模拟移动床色谱拆分匹诺塞林对映体的方法
【专利摘要】本发明公开了一种模拟移动床色谱拆分匹诺塞林对映异构体的方法。本发明的特征是：采用模拟移动床色谱系统，填料为直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，流动相为甲醇，在正相条件下拆分匹诺塞林对映异构体得到高纯度的R-匹诺塞林和S-匹诺塞林。模拟移动床色谱系统是连续化生产，自动化程度高，生产效率高。
【专利说明】模拟移动床色谱拆分匹诺塞林对映体的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种手性药物的拆分技术，特别是匹诺塞林的模拟移动床色谱分离方法。
【背景技术】
[0002]匹诺塞林(pinocembrin),化学名称为2，3_ 二氧-5, 7_ 二羟基-2-苯基-4H-1-苯并批喃 _4_ 酮(2，3_d ihydro-5, 7-d ihydroxy-2-phenyl-4H-l-benzopyran-4_one),最初是从蜂胶中得到的一种具有多种生物活性的黄烷酮类化合物。在药理筛选的过程中首次发现消旋的匹诺塞林对急性脑缺血大鼠的神经血管单元(NVU)具有显著的保护活性，可明显降低脑水肿百分率和脑梗塞体积，改善神经行为学特征，有治疗急性脑缺血的作用，具有良好的开发前景。匹诺塞林的分子结构中含有I个手性中心，存在I对光学异构体，天然立体构型为S构型，在植物中含量很低，而对于R构型匹诺塞林的生物活性未见报道，因此，有必要对其消旋体进行拆分。
[0003]近年来，模拟移动床色谱技术已在药物分离方面取得了快速发展，特别是在手性药物的拆分方面显示出独特的优势，目前，使用模拟移动床色谱分离匹诺塞林对映体的方法迄今仍未见公开报道。本方法采用模拟移动床色谱拆分匹诺塞林对映体具有高效、节约成本，并能实现连续分离等特点。
[0004]
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种匹诺塞林对映体模拟移动床拆分的方法。
[0006]本发明为实现上述发明目的采用的技术方案如下:一种匹诺塞林对映体的模拟移动床的拆分方法，其特征在于用涂敷型直链淀粉-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)为固定相，用甲醇流动相，用模拟移动床系统从匹诺塞林外消旋物中拆分出高纯度的R-匹诺塞林和S-匹诺塞林，包括以下步骤:
(1)、将匹诺塞林外消旋体溶于甲醇中，浓度为:(T50g/L；
(2)、用模拟移动床拆分匹诺塞林外消旋体；
(3)、浓缩、重结晶得到高纯度的两种匹诺塞林对映体。
[0007]本发明具有以下技术效果:本发明采用模拟移动床系统，从匹诺塞林的外消旋体中拆分出具有光学纯度的匹诺塞林对映体，工艺简单，生产连续自动化，产品质量稳定，溶剂采用正己烷与醇类有机改性剂的混合物，可回收利用，无污染，实现清洁生产。
【具体实施方式】
[0008]1、设备及条件选择
采用模拟移动床色谱系统，该系统包括洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、电磁阀、单向阀、控温器和PLC系统控制器及计算机组成。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口和洗脱液入口注入系统，匹诺塞林的两个对映体分别从提余液和提取液两个出口中流出，每隔一定的时间样品液和洗脱液入口，提取液和提余液出口沿流动相流动的方向切换至下一支色谱柱。
[0009]2、色谱柱填料及流动相(溶剂)选择
以涂覆型直链淀粉-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)为手性固定相，填料粒度为fl50um，微粒越小，粒径分布越窄，越有利于分离；但粒径越小系统压力越大，最适宜的粒径范围是20~40um ；
流动相(溶剂)为甲醇。 [0010]3、分离步骤
A、样品用甲醇溶解，浓度为(T50g/L，色谱系统由4~12根制备柱组成，分为4个区，色谱柱数目越多分离越好，但系统的复杂度及系统压力越高，最适合的是41根，通过模拟移动床色谱系统的控制器，定期控制电磁阀的开闭，使进样口、萃取液出口及残余液出口沿流动相的方向定期变换，使匹诺塞林的两个对映体从提取液和提余液两个出口流出系统；
B、得到的产品溶液，经过浓缩、重结晶得到纯度在96%以上的合格产品；
C、成品检验 流动相:甲醇 流速:lmL/min
泵:江苏汉邦科技分析泵
色谱柱:Chiralpak AD-RH 柱(4.6*250mm)
检测器:江苏汉邦科技紫外检测器 检测波长:290nm
下面结合实例进一步说明本发明:
分离实例一
1、样品的配制:样品用甲醇溶解，制成浓度为5g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；
2、模拟移动床参数的选择:确定参数如下:进样流速0.3mL/min,洗脱流速2.0mL/min,提取液流速1.2mL/min，提余液流速1.lmL/min，切换时间13min，温度控制在20_30°C ；
3、产品收集:待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；
4、成品检验:得到的产品用流动相溶解后，用分析条件检测两出口产品R-匹诺塞林和S-匹诺塞林的纯度分别为97.3%和98.1% ；
每公斤固定相每天可生产R-匹诺塞林和S-匹诺塞林各0.55kg，流动相消耗为21.5L/kg,回收率为96.4%。
[0011]分离实例二
1、样品的配制:样品用甲醇溶解，制成浓度为10g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；
2、模拟移动床参数的选择:确定参数如下:进样流速0.6mL/min,洗脱流速4.2mL/min,提取液流速2.6mL/min，提余液流速2.2mL/min，切换时间12min，温度控制在20_30°C ；
3、产品收集:待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；
4、成品检验:得到的产品用流动相溶解后，用分析条件检测两出口产品R-匹诺塞林和S-匹诺塞林的纯度分别为97.3%和97.9% ；
每公斤固定相每天可生产R-匹诺塞林和S-匹诺塞林各1.26kg，流动相消耗为67.5L/kg，回收率为96.8%。
[0012]分离实例三
1、样品的配制:样品用甲醇溶解，制成浓度为20g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；
2、模拟移动床参数的选择:确定参数如下:进样流速1.2mL/min,洗脱流速6.8mL/min,提取液流速4.2mL/min，提余液流速3.8mL/min，切换时间llmin，温度控制在20_30°C ；
3、产品收集:待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；
4、成品检验:得到的产品用流动相溶解后，用分析条件检测两出口产品R-匹诺塞林和S-匹诺塞林的纯度分别为97.3%和98.3% ；
每公斤固定相每天可生产R-匹诺塞林和S-匹诺塞林各2.32kg，流动相消耗为95.5L/kg，回收率为96.6%ο
[0013]上述实施实例用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明做出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。
[0014]
【权利要求】
1.一种匹诺塞林对映体的模拟移动床色谱拆分方法，其特征在于:采用模拟移动床色谱(简称SMBC)分离系统，系统中的洗脱泵流量O~100mL/min，压力O~lOMpa，进样泵流量O~50mL/min,压力O~IOMpa,萃取泵流量O~100mL/min,压力O~IOMpa,工作温度20~35°C，色谱柱填料为直链淀粉-三(3，5- 二甲基苯基氨基甲酸酯)，填料粒度20~40um，流动相为甲醇，该方法的分离步骤如下: A、匹诺塞林外消旋体用甲醇溶解，浓度为O~50g/L，由进样泵进入色谱系统，色谱系统由4~12根制备柱组成，分成四个区，每区有I~3支柱子，其中I区位于洗脱液入口与提取液出口之间，在此区实现S-匹诺塞林的解吸；II区位于提取液出口与进样口之间，在此区使S-匹诺塞林反复吸附、解吸、浓缩；111区位于进样口与提余液出口之间在此区得到R-匹诺塞林；IV区位于提余液出口与洗脱液入口之间，一方面III区的洗脱液进入到该区可循环利用，另一方面将III区与I区隔开，防止提余液中的R-匹诺塞林进入到I区； B、得到两个对映体产品，经过浓缩重结晶，得到纯度为95%以上的合格产品。
2.根据权利要求1所述的匹诺塞林的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于所述的流动相为甲醇。
3.根据权利要求1所述的匹诺塞林的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于进入模拟移动床系统的浓度为O~50g/L，进样流速为O~50mL/min，洗脱液流速为O~100mL/min，萃取液流速为O~100mL/min,提余液流速为O~100mL/min。
4.根据权利要求1所述的匹诺塞林的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于所述的定期切换电磁阀的时间为:5~20min。
5.根据权利要求1所述的匹诺塞林的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于所述的模拟移动床色谱系统的操作温度`为20~30°C。
【文档编号】C07D311/32GK103788049SQ201210431001
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2012年11月2日 优先权日:2012年11月2日
【发明者】张大兵, 张宁, 刘玉明, 罗军侠, 王亚辉 申请人:江苏汉邦科技有限公司