一种胸腺法新的纯化方法
【专利摘要】本发明涉及一种胸腺法新的纯化方法，其特征包括以下步骤：步骤1，将胸腺法新粗品用水溶解，调节pH3-5；步骤2，按体积分数设置梯度，使用流动相A冲洗聚合物反相色谱柱；步骤3，将步骤1溶液载入聚合物反相色谱柱中；步骤4，按体积分数设置梯度，洗脱梯度的初始状态流动相B为5%，保持2分钟，然后在5分钟内将流动相B比例增至25%，然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。分部收集洗脱馏分；步骤5，将洗脱馏分经过干燥得到纯品胸腺法新。
【专利说明】一种胸腺法新的纯化方法
【技术领域】:
[0001]本发明涉及一种多肽类药物的纯化方法，特别涉及一种胸腺法新的纯化方法。
【背景技术】:
[0002]胸腺法新,英名为:Thymalfasin,为线性多肽,结构式如下:
[0003]
【权利要求】
1.一种纯化胸腺法新的方法，该方法采用聚合物反相色谱法，可使成品胸腺法新中的杂质D-Asn28-胸腺法新含量降低到0.3%以下，其特征在于，所述方法包括以下步骤: 步骤1，将胸腺法新粗品用水溶解，调节PH3-4 ； 步骤2，按体积分数设置梯度，使用流动相A冲洗聚合物反相色谱柱；步骤3，将步骤I溶液载入聚合物反相色谱柱中； 步骤4，按体积分数设置梯度，洗脱梯度的初始状态流动相B为5%，保持2分钟，然后在5分钟内将流动相B比例增至25%，然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。分部收集洗脱馏分； 步骤5，将洗脱馏分经过干燥得到纯品胸腺法新； 其中色谱条件为: 色谱柱采用聚合物反相填料柱(UniPS?10-100，50mmX 250mm)； 流动相A:0.3%醋酸水溶液； 流动相B:乙腈； 梯度程序为:初始状态流动相B为5%，保持2分钟，然后在5分钟内将流动相B比例增至25%，然后在30分钟内将流动相B比例增至40%，流速为:80mL / min, 检测波长为220nm。
2.根据权利要求1所述.的方法，其特征是:包括以下步骤: 步骤1，样品处理: 将Ig胸腺法新粗肽溶解于50ml纯净水中，用氨水调节pH为3-4 ； 步骤2，平衡 按体积分数设置梯度，使用100%的流动相A冲洗聚合物反相色谱柱IOmin ； 步骤3，上样 将样品溶液载入色谱柱中； 步骤4，洗脱 按体积分数设置梯度，梯度的初始状态流动相B为5%，保持2分钟，然后在5分钟内将流动相B比例增至25%，然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。分部收集洗脱馏分；步骤5,冻干 将洗脱馏分经过冻干得到纯品胸腺法新； 其中， 聚合物反相填料柱为(UniPS?10-100，50_X250mm)； 流动相:A为0.3%醋酸水溶液； 流动相B为乙腈； 梯度程序为:初始状态流动相B为5%，保持2分钟，然后在5分钟内将流动相B比例增至25%，然后在30分钟内将流动相B比例增至40%，流速为:80mL / min, 检测波长为220nm。
【文档编号】C07K1/20GK103467593SQ201310399935
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月5日 优先权日:2013年9月5日
【发明者】路杨, 杨东晖, 陈晓航 申请人:杭州诺泰制药技术有限公司