专利名称：微波辅助技术提取蟛蜞菊内脂的方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离提纯领域，涉及一种蟛蜞菊内酯的提取方法，特别是一种微波辅助技术提取蟛蜞菊内酯。
背景技术：
墨旱莲(Herba Ecliptae)为菊科鳢肠属植物鳢肠的干燥地上部分，因为搓揉它的茎叶时，可见黑色的汁液流出，所以叫“墨旱莲”，为常用中药之一，具有滋肝补肾、凉血止血之功能。用于牙齿松动、须发早白、眩晕耳鸣、腰膝酸、阴虚血热、吐血、外伤出血等。墨旱莲主要药理活性成分是其中所含的香豆素醚成分蟛蜞菊内酯，据文献报道蟛蜞菊内酯具有保肝和促进肝细胞再生等作用。
蟛蜞菊内酯灰白色无定形粉末，熔点315°C，分子式C6HltlO7,结构式如下
16 g
、 I .2 10
OH O~
1 13 0H从植物中提取、分离蟛蜞菊内酯的方法，大多以醴肠地上干燥部分粉碎，有机溶剂室温或加热提取，减压浓缩，不同极性有机溶剂萃取，在中弱极性部位色谱法分离、提纯得蟛蜞菊内酯。传统方法提取天然产物中的化学成分是一件耗时耗能又费溶剂的工作。目前传统的提取方法有溶剂提取法和水蒸气蒸馏法均存在被提取成分损失大，周期长，提取率低等缺点，已不适应时代发展的需要，特别是在中草药有效成分提取过程中已暴露出许多缺点。微波萃取技术又称微波辅助提取(Microwave-assisted Extraction, MAE),是指使用合适的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物、动物组织中提取各种化学成分的技术和方法。1986年，Ganzler等人首先报道了微波用于天然产物成分的提取。微波萃取技术作为一种新型的萃取技术与传统，有其独特的作用方式，微波对细胞的破碎有很大的作用，细胞壁破坏以后，传质阻力减小，目标产物比较容易进入到萃取剂中，并依据相似相容的原理而溶解，达到萃取的目的。与传统的水蒸汽蒸馏、索氏抽提及超声萃取等技术相比，微波萃取技术可以缩短实验和生产时间、降低能耗、减少溶剂用量以及废物的产生，同时可以提高提取物收率和纯度；其优越性不仅在于降低了实验操作费用和生产成本，更重要的是这种技术更加符合“绿色”环保的要求。运用微波萃取技术提取天然药物的化学成分具有很高的实用价值，有待开展多方面的深入研究。在传统的萃取过程中，能量首先无规则地传递给萃取剂，然后萃取剂扩散进入基体物质，再从基体溶解或夹带多种成分扩散出来，即遵循加热一渗透进基体一溶解或夹带一渗透出来的模式。微波萃取法则是利用微波能来提高萃取效率的一种新技术。不同物质的介电常数不同，其吸收微波能的程度不同，由此产生的热能及传递给周围环境的热能也不相同。在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到介电常数较小、微波吸收能力相对较差的萃取剂中。现有专利中蟛蜞菊内酯的制备主要是采用化学合成的方法，该方法存在着合成成本高，生产过程复杂的缺陷，发明专利公开号为CN102020655A提供一种天然提取蟛蜞菊内酯的方法，此方法采用含硼砂的碱水超声提取，提取液上大孔树脂，收集下柱液加酸调节至一定的Ph值，再上大孔树脂水洗至糖反应阴性，用低碳醇洗脱，乙酸乙酯萃取，甲醇重结晶。与此专利相比本发明的特征在于微波辅助提取蟛蜞菊内酯，提取时间短，速度快，安全可靠，无污染，属绿色工程，硅胶柱层析较大孔吸附树脂法提纯蟛蜞菊内酯，操作简单，产品收率和纯度高
发明内容
本发明的目的是提供一种高效提取蟛蜞菊内酯的方法。该方法操作简单，可以缩短提取时间、减少溶剂用量、降低能耗，同时可以提高提取物收率和纯度，此技术符合“绿色”环保的要求，具有工业化的意义。本发明的操作步骤是这样实现的将墨旱莲全草粉碎，加入有机萃取剂，固液比1:5 I :20，此处两者是按kg: I计量，微波提取I 2次，每次的提取时间为3min 9min，提取液过滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压蒸发回收有机溶剂，得黑绿色浸膏。加入黑绿色浸膏的2 5倍体积的水，于70°C 80°C微波发生器中加热Imin 3min,趁热过滤,滤液依次用石油醚除去叶绿素等脂溶性成分，乙酸乙酯萃取2 3次，合并萃取液加入无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，每次取该浸膏1:6 1:3上硅胶柱，用乙酸乙酯一甲醇体积比20:1至10:1极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯一甲醇体积比16:1时得灰白色固体，再用甲醇重结晶2 3次即得产品。其提取操作流程图如图I所示。所述的有机萃取剂是体积分数70% 80%低碳醇。所述的微波发生器为多模箱式微波发生器。所述的微波提取功率控制在80W 150W。所述的梯度洗脱速率为lmL/min。本发明的微波辅助提取蟛蜞菊内酯具有以下优点I.选择性好，极性分子可以获得较多的微波能，使蟛蜞菊内酯的收率和纯度提高。2.微波萃取与传统的回流提取、索氏抽提及超声萃取等技术相比，缩短萃取时间、减少溶剂用量、降低能耗，同时可以提高蟛蜞菊内酯收率和纯度。3.蟛蜞菊内酯质量好，可以避免长时间高温引起的样品分解，从而有利于得到纯净的蟛蜞菊内酯。4.乙酸乙酯一甲醇梯度洗脱，缩短分析周期，提高分离能力，得到更加纯净的蟛蜞菊内酯。
5.硅胶柱层析较大孔吸附树脂法提纯蟛蜞菊内酯，操作简单，产品收率和纯度高；甲醇重结晶，提高产物纯度，能耗少，操作方便，工业应用广泛。
图I :蟛蜞菊内酯提取操作流程图。
具体实施例以下为本发明的具体实施方式
，所述实施例是为进一步描述本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I取墨旱莲全草Ikg粉碎，加入体积分数为70%甲醇，固液比I: 5，此处两者是按kg: I计量(固液比I :5 I :8同样适合)，微波提取I次，每次的提取时间为3min，提取液过滤，用旋转蒸发仪蒸发增浓回收甲醇，温度控制在45°C，得黑绿色浸膏。加入黑绿色浸膏的3倍体积的水，于70°C微波发生器中加热2min，趁热过滤，滤液依次用石油醚除去叶绿素等脂溶性成分，用2L乙酸乙酯萃取2次，无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，每次取该浸膏1:4上硅胶柱，柱体积为1.5L，径高比为I :9，用乙酸乙酯一甲醇体积比20:1至10:1极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯一甲醇体积比16:1时得灰白色固体，用甲醇重结晶2次即得产品I. 61g，含量93. 1%。实施例2取墨旱莲全草Ikg粉碎，加入体积分数为75%乙醇，固液比1:10，此处两者是按kg: I计量(固液比I :9 I :13同样适合)，微波提取2次，每次的提取时间为6min，提取液过滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压增浓回收甲醇，温度控制在60°C，得黑绿色浸膏。加入黑绿色浸膏的2倍体积的水，于75°C微波发生器中加热3min，趁热过滤，滤液依次用石油醚除去叶绿素等脂溶性成分，用I. 8L乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，每次取该浸膏1:3上硅胶柱，柱体积为1.5L，径高比为I :6，用乙酸乙酯一甲醇体积比20:1至10:1极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯一甲醇体积比16:1时得灰白色固体，用甲醇重结晶3次即得产品I. 73g，含量95. 6%。实施例3取墨旱莲全草IOkg粉碎，加入体积分数为75%甲醇，固液比1:16，此处两者是按kg: I计量(固液比I :14 I :17同样适合)，微波提取2次，每次的提取时间为9min，提取液过滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压增浓回收甲醇，温度控制在55°C，得黑绿色浸膏。加入黑绿色浸膏的3倍体积的水，于75°C微波发生器中加热2min，趁热过滤，滤液依次用石油醚除去叶绿素等脂溶性成分，用16L乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，每次取该浸膏1:5上硅胶柱，柱体积为15L，径高比为I :9，用乙酸乙酯一甲醇体积比20:1至10:1极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯一甲醇体积比16:1时得灰白色固体，用甲醇重结晶2次即得产品16. 4g，含量92. 3%。实施例4、取墨旱莲全草IOkg粉碎，加入体积分数为80%乙醇，固液比1:20，此处两者是按kg: I计量(固液比I :18 I :20同样适合)，微波提取3次，每次的提取时间为6min，提取液过滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压增浓回收甲醇，温度控制在55°C，得黑绿色浸膏。加入黑绿色浸膏的4倍体积的水，于80°C微波发生器中加热2min，趁热过滤，滤液依次用石油醚除去叶绿素等脂溶性成分，用18L乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，每次取该浸膏1:6上硅胶柱，柱体积为15L，径高比为I :6，用乙酸乙酯一甲醇体积比20:1至10:1极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯一甲醇体积比16:1时得灰白色固体，用甲醇重结晶3次即得产品17. 8g，含量94. 7%。·
权利要求
1.一种微波辅助技术提取蟛蜞菊内酯的方法，其特征是将墨旱莲全草粉碎，加入有机萃取剂，固液比1:5 1:20，此处两者是按kg: I计量，微波提取I 2次，每次的提取时间为3min 9min，提取液过滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压蒸发回收有机萃取剂，得黑绿色浸膏；加入黑绿色浸膏的2 5倍体积的水，于70°C 80°C微波反应器中加热Imin 3min,趁热过滤，滤液依次用石油醚除去叶绿素等脂溶性成份，乙酸乙酯萃取2 3次，合并萃取液加入无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，每次取该浸膏1:6 1:3上硅胶柱，用乙酸乙酯一甲醇体积比20:1至10:1极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯一甲醇体积比16:1时得灰白色固体，再用甲醇重结晶2 3次即得产品。
2.如权利要求I所述的一种微波辅助技术提取蟛蜞菊内酯的方法，其特征在于所述的有机萃取剂是体积分数70% 80%低碳醇。
3.如权利要求I所述的一种微波辅助技术提取蟛蜞菊内酯的方法，其特征在于所述的微波发生器为多模箱式微波发生器。
4.如权利要求I所述的一种微波辅助技术提取蟛蜞菊内酯的方法，其特征在于所述的微波提取功率控制在80W 150W。
5.如权利要求I所述的一种微波辅助技术提取蟛蜞菊内酯的方法，其特征在于梯度洗脱速率为lmL/min。
全文摘要
本发明涉及一种微波辅助提取蟛蜞菊内酯的方法，将墨旱莲全草粉碎，加入有机萃取剂,微波提取2～3次，提取液过滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压蒸发回收有机萃取剂，得黑绿色浸膏。加入2～5倍体积的水，于70℃～80℃微波反应器中加热一段时间后，趁热过滤，滤液依次加入石油醚除去叶绿素等脂溶性成分，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠脱水，减压浓缩得黄绿色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用乙酸乙酯—甲醇极性由小到大梯度洗脱，于乙酸乙酯—甲醇体积比适量时得灰白色固体，用甲醇重结晶2～4次即得产品。微波萃取技术可以缩短时间、减少溶剂用量、降低能耗,同时可以提高提取物收率和纯度，此技术符合“绿色”环保的要求，具有工业化的意义。
文档编号C07D493/04GK102775420SQ201210256560
公开日2012年11月14日 申请日期2012年7月23日 优先权日2012年7月23日
发明者丁辉, 史大静 申请人:天津大学