，得到高纯度熊果酸晶体。开展此项工艺研究不仅可以推动熊果酸生产技术的进步，而且还可以带动枇杷种植业的发展。本发明的实施有利于提高枇杷叶的利用能力，给枇杷种植业带来巨大的经济价值。
图1、枇杷叶中熊果酸提取物最终产品的液相色谱图。液相条件C18柱，甲醇水 =9:1，检测波长210歷，柱温301，图中峰1为熊果酸。图2、蒸汽爆破处理结合重结晶技术制得熊果酸的工艺流程图。
具体实施例方式实施例1
新鲜枇杷叶经清洗烘干至恒重，粉碎后得到粉末1kg，加入水10L，2MPa蒸气爆破处理 200s，加入乙醇水溶液(乙醇水=9:1)6. 5L，混合后水浴70°C搅拌提取，提取时间为1. 5h， 提取次数为3次。收集3次提取液，离心分离后取上清液，减压浓缩2h，去除一定体积的乙醇溶液，DM-130大孔树脂处理，收集90%乙醇水洗脱液，减压浓缩至一定体积，并调节pH至 2-5，用乙醇结晶2-6次，结晶得到熊果酸晶体(纯度>95%) 6. 9 g。实施例2
新鲜枇杷叶经清洗烘干至恒重，粉碎后得到粉末1kg，加入水8L，0. 5Mp蒸气爆破处理 800s，加入乙醇(乙醇水=100:0)5L，混合后水浴20°C搅拌提取，提取时间为3h，提取次数为2次。收集2次提取液，离心分离后取上清液，减压浓缩2h，去除一定体积的乙醇溶液， D-101大孔树脂处理，收集70%乙醇水洗脱液，减压浓缩至一定体积，并调节pH至2-5，用乙醇结晶2-6次，结晶得到熊果酸晶体(纯度>95%) 6. 4 g。实施例3
新鲜枇杷叶经清洗烘干至恒重，粉碎后得到粉末1kg，加入水9L，5Mp蒸气爆破处理 50s，加入乙醇水溶液(乙醇水=6:4) 10L,混合后水浴50°C搅拌提取，提取时间为0. 5h， 提取次数为4次。收集4次提取液，离心分离后取上清液，减压浓缩2h，去除一定体积的乙醇溶液，D-101大孔树脂处理，收集50%乙醇水洗脱液，减压浓缩至一定体积，并调节pH至 2-5，用乙醇结晶2-6次，结晶得到熊果酸晶体(纯度>95%) 7. 2 g。
权利要求
1.一种从枇杷叶中提取熊果酸的方法，其特征在于以新鲜采摘的枇杷叶为原料，经干燥粉碎、蒸汽爆破处理、醇提、减压蒸馏浓缩、大孔吸附树脂富集、乙醇多重结晶得到熊果酸纯品；步骤如下(1)枇杷叶的干燥粉碎将枇杷叶洗净，去除灰尘杂质，浙干水分，于20-80°C干燥 0. 5-5 h ；粉碎；(2)蒸气爆破处理加水8-10L/Kg枇杷叶，蒸气压力为0. 5-5MPa，保压时间50_800s ；(3)醇提将蒸气爆破后枇杷叶用质量浓度60%-100%乙醇水溶液提取，提取所用乙醇水溶液用量为5-10L/Kg枇杷叶，温度为20-80°C，提取时间为0. 5_3h，重复提取1_5次；合并提取液，离心分离后取上清液；(4)减压蒸馏将(3)所得上清液于20-60°C减压蒸馏，除掉其中的有机溶剂乙醇；(5)大孔吸附树脂富集将(4)所得提取物经大孔吸附树脂处理，采用质量浓度 10%-90%乙醇水溶液洗脱；(6)减压蒸馏对(5)所得到的洗脱液减压蒸馏，除去乙醇；并调节pH至2-5；(7)对(6)所得到的溶液用乙醇结晶2-6次，得到的晶体即为熊果酸。
2.根据权利要求1所述的从枇杷叶中提取熊果酸的方法，其特征在于大孔吸附树脂选用DM-130大孔吸附树脂或D-101大孔吸附树脂。
全文摘要
一种从枇杷叶中提取熊果酸的方法，涉及到食品科学领域和天然产物技术领域。本发明以枇杷叶为原料，经过干燥粉碎、蒸汽爆破、醇提、减压蒸馏浓缩、大孔吸附树脂富集、结晶技术得到熊果酸晶体。本发明的优点在于通过蒸汽爆破处理，使熊果酸与枇杷叶中的蛋白质、木质素、纤维素等物质分离而更易于提取，经过大孔吸附树脂纯化工艺，选择性的分离得到熊果酸粗品，减少了乙醇结晶的次数，提高了制备熊果酸的效率，使其具有更为广泛的应用前景。
文档编号C07J63/00GK102276682SQ20111027948
公开日2011年12月14日 申请日期2011年9月20日 优先权日2011年9月20日
发明者华霄, 吴梨, 杨瑞金, 赵伟 申请人:江南大学