一种水溶性鱼酱氨基酸改性大豆甾醇的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明公开了一种水溶性鱼酱氨基酸改性大豆留醇的制备方法，属于留醇制造领域。
【背景技术】
[0002]留醇，是从玉米、大豆中经过物理提纯而得，具有营养价值高、生理活性强等特点。植物留醇可通过降低胆固醇减少心血管病的风险。其广泛应用在食品、医药、化妆品、动物生长剂及纸张加工、印刷、纺织等领域，特别是在欧洲作为食品添加剂非常普遍。植物甾醇主要存在于植物油脂部分中，可以利用原料组成及理化特性方面的差异，提取植物留醇类物质。常见的提取方法有:溶剂结晶法、皂化法、络合法、酶法、超临界co2萃取法、微波辅助提取法及超声辅助提取法等。
[0003]植物留醇具有降低胆固醇、消炎、退热、抗溃疡、抗肿瘤及抑菌等作用。植物留醇是一种结构和生化特性与胆固醇相似的留醇类物质。这种“类脂肪”广泛存在于植物的根、茎、叶和果实中，在人体内不能合成，唯一的途径是通过膳食摄取。其广泛应用于医学、工业、日化、农业，是一种多用途纯天然的物质。
[0004]目前留醇及其衍生物在食品中的应用多集中于食用油、黄油、人造奶油、肉制品等脂溶性食品中，主要是由于植物留醇具有一定的油溶性，并且绝大多数植物留醇衍生物改善的是植物留醇的亲油性，而植物留醇的水不溶性，导致其在水基质食品，应用还受到很大限制，因此，改善植物留醇的水溶性非常必要。
【发明内容】
[0005]本发明主要解决的技术问题:针对目前植物留醇的水不溶性和低油溶性，导致其在水基质食品，应用还受到很大限制，而且化学改性催化剂毒性较大，对环境污染大，反应温度高，反应副产物多的问题，提供了一种水溶性鱼酱氨基酸改性大豆留醇的制备方法，本发明从大豆中用微波法提取留醇，并制得催化剂，将留醇和琥珀酸酐进行酯化反应，再用富含氨基酸的鱼子酱进行酯化产物进行改性，即可得到水溶性好的留醇，本发明的改性大豆甾醇由于含有亲水性基团而改善了原本豆留醇的水不溶性，可以应用在水基质的食品中，而且改性反应中加入的催化剂绿色无污染，反应副产物少，制备成本低廉。
[0006]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:
1.(1)取300?500g大豆油加工脱臭馏出物，按固液比为3:1向流出物中加入甲醋化试剂，放入微波提取仪中，以600W的功率在0.2?0.3MPa的压力下微波辅助甲醋化反应2?3min后，放入冰箱中，设置温度为4?6°C，冰析结晶5?6h后过滤得粗大豆甾醇；
2.(2)称取30?35g上述制得的粗大豆甾醇连同100?150mL环己酮一起倒入250mL烧杯中，移入水浴锅中加热至55?65°C，放置在高速搅拌机上，以800?900r/min的转速搅拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷却至室温并过得到滤饼，再将滤饼按上述步骤反复操作3?5次后放入烘箱中干燥至恒重，备用； 3.(3)取3?5g十二烷基硫酸钠放入研钵中，加入其体积2?3倍的浓度为0.0lmol/L的盐酸溶液，在通风橱中研磨3?5min后放入马弗炉，在300?400°C下煅烧1?2h制得十二烷基硫酸催化剂；
4.(4)取30?50g雷山鱼酱放入500mL烧杯中，加入200?300mL温度为40?50 °C的蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀后放入超声振荡仪中，以200?300W的功率超声振荡30?40min后放入螺旋离心机中，以7000?8000r/min的转速离心处理10?20min分离去除滤渣得上清液；
5.(5)将备用的滤饼和琥珀酸酐按摩尔比为1:1.5进行混合后溶于两者总质量2?3倍的甲苯中，移入油浴锅中加热至110?120°C，保温反应10?20h，将反应液过硅胶柱层析得到大豆留醇琥珀酸单酯；
6.(6)将400?500mL体积比为2:1的二氯甲烷和乙腈混合液装入具塞锥形瓶中，再加入2?5g制得的十二烷基硫酸催化剂，移入冰水浴中，在2?4°C下加入40?50g大豆甾醇琥珀酸单酯，用玻璃棒缓慢搅拌并在搅拌状态下分3?5次滴入30?50mL离心分离得到的上清液，控制滴加速度使其30?35min内滴加完毕，继续搅拌5?lOmin后，过滤去除滤渣将滤液放入旋转蒸发器中，升温至85?95°C，旋蒸去除溶剂后即得一种水溶性鱼酱氨基酸改性大豆甾醇。
[0007]所述的甲醋化试剂是由无水乙醇和甲苯按摩尔比为1:1混合后制得。
[0008]本发明的应用方法:取20?30mL本发明制得的改性大豆甾醇在500ml容器中，再加入5?10mL花生油、3?5mL辛癸酸甘油酯，混合搅拌加热至100?120°C，形成的透明溶液为油相，再将其倒入在1L的反应容器中，并向其中加入100?150mL去离子水，加热至80?82°C，以5000?6000r/min转速下搅拌15?25min，搅拌后所得乳液用高压均质机以4000?4500psi的压力处理1?3次，处理后将乳液降温至20?25°C，之后按水性饮料总重量的0.6?1%添加到饮料中，即可制得植大豆留醇的水性饮料。
[0009]本发明的有益效果是:
(1)本发明的改性大豆留醇改善了原本豆留醇的水不溶性，可以应用在水基质的食品中；
(2)本发明加入的催化剂绿色无污染，反应副产物少，制备成本低廉。
【具体实施方式】
[0010]首先取300?500g大豆油加工脱臭馏出物，按固液比为3:1向流出物中加入甲醋化试剂，放入微波提取仪中，以600W的功率在0.2?0.3MPa的压力下微波辅助甲醋化反应2?3min后，放入冰箱中，设置温度为4?6°C，冰析结晶5?6h后过滤得粗大豆留醇；称取30?35g上述制得的粗大豆留醇连同100?150mL环己酮一起倒入250mL烧杯中，移入水浴锅中加热至55?65°C，放置在高速搅拌机上，以800?900r/min的转速搅拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷却至室温并过得到滤饼，再将滤饼按上述步骤反复操作3?5次后放入烘箱中干燥至恒重，备用；取3?5g十二烷基硫酸钠放入研钵中，加入其体积2?3倍的浓度为0.01mol/L的盐酸溶液，在通风橱中研磨3?5min后放入马弗炉，在300?400 °C下煅烧1?2h制得十二烷基硫酸催化剂；取30?50g雷山鱼酱放入500mL烧杯中，加入200?300mL温度为40?50°C的蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀后放入超声振荡仪中，以200?300W的功率超声振荡30?40min后放入螺旋离心机中，以7000?8000r/min的转速离心处理10?20min分离去除滤渣得上清液；将备用的滤饼和琥珀酸酐按摩尔比为1:1.5进行混合后溶于两者总质量2?3倍的甲苯中，移入油浴锅中加热至110?120°C，保温反应10?20h，将反应液过硅胶柱层析得到大豆留醇琥珀酸单酯；将400?500mL体积比为2:1的二氯甲烷和乙腈混合液装入具塞锥形瓶中，再加入2?5g制得的十二烷基硫酸催化剂，移入冰水浴中，在2?4°C下加入40?50g大豆留醇琥珀酸单酯，用玻璃棒缓慢搅拌并在搅拌状态下分3?5次滴入30?50mL离心分离得到的上清液，控制滴加速度使其30?35min内滴加完毕，继续搅拌5?lOmin后，过滤去除滤渣将滤液放入旋转蒸发器中，升温至85?95°C，旋蒸去除溶剂后即得一种水溶性鱼酱氨基酸改性大豆甾醇。
[0011]所述的甲醋化试剂是由无水乙醇和甲苯按摩尔比为1:1混合后制得。
[0012]实例1
11.首先取300g大豆油加工脱臭馏出物，按固液比为3:1向流出物中加入甲醋化试剂，放入微波提取仪中，以600W的功率在0.2MPa的压力下微波辅助甲醋化反应2min后，放入冰箱中，设置温度为4°C，冰析结晶5h后过滤得粗大豆留醇；称取30g上述制得的粗大豆甾醇连同lOOmL环己酮一起倒入250mL烧杯中，移入水浴锅中加热至55°C，放置在高速搅拌机上，以800r/min的转速搅拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷却至室温并过得到滤饼，再将滤饼按上述步骤反复操作3次后放入烘箱中干燥至恒重，备用；取3g十二烷基硫酸钠放入研钵中，加入其体积2倍的浓度为0.01mol/L的盐酸溶液，在通风橱中研磨3min后放入马弗炉，在300°C下煅烧lh制得十二烷基硫酸催化剂；取30g雷山鱼酱放入500mL烧杯中，加入200mL温度为40°C的蒸馏水，用玻璃棒搅拌均匀后放入超声振荡仪中，以200W的功率超声振荡30min后放入螺旋离心机中，以7000r/min的转速离心处理lOmin分离去除滤渣得上清液；将备用的滤饼和琥珀酸酐按摩尔比为1:1.5进行混合后溶于两者总质量2倍的甲苯中，移入油浴锅中加热至110°C，保温反应10h，将反应液过硅胶柱层析得到大豆甾醇琥珀酸单酯d_400mL体积比为2:1的二氯甲烷和乙腈混合液装入具塞锥形瓶中，再加入2g制得的十二烷基硫酸催化剂，移入冰水浴中，在2°C下