本发明属于化学制药技术领域，特别涉及一种盐酸安非他酮缓释片的杂质(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的合成。
背景技术：
盐酸安非他酮(bupropionhydrochloride),化学名称(±)-1-(3-氯苯基)-2-[(1,1-二甲基乙基)氨基]-1-丙酮盐酸盐，由英国glaxo-wellcome公司研制成功，并于1989年在美国首次上市，商品名为zyban，wellbutrin，由于其良好的治疗效果和较小的副作用，被广泛应用于抑郁症、吸烟上瘾和其他多种疾病的治疗当中。
盐酸安非他酮缓释片中(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸(结构如式v所示)和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸(结构如式v’所示)这一对非对映异构体杂质的含量对产品质量影响较大。迄今为止，现有技术尚未有关于这两个杂质的制备报道，甚至这两个化合物在公开文献中也没有报道，其cas号也没有登记，不利于盐酸安非他酮的质量控制。
因此，合成这两个杂质，对安非他酮的质量和杂质研究意义重大，可以用于盐酸安非他酮缓释片生产中杂质的定性和定量分析，为盐酸安非他酮的用药安全提供保障。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种上述盐酸安非他酮缓释片杂质(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备方法，该制备方法能够以较高的纯度和收率得到两种异构体，可以用于安非他酮的质量控制。
一种盐酸安非他酮缓释片杂质异构体的合成方法，包括以下步骤：
(1)化合物i或其盐和巯基保护试剂进行巯基的上保护反应得到中间体ii；
(2)步骤(1)中得到的中间体ii与2-溴-3'-氯苯丙酮在缚酸剂的作用下进行反应，得到中间体iii；
(3)将步骤(2)中得到的中间体iii进行脱保护基环合串联反应，得到中间体iv和iv'。中间体iv和iv'是一对非对映异构体，可通过柱层析进行分离。
(4)步骤(3)中得到的中间体iv和iv'分别在碱性条件下进行酯水解反应，得到目标化合物v和v'。
步骤(1)中，采用化合物i或其盐反应都能发生，从原料易得的角度考虑，一般选择d-半胱氨酸甲酯盐酸盐，结构如式(i)所示：
中间体ii的结构式如式ii所示：
中间体iii的结构式如式iii所示：
中间体iv和iv'的结构式如式iv所示：
目标化合物v和v'的结构式如式v所示：
本发明各步骤的反应式如下：
步骤1(化合物ii的制备)
步骤2(化合物iii的制备)
步骤3(化合物iv和iv'的制备)
步骤4(目标化合物v和v'的制备)
其中，化合物ii和iii中的r有相同的定义，为巯基保护基。作为优选，所述的r为取代或者未取代的苄基，取代或者未取代的苄氧羰基、叔丁氧羰基、二苯甲基或三苯甲基；
所述的苄基或者苄氧羰基上的取代基选自c1～c4烷基，c1～c4烷氧基或硝基中的一个或者多个；
所述的取代苄基优选为对甲氧基苄基或对硝基苄基。
步骤1中，所述巯基保护试剂为苄氯、苄溴、对甲氧基苄氯、对甲氧基苄溴、对甲氧基苯乙醇、对硝基苄氯、对硝基苄溴、氯甲酸苄酯、二苯甲醇、二苯基氯甲烷、三苯甲醇、三苯基氯甲烷中至少一种，优选为三苯基氯甲烷。
步骤1中，所用溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷中至少一种，优选为n,n-二甲基甲酰胺。
步骤1中，反应温度为0～80℃，优选20～40℃。
步骤1的反应结束之后，经过简单的洗涤和干燥即可进入步骤2进行反应，不需要经过柱层析操作。
步骤2中，所述缚酸剂为无机碱或三级胺，选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、1,8-二氮杂二环-双环(5,4,0)-7-十一烯(简称dbu)、二苯基乙胺、n,n-二异丙基乙胺和n-甲基吗啉中的至少一种，优选n,n-二异丙基乙胺。
步骤2中，所用溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷中至少一种，优选n,n-二甲基甲酰胺。
步骤2中，反应温度为0～80℃，优选20～40℃。
步骤3中，所述脱保护试剂为氢氟酸/苯甲醚、三甲基氯硅烷/二苯基氧锡/三氟乙酸、氢气/钯碳、三氟乙酸/苯酚、三乙基硅烷/三氟乙酸、盐酸/冰醋酸中的一种，优选三乙基硅烷/三氟乙酸。
步骤3中，所述溶剂选自甲醇、乙醇、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷中至少一种。优选二氯甲烷。
步骤3中，反应温度为0～80℃，优选20～40℃。
步骤3中，当保护基不同的时候，最合适的脱保护环化条件不同，例如，当所述的保护基r为三苯甲基时，采用三乙基硅烷/三氟乙酸作为脱保护试剂，以二氯甲烷作为溶剂反应效果最好；当所述的保护基r为苄氧羰基或者苄基时，采用氢气/钯碳作为脱保护试剂，以甲醇或者乙醇作为溶剂反应效果最好。
步骤3的反应结束后，经过柱层析分离得到两种不同的中间体异构体，然后分别进行后续水解步骤。
步骤4中，所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾中的一种，优选氢氧化锂。
步骤4中，所述溶剂选自甲醇、乙醇、四氢呋喃、1、4-二氧六环、水，优选甲醇。
步骤4中，反应温度为0～80℃，优选0～10℃。
本发明各步骤均以tlc方法检测反应终点。
本发明中反应原料的用量并没有严格的限定，一般按照化学反应计量比进行反应，也可过量进行反应。
本发明中反应溶剂、催化剂的用量并没有严格的限定，可根据反应原料的用量调整：反应原料较多增加反应溶剂和催化剂的用量，反应原料较少减少反应溶剂的和催化剂的用量。
同现有技术相比，本发明具有以下有益效果：提供了一种盐酸安非他酮缓释片杂质(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备方法，可以用于盐酸安非他酮缓释片生产中杂质的定性和定量分析，从而提升盐酸安非他酮成品检测方法对杂质异构体的准确定位和定性，有利于加强对该杂质的控制，进而为盐酸安非他酮的用药安全提供保障；同时，可以研究该杂质对药物活性和毒副作用的影响。此外，本发明合成路线简洁高效，手性控制立体专一，反应收率较高，所用物料和溶剂、试剂廉价易得。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例作进一步的说明，但本领域的普通技术人员应当认识到，本发明并不限于这些实施例。
实施例1
(1)(s)-2-氨基-3-(三苯甲基巯基)丙酸甲酯的制备：250ml单口瓶中加入80mln,n-二甲基甲酰胺，20gd-半胱氨酸甲酯盐酸盐(化合物i，0.12mol)，室温搅拌溶清，加入45.2g三苯基氯甲烷(0.16mol)，20～25℃反应48h。tlc监控原料转化完全。将反应液加入180ml10％醋酸钠溶液中，搅拌得白色粘稠油状物，去除上面的水层，用200ml二氯甲烷将白色粘稠油状物溶清，加入40ml饱和氯化钠溶液洗涤，分去水相。有机相减压浓缩得到黄色油状物42.7g，收率97.1％。
(2)(s)-2-(1-(3-氯苯基)-1-氧代丙烷-2-氨基)-3-(三苯甲基巯基)丙酸甲酯的制备：100ml单口瓶中加入16mln,n-二甲基甲酰胺，10g(s)-2-氨基-3-(三苯甲基巯基)丙酸甲酯(26.4mmol)，室温搅拌溶清，加入4.7gn,n-二异丙基乙胺(36.4mmol)，再加入8.97g2-溴-1-(3-氯苯基)丙酮(36.2mmol)，20～25℃搅拌36h。反应完毕，加入10ml水和40ml二氯甲烷。分去水相，有机相再加入10ml饱和氯化钠溶液洗涤。分层，有机相减压浓缩得黄色油状物，柱层析纯化得到黄色油状物9.2g，收率63.8％。
(3)(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯的制备：100ml单口瓶中加入3.5g(r)-2-(1-(3-氯苯基)-1-氧代丙烷-2-氨基)-3-(三苯甲基巯基)丙酸甲酯(6.4mmol)，12ml二氯甲烷，室温搅拌溶清，加入12ml三氟乙酸，再加入0.5ml三乙基硅烷，20～25℃反应2h。反应完毕，加入30ml二氯甲烷，用30％naoh溶液调ph＝6-7，分层。有机相用10ml饱和氯化钠溶液洗涤，分层。有机相减压浓缩得黄色油状物。柱层析分离，得到(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯0.65g,收率33.5％；(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯0.75g,收率38.7％。
(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯：1hnmr(cdcl3)δ：0.84(d,3h),3.04(dd,2h),3.56-3.59(m,1h),3.81(s,3h),3.92-3.95(m,1h),7.26-7.32(m,2h),7.49(d,1h),7.63(s,1h).13cnmr(cdcl3)δ：16.8,29.1,52.6,60.2,63.4,80.7,123.5,,125.7,128.1,129.6,134.4,142.9,171.1.ms：(m+h)+＝302.1.
(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯：1hnmr(cdcl3)δ：0.74(d,3h),3.32(dd,2h),3.80-3.82(m,1h),3.87(s,3h),3.98-4.00(m,1h),7.25-7.30(m,2h),7.46(d,1h),7.61(s,1h).13cnmr(cdcl3)δ：17.1,27.4,52.5,56.5,58.4,80.9,123.5,,125.6,128.0,129.5,134.3,143.4,172.5.ms：(m+h)+＝302.1.
(4)(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备：25ml单口瓶中加入0.5g(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯，5ml甲醇，搅拌溶清，加入2.5ml1mlioh，0～10℃搅拌3h，反应完毕，减压浓缩除去甲醇得白色固体，加入3ml水将固体溶解，用1mhcl调ph＝1-2，水相用乙酸乙酯萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸0.45g，收率94.3％，hplc纯度99.6％。
1hnmr(d2o)δ：0.64(d,3h),2.83(dd,2h),3.42-3.44(m,1h),3.57-3.60(m,1h),7.25-7.52(m,5h).ms：(m+h)+＝288.0.
(5)(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备：25ml单口瓶中加入0.5g(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯，5ml甲醇，搅拌溶清，加入2.5ml1mlioh，0～10℃搅拌3h，反应完毕，减压浓缩除去甲醇得白色固体，加入3ml水将固体溶解，用1mhcl调ph＝1-2，水相用乙酸乙酯萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸0.46g，收率96.5％，hplc纯度99.7％。
1hnmr(d2o)δ：0.65(d,3h),2.83(dd,2h),3.34-3.45(m,1h),3.57-3.59(m,1h),7.26-7.52(m,5h).ms：(m+h)+＝288.0.
实施例2
(1)(s)-2-氨基-3-(苄氧羰基巯基)丙酸甲酯的制备：500ml三口瓶中加入17.6gd-半胱氨酸甲酯盐酸盐(化合物i，0.10mol)，200ml1nnahco3溶液，搅拌溶清，再加入100ml甲基叔丁基醚，降温至0℃，一次性加入17.3g氯甲酸苄酯(0.13mol)，在0℃搅拌1h，缓慢升温至10℃，在此温度下继续搅拌1h，抽滤，滤饼用水洗涤，再用丙酮和甲基叔丁基醚洗涤，真空干燥得到白色固体20.7g，收率75％。
(2)(s)-2-(1-(3-氯苯基)-1-氧代丙烷-2-氨基)-3-(苄氧羰基巯基)丙酸甲酯的制备：100ml单口瓶中加入16mln,n-二甲基甲酰胺，10g(r)-2-氨基-3-(苄氧羰基巯基)丙酸甲酯(37mmol)，室温搅拌溶清，加入6.7g三乙胺，再加入12.7g2-溴-1-(3-氯苯基)丙酮，40～45℃搅拌36h，反应完毕，加入10ml水和40ml二氯甲烷。分去水相，有机相加入10ml饱和氯化钠溶液洗涤。分层，有机相减压浓缩得黄色油状物，柱层析纯化得到黄色油状物10.3g，收率63.6％。
(3)(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯的制备：100ml单口瓶中加入3g(r)-2-(1-(3-氯苯基)-1-氧代丙烷-2-氨基)-3-(苄氧羰基巯基)丙酸甲酯(69mmol)，12ml乙醇，室温搅拌溶清，加入0.3g10％pd/c和1g2n盐酸，通入氢气至压力为2mpa，50℃～60℃搅拌反应6小时，tlc监控反应完全，将反应液过滤，浓缩，加入30ml二氯甲烷，用5％naoh溶液调ph＝6-7，分层。有机相用10ml饱和氯化钠溶液洗涤，分层，有机相减压浓缩得黄色油状物。柱层析分离，得到(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯0.76g，收率36.6％；(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯0.82g，收率39.5％。
(4)(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备：25ml单口瓶中加入0.5g(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯，5ml甲醇，搅拌溶清，加入2.5ml0.5mnaoh，0～10℃搅拌3h，反应完毕，减压浓缩除去甲醇得白色固体，加入3ml水将固体溶解，用1mhcl调ph＝1-2，水相用乙酸乙酯萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸0.41g，收率86.0％，hplc纯度99.2％。
(5)(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备：25ml单口瓶中加入0.5g(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯，5ml甲醇，搅拌溶清，加入2.5ml0.5mnaoh，0～10℃搅拌3h，反应完毕，减压浓缩除去甲醇得白色固体，加入3ml水将固体溶解，用1mhcl调ph＝1-2，水相用乙酸乙酯萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸0.43g，收率90.2％hplc纯度99.3％。
实施例3
(1)(s)-2-氨基-3-(苄基巯基)丙酸甲酯的制备：250ml单口瓶中加入50ml二氯甲烷，20ml水，10gd-半胱氨酸甲酯盐酸盐(化合物i，58mmol)，9.6g碳酸钾，冰浴降温，缓慢加入12.2g溴化苄(71mmol)，移除冰浴，35～40℃搅拌过夜，分液，水相用二氯甲烷萃取2次，有机相加入20ml饱和氯化钠溶液洗涤，分去水相，有机相减压浓缩得到黄色油状物11.2g，收率85.3％。
(2)(s)-2-(1-(3-氯苯基)-1-氧代丙烷-2-氨基)-3-(苄基巯基)丙酸甲酯的制备：100ml单口瓶中加入16mln,n-二甲基甲酰胺，10g(r)-2-氨基-3-(苄基巯基)丙酸甲酯(44mmol)，室温搅拌溶清，加入7.8g碳酸钾，再加入15g2-溴-1-(3-氯苯基)丙酮，30～35℃搅拌36h，反应完毕，加入10ml水和40ml二氯甲烷。分去水相，有机相再加入10ml饱和氯化钠溶液洗涤，分层。有机相减压浓缩得黄色油状物，柱层析纯化得到黄色油状物11.4g，收率65.5％。
(3)(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯和(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯的制备：100ml高压釜中加入3g(r)-2-(1-(3-氯苯基)-1-氧代丙烷-2-氨基)-3-(苄基巯基)丙酸甲酯，0.4g10％pd/c，60ml甲醇，充入氢气，压力0.3-0.4mpa，20～25℃搅拌过夜，过滤除去pd/c，有机相减压浓缩得黄色油状物。柱层析分离，得到(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯0.82g,收率35.5％；(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯0.9g，收率38.9％。
(4)(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备：25ml单口瓶中加入0.5g(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯，5ml甲醇，搅拌溶清，加入2.5ml0.2mkoh，20～25℃搅拌3h，反应完毕，减压浓缩除去甲醇得白色固体，加入3ml水将固体溶解，用1mhcl调ph＝1-2，水相用乙酸乙酯萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到(3s,5s,6s)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸0.36g，收率75.5％，hplc纯度99.3％。
(5)(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸的制备：25ml单口瓶中加入0.5g(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸甲酯，5ml甲醇，搅拌溶清，加入2.5ml0.2mkoh，20～25℃搅拌3h，反应完毕，减压浓缩除去甲醇得白色固体，加入3ml水将固体溶解，用1mhcl调ph＝1-2，水相用乙酸乙酯萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到(3s,5r,6r)-6-(3-氯苯基)-6-羟基-5-甲基硫代吗啉-3-羧酸0.38g，收率79.7％，hplc纯度99.2％。