【
技术领域：
】本发明积雪草甙制备
技术领域：
，具体涉及一种从积雪草中提取积雪草甙的工艺。
背景技术：
：积雪草为双子叶植物伞形科植物积雪草的全草或带根全草，具有清热利湿，消肿解毒之功效；用于治疗湿热黄疸，痢疾风疹、喉肿、肿毒和跌打损伤等。积雪草甙是积雪草提取物中的有效成分之一。积雪草甙具有多种药理作用：(1)美容：有抗氧化作用，祛除老死角脂层，促进皮肤的新陈代谢，增加皮肤的弹性及光滑，补充营养素。(2)保健：调节内分泌，改善肠道功能，延缓衰老，改善记忆，改善贫血，促进睡眠，改善肠胃功能。(3)减肥：降低胆固醇，清除多余脂肪与降低超重，调节大脑的神经递质，补充大脑神经中枢的营养。(4)促进伤口愈合和治愈皮肤损伤：能治疗皮肤溃疡，如顽固性创伤、皮肤结核、麻风等。对小鼠、豚鼠、兔肌肉注射或皮下植入时可促进皮肤生长、局部白细胞增多、结缔组织血管网增生、粘液分泌增加、毛和尾的生长加速等。(5)调节免疫功能：积雪草甙可抑制自身抗体的形成，降低免疫球蛋白，改善细胞免疫功能。(6)抗菌：对金黄色葡萄菌、溶血型链球菌、各种痢疾杆菌、伤寒杆菌均有抑制作用。(7)抗溃疡作用：可抑制大鼠幽门结扎溃疡和应激性溃疡。(8)对中枢神经的作用：刺激中心神经系统，从而改善记忆和抗疲劳。(9)镇静、安定作用：可用于治疗失眠症。另据文献报道，积雪草甙对静脉功能不全而致的长期不能愈合的下肢溃疡及外伤病例、手术或创伤引起的肌腱粘连、灼伤等因素所致的创面恢复后的瘢痕疙瘩以及硬皮病均有一定疗效。积雪草甙还能轻度抑制乙酰胆碱的作用，并用于乳腺增生的治疗。积雪草甙的保健、药用功效如此之多，但到目前为止，很少有关于从积雪草中提取高纯度积雪草甙的相关报道。cn1491656a公开了从积雪草中提取积雪草提取物的工艺步骤，但该提取物的主要成分为积雪草甙和羟基积雪草甙，二者在提取物中的含量为10％-95％，没有将积雪草甙和羟基积雪草甙分开。cn101210040a公开了一种积雪草甙化学对照品的分离制备方法，可获得纯度大于98％的积雪草甙化学对照品，但该方法是以重量含量30％-97％的积雪草甙提取物为原料进行分离提纯的，必须先从积雪草中提取出一定含量的积雪草甙提取物。cn101323637a公开了一种积雪草甙及其制备方法，制得的积雪草甙纯度在95％以上，所得样品不能完全作为定性的对照品。技术实现要素：本发明提供的一种从积雪草中提取积雪草甙的工艺，以解决土现有技术制得的积雪草甙纯度在95％以上，所得样品不能完全作为定性的对照品的问题。为解决以上技术问题，本发明采用以下技术工艺：一种从积雪草中提取积雪草甙的工艺，包括以下步骤：s1：将积雪草进行粉碎并过筛子，制得积雪草粉末；s2：向步骤s1制得的积雪草粉末中加入乙醇，在水浴条件下回流提取2-3次，每次提取时长为1.2-1.6h，提取完全后合并提取液，调节提取液的ph值至4-4.6，温度控制为56-62℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得一次脱色液；s3：将步骤s2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-5.4倍体积的42-50℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2-3次，继续用无水乙酸乙酯进行2-3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4-5.2(w/v)，制得结晶粗品；s4：将步骤s3制得的粗晶经70％-80％的乙醇溶解，调节溶液的ph值至4-4.6，温度控制为56-62℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得二次脱色液；s5：将步骤s4制得的二次脱色液真空减压浓缩后，在温度为6-10℃下结晶，制得重结晶粗品；s6：将步骤s5制得的重结晶粗品经过萃取，制得积雪草甙液体；s7：将步骤s6制得的积雪草甙液体进行真空减压浓缩后结晶并干燥，制得积雪草甙。优选地，步骤s1中所述筛子的目数为40-60。优选地，步骤s2中所述积雪草粉末与乙醇的重量比为1:6-8。优选地，所述乙醇的体积分数为70％-80％。优选地，步骤s2中所述通过活性炭脱色除杂的时间为0.5-1h。优选地，步骤s4中所述通过活性炭脱色除杂的时间为0.4-0.7h。优选地，步骤s6中所述萃取为超临界co2萃取。优选地，所述超临界co2萃取的条件：萃取釜压力为12-15mpa，萃取温度为40-45℃，萃取时间为28-35min。优选地，步骤s6中所述结晶是在温度为3-8℃下进行的。优选地，步骤s6中所述晶体在温度为40-45℃下真空干燥至含水率≤1％。本发明具有以下有益效果：本发明的方法制得的积雪草甙的纯度在98.02％以上，均高于现有技术制得的积雪草甙的纯度，且能作为定性、定量的对照品。【具体实施方式】为便于更好地理解本发明，通过以下实施例加以说明，这些实施例属于本发明的保护范围，但不限制本发明的保护范围。在实施例中，所述从积雪草中提取积雪草甙的工艺，包括以下步骤：s1：将积雪草进行粉碎并过40-60目筛子，制得积雪草粉末；s2：向步骤s1制得的积雪草粉末中加入其重量6-8倍70％-80％的乙醇，在水浴条件下回流提取2-3次，每次提取时长为1.2-1.6h，提取完全后合并提取液，调节提取液的ph值至4-4.6，温度控制为56-62℃，通过活性炭脱色除杂0.5-1h，过滤后制得一次脱色液；s3：将步骤s2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-5.4倍体积的42-50℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2-3次，继续用无水乙酸乙酯进行2-3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4-5.2(w/v)，制得结晶粗品；s4：将步骤s3制得的粗晶经70％-80％的乙醇溶解，调节溶液的ph值至4-4.6，温度控制为56-62℃，通过活性炭脱色除杂0.4-0.7h，过滤后制得二次脱色液；s5：将步骤s4制得的二次脱色液真空减压浓缩后，在温度为6-10℃下结晶，制得重结晶粗品；s6：将步骤s5制得的重结晶粗品经过超临界co2萃取，萃取的条件：萃取釜压力为12-15mpa，萃取温度为40-45℃，萃取时间为28-35min，制得积雪草甙液体；s7：将步骤s6制得的积雪草甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为3-8℃下进行结晶，所述晶体在温度为40-45℃下真空干燥至含水率≤1％，制得积雪草甙。实施例1一种从积雪草中提取积雪草甙的工艺，包括以下步骤：s1：将积雪草进行粉碎并过50目筛子，制得积雪草粉末；s2：向步骤s1制得的积雪草粉末中加入其重量7倍76％的乙醇，在水浴条件下回流提取2次，每次提取时长为1.5h，提取完全后合并提取液，调节提取液的ph值至4.3，温度控制为60℃，通过活性炭脱色除杂0.7h，过滤后制得一次脱色液；s3：将步骤s2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.3倍体积的46℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2次，继续用无水乙酸乙酯进行2次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4.8(w/v)，制得结晶粗品；s4：将步骤s3制得的粗晶经75％的乙醇溶解，调节溶液的ph值至4.3，温度控制为60℃，通过活性炭脱色除杂0.6h，过滤后制得二次脱色液；s5：将步骤s4制得的二次脱色液真空减压浓缩后，在温度为8℃下结晶，制得重结晶粗品；s6：将步骤s5制得的重结晶粗品经过超临界co2萃取，萃取的条件：萃取釜压力为14mpa，萃取温度为43℃，萃取时间为32min，制得积雪草甙液体；s7：将步骤s6制得的积雪草甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为6℃下进行结晶，所述晶体在温度为43℃下真空干燥至含水率为1％，制得积雪草甙。实施例2一种从积雪草中提取积雪草甙的工艺，包括以下步骤：s1：将积雪草进行粉碎并过40目筛子，制得积雪草粉末；s2：向步骤s1制得的积雪草粉末中加入其重量6倍70％的乙醇，在水浴条件下回流提取2次，每次提取时长为1.2h，提取完全后合并提取液，调节提取液的ph值至4，温度控制为56℃，通过活性炭脱色除杂1h，过滤后制得一次脱色液；s3：将步骤s2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5倍体积的42℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2次，继续用无水乙酸乙酯进行2次结晶处理，结晶过程中固液比为1:4(w/v)，制得结晶粗品；s4：将步骤s3制得的粗晶经70％的乙醇溶解，调节溶液的ph值至4，温度控制为56℃，通过活性炭脱色除杂0.7h，过滤后制得二次脱色液；s5：将步骤s4制得的二次脱色液真空减压浓缩后，在温度为6℃下结晶，制得重结晶粗品；s6：将步骤s5制得的重结晶粗品经过超临界co2萃取，萃取的条件：萃取釜压力为12mpa，萃取温度为40℃，萃取时间为35min，制得积雪草甙液体；s7：将步骤s6制得的积雪草甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为3℃下进行结晶，所述晶体在温度为40℃下真空干燥至含水率为0.8％，制得积雪草甙。实施例3一种从积雪草中提取积雪草甙的工艺，包括以下步骤：s1：将积雪草进行粉碎并过40目筛子，制得积雪草粉末；s2：向步骤s1制得的积雪草粉末中加入其重量8倍80％的乙醇，在水浴条件下回流提取3次，每次提取时长为1.5h，提取完全后合并提取液，调节提取液的ph值至4.6，温度控制为62℃，通过活性炭脱色除杂0.5h，过滤后制得一次脱色液；s3：将步骤s2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.4倍体积的50℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取3次，继续用无水乙酸乙酯进行3次结晶处理，结晶过程中固液比为1:5.2(w/v)，制得结晶粗品；s4：将步骤s3制得的粗晶经80％的乙醇溶解，调节溶液的ph值至4.6，温度控制为62℃，通过活性炭脱色除杂0.4h，过滤后制得二次脱色液；s5：将步骤s4制得的二次脱色液真空减压浓缩后，在温度为10℃下结晶，制得重结晶粗品；s6：将步骤s5制得的重结晶粗品经过超临界co2萃取，萃取的条件：萃取釜压力为15mpa，萃取温度为45℃，萃取时间为28min，制得积雪草甙液体；s7：将步骤s6制得的积雪草甙液体进行真空减压浓缩后，在温度为8℃下进行结晶，所述晶体在温度为45℃下真空干燥至含水率为0.9％，制得积雪草甙。对比例1，采用“一种积雪草甙及其制备方法(专利号：zl200810303151.9)”的实施例1-3的方法制备积雪草甙。对实施例1-3和对比例1制得的积雪草甙的纯度进行检测，结果如下表所示。实验项目纯度(％)实施例198.12实施例298.02实施例398.61对比例195.62-96.03由以上表可知，本发明的方法制得的积雪草甙的纯度在98.02％以上，均高于现有技术制得的积雪草甙的纯度，且能作为定性、定量的对照品。以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明，对于所属
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的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。当前第1页12