专利名称：：雄性避孕组合物以及使用方法雄性避孕组合物以及使用方法相关申请的交叉引用本申请要求于2010年5月14日提交的美国临时申请号61/334，991;2010年8月4日提交的美国临时申请号61/370,745;2010年8月22日提交的美国临时申请号61/375,863;2011年3月24日提交的美国临时申请号61/467，376;以及2011年3月24日提交的美国临时申请号61/467，299的权益。通过该引用以其全文将这些申请的内容结合在此。在联邦资助研究下做出本发明的权利陈述本工作由来自美国国立卫生研究院的以下拨款支持，拨款号:K08CA128972(布拉德纳(Bradner))。在本发明中政府具有一定的权利。
背景技术：
：尽管哺乳动物基因组的4%对在精子发生期间于雄性精细胞中表达的基因进行编码，但是男性避孕药物仍难以解决。迄今为止，临床试验中的仅有药物是改变内源雄激素生产的睾酮类似物。缺乏男性避孕替代方案部分地是高无计划受孕率的原因，尤其是十几岁的少年，并且部分地是相关的产妇死亡率以及与单身母亲的流产与分娩相关的伦理、社会及经济成本的原因。为了着手处理这一男性避孕替代方案的缺乏，希望的是研发可以靶向精子发生特异性蛋白的小分子，已经显示这些精子发生特异性蛋白对于哺乳动物中的精子发生以及生育力是必需的。一个此类避孕靶标是布罗莫结构域睾丸特异性蛋白，BRDT。BRDT是一种组织局限性的、染色质重塑蛋白，在粗线期精母细胞、双线期精母细胞以及球形精细胞中表达。在减数分裂后成熟期间，BRDT定位到细胞核并且通过双乙酰赖氨酸识别模块或布罗莫结构域重新组织超乙酰化的组蛋白。BRDT在精子发生中的必需作用是通过第一布罗莫结构域(BRDT(I))来介导的，该BRDT(I)以适度效价(20μM)结合组蛋白4(H4Kac4)的四-乙酰化氨基端尾。鼠BRDT的结构研究已经证明，BRDT(I)部分地通过一个保守的天冬酰胺来结合二乙酰化的组蛋白4肽(H4K5ac8ac)，这与对其他布罗莫结构域共激活因子蛋白的精液研究类似。BRDT的遗传研究已经证明，BRDT(I)编码区域的选择性缺失足以在纯合雄性小鼠中赋予不育，并且最近公开的一项对特发性男性不育的全基因组关联研究将BRDT的单核苷酸多态性鉴别为显著地与在欧洲男性中的少精子症或无精子症相关。这些见解建立了令人信服的理论以靶向BRDT用于避孕效果。发明概述如以下所述，本发明提供了用于实现雄性避孕的新颖化合物和组合物。本发明还提供了用于在雄性受试者中使用此类化合物和组合物的方法。在一个方面，本发明提供了用于在雄性受试者中减少或抑制精子发生的方法。在实施方案中，这些方法涉及给予该雄性受试者一个有效量的抑制布罗莫结构域睾丸特异性蛋白(BRDT)的化合物或其盐。在一个方面，本发明提供了用于在受试者中减少雄性生育率的方法。在实施方案中，这些方法涉及给予该雄性受试者一个有效量的抑制BRDT的化合物或其盐。在以上方面中，这些方法涉及以一种足以减少精子数目和/或减少精子活动性的量给予该化合物或其盐。在以上方面中，这些方法涉及以一种足以引起无精子症、少精子症和/或弱精子症的量给予该化合物或其盐。在实施方案中，这些方法在受试者中诱导避孕效果。在本发明的方面中，本发明提供了具有抑制BRDT的化合物或其药学上可接受的盐或药物前体的药用组合物。在实施方案中，该化合物或其盐以一个有效减少或抑制雄性受试者中的精子发生的量存在。在实施方案中，该化合物或其盐以一个有效减少精子数目和/或减少精子活动性的量存在。在实施方案中，该化合物或其盐以一个有效诱导无精子症、少精子症和/或弱精子症的量存在。在相关的实施方案中，该化合物或其盐以一个有效在受试者中诱导避孕效果的量存在。在任何以上方面中，该化合物或其盐是利用在此描述的任何给予剂量和/或给予途径来给予受试者。在实施方案中，该化合物或其盐是口服、经皮或通过注射给予受试者。在相关实施方案中，该化合物或其盐是以片剂或胶囊形式给予。在相关实施方案中，该化合物或其盐是通过肠胃外注射、肌内注射、静脉内注射、皮下植入、皮下注射或经皮制剂来给予。在任何以上方面中，该化合物或其盐是与一种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂组合给予。在任何以上方面中，该化合物或其盐的给予减少了附睾精子数目，程度为对照中存在的精子数目的至少约25%。在实施方案中，该化合物或其盐的给予减少了附睾精子数目，程度为对照中存在的精子数目的至少约10%。在相关实施方案中，给予该化合物或其盐后，剩余精子中仅有约5%显示出前进运动性。在任何以上方面中，该化合物或其盐的给予降低精子浓度至不大于3百万/mL、2百万/mL、I百万/mL、0.5百万/mL、0.25百万/mL或0.1百万/mL。在相关实施方案中，该化合物或其盐的给予降低精子浓度至不大于0.1百万/mL。在一个方面，本发明提供了用于减少雄性生育力的试剂盒。在实施方案中，这些试剂盒包括一个有效量的抑制BRDT的化合物或其药学上可接受的盐或药物前体。在实施方案中，这些试剂盒包含用于在任何在此描述的方法中使用该抑制剂的说明。在任何以上方面中，该化合物是JQl或具有化学式1-XXII中任一个的化合物，或任何在此披露的化合物，或其衍生物或盐。在实施方案中，该化合物是JQl或其药学上可接受的盐或药物前体。在任何以上方面中，该化合物或其盐是与至少一种额外的雄性避孕剂或装置组合给予。在实施方案中，该额外的雄性避孕用具是避孕套。在实施方案中，该额外的雄性避孕剂是睾酮生产、雄激素受体功能或稳定性的调节剂。本发明的额外目标与优点将部分在以下说明书中阐明，并且部分从本说明书中显而易见，或可以通过实践本发明习得。本发明的目标与优点将借助于在此披露的要素以及组合来实现或获得，包括哪些在附加权利要求中指明的那些。应理解，前述的一般说明以及以下的详细说明都是示例性的并且仅是解释性的并且不限制所要求的本发明。结合并入并且构成本说明书的一部分的了本发明的若干实施方案并且与本说明一起用于解释本发明的原理。定义为了有助于理解本发明，以下对一些术语与短语进行定义。术语“减少或抑制精子排出(reducingorinhibitingspermatozoaemission)”指在精液从雄性受试者排出过程中降低精液中存在的精子量。精液中精子水平的减少或抑制可以通过抑制精子发生、诱导无精子症、诱导少精子症、等来实现。因此，在本发明的上下文中，当排出的精液接触雌性受试者的卵子时，“减少或抑制精子排出”具有抑制和/或减少受精率的效果。“精子发生”指雄性中配子发生的全过程。精子发生在细精管中并且直接由该细精管周围的、特别是塞托利细胞上的促卵泡激素与雄性激素的水平调节。术语“无精子症”指每mL精液中精子含量低于I百万，接近零精子含量水平，并且它是抑制精子发生的结果。术语“少精子症”指每mL精液中精子含量在2000万到一百万之间(百万/mL)，并且它是精子发生的受抑制水平的结果。所谓“布罗莫结构域(bromodomain)”意味着识别乙酰化的赖氨酸残基的多肽的一部分。在一个实施方案中，BET家族成员多肽的布罗莫结构域包括约110个氨基酸并且共享一种保守的折叠，该折叠包括被不同的环区连接的四个α螺旋的一种左旋束，这些环区与染色质相互作用。所谓“BET家族多肽(BETfamilypolypeptide)”意味着包括两个布罗莫结构域和一种额外末端(ET)结构域的多肽或其片段，其具有转录调控活性或乙酰化的赖氨酸结合活性。示例性的BET家族成员包括BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT。所谓“BRD2多肽(BRD2polyp印tide)”意味着与能够结合染色质或者调控转录的NP_005095具有至少85%同一性的蛋白或其片段。一个示例性的BRD2多肽的序列如下:MLQNVTPHNKLPGEGNAGLLGLGPEAAAPGKRIRKPSLLYEGFESPTMASVPALQLTPANPPPPEVSNPKKPGRVTNQLQYLHKVVMKALWKHQFAWPFRQPVDAVKLGLPDYHKIIKQPMDMGTIKRRLENNYYffAASECMQDFNTMFTNCYIYNKPTDDIVLMAQTLEKIFLQKVASMPQEEQELVVTIPKNSHKKGAKLAALQGSVTSAHQVPAVSSVSHTALYTPPPEIPTTVLNIPHPSVISSPLLKSLHSAGPPLLAVTAAPPAQPLAKKKGVKRKADTTTPTPTAILAPGSPASPPGSLEPKAARLPPMRRESGRPIKPPRKDLPDSQQQHQSSKKGKLSEQLKHCNGILKELLSKKHAAYAWPFYKPVDASALGLHDYHDIIKHPMDLSTVKRKMENRDYRDAQEFAADVRLMFSNCYKYNPPDHDVVAMARKLQDVFEFRYAKMPDEPLEPGPLPVSTAMPPGLAKSSSESSSEESSSESSSEEEEEEDEEDEEEEESESSDSEEERAHRLAELQEQLRAVHEQLAALSQGPISKPKRKREKKEKKKKRKAEKHRGRAGADEDDKGPRAPRPPQPKKSKKASGSGGGSAALGPSGFGPSGGSGTKLPKKATKTAPPALPTGYDSEEEEESRPMSYDEKRQLSLDINKLPGEKLGRVVHIIQAREPSLRDSNPEEIEIDFETLKPSTLRELERYVLSCLRKKPRKPYTIKKPVGKTKEELALEKKRELEKRLQDVSGQLNSTKKPPKKANEKTESSSAQQVAVSRLSASSSSSDSSSSSSSSSSSDTSDSDSG所谓“BRD2核酸分子(BRD2nucleicacidmolecule)”意味着对BRD2多肽或其片段进行编码的多核苷酸。所谓“BRD3多肽(BRD3polypeptide)”意味着与能够结合染色质或者调控转录的NP_031397.1具有至少85%同一性的蛋白或其片段。一个示例性的BRD3多肽的序列如下:Imstattvapagipatpgpvnppppevsnpskpgrktnqlqymqnvvvktlwkhqfawpfy61qpvdaiklnlpdyhkiiknpmdmgtikkrlennyywsasecmqdfntmftncyiynkptd121divlmaqalekiflqkvaqmpqeevellppapkgkgrkpaagaqsagtqqvaavssvspa181tpfqsvpptvsqtpviaatpvptitanvtsvpvppaaappppatpivpvvpptppvvkkk241gvkrkadtttpttsaitasrsesppplsdpkqakvvarresggrpikppkkdledgevpq301hagkkgklsehlrycdsilremlskkhaayawpfykpvdaealelhdyhdiikhpmdlst361vkrkmdgreypdaqgfaadvrlmfsncykynppdhevvamarklqdvfemrfakmpdepv421eapalpapaapmvskgaessrsseesssdsgssdseeeratrlaelqeqlkavheqlaal481sqapvnkpkkkkekkekekkkkdkekekekhkvkaeeekkakvappakqaqqkkapakka541nstttagrqlkkggkqasasydseeeeeglpmsydekrqlsldinrlpgeklgrvvhiiq601srepslrdsnpdeieidfetlkpttlreleryvksclqkkqrkpfsasgkkqaakskeel661aqekkkelekrlqdvsgqlssskkparkekpgsapsggpsrlssssssesgsssssgsss721dssdse所谓“Brd3核酸分子(Brd3nucleicacidmolecule)”意味着对BRD3多妝进行编码的多核苷酸。所谓“BRD4多肽(BRD4polypeptide)”意味着与能够结合染色质或者调控转录的NP—055114具有至少85%同一性的蛋白或其片段。Imsaesgpgtrlrnlpvmgdgletsqmsttqaqaqpqpanaastnppppetsnpnkpkrqt61nqlqyllrvvlktlwkhqfawpfqqpvdavklnlpdyykiiktpmdmgtikkrlennyyw121naqeciqdfntmftncyiynkpgddivlmaealeklfIqkinelpteeteimivqakgrg181rgrketgtakpgvstvpnttqastppqtqtpqpnpppvqatphpfpavtpdlivqtpvmt241vvppqplqtpppvppqpqpppapapqpvqshppiiaatpqpvktkkgvkrkadtttptti301dpiheppslppepkttklgqrressrpvkppkkdvpdsqqhpapeksskvseqlkccsgi361lkemfakkhaayawpfykpvdvealglhdycdiikhpmdmstikskleareyrdaqefga421dvrlmfsncykynppdhevvamarklqdvfemrfakmpdepeepvvavsspavppptkvv481appsssdsssdsssdsdsstddseeeraqrlaelqeqlkavheqlaalsqpqqnkpkkke541kdkkekkkekhkrkeeveenkkskakepppkktkknnssnsnvskkepapmkskppptye601seeedkckpmsyeekrqlsldinklpgeklgrvvhiiqsrepslknsnpdeieidfetlk661pstlreleryvtsclrkkrkpqaekvdviagsskmkgfsssesesssessssdsedsetg721pa所谓“Brd4核酸分子(Brd4nucleicacidmolecule)”意味着对BRD4多妝进行编码的多核苷酸。所谓“BRDT多肽(BRDTpolypeptide)”意味着与能够结合染色质或者调控转录的NP—001717具有至少85%同一性的蛋白或其片段。Imslpsrqtaiivnppppeyintkkngrltnqlqylqkvvlkdlwkhsfswpfqrpvdavk61lqlpdyytiiknpmdlntikkrlenkyyakaseciedfntmfsncylynkpgddivlmaq121aleklfmqklsqmpqeeqvvgvkerikkgtqqniavssakeksspsatekvfkqqeipsv181fpktsisplnvvqgasvnsssqtaaqvtkgvkrkadtttpatsavkassefsptfteksv241alppikenmpknvlpdsqqqynvvktvkvteqlrhcseilkemlakkhfsyawpfynpvd301vnalglhnyydvvknpmdlgtikekmdnqeykdaykfaadvrlmfmncykynppdhevvt361marmlqdvfethfskipiepvesmplcyiktditettgrentneassegnssddsederv421krlaklqeqlkavhqqlqvlsqvpfrklnkkkekskkekkkekvnnsnenprkmceqmrl481kekskrnqpkkrkqqfiglksedednakpmnydekrqlslninklpgdklgrvvhiiqsr541epslsnsnpdeieidfetlkastlrelekyvsaclrkrplkppakkimmskeelhsqkkq601elekrlldvnnqlnsrkrqtksdktqpskavenvsrlsesssssssssesessssdlsss661dssdsesemfpkftevkpndspskenvkkmknecilpegrtgvtqigycvqdttsanttl721vhqttpshvmppnhhqlafnyqelehlqtvknisplqilppsgdseqlsngitvmhpsgd781sdttmlesecqapvqkdikiknadswkslgkpvkpsgvmkssdelfnqfrkaaiekevka841rtqelirkhleqntkelkasqenqrdlgngltvesfsnkiqnkcsgeeqkehqqsseaqd901ksklwllkdrdlarqkeqerrrreamvgtidmtlqsdimtmfennfd所谓“BRDT核酸分子(BRDTnucleicacidmolecule)”意味着对BRDT多肽进行编码的多核苷酸。“给予(Administering)”在此定义为以一种方式提供试剂给受试者的手段，该方式使该试剂进入该受试者的身体。此类给予可以通过任何途径，包括但不局限于，口腔的、经皮的、粘膜的(例如，阴道、直肠、口腔或鼻粘膜)，通过注射(例如，皮下的、静脉内、肠胃外的、腹膜内的、鞘内的)，或通过吸入(例如，口腔的或鼻的)。通过形成适合于希望的给予途径的形式给出药物制剂。所谓“试剂(agent)”或“化合物(compound)”意味着任何小分子的化学化合物、抗体、核酸分子、或多肽、或其片段。所谓“改善(ameliorate)”是指减少、抑制、减弱、减小、阻滞、或稳定疾病的发展或进展。所谓“改变(alteration)”意味着通过标准技术已知的方法(例如在此描述的方法)检测的基因或多肽的表达水平或活性的变化(增加或减少)。如在此所使用的，改变包括表达水平的10%变化，优选是表达水平的25%的变化、更优选是40%的变化、以及最优选是50%或更大的变化。所述的“类似物(analog)”意味着不是相同的但是具有类似的功能或者结构特征的分子。例如，多肽类似物保留了对应的天然存在的多肽的至少一些生物活性，同时相对于天然存在的多肽具有增强类似物的功能的某些生物化学修饰。这样的生物化学修饰可以增加类似物的蛋白酶抗性、膜通透性或半生期，而不改变，例如，配体结合。类似物可以包括非天然氨基酸。如在此所使用的，术语“烷基(alkyl)”意味着饱和的直链或支链非环烃，该烃典型地具有1-10个碳原子。代表性的饱和的直链烷基包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基以及正癸基；而饱和的支链烷基包括异丙基、仲-丁基、异丁基、叔-丁基、异戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3_二甲基丁基、2，3_二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基戊基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基戍基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基戍基、3-乙基戍基、2_乙基己基、3_乙基己基、4-乙基己基、2_甲基-c1-乙基戍基、2_甲基-3_乙基戍基、2_甲基-4-乙基戍基、2_甲基-2-乙基己基、2_甲基-3_乙基己基、2_甲基-4-乙基己基、2，2-二乙基戊基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基、3，3-二乙基己基等。包括在本发明的化合物中的烷基基团可以是未经取代的、或任选地经一个或多个取代基取代，诸如氨基、烧氣基、芳氣基、杂芳基氣基、烧氧基、烧硫基、氧基、齒素、酸基、硝基、轻基、氛基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳氧基、杂芳氧基、芳硫基、杂芳硫基、芳氨基、杂芳氨基、碳环基、碳环氧基、碳环硫基、碳环氨基、杂环基、杂环氧基、杂环氨基、杂环硫基等。对于本发明的化合物而言典型地优选低级烷基。如在此所使用的,术语“芳族环(aromaticring)”或“芳基(aryl)”意味着单环或多环的芳族环或者包括碳和氢原子的环基团。适合的芳基基团的实例包括，但并不局限于，苯基、甲苯基、蒽基、芴基、茚基、奥基、和萘基、以及苯稠合的碳环部分，如5，6，7，8_四氢萘基。芳基基团可以是未经取代的或任选地经一个或多个取代基取代，例如，如此所述的用于芳基基团的取代基(包括但并不局限于烷基(优选是低级烷基或者经一个或多个卤素取代的烧基)、轻基、烧氧基(优选是低级烧氧基)、烧硫基、氛基、素、氣基、砸酸(-B(OH)2)、以及硝基)。在某些实施方案中，芳基基团是单环，其中该环包括6个碳原子。术语“非对映异构体(diastereomers)”指的是具有两个或更多个不对称中心并且其分子不是彼此镜像的立体异构体。术语“对映异构体(enantiomers)”是指一种化合物的两种互为不能重叠的镜像的立体异构体。两种对映异构体的等摩尔混合物称为“消旋混合物”或者“消旋体”。术语“齒素(halogen)”是指-F、-Cl、-Br或-1。术语“卤烷基(haloalkyl)”旨在包括以上定义的，经卤素单、双或多取代的烷基基团，例如氟甲基以及三氟甲基。术语“轻基(hydroxyl)”意味着-0H。如在此所使用的术语“杂原子(heteroatom)”是指除了碳或氢之外的任何元素的原子。优选杂原子是氮、氧、硫以及磷。术语“杂芳基(heteroaryl)”指的是芳族的5_8元单环、8_12元双环、或11-14元三环环系统，如果是单环则具有1-4个环杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自0、N、或S，并且剩余环原子是碳。杂芳基基团可以任选地经一个或多个如在此描述的用于芳基基团的取代基取代。杂芳基基团的实例包括，但并不局限于，吡啶基、呋喃基、苯并二氧杂环戊烯基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、噻唑基、异噁唑基、喹啉基、吡唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、三唑基、噻二唑基、异喹啉基、吲唑基、苯丙噁唑基、苯并呋喃基、吲嗪基、咪唑并吡啶基、四唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噁二唑基、以及吲哚基。如在此所使用的术语“杂环的(heterocyclic)”指的是在一个环状结构内包含除了碳之外的至少一个原子(例如，S、0、N)的有机化合物。这些有机化合物中的该环状结构可以是芳族的或者，在某些实施方案中，是非芳族的。杂环部分的一些实例包括，但并不局限于，吡啶、嘧啶、吡咯烷、呋喃、四氢呋喃、四氢噻吩、以及二噁烷。术语“同分异构体(isomers)”或者“立体异构体(stereoisomers)”指的是具有相同的化学构成，但是原子或基团的空间安排不同的化合物。术语“同位素衍生物(isotopicderivatives)”包括化合物的衍生物,其中这些化合物中的一个或多个原子被这些原子的相应的同位素替换。例如，含有碳原子(C12)的化合物的同位素衍生物可以是其中该化合物的该碳原子被C13同位素替换的同位素衍生物。所谓“计算机建模(computermodeling)”意味着应用计算程序确定以下一项或多项:配体对于结合部分的定位和结合邻近，被结合配体占用的空间，结合部分与配体之间的互补接触表面的量，给定配体对结合部分进行结合的变形能，以及配体与结合部分之间的氢键能、范德华相互作用、疏水性相互作用、和/或静电相互作用能的一些估算。计算机建模还可以提供模型系统与候选化合物的特征比较。例如，计算机建模实验可以比较本发明的一个药效团模型与一个候选化合物，以便评估该候选化合物与该模型的适宜性。所谓“计算机系统(computersystem)”意味着用于分析原子坐标数据的硬件装置、软件装置以及数据存储装置。本发明的基于计算机的最小硬件装置包括中央处理器(CPU)、输入装置、输出装置以及数据存储装置。理想的是，提供一个监视器对结构数据进行可视化。该数据存储装置可以是随机存取存储器(RAM)或者对本发明的计算机可读媒质进行存取的装置。这样的系统的实例是从SiliconGraphicsIncorporated公司以及SunMicrosystems公司可得到的运行基于Unix的,WindowsNT或IBMOS/2的操作系统的微型计算机工作站。所谓“计算机可读媒质(computerreadablemedia)”意味着可以被计算机直接读取并且存取，例如使得该媒质适合于在以上提到的计算机系统中使用的任何媒质。该媒质包括，但并不局限于，磁存储媒质如软磁盘、硬磁盘存储媒质以及磁带；光存储媒质如光盘或只读光盘(CD-ROM);电存储媒质如RAM和只读存储器(ROM);以及这些分类的混合体如磁/光存储媒质。在本披露中，“包括(comprises、comprising)”、“包含(containing)”以及“具有(having)”等具有美国专利法指定的意义并且意味着“包括(includes、including)”等；“基本上由...组成(consistingessentiallyof或consistsessentially)”同样具有美国专利法指定的意义并且该术语是开放性的，允许超出所叙述的存在，只要所叙述的基本或新特征不被超过叙述的存在改变，但是排除现有技术实施方案。“检测(detect)”指的是识别有待检测的分析物的存在、缺乏或者量。所谓“可检测的标记物(detectablelabel)”意味着一种组合物，当把该组合物连接到一个感兴趣的分子时，使后者变成通过光谱、光化学、生物化学、免疫化学、或化学的手段可检测的。例如，有用的标记物包括放射性同位素、磁珠、金属珠、胶粒、荧光染料、高电子密度试剂、酶(例如，如通常在酶联免疫吸附试验(ELISA)中所使用的)、生物素、异羟基洋地黄毒甙元、或半抗原。所谓“有效量(effectiveamount)”意味为另外的能育雄性提供避孕所需要的试剂量。用于实施本发明以治疗性地处理疾病的一种或多种活性化合物的有效量随给药方式，受试者的年龄、体重以及总体健康状况而变化。最终地，主治医生或者兽医会决定适当的量以及给药方案。这样的量被指为“有效(effective)”量。术语“对映异构体(enantiomers)”是指一种化合物的两种互为不能重叠的镜像的立体异构体。两种对映异构体的等摩尔混合物称为“消旋混合物”或者“消旋体”。术语“齒素(halogen)”是指-F、-Cl、-Br或-1。术语“卤烷基(haloalkyl)”旨在包括以上定义的，经卤素单、双或多取代的烷基基团，例如氟甲基以及三氟甲基。术语“轻基(hydroxyl)”意味着-OH。如在此所使用的术语“杂原子(heteroatom)”是指除了碳或氢之外的任何元素的原子。优选杂原子是氮、氧、硫以及磷。术语“杂芳基(heteroaryl)”指的是芳族的5_8元单环、8_12元双环、或11-14元三环环系统，如果是单环则具有1-4个环杂原子，如果是双环则具有1-6个杂原子，或如果是三环则具有1-9个杂原子，所述杂原子选自O、N、或S，并且剩余环原子是碳。杂芳基基团可以任选地经一个或多个取代基取代。杂芳基基团的实例包括，但并不局限于，吡啶基、呋喃基、苯并二氧杂环戊烯基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、噻唑基、异噁唑基、喹啉基、批唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、批嗪基、三嗪基、三唑基、噻二唑基、异喹啉基、喷唑基、苯丙噁唑基、苯并呋喃基、喷嗪基、咪唑并吡啶基、四唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并噁二唑基、以及吲哚基。如在此所使用的术语“杂环的(heterocyclic)”指的是在一个环状结构内包含除了碳之外的至少一个原子(例如，S、O、N)的有机化合物。这些有机化合物中的该环状结构可以是芳族的或者非芳族的。杂环部分的一些实例包括，但并不局限于，吡啶、嘧啶、吡咯烷、呋喃、四氢呋喃、四氢噻吩、以及二噁烷。术语“同分异构体(isomers)”或者“立体异构体(stereoisomers)”指的是具有相同的化学构成，但是原子或基团的空间安排不同的化合物。术语“同位素衍生物(isotopicderivatives)”包括化合物的衍生物,其中这些化合物中的一个或多个原子被这些原子的相应的同位素替换。例如，含有碳原子(C12)的化合物的同位素衍生物可以是其中该化合物的该碳原子被C13同位素替换的同位素衍生物。本发明提供了多个对于开发高特异性药物是有用的靶点以便减少雄性受试者中的生育力。此外，本发明的方法提供了一种容易的手段以便鉴别安全用于雄性受试者的其他避孕疗法。此外，本发明的方法提供了以高体积通量、高灵敏度、以及低复杂度实际上地分析任何数量的用于作用于在此描述的疾病的化合物的途径。所谓“适宜性(fitting)”意味着通过自动、或半自动的手段确定试剂分子的一个或多个原子与BET家族成员的一个或多个原子或结合位点(例如，BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT的布罗莫结构域)之间的相互作用，并且确定这种相互作用稳定的程度。用于适宜性的不同的基于计算机的方法在此进一步地描述。所谓“片段(fragment)”意味着多肽或者核酸分子的一部分。这一部分包含，优选地，参考核酸分子或多肽的整个长度的至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、或90%。一个片段可以包含10、20、30、40、50、60、70、80、90，或100、200、300、400、500、600、700、800、900，或1000个核苷酸或氨基酸。“杂交(hybridization)”意味着互补核碱基之间的氢键合,该氢键合可以为沃森-克里克(Watson-Crick)、霍氏(Hoogsteen)或反霍氏(reversedHoogsteen)氢键合。例如，腺嘌呤和胸腺嘧啶是通过氢键的形成进行配对的互补核碱基。所谓“分离的多核苷酸(isolatedpolynucleotide)”意味着脱离了基因的核酸(例如，DNA)，该基因在衍生出本发明的核酸分子的有机体的天然存在的基因组中，该核酸在该基因侧面。因此该术语包括，例如，重组DNA，该重组DNA合并进入载体、自主复制质粒或病毒、或原核生物或真核生物的基因组DNA,或者该重组DNA作为不依赖于其他序列的分离的分子存在(例如，通过聚合酶链反应(PCR)或限制性内切核酸酶消化产生的cDNA或者基因组的或cDNA的片段。此外，该术语包括从DNA分子转录的RNA分子，以及是对另外的多肽序列进行编码的杂合基因的一部分的重组DNA。所谓“分离的多肽(isolatedpolypeptide)”意味着本发明的从天然伴随它的组分中分离的多肽。典型地，当该多肽以重量计为至少60%时，将它从它天然关联的蛋白和天然存在的有机分子中分离。优选地，制品是以重量计至少75%、更优选是至少90%、并且最优选是至少99%的本发明的多肽。本发明的分离的多肽可以，例如，通过从天然源提取、对这样的多肽进行编码的重组核酸的表达、或化学合成蛋白而得到。可以通过任何适当的方法测量纯度，例如，柱色谱法、聚丙烯酰胺凝胶电泳、或高效液相色谱(HPLC)分析。所谓“标记(marker)”意味着在与疾病或失调相关联的表达水平或活性方面具有改变的任何蛋白或多核苷酸。在如此所使用的，“获得一种试剂(obtaininganagent)”中的“获得(obtaining)”包括合成、购买、或以另外的方式获得该试剂。“获得化合物(obtainingcompound)”中的术语“获得(obtaining)”旨在包括购买、合成或以其他方式获得该化合物。如在此所使用的术语“光学异构体(opticalisomers)”包括互为不能重叠的镜像的分子，也被称为手性分子。在此使用的短语“肠胃外给药(parenteraladministration和administeredparenterally)”意味着除了肠内以及局部给药之外的给药方式，通常是通过注射，并且包括但并不局限于，静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眼眶内、心内、真皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊髓内以及胸骨内注射以及输注。“药学上可接受的(Pharmaceuticallyacceptable)”指由联邦或州政府的监管机构批准或可批准，或者美国药典中或其他公认药典中列出用于在动物(包括人类)中使用。“药学上可接受的赋形剂、载体或辅助剂(Pharmaceuticallyacceptableexcipient,carrieroradjuvant)”指这样一种赋形剂、载体或辅助剂,它们可以与一种试剂(例如，任何在此描述的化合物)一起给予受试者，并且它们不破坏这些试剂的药理学活性并且当以足够递送治疗量的该试剂的剂量给予时是无毒的。术语“多环基(polycyclyl)”或者“多环的基团(polycyclicradical)”指的是两个或更多个环的环基团(例如，环烷基、环烯基、环炔基、芳基和/或杂环基)，其中两个或更多个碳被两个邻接的环共用，例如，这些环是“稠环”。通过非相邻的原子连接的环称为“桥”环。多环的每个环可以经以上描述的取代基取代，例如，卤素、羟基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羧基、烷基羰基、烷氧基羰基、氨羰基、烷基硫擬基、烧氧基、憐酸根、勝酸基、亚勝酸基、氰1基、氣基(包括烧氣基、~■烧氣基、芳氣基、~■芳氣基、以及烧基芳氣基)、酸胺基(包括烧基擬基氣基、芳基擬基氣基、氣基甲酸基以及服基)、脒基、亚胺基、硫氢基、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸根、硫酸根、磺酸基、氨磺酰基、亚磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、叠氮基、杂环基、烷基、烷基芳基、或芳族的或杂芳族的部分。如在此所使用的术语“多晶型(polymorph)”指的是本发明的化合物或其络合物的固体晶型。相同化合物的不同多晶型表现出不同的物理、化学和/或光谱特性。不同的物理特性包括，但并不局限于，稳定性(例如，对热或光)、可压缩性以及密度(在配制和产品制造方面重要)、以及溶解速率(能够影响生物可利用率)。稳定性的不同可由化学反应性(例如，差分氧化，一种剂型当包括一种多晶型时比包括另一种多晶型褪色更快)或力学特征(例如，存储时破碎为动力学上有利的多晶型的片剂转化成热力学上更稳定的多晶型)或两者(例如，具有一种多晶型的片剂在高湿度时更容易断裂)的变化引起。多晶型的不同的物理特性可以影响它们的加工。术语“药物前体(prodrug)”包括具有可在体内代谢的部分的化合物。通常，药物前体在体内通过酯酶或者其他机制代谢为活性药物。药物前体的实例以及它们的应用在本领域是众所周知的(参见，例如，Berge等人(1977)“药物盐(PharmaceuticalSalts)”《药物科学杂志》(J.Pharm.Sci)66:1_19)。可以在化合物的最终分离和纯化时原位制备这些药物前体，或通过将经纯化的化合物以自由酸形式或羟基分开地与适合的酯化剂进行反应。通过用羧酸进行处理，可以将羟基基团转化成酯类。药物前体部分的实例包括经取代的和未经取代的、支链或无支链的低级烷基酯部分(例如，丙酸酯类)，低级烯基酯类，二-低级烧基_氣基低级烧基酷类(例如，~■甲基氣基乙基酷)，酸氣基低级烧基酷类(例如，乙酰氧基甲基酯)，酰氧基低级烷基酯类(例如，新戊酰氧基甲基酯)，芳基酯类(苯基酯)，芳基-低级烷基酯类(例如，苯甲基酯)，经取代的(例如，用甲基、卤素、或甲氧基取代基)芳基和芳基-低级烷基酯类，酰胺类，低级烷基酰胺类，二-低级烷基酰胺类，以及羟基酰胺类。优选的药物前体部分是丙酸酯类和酰基酯类。也包括在体内通过其他机制转化成活性形式的药物前体。此外，横跨碳-碳双键的立体化学的表示也与通常的化学领域相反:“Z”指的是经常被称为“顺式(cis)”(相同侧)的构象而“E”指的是经常被称为“反式(trans)”(相反侦D的构象。本发明的化合物包括这两种构型，顺式/反式和/或Z/E。关于手性中心的命名，术语“d”以及“I”构型正如国际理论与应用化学联合会(IUPAC)所定义的。关于术语非对映异构体、消旋体、差向异构体以及对映异构体，这些将在它们通常的语境中使用以便描述制品的立体化学。所谓“减少(reduces)”意味着至少10%、25%、50%、75%、或100%的负的改变。所谓“参考(reference)”意味着标准或对照状况。“参考序列(referencesequence)”是定义的作为序列比较的基础的序列。参考序列可以是规定序列的子集或者整体，例如全长cDNA或基因序列的区段、或者该完整的cDNA或基因序列。对多肽而言，参考多肽序列的长度将通常是至少约16个氨基酸，优选地是至少约20个氨基酸，更优选地是至少约25个氨基酸，并且甚至更优选地是约35个氨基酸、约50个氨基酸、或约100个氨基酸。对核酸而言，参考核酸序列的长度将通常是至少约50个核苷酸、优选地是至少约60个核苷酸、更优选地是至少约75个核苷酸、并且甚至更优选地是约100个核苷酸或约300个核苷酸或它们附近的或者它们之间的任一整数。所谓“特异性结合(specificalIybinds)”意味着一种化合物或抗体识别并且结合本发明的多肽，但是基本上并不识别并且结合天然地包括本发明的多肽的样品(例如，生物样品)中的其他分子。在本发明的方法中有用的核酸分子包括对本发明的多肽或其片段进行编码的任何核酸分子。这样的核酸分子不需要与内源性核酸序列具有100%的同一性，但是将典型地表现出基本的同一'I"生。与内源性序列具有“基本同一'丨生(substantialidentity)”的多核苷酸典型地能够与双链核酸分子的至少一条链杂交。在本发明的方法中有用的核酸分子包括对本发明的多肽或其片段进行编码的任何核酸分子。这样的核酸分子不需要与内源性核酸序列具有100%的同一性，但是将典型地表现出基本的同一性。与内源性序列具有“基本同一'I"生(substantialidentity)”的多核苷酸典型地能够与双链核酸分子的至少一条链杂交。所谓“杂交(hybridize)”意味着在不同的严格条件下进行配对以便在互补的多核苷酸序列(例如，在此描述的基因)、或其部分之间形成双链分子。(例如，参见Wahl(瓦尔)，G.M.和S.L.Berger(伯格)(1987)《酶学方法》(MethodsEnzymol.)152:399),Kimmel(基默尔),A.R.(1987)《酶学方法》(MethodsEnzymol.)152:507)。例如，严格的盐浓度通常将是小于约750mM的氯化钠和75mM的柠檬酸三钠、优选地是小于约500mM的氯化钠和50mM的柠檬酸三钠、并且更优选地是小于约250mM的氯化钠和25mM的柠檬酸三钠。在缺少有机溶剂(例如，甲酰胺)下可以获得低严格杂交，而在至少约35%的甲酰胺、并且更优选地是至少约50%的甲酰胺存在下可以获得严格杂交。严格的温度条件将通常包括至少约30°C、更优选地是至少约37°C、并且最优选地是至少约42°C的温度。不同的另外的参数，例如杂交时间、清洁剂(例如，十二烷基硫酸钠(SDS))浓度、以及载体DNA的包含或排除，对本领域的普通技术人员是熟知的。根据需要通过组合这些不同的条件实现不同的严格水平。在一个优选的实施方案中，杂交将会在30°C、在750mM的氯化钠、75mM的柠檬酸三钠、以及I%的SDS中发生。在一个更优选的实施方案中，杂交将会在37°C、在500mM的氯化钠、50mM的柠檬酸三钠、I%的SDS、35%的甲酰胺、以及100μg/ml的变性的鲑精DNA(ssDNA)中发生。在一个最优选实施方案中，杂交将会在42°C、在250mM的氯化钠、25mM的柠檬酸三钠、1%的SDS、50%的甲酰胺、以及200μg/ml的ssDNA中发生。这些条件的有用的变体对于本领域的普通技术人员将是显而易见的。对于大多数的应用，杂交之后的洗涤步骤也将会在严格度方面不同。通过盐浓度和温度可以定义洗涤严格条件。如上所述，通过降低盐浓度或增加温度可以增加洗涤严格度。例如，用于洗涤步骤的严格盐浓度将为优选地小于约30`mM的氯化钠和3mM的柠檬酸三钠、并且最优选地是小于约15mM的氯化钠和1.5mM的柠檬酸三钠。用于洗涤步骤的严格的温度条件将通常包括至少约25°C、更优选地是至少约42°C、并且甚至更优选地是至少约68°C的温度。在一个优选的实施方案中，洗涤步骤将会在25°C、在30mM的氯化钠、3mM的柠檬酸三钠、以及0.1%的SDS中发生。在一个更优选的实施方案中，洗涤步骤将会在42°C、在15mM的氯化钠、1.5mM的柠檬酸三钠、以及0.1%的SDS中发生。在一个更优选的实施方案中，洗涤步骤将会在68°C、在15mM的氯化钠、1.5mM的柠檬酸三钠、以及0.1%的SDS中发生。这些条件的另外的变体对于本领域的普通技术人员将是显而易见的。杂交技术对于本领域的普通技术人员是熟知的并且描述于例如Benton(本顿)与Davis(戴维斯)(《科学》(science)196:180，1977);Grunstein(古恩斯坦)和Hogness(霍格内斯)(《美国科学院院刊》(Proc.Natl.Acad.Sc1.，USA)72:3961,1975);Ausubel(奥苏贝尔)等人(《分子生物学实验手册》，威利出版社期刊全文数据库，纽约(CurrentProtocolsinMolecularBiology,WileyInterscience,NewYork,)2001);Berger(伯格)和Kimmel(基默尔)(《分子克隆技术指南》(GuidetoMolecularCloningTechniques),1987,学术出版社，纽约(AcademicPress,NewYork));以及Sambrook(萨姆布鲁克)等人,《分子克隆实验指南》，冷泉港实验室出版社，纽约，(MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYork)。所谓“基本上同一的(substantiallyidentical)”意味着相对于参考氨基酸序列(例如，在此描述的任一氨基酸序列)或核酸序列(例如，在此描述的任一核酸序列)，一种多肽或核酸分子表现出至少85%的同一性。优选地，相对于用于比较的序列，这样的序列在氨基酸水平或核酸上为至少85%、90%、95%、99%或甚至100%的同一。使用序列分析软件(例如，威斯康星大学生物技术中心(麦迪逊大学道1710，威斯康星州53705(1710UniversityAvenue,Madison,ffis.53705))遗传计算组的序列分析软件包，BLAST、BESTFIT、GAP、或PILEUP/PRETTYB0X程序)典型地测量序列同一性。这种软件通过将同源性程度分配给不同的取代、缺失、和/或其他修饰进行相同或相似序列的匹配。保守取代典型地包括以下组内的取代:甘氨酸、丙氨酸；缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸；天冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺；丝氨酸、苏氨酸；赖氨酸、精氨酸；以及苯丙氨酸、酪氨酸。在确定同一性程度的示例性方法中，可以使用BLAST程序，其中在e_3到e—.之间的概率分数表示密切相关的序列。所谓“减少(reduces)”或“增加(increases)”意味着相对于参考，分别地至少约10%、25%、50%、75%、或100%的负的或正的改变。所谓“均方根偏差(rootmeansquaredeviation)”是指离均差的平方的算术平均数的平方根。所谓“减少细胞存活(reducingcellsurvival)”意味着相对于参考细胞，抑制细胞的生存力或诱导细胞死亡。所谓“参考(reference)”意味着标准或对照状况。“参考序列(referencesequence)”是定义的作为序列比较的基础的序列。参考序列可以是规定序列的子集或者整体，例如全长cDNA或基因序列的区段、或者该完整的cDNA或基因序列。对多肽而言，参考多肽序列的长度将通常是至少约16个氨基酸，优选地是至少约20个氨基酸，更优选地是至少约25个氨基酸，并且甚至更优选地是约35个氨基酸、约50个氨基酸、或约100个氨基酸。对核酸而言，参考核酸序列的长度将通常是至少约50个核苷酸、优选地是至少约60个核苷酸、更优选地是至少约75个核苷酸、并且甚至更优选地是约100个核苷酸或约300个核苷酸或它们附近的或者它们之间的任一整数。所谓“受试者(subject)”意味着哺乳动物，包括但并不局限于，人或非人类的哺乳动物，例如牛、马、犬、绵羊、或猫。所谓“特异性结合(specificallybinds)”意味着一种化合物或抗体识别并且结合本发明的多肽，但是基本上并不识别并且结合天然地包括本发明的多肽的样品(例如，生物样品)中的其他分子。术语“巯基(sulfhydryl或thiol)”意味着-SH。如在此所使用的，术语“互变异构体(tautomers)”指的是通过互变异构化容易地进行相互转化的有机分子的同分异构体，其中氢原子或质子在该反应中迁移，在一些场合伴随着单键与相邻双键的转换。如在此所使用的术语“治疗(treat、treating、treatment等)”指的是减少或改善失调和/或与其相关联的症状。所谓“改善(ameliorate)”是指减少、抑制、减弱、减小、阻滞、或稳定疾病的发展或进展。将被理解的是，尽管不能排除，治疗失调或违和并不要求完全地消除该失调、违和或与其相关联的症状。如在此所使用的术语预防(prevent、preventing、prevention)“、“预防性治疗(prophylactictreatment)”等指的是减少失调或违和在受试者中的发展的可能性,该受试者没有失调或违和，但是有发展失调或违和的风险或者容易发展失调或违和。“有效量(effectiveamount)”指的是对经治疗的受试者赋予避孕效果的化合物的量。这种效果可以是客观的(即通过一些测试或标记是可测量的)或主观的(即受试者给出了作用的指征或感觉到了作用)。在此描述的化合物的有效量可以在每千克体重约Img到约5000mg的范围内。有效剂量还会根据给药途径，以及与其他药剂共同使用的可能性而改变。在本发明的实施方案中，“一个有效量(aneffectiveamount)”的试剂或组合物是足以实现避孕的量。将在此提供的范围理解为该范围内的所有值的简略表达。例如，将I至50的范围理解为包括下组的任一数、数的组合、或者下组的子范围，该组由以下各项组成:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50。除非明确声明或从上下文显而易见，如在此所使用的，术语“或(or)”被理解为包括在内。除非明确声明或从上下文显而易见，如在此所使用的，术语“一个、一种(a、an)”、和“该(the)”被理解为单数的或复数的。术语“包括(including)”在此用作意思是短语“包括但不局限于(includingbutnotlimitedto)”,并且与后者互换地使用。除非明确声明或从上下文显而易见，如在此所使用的，术语“约(about)”被理解为在本领域的正常容差范围内，例如，在平均数的2标准差之内。约可以被理解为在声明值的10%,9%,8%,7%,6%,5%,4%,3%,2%,1%>0.5%,0.1%,0.05%、或0.01%之内。除非从上下文显而易见，在此提供的所有数值被该术语约修饰。在此的变量的任何定义中的一系列化学基团的陈述包括该变量作为任何单个基团或所列出基团的组合的定义。在此针对变量或方面的实施方案的陈述包括该实施方案作为任何单个的实施方案或与任何其他实施方案或其部分的组合。在此提供的任何化合物、组合物或方法可以与在此提供的一个或多个任何其他化合物、组合物和方法进行组合。附图简要说明图1是人类BRDT(I)与人类BRD4(1)以及鼠BRDT(I)的序列比较。蛋白序列比对揭示了同源(homologous)以及直源(orthologous)结构域之间的高度序列同一'丨生。同一的(红色)以及相似的(黄色)残基被高亮。以上描绘的残基序列是主要螺旋元件的图示。(+)-JQl与BRDT(I)之间的接触用黑星来描绘。介导乙酰基-赖氨酸识别的保守的天冬酰胺用蓝星来描绘。图2A-2C显示了⑴-JQl对BRDT的抑制。图2A是活性⑴-JQl对映异构体的结构。图2B是使用邻近检测测定法显示的(+)_JQ1(IC50:11ηΜ)对BRDT结合至合成的生物素酰化的H4Kac4的竞争性抑制图。图2C包括一个显示了利用500nM的所指化合物的测定结果的图。误差棒显示标准差。图3是人类BRDT与人类BRD4的MAFFT比对。图4是人类BRDT与小鼠BRDT的MAFFT比对。图5A-5H显示了对来自用JQl或载体对照处理的小鼠的睾丸的总体分析以及组织学分析。图5A包括一张图，该图提供了对来自注射对照或JQl的9周龄小鼠的睾丸的总体分析。图5B包括来自用对照或JQl处理的、3-6周、6-9周或6-12周龄的小鼠的睾丸重量(mg)的图示。数据表示平均值土平均值的标准误(SEM)，并且用从双尾t-检验获得的P值进行注释(*表示P<0.05的显著性)。图5C-5F包括组织学染色，显示了从3-6周龄用对照(图5C)或JQl(图5D)进行处理的6周龄小鼠的睾丸的组织学，以及从6-12周龄用对照(图5E)或JQl(图5F)进行处理的12周龄小鼠的睾丸的组织学。睾丸间质细胞的管间岛在附图5C-5F中用箭头标绘。塞托利细胞(V)在图5F中的若干小管中被高亮。图5G以及5H包括组织学染色，显示了来自从6-12周龄用对照(图5G)或JQl(图5H)进行处理的雄性的附睾的组织学。与被成熟精子致密填充的对照附睾腔(图5G)相比，在JQl处理的小鼠的附睾腔(附图5H)中观察到更少精子和多个大的有核细胞(黑箭头)。图5C-5H是以相同放大倍数进行拍照。图6A以及6B显示附睾精子计数以及受精潜力。图6A是一个图示，显示了从自6-9周龄用JQl或对照进行处理的雄性的整个附睾获得的精子计数，或从自6-12周龄进行处理的雄性的附睾尾部(尾)获得的精子计数。图6B包括一个图，显示了从与用对照或JQl处理5周的雄性交配的超排卵雌性获得的卵母细胞的体外发育潜力。所有数据表示平均值土SEM，并且用从双尾t-检验获得的P值进行注释(*表示P<0.05的显著性)。图7A-7C显示了对用JQl或载体对照处理的小鼠的睾丸的分子分析。图7A包括一个图，显示了对从6-12周龄用JQl或对照溶液进行处理的雄性的定量RT-PCR结果。被测试的小鼠基因是Plzf(前髓细胞白血病锌指或Zbtbl6)、Stra8(受视黄酸基因8刺激)、Brdt(布罗莫结构域,睾丸特异性的)、Ccnal(细胞周期蛋白Al)、Histlhlt(组蛋白簇1、组蛋白1、睾丸特异性的)、Papolb(聚(A)聚合酶β或Tpap)、Klfl7(Kruppel样因子17或Zfp393)以及Prml(鱼精蛋白I)。数据表示平均值土SEM，并且用从双尾t_检验获得的P值进行注释(*表示P<0.05的显著性；Prml的P值是0.06)。图7B以及7C包括用对照处理的(图7B)以及用JQl处理的(图7C)睾丸中的TNP2的免疫组织化学染色图像。图8A-8C显示JQl对精子计数以及睾丸质量的作用。在一个重复研究中，用JQl对C57B6小鼠进行处理(50mpkX8周)。图8A包括一个显示测试小鼠中的精子计数的图。图8B包括一个显示测试小鼠中的睾丸重量的图。图SC包括来自测试小鼠的精子的相衬成像。图9A-9C显示JQl的作用在去除时被逆转。图9A包括一个图，显示了在JQl处理终止后两个月以及四个月的测试小鼠中的精子运动性水平。图9B包括一个图，显示了在JQl处理终止后两个月以及四个月的测试小鼠中的睾丸重量。图9C包括一个图，显示了在JQl处理终止后两个月以及四个月的测试小鼠中的精子计数。发明详细说明本发明至少部分地基于以下发现:表观遗传读出物蛋白的布罗莫结构域与额外末端(BET)亚家族的小分子抑制剂(JQl)对于精子发生过程中的染色质重塑是必需的。生化分析确证JQl对该BRDT乙酰基-赖氨酸结合袋的占据阻止了乙酰化组氨酸H4的识别。本发明还基于以下发现:用JQl处理小鼠减少了精子数目并降低了精子移动性，连同减小了睾丸大小。尽管JQl处理的雄性正常交配，但是JQl明显在精母细胞期的抑制作用引起受精卵母细胞剧烈减少以及雄性中的可逆避孕效果。因此，本发明是针对一种新颖类型的雄性避孕剂，该避孕剂可以跨越血液睾丸屏障并且在精子发生期间抑制布罗莫结构域活性。含有布罗莫结构域的蛋白基因调控基本上被可逆的、非共价的大分子组装控制。至RNA聚合酶的信号转导要求更高级的蛋白复合体，该复合体被能够解释染色质的翻译后修饰状态的组装因子在空间上调控。表观遗传读出物是结构上不同的蛋白，各自具有一个或多个进化上保守的效应物模块，该效应物模块识别组蛋白或DNA的共价修饰。组蛋白尾上的赖氨酸残基的ε-N-乙酰化(Kac)与开放的染色质构造以及转录激活相关联3。乙酰基-赖氨酸的背景特异的分子识别主要由布罗莫结构域介导。作为转录因子复合体(TAF1、PCAF、Gcn5以及CBP)的组分以及表观遗传记忆的决定子4，含有布罗莫结构域的蛋白有重要的生物学意义。有含有总共57种不同的布罗莫结构域的41种人类蛋白。尽管大量序列不同，但所有的布罗莫结构域共享一个保守的折叠，该折叠包括由确定底物特异性的不同环区(ZA与BC环)连接的四个α螺旋(αΖ、αΑ、αΒ、aC)的一个左旋束。具有肽底物的共晶体结构表明乙酰基-赖氨酸被一个中心疏水腔识别并且通过与存在于大多数布罗莫结构域中的天冬酰胺残基的氢键得以锚定5。布罗莫结构域和额外末端(BET)家族(BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT)共享一种共同结构域构造以及一种更趋异的C端募集结构域，该共同结构域构造包括表现高水平的序列保守性的两个N端布罗莫结构域6。本发明特征在于用于抑制人类布罗莫结构域蛋白的组合物和方法。本发明的化合物本发明提供了多种化合物(例如，JQl和具有在此描述的化学式的化合物)，这些化合物结合在BET家族成员(例如BRDT、BRD2、BRD3、BRD4)的第一布罗莫结构域的apo晶体结构的结合袋中。不希望受理论限制，这些化合物特别有效于降低雄性生育力。在一个方法中，使用分子对接程序对有用于降低雄性生育力的化合物进行选择以鉴别有望结合至布罗莫结构域结构结合袋的化合物。在某些实施方案中，本发明的化合物可以阻止、抑制、或破坏、或减少BET家族成员(例如，BRD2、BRD3、BRD4、BRDT)的至少10%,25%,50%,75%,或100%的生物活性，和/或例如通过结合到布罗莫结构域apo结合袋内的结合位点破坏这类蛋白的亚细胞定位。在某些实施方案中，本发明的化合物是小分子，其分子量小于约1000道尔顿、小于800、小于600、小于500、小于400、或小于约300道尔顿。本发明的化合物的实例包括JQl和其他化合物，这些化合物结合到BET家族成员(例如，BRD4(下文指BRD4(I)；PDBID20SS))的第一布罗莫结构域的apo晶体结构的结合袋。JQl是一种新型的噻吩并-三唑并-1，4-二氮杂环庚烷。本发明进一步提供了这些化合物的药学上可接受的盐。在一个方面，该化合物是具有化学式I的化合物:权利要求1.一种减少或抑制雄性受试者中的精子发生的方法，该方法包括给予该雄性受试者一个有效量的抑制布罗莫结构域睾丸特异性蛋白(BRDT)的一种化合物或它的一种盐。2.一种减少受试者中的雄性生育率的方法，该方法包括给予该雄性受试者一个有效量的抑制BRDT的一种化合物或它的一种盐。3.如权利要求1或2所述方法，其中该方法包括以一个足以减少精子数目和/或减少精子活动性的量给予该化合物或它的一种盐。4.如权利要求1或2所述方法，其中该方法包括以一个足以引起无精子症、少精子症和/或弱精子症的量给予该化合物或它的一种盐。5.如权利要求4所述的方法，其中该方法在该受试者中诱导避孕效果。6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中该化合物或它的一种盐是口服、经皮或通过注射给予该受试者。7.如权利要求6所述的方法，其中该化合物或它的一种盐是以一种片剂或胶囊形式给予。8.如权利要求6所述的方法，其中该化合物或它的一种盐是通过肠胃外注射、肌内注射、静脉内注射、皮下植入、皮下注射或经皮制剂来给予。9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中该化合物或它的一种盐是与一种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂组合给予。10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中该化合物是JQl或具有化学式1-XXII中任一个的一种化合物，或在此披露的任何化合物，或它的一种衍生物或盐。11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中该受试者是人类。12.一种药用组合物，该组合物以一个有效减少或抑制雄性受试者中的精子发生的量包括一种抑制BRDT的化合物或它的一种药学上可接受的盐或药物前体。13.如权利要求12所述药用组合物，其中该药用组合物包括一个足以减少精子数目和/或抑制精子活动性的量的该化合物或它的一种盐。14.如权利要求12所述药用组合物，其中该药用组合物包括一个足以引起无精子症、少精子症和/或弱精子症的量的该化合物或它的一种盐。15.如权利要求14所述药用组合物，其中该药用组合物包括一个足以在该受试者中诱导避孕效果的量的该化合物或它的一种盐。16.如权利要求12-15中任一项所述的药用组合物，其中该化合物或它的一种盐是口服、经皮或通过注射给予该受试者。17.如权利要求16所述的药用组合物，其中该化合物或它的一种盐是以一种片剂或胶囊形式。18.如权利要求16所述的药用组合物，其中该药用组合物是通过肠胃外注射、肌内注射、静脉内注射、皮下植入、皮下注射或经皮制剂来给予。19.如权利要求12-18中任一项所述的药用组合物，其中该药用组合物进一步地包括一种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。20.如权利要求12-19中任一项所述的药用组合物，其中该药用组合物是JQl或具有化学式1-XXII中任一个的一种化合物，或在此披露的任何化合物，或它的一种衍生物或盐。21.如权利要求12-20中任一项所述的药用组合物，其中该受试者是人类。22.一种用于减少雄性生育率的试剂盒，该试剂盒包括一个有效量的抑制BRDT的一种化合物或它的一种药学上可接受的盐或药物前体。23.如权利要求22所述的试剂盒，其中该试剂盒进一步包括用于在如权利要求1-11中任一项所述的方法中使用该抑制剂的说明。·全文摘要本发明涉及用于实现雄性避孕的组合物和方法。文档编号C07D471/00GK103180318SQ201180033583公开日2013年6月26日申请日期2011年5月16日优先权日2010年5月14日发明者J·E·布拉德纳,M·玛祖克,祁军申请人:达那-法伯癌症研究所,贝勒医学院