一种用于PCR产物纯化用的卡盒的制作方法

文档序号:14960446发布日期:2018-07-18 00:25阅读:150来源:国知局

本实用新型涉及一种生物核酸分子提取装置,具体为一种用于PCR产物纯化过程防止气溶胶污染的卡盒。



背景技术:

PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去,但是因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测拷贝数的极限,并且在纯化的过程中,非常容易产生气溶胶逸散到环境中,对环境造成污染,该污染在短期内很难消除,解决这一难题对分子诊断工作或研究具有重要意义。



技术实现要素:

本实用新型要解决的技术问题是克服现有的PCR产物纯化时易产生气溶胶的污染的缺陷,提供一种用于PCR产物纯化用的卡盒。

为了解决上述技术问题,本实用新型提供了如下的技术方案:

一种用于PCR产物纯化用的卡盒,包括同心安装的上盖、圆形外壳和底座,圆形外壳和底座可一起相对于上盖转动,所述上盖上开设有通孔,通孔内设置有磁套,所述磁套的中部设置有环状突起,在环状突起的下部的磁套上套设有弹簧,磁套内设置有金属棒,金属棒的底部为直径略小于磁套内径的球形,金属棒上端伸出上盖,下端插入到磁套的底部,金属棒可带动磁套上下运动;底座上设置有若干个离心管。

进一步的,所述上盖的通孔与磁套的结合处设置有密封圈。密封圈采用的是弹性密封材料制成,磁套在上下运动时,防止气溶胶从上盖的孔上部逸散。

进一步的,所述底座与圆形外壳的结合处设置有密封垫,密封垫采用的是弹性密封材料,圆形外壳与底座进行旋转时,可以防止气溶胶逸散。

进一步的,金属棒由高磁导率的金属加工而成,优选的,金属棒采用奥氏体不锈钢加工而成。在外界的磁场作用下,金属棒会产生磁性,去除外界磁场后,其磁性可以完全消除。

进一步的,所述离心管放置在底座开设的孔内,底座上的孔与离心管过盈配合。孔与离心管紧密配合,无间隙,有效的减少了污染。

进一步的,在底座上放置6个离心管。

本实用新型的工作原理为:在外界的磁场作用下,金属棒会产生磁性,去除外界磁场后,其磁性可以完全消除。通过金属棒和磁套的上下运动,可以完成磁珠的抓取和释放,通过简单的操作就可以实现对核酸的捕获、洗涤和洗脱,最终得到纯化后的PCR产物,避免了PCR产物纯化过程中产生的气溶胶逸散对环境的影响。

附图说明

附图用来提供对本实用新型的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本实用新型的实施例一起用于解释本实用新型,并不构成对本实用新型的限制。在附图中:

图1是本实用新型的结构示意图;

图2是磁套的结构示意图;

图3是上盖的结构示意图;

其中:1、金属棒,2、密封圈,3、上盖,4、磁套,5、弹簧,,6圆形外壳,7、密封垫,8、离心管,9、底座,10、通孔,11、环状突起。

具体实施方式

以下结合附图对本实用新型的优选实施例进行说明,应当理解,此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本实用新型,并不用于限定本实用新型。

实施例1

如图1所示,一种用于PCR产物纯化用的卡盒,包括同心安装的上盖3、圆形外壳6和底座9,圆形外壳6和底座9可一起相对于上盖3转动,上盖3上开设有通孔10,通孔内设置有磁套4,磁套4的中部设置有环状突起11,在环状突起11的下部的磁套上套设有弹簧5,磁套4内设置有金属棒1,金属棒1的底部为直径略小于磁套内径的球形,金属棒上端伸出上盖3,下端插入到磁套4的底部,金属棒1可带动磁套4上下运动;底座9上设置有若干个离心管8。

上盖3、磁套4、底座9采用硬质透明塑料注塑加工,金属棒1采用高磁导率的金属奥氏体不锈钢加工而成,密封圈2、密封垫7采用弹性密封材料制成。金属棒1插入到磁套4的内孔里,弹簧5从磁套4下部部套入,然后将磁套4放置于上盖3的通孔10内,通孔10上端放置密封圈2,然后将上盖3放入圆形外壳6的上部。

在底座9的孔内放置6个标准离心管,在第1个离心管内加入300μL裂解液、50μL结合液和1mg的粒径为500μm磁性纳米颗粒,在第2~5个离心管分别加入500μL的洗涤液,在第6个离心管内加入100μL洗脱液;将待纯化200μL的待纯化PCR产物加入到第1个离心管内;之后将底座9上端套入密封垫7,再将圆形外壳6安装到底座9上端,完成整个卡盒的装配。

具体的提取操作流程如下:

(1)旋转圆形外壳,将磁套正对底座上的第1个离心管,然后上下快速按动金属棒,金属棒带磁套上下快速在第1个离心管里的液体内振动,让管内液体充分混匀,让磁珠与PCR产物中的目的核酸结合;

(2)待结合后,将金属棒上部套上环形磁铁,将金属棒磁化,慢慢将金属棒向下按动,由于磁力的作用,第1个离心管内的磁珠被吸附到磁套的底部,然后缓慢的将金属棒和磁套一起向上运动,磁珠随着磁套一起离开第1个离心管;

(3)旋转圆形外壳,将磁套对准第2个离心管,然后将金属棒和磁套一起缓慢插入到第2个离心管的洗涤液内,保持不动,撤去圆形磁铁,让金属棒失去磁性,再通过快速反复上下运动,将磁珠从磁套上分离,磁套继续上下往复运动,将磁珠在洗涤液内混匀,去除磁珠表面结合的其它杂质;

(4)重复2~3步动作,将磁珠依次在第3~6个离心管内进行重复;

(5)重复动作(2),将已经洗脱掉核酸的磁珠吸起,然后转移至第1个孔内丢弃。

提取过程完成,第6个离心管内得到了PCR产物的纯化后的核酸。

最后应说明的是:以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已,并不用于限制本实用新型,尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本实用新型的保护范围之内。

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