一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法
【专利摘要】本发明涉及一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法。包括如下步骤：取鲨鱼软骨，粉碎成细粉，加入水中，搅拌均匀，再置于蒸馏釜中进行蒸馏，除去蒸发的蒸汽之后，放冷，得到浸提液；使浸提液的pH在4.0以下，用超滤膜过滤之后，再将超滤滤液送入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液；调节透过液的pH至10.0以上，再送入大孔吸附树脂进行吸附除杂，得到除杂液；将除杂液的pH调节在6.0～7.0，减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软骨素。本发明通过蒸馏的方式去除软骨中的小分子杂质，并可以同时对软骨的纤维结构起到一定的破坏作用，可以使软骨素尽可能多的析出，最终可以获得高收率、高纯度的软骨素。
【专利说明】一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法
[0001]
【技术领域】
[0002] 本发明涉及一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，属于天然药物化学技术领 域。
[0003]
【背景技术】
[0004] 鲨鱼软骨含有4种复杂的活性蛋白和硫酸软骨素及多糖等有效成分，即"防止肿 瘤新生血管生长因子"和"促进人体软骨再生"。鲨鱼软骨中含有可以促进人体关节软骨再 生的物质，如氨基葡萄糖、硫酸软骨素、胶原蛋白等等。这些物质以均衡的比例组成，可以促 进人体软骨再生。而肿瘤生长和转移，依赖于新生血管的增生，以提供养分，若肿瘤的血管 网被抑制破坏，那么肿瘤的生长和发展就会受阻。而"因子"恰好能阻止肿瘤新生血管网络 的增生，继而切断癌细胞的养分及新陈代谢。蛋白质是人体所必需的重要的营养成分，而软 骨素硫酸盐是目前医学证明的富含粘性物质的主要代表。粘性物质(粘性多倍体)是人体结 构组织的重要成分。但研究表明鲨鱼软骨并无抑制肿瘤癌症的作用，鲨鱼也并非不得癌症， 人们已在至少23种鲨鱼身上发现肿瘤。
[0005] 硫酸软骨素是从鲨鱼软骨提取、纯化制备的酸性黏多糖类物质，是构成细胞间质 的主要成份，对维持细胞环境的相对稳定性和正常功能具有重要作用。可加速伤口愈合，减 少瘢痕组织的产生。通过促进基质的生成，为细胞的迁移提供构架，有利于角膜上皮细胞的 迁移，从而促进角膜创伤的愈合。硫酸软骨素可以改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗出 液的吸收及炎症的消除。
[0006] 现有的硫酸软骨素一般是通常沉淀法从鲨鱼软骨中提取得到的，存在着提取工艺 收率低、产物纯度低的不足。
[0007]
【发明内容】
[0008] 本发明所要解决的技术问题是：现有的硫酸软骨素提取工艺收率低、产物纯度低 的不足。提出一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法。
[0009] 技术方案： 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、按重量份计，取鲨鱼软骨10?20份，粉碎成细粉，加入20?40份的水中，搅 拌均匀，再置于蒸馏釜中进行蒸馏，除去蒸发的蒸汽之后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0以下，用超滤膜过滤之后，再将超滤滤液送 入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步、用NaOH溶液调节透过液的pH至10. 0以上，再送入大孔吸附树脂进行吸附除 杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在6. O?7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到 鲨鱼软骨素。
[0010] 所述的第1步中，蒸馏塔的温度是120?140°C，压力是0? 3?0? 5 MPa。
[0011] 所述的第1步中，蒸馏时间是〇. 5?2小时。
[0012] 所述的第2步中，超滤膜的截留分子量是200000Da。
[0013] 所述的第3步中，所述的大孔吸附树脂是D101。
[0014] 每I Kg的软骨中可以制得软骨素0? 04 Kg，纯度为93%。
[0015] 有益效果 本发明通过蒸馏的方式去除软骨中的小分子杂质，并可以同时对软骨的纤维结构起到 一定的破坏作用，可以使软骨素尽可能多的析出，通过氧化铝床层的目的是用于吸附掉一 些大分子的蛋白、多肽等杂质。将料液的PH调节为10以上后，可以利用大孔吸附树脂进一 步地除去杂质，而保留有效的软骨素的成分，最终可以获得高收率、高纯度的软骨素。
[0016]
【具体实施方式】
[0017] 实施例1 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、取鲨鱼软骨l〇Kg，粉碎成细粉，加入20 Kg的水中，搅拌均匀，再置于蒸馏釜中 进行蒸馏，蒸馏塔的温度是120°C，压力是0. 3 MPa，蒸馏时间是0. 5小时，除去蒸发的蒸汽 之后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4.0,用超滤膜过滤，超滤膜的截留分子量是 200000Da，再将超滤滤液送入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步、用NaOH溶液调节透过液的pH至10. 0,再送入大孔吸附树脂DlOl进行吸附除 杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在6.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软 骨素。
[0018] 实施例2 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、取鲨鱼软骨20Kg，粉碎成细粉，加入40 Kg的水中，搅拌均匀，再置于蒸馏釜中 进行蒸馏，蒸馏塔的温度是140°C，压力是0. 5 MPa，蒸馏时间是2小时，除去蒸发的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0,用超滤膜过滤，超滤膜的截留分子量是 200000Da，再将超滤滤液送入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步、用NaOH溶液调节透过液的pH至10. 0,再送入大孔吸附树脂DlOl进行吸附除 杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软 骨素。
[0019] 实施例3 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、取鲨鱼软骨15Kg，粉碎成细粉，加入30 Kg的水中，搅拌均匀，再置于蒸馏釜中 进行蒸馏，蒸馏塔的温度是130°C，压力是0. 4 MPa，蒸馏时间是1小时，除去蒸发的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0,用超滤膜过滤，超滤膜的截留分子量是 200000Da，再将超滤滤液送入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步、用NaOH溶液调节透过液的pH至10. 0,再送入大孔吸附树脂DlOl进行吸附除 杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在6. 5,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软 骨素。
[0020] 对照例1 与实施例3的区别在于：对鲨鱼软骨采用的是水浸提的方法进行提取，而不是采用蒸 馏法。
[0021] 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、取鲨鱼软骨15Kg，粉碎成细粉，加入150 Kg的水中，加热浸提，水温在90? KKTC，提取时间1小时，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4.0,用超滤膜过滤，超滤膜的截留分子量是 200000Da，再将超滤滤液送入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步、用NaOH溶液调节透过液的pH至10. 0,再送入大孔吸附树脂DlOl进行吸附除 杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在6. 5,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软 骨素。
[0022] 对照例2 与实施例3的区别在于：未采用氧化铝吸附杂质。
[0023] 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、取鲨鱼软骨15Kg，粉碎成细粉，加入30 Kg的水中，搅拌均匀，再置于蒸馏釜中 进行蒸馏，蒸馏塔的温度是130°C，压力是0. 4 MPa，蒸馏时间是1小时，除去蒸发的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0,用超滤膜过滤，超滤膜的截留分子量是 200000Da，得到超滤透过液； 第3步、用NaOH溶液调节超滤透过液的pH至10. 0,再送入大孔吸附树脂DlOl进行吸 附除杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在6. 5,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软 骨素。
[0024] 对照例3 与实施例3的区别在于：在第3步未调节pH值。
[0025] 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，包括如下步骤： 第1步、取鲨鱼软骨15Kg，粉碎成细粉，加入30 Kg的水中，搅拌均匀，再置于蒸馏釜中 进行蒸馏，蒸馏塔的温度是130°C，压力是0. 4 MPa，蒸馏时间是1小时，除去蒸发的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4.0,用超滤膜过滤，超滤膜的截留分子量是 200000Da，再将超滤滤液送入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步，透过液送入大孔吸附树脂DlOl进行吸附除杂，得到除杂液； 第4步、除杂液减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到鲨鱼软骨素。
[0026] 各个实施例和对照例中获得的鲨鱼软骨素的得量(按每IKg软骨所能获得的软骨 素折算）以及纯度如下表所示：
【权利要求】
1. 一种用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，其特征在于，包括如下步骤： 第1步、按重量份计，取鲨鱼软骨10?20份，粉碎成细粉，加入20?40份的水中，搅 拌均匀，再置于蒸馏釜中进行蒸馏，除去蒸发的蒸汽之后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0以下，用超滤膜过滤之后，再将超滤滤液送 入填充有氧化铝颗粒的床层中进行吸附，得到透过液； 第3步、用NaOH溶液调节透过液的pH至10. 0以上，再送入大孔吸附树脂进行吸附除 杂，得到除杂液； 第4步、用稀硫酸将除杂液的pH调节在6.0?7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后，得到 鲨鱼软骨素。
2. 根据权利要求1所述的用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第1步中，蒸馏塔的温度是120?140°C，压力是0· 3?0· 5 MPa。
3. 根据权利要求1所述的用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第1步中，蒸馏时间是〇. 5?2小时。
4. 根据权利要求1所述的用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第2步中，超滤膜的截留分子量是200000Da。
5. 根据权利要求1所述的用于眼药水的鲨鱼软骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第3步中，所述的大孔吸附树脂是D101。
【文档编号】C08B37/08GK104292363SQ201410516903
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月30日 优先权日:2014年9月30日
【发明者】吴克 申请人:江苏奇力康皮肤药业有限公司