本发明涉及药物化学技术领域，尤其涉及一种2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
肿瘤是严重危害人类健康而又难以克服的疾病，目前已经上市的抗肿瘤药物也有很多，但这些药物中还是存在一些问题，比如毒性大、靶向性弱以及容易产生耐药性等。因此，新型抗肿瘤药物的研发显得尤为重要。
泛素化修饰参与蛋白质翻译后修饰从而调节细胞过程。研究表明，泛素化过程异常常能引发多种疾病，如帕金森病、阿尔茨海默症以及直肠癌、乳腺癌等多种的人类疾病。与泛素化修饰相类似的neddylation修饰，是经过一系列酶促反应，来完成蛋白质修饰，进而调节细胞活动。neddylation过程与肿瘤、免疫系统相关疾病有密切的关系，比如代谢综合征、肝癌、肺癌、胃癌等。在neddylation调控过程中，其e3连接酶的dcn1在疾病发生发展过程中亦发挥重要的作用。而在结构上，dcn1中包含有一个ubadomain，可与e2偶联酶ubc12形成复合物，进而修饰neddylation下游底物。因此，设计开发具有高生物活性、高选择性、低毒副作用的dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用的小分子抑制剂已成为药物研究的热点。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种具有高生物活性、高选择性、低毒副作用的dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物，具有式ⅰ所示结构：
式ⅰ中，r1为
r2为
优选的，所述r1为
所述r2为
优选的，所述2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物为
本发明还提供了所述2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物的制备方法，包括以下步骤：
将氰基乙酸乙酯、硫脲、r2-cho、碱试剂和溶剂ⅰ混合，发生环合反应，得到具有式ⅱ所示结构的化合物；
将所述具有式ⅱ所示结构的化合物、溴丙炔、三氯氧磷和溶剂ⅱ混合，发生取代反应ⅰ，得到具有式ⅲ所示结构的化合物；
将所述具有式ⅲ所示结构的化合物、r1-h和溶剂ⅲ混合，发生取代反应ⅱ，得到2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物；
优选的，所述环合反应的温度为0～90℃，所述环合反应的时间为11～13小时。
优选的，所述取代反应ⅰ的温度为0～90℃，所述取代反应ⅰ的时间为5～7小时。
优选的，所述取代反应ⅱ的温度为0～90℃，所述取代反应ⅱ的时间为9～11小时。
优选的，所述溶剂ⅰ、溶剂ⅱ和溶剂ⅲ独立地为丙酮、n,n-二甲基甲酰胺、乙腈、甲醇、异丙醇、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二氧六环和水中的一种或几种。
优选的，所述碱试剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、磷酸钠、十二水磷酸钠、磷酸钾、碳酸氢钾、碳酸氢钠和三乙胺中的一种或几种。
本发明还提供了所述的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明提供了一种具有式ⅰ所示结构的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物，本发明所述的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物对dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用较临床上已使用的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶有更好的抑制作用。根据实施例的记载，所述2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物对dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用具有较好的抑制活性。
具体实施方式
本发明提供了一种2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物，具有式ⅰ所示结构：
式ⅰ中，r1为
r2为
在本发明中，所述r1优选为
在本发明中，所述2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物优选为
本发明还提供了所述的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物的制备方法，包括以下步骤：
将氰基乙酸乙酯、硫脲、r2-cho、碱试剂和溶剂ⅰ混合，发生环合反应，得到具有式ⅱ所示结构的化合物；
将所述具有式ⅱ所示结构的化合物、溴丙炔、三氯氧磷和溶剂ⅱ混合，发生取代反应ⅰ，得到具有式ⅲ所示结构的化合物；
将所述具有式ⅲ所示结构的化合物、r1-h和溶剂ⅲ混合，发生取代反应ⅱ，得到2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物；
在本发明中，若无特殊说明，所有原料均为本领域技术人员所熟知的市售产品。
本发明将氰基乙酸乙酯、硫脲、r2-cho、碱试剂和溶剂ⅰ混合，发生环合反应，得到具有式ⅱ所示结构的化合物。在本发明中，所述r2-cho中r2为
在本发明中，所述碱试剂优选为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、磷酸钠、十二水磷酸钠、磷酸钾、碳酸氢钾、碳酸氢钠和三乙胺中的一种或几种；当所述碱试剂为上述具体选择中的两种以上时，本发明对所述具体物质的比例没有任何特殊的限定，可按任意比例进行混合。
在本发明中，所述溶剂ⅰ优选为丙酮、n，n-二甲基甲酰胺、乙腈、甲醇、异丙醇、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二氧六环和水中的一种或几种；当所述溶剂ⅰ为上述具体选择中的两种以上时，本发明对所述具体物质的比例没有任何特殊的限定，可按任意比例进行混合。
在本发明中，所述氰基乙酸乙酯、硫脲、r2-cho和碱试剂的摩尔比优选为(1.8～2.2)：(2.8～3.2)：(2.8～3.2)：(2.8～3.2)：(4.8～5.2)，更优选为(1.9～2.1)：(2.9～3.1)：(2.9～3.1)：(2.9～3.1)：(4.9～5.1)。
在本发明中，所述氰基乙酸乙酯的物质的量与溶剂ⅰ的体积比优选为(0.3～0.5)mol：1ml，更优选为(0.32～0.48)mol：1ml，最优选为(0.35～0.45)mol：1ml。
本发明对所述混合的顺序没有任何特殊的限定，可按任意混合顺序进行混合。在本发明中，所述混合顺序可以具体的为：将氰基乙酸乙酯、碱试剂和乙醇混合，得到混合物ⅰ；将硫脲、r2-cho与混合物ⅰ混合。
在本发明中，所述氰基乙酸乙酯、碱试剂和乙醇的混合温度优选为80～100℃，更优选为85～95℃，最优选为88～92℃；在本发明中，所述氰基乙酸乙酯、碱试剂和乙醇的混合优选在搅拌的条件下进行，本发明对所述搅拌没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的搅拌过程进行搅拌达到充分溶解的目的即可。
在本发明中，所述硫脲、r2-cho与混合物ⅰ混合的温度优选为80～100℃，更优选为85～95℃，最优选为88～92℃；在本发明，所述混合优选在搅拌的条件下进行，所述搅拌时间优选为8～12小时，更优选为9～11小时；本发明对所述搅拌的速率没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的搅拌速率进行搅拌即可。
在本发明中，所述环合反应的温度优选为0～90℃，更优选为10～80℃，最优选为30～50℃；所述环合反应的时间优选为11～13小时，更优选为11.5～12.5小时，最优选为11.8～12.2小时。
在本发明中，所述环合反应优选通过tlc跟踪检测判断反应是否完成。
环合反应完成后，本发明优选对所得反应产物进行抽滤和重结晶，得到具有式ⅱ所示结构的化合物。本发明对所述抽滤和重结晶没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的抽滤和重结晶过程、并达到固液分离和净化产物的目的即可。
得到具有式ⅱ所示结构的化合物后，本发明将所述具有式ⅱ所示结构的化合物、溴丙炔、三氯氧磷和溶剂ⅱ混合，发生取代反应ⅰ，得到具有式ⅲ所示结构的化合物。在本发明中，所述溶剂ⅱ优选为丙酮、n，n-二甲基甲酰胺、乙腈、甲醇、异丙醇、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二氧六环和水中的一种或几种；当所述溶剂ⅱ为上述具体选择中的两种以上时，本发明对所述具体物质的比例没有任何特殊的限定，可按任意比例进行混合。
在本发明中，所述具有式ⅱ所示结构的化合物、溴丙炔和三氯氧磷的摩尔比优选为(1.8～2.2)：(2.8～3.2)：(2.8～3.2)；更优选为(1.9～2.1)：(2.9～3.1)：(2.9～3.1)。
在本发明中，所述具有式ⅱ所示结构的化合物的物质的量与溶剂ⅱ的体积比优选为(1.8～2.2)mol：(4.8～5.2)ml，更优选为(1.9～2.1)mol：(4.9～5.1)ml。
在本发明中，所述取代反应ⅰ的温度优选为0～90℃，更优选为10～80℃，最优选为30～50℃；所述取代反应ⅰ的时间优选为5～7小时，更优选为5.5～6.5小时，最优选为5.8～6.2小时。
在本发明中，所述取代反应ⅰ优选包括两个反应阶段：
将具有式ⅱ所示结构的化合物、溴丙炔与溶剂ⅱ混合，发生第一阶段反应，得到反应后的混合液；
将所述反应后的混合液与三氯氧磷混合，发生第二阶段反应，得到具有式ⅲ所示结构的化合物。
在本发明中，所述具有式ⅱ所示结构的化合物、溴丙炔与溶剂ⅱ的混合优选是将具有式ⅱ所示结构的化合物与溶剂ⅱ混合，然后向所得物料中滴加溴丙炔；本发明对所述滴加的速率没有任何特殊的限定，按照本领域技术人员熟知的滴加方式进行滴加并达到逐滴加入的目的即可。
在本发明中，所述第一阶段反应的温度优选为0～90℃，更优选为10～80℃，最优选为30～50℃；在本发明中，所述第一阶段反应的时间优选为3～5小时，更优选为3.5～4.5小时，最优选为3.8～4.2小时；在本发明中，所述第一阶段反应优选通过tlc检测取代1反应是否完成。
在本发明中，所述第一阶段反应优选在搅拌的条件下进行，本发明对所述搅拌的条件没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的条件进行搅拌即可。
在本发明中，所述第二阶段反应的温度优选为0～90℃，更优选为10～80℃，最优选为30～50℃；所述第二阶段反应的时间优选为0.5～1小时，更优选为0.6～0.9小时，最优选为0.7～0.8小时。
取代反应ⅰ完成后，本发明优选将反应产物与冰水混合，析出固体后进行抽滤和柱层析，得到具有式ⅲ所示结构的化合物。在本发明中，所述反应产物与冰水的混合优选在搅拌条件下进行；本发明对所述搅拌没有任何特殊的限定，按本领域技术人员熟知的搅拌过程进行搅拌即可；本发明对所述抽滤和柱层析没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的抽滤和柱层析过程、并达到固液分离和净化产物的目的即可。
得到具有式ⅲ所示结构的化合物后，本发明将所述具有式ⅲ所示结构的化合物、r1-h和溶剂ⅲ混合，发生取代反应ⅱ，得到2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物。
在本发明中，所述r1-h中的r1优选为为
在本发明中，所述具有式ⅲ所示结构的化合物、r1-h的摩尔比优选为(0.8～1.2)：(1.8～2.2)，更优选为(0.9～1.1)：(1.9～2.1)；在本发明中，所述具有式ⅲ所示结构的化合物的物质的量与溶剂ⅲ的体积比优选为1mol:(18～22)l，更优选为1mol：(19～31)l。
在本发明中，所述溶剂ⅲ优选为丙酮、n，n-二甲基甲酰胺、乙腈、甲醇、异丙醇、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二氧六环和水中的一种或几种；当所述溶剂ⅲ为上述具体选择中的两种以上时，本发明对所述具体物质的比例没有任何特殊的限定，可按任意比例进行混合。
在本发明中，所述具有式ⅲ所示结构的化合物、r1-h和溶剂ⅲ的混合优选先将具有式ⅲ所示结构的化合物和溶剂ⅲ混合，得到混合物ⅱ；然后将混合物ⅱ与r1-h混合。在本发明中，所述具有式ⅲ所示结构的化合物和溶剂ⅲ的混合优选是将溶剂ⅲ加入到具有式ⅲ所示结构的化合物中；本发明对所述混合的温度和时间没有任何特殊的限定，按本领域技术人员熟知的混合温度和时间进行混合并达到充分溶解的目的即可。混合完成后，本发明优选将所述混合物ⅱ加热至55～65℃，更优选为58～62℃。在本发明中，所先将混合物ⅱ先加热再与r1-h混合可以充分溶解混合物ⅱ，更有利于反应进行。
在本发明中，所述混合物ⅱ与r1-h的混合优选在搅拌的条件下进行，本发明对所述搅拌没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的条件进行即可。
在本发明中，所述取代反应ⅱ的温度优选为0～90℃，更优选为10～80℃，最优选为30～50℃；在本发明中，所述取代反应ⅱ优选在加热回流的条件下进行；所述取代反应ⅱ的时间优选为9～11小时，更优选为9.5～10.5小时最优选为9.8～10.2小时；所述取代反应ⅱ通过tlc跟踪检测反应是否完成。
取代反应ⅱ完成后，本发明优选对反应产物进行后处理；所述后处理优选包括冷凝、析出固体、抽滤和重结晶。本发明对所述冷凝、析出固体、抽滤和重结晶没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员所熟知的条件进行即可。
本发明还提供了所述的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。在本发明中，所述抗肿瘤药物优选是以dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用为靶标。
下面结合实施例对本发明提供的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将氰基乙酸乙酯(2.3g,20mmol)与氢氧化钾(1.2g,30mmol)加入到50ml乙醇(ar)中，90℃条件下搅拌溶解，再将硫脲(2.3g,30mmol)和香豆素-6-甲醛(5.22g,30mmol)加入反应体系中，90℃条件下继续搅拌10h，tlc跟踪检测。反应结束后，抽滤，重结晶，得到具有式ⅱ-1所示结构的化合物；
将具有式ⅱ-1所示结构的化合物(6.7g,20mmol)与1,4-二氧六环(ar，50ml)混合，向所得溶液中逐滴加入溴丙炔(3.6g,30mmol)，60℃加热搅拌反应。用tlc监测反应进程，直至反应完成；未经分离，直接向反应体系中滴加三氯氧磷(4.6g,30mmol)，反应完成后，将所得反应产物倒入冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，得到固体，经柱层析得到具有iii-1所示结构的化合物。所述具有iii-1所示结构的化合物为黄色固体，熔点为188～189℃，产率52.1％。
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.42(d,j＝2.2hz,1h,-ch＝),8.26(dd,j＝8.7,2.2hz,1h,-ch＝),8.21(d,j＝9.6hz,1h,ar-h),7.66(d,j＝8.7hz,1h,ar-h),6.63(d,j＝9.6hz,1h,ar-h),4.15(d,j＝2.6hz,2h,-ch2-),3.27(t,j＝2.6hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c17h8cln3o2s,[m+na]+m/z:375.9923,found:375.9925。
将具有式iii-1所示结构的化合物(353mg,1mmol)加入50ml圆底烧瓶中，加入20ml乙醇，溶解后，加热至60℃，搅拌下加入1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑(116mg,2mmol)，加热回流反应，tlc跟踪监测。待反应完成后，冷凝，析出固体，抽滤，用乙醇重结晶得到具有式i-1所示结构的化合物。所述具有式i-1所示结构的化合物为白色固体，熔点为184～186℃，产率88.5％。
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.36(d,j＝1.7hz,1h,ar-h),8.22(dd,j＝6.2,4.0hz,2h,ar-h),7.66(d,j＝14.7hz,1h,ar-h),6.62(d,j＝9.6hz,1h,ar-h),4.14(s,3h,-ch3),3.57(d,2h,-ch2-),3.17(s,1h,j＝2.5hz,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c19h11n7o2s2,[m+na]+m/z:456.0313,found:456.0315。
实施例2
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-2所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为噻吩醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-2所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-2所示结构的化合物；所示式ⅰ-2所示结构的化合物为白色固体，熔点为183～184℃，产率为83.9％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.32(s,1h,ar-h),8.13(d,j＝4.1hz,1h,ar-h),7.39(s,1h,ar-h),4.11(s,3h,-ch3),3.59(d,2h,-ch2-),3.15(t,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c14h9n7s3,[m+na]+m/z:393.9979,found:393.9982。
实施例3
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-3所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为吲哚醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-3所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-3所示结构的化合物；所述式ⅰ-3所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为227℃，产率为86.6％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ12.37(s,1h,nh,d2oexchangeable),8.63(d,j＝3.0hz,1h,-ch＝),8.41(d,j＝7.8hz,1h,ar-h),7.57(d,j＝7.9hz,1h,ar-h),7.29(t,j＝7.3hz,1h,ar-h),7.24(t,j＝7.5hz,1h,ar-h),4.13(s,3h,-ch3),3.59(d,j＝2.3hz,2h,-ch2-),3.17(t,j＝2.4hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c18h12n8s2,[m+na]+m/z:427.0524,found:427.0525。
实施例4
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-4所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为2-吡咯醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-4所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-4所示结构的化合物；所述式ⅰ-4所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为189～190℃，产率为51.6％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ12.08(s,1h,nh,d2oexchangeable),7.49(s,1h,-ch＝),7.29(s,1h,-ch＝),6.53–6.32(m,1h,-ch＝),4.10(s,3h,-ch3),3.69(d,j＝2.6hz,2h,-ch2-),3.15(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c14h10n8s2,[m+na]+m/z:418.0521,found:418.0521。
实施例5
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-5所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为对氯苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-5所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-5所示结构的化合物；所述式ⅰ-5所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为179℃，产率为87.7％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.02(s,1h,ar-h),7.97(d,j＝7.9hz,1h,ar-h),7.81–7.75(m,1h,-ch＝),7.69(t,j＝7.9hz,1h,-ch＝),4.99(t,j＝6.6hz,2h,-ch2-),3.69(t,j＝5.1hz,2h,-ch2-),3.67(d,j＝2.2hz,2h,-ch2-),3.21(t,j＝2.4hz,1h,≡c-h),2.84(s,6h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c19h17cln8s2,[m+h]+m/z:457.0784,found:457.0785。
实施例6
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-6所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-6所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-6所示结构的化合物；所述式ⅰ-6所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为156～158℃，产率为89.8％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.21(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),8.12(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),7.93(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),7.43(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),3.80(d,j＝2.5hz,2h,-ch2-),3.15(t,j＝2.4hz,1h,≡c-h),2.41(d,j＝6.0hz,3h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c18h12n4s3,[m+na]+m/z:403.0122,found:403.0123。
实施例7
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-7所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为间氯苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-7所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-7所示结构的化合物；所述式ⅰ-7所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为174～175℃，产率为67.1％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.86(d,j＝4.9hz,2h,-ch＝),7.94(d,j＝8.0hz,2h,ar-h),7.55(t,j＝4.9hz,1h,-ch＝),7.44(d,j＝8.0hz,2h,ar-h),3.90(d,j＝2.2hz,2h,-ch2-),3.16(s,1h,≡c-h),2.43(s,3h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c19h13n5s2,[m+na]+m/z:398.0510,found:398.0508。
实施例8
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-8所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为对甲基苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-8所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-8所示结构的化合物；所述式ⅰ-8所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为189～192℃，产率为89.9％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.56(s,1h,ar-h),7.54(d,j＝3.7hz,2h,ar-h),7.25(dt,j＝6.9,2.2hz,1h,ar-h),4.12(s,3h,-ch3),3.84(s,3h,-ch3),3.61(d,j＝2.4hz,2h,-ch2-),3.17(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c17h13n7os2,[m+na]+m/z:418.0521,found:418.0521。
实施例9
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-9所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为间对二氯苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-9所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-9所示结构的化合物；所述式ⅰ-9所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为136℃，产率为73.2％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.21(t,j＝10.7hz,1h,-ch＝),8.13(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),8.03(d,j＝8.6hz,2h,ar-h),7.71(d,j＝8.6hz,2h,ar-h),3.79(d,j＝2.4hz,2h,-ch2-),3.15(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c17h9cln4s3,[m+na]+m/z:422.9576,found:422.9578。
实施例10
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-10所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为对溴苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-10所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-10所示结构的化合物；所述式ⅰ-10所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为159～160℃，产率为89％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.94(d,j＝8.5hz,2h,ar-h),7.86(d,j＝8.5hz,2h,ar-h),4.13(s,3h,-ch3),3.59(d,j＝2.1hz,2h,-ch2-),3.15(s,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c16h10brn7s2,[m+na]+m/z:418.0521,found:418.0520。
实施例11
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为间对间三甲氧基苯甲醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-11所示结构的化合物；所述式ⅰ-11所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为179～180℃，产率为80％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.40(s,2h,ar-h),4.12(s,3h,-ch3),3.87(s,6h,-ch3),3.80(s,3h,-ch3),3.67(d,j＝2.2hz,2h,-ch2-),3.20(t,j＝2.3hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c19h17n7o3s2,[m+na]+m/z:478.0732,found:478.0733。
实施例12
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-1所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-1所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-12所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-巯基-1h-四氮唑；所述式ⅰ-12所示结构的化合物为黄色固体产物，熔点为197～198℃，产率为72.4％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.39(s,1h,ar-h),8.27–8.19(m,2h,ar-h),7.66(d,j＝8.7hz,1h,ar-h),6.63(d,j＝9.6hz,1h,ar-h),5.00(t,j＝6.5hz,2h,-ch2-),3.69(d,j＝4.9hz,2h,-ch2-),3.66(d,j＝1.9hz,2h,-ch2-),3.23(t,j＝2.3hz,1h,≡c-h),2.83(s,6h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c22h18n8o2s2,[m+na]+m/z:513.0892,found:513.0893。
实施例13
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-13所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-巯基-1h-四氮唑；所述式ⅰ-13所示结构的化合物为黄色固体产物，熔点为197～198℃，产率为75.9％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.42(s,2h,ar-h),4.99(t,j＝6.6hz,2h,-ch2-),3.87(s,6h,-ch3),3.79(s,3h,-ch3),3.72(d,j＝2.3hz,2h,-ch2-),3.69(t,j＝6.6hz,2h,-ch2-),3.25(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h),2.83(s,6h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c22h24n8o3s2,[m+na]+m/z:513.1491,found:513.1491。
实施例14
采用与实施例8中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-8所示结构的化合物；
采用与实施例8中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-8所示结构的化合物；
采用与实施例8中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-14所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-巯基-1h-四氮唑；所述式ⅰ-14所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为141～142℃，产率为83.4％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.95(d,j＝3.9hz,2h,ar-h),7.50(d,j＝8.0hz,2h,ar-h),4.14(d,j＝4.0hz,3h,-ch3),3.60(s,2h,-ch2-),3.15(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h),3.05–2.96(m,1h,-ch),1.25(d,j＝6.8hz,6h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c19h17n7s2,[m+na]+m/z:430.0885,found:430.0886。
实施例15
采用与实施例5中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-5所示结构的化合物；
采用与实施例5中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-5所示结构的化合物；
采用与实施例5中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-15所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-巯基-1h-四氮唑；；所述式ⅰ-15所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为171～172℃，产率为65.4％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.24–8.21(m,1h,ar-h),8.13(d,j＝2.9hz,1h,ar-h),8.03(s,1h,ar-h),7.96(d,j＝7.6hz,1h,ar-h),7.75(d,j＝8.0hz,1h,-ch＝),7.66(t,j＝7.8hz,1h,-ch＝),3.80(s,2h,-ch2-),3.15(s,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c17h9cln4s3,[m+na]+m/z:422.9576,found:422.9577。
实施例16
采用与实施例7中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-7所示结构的化合物；
采用与实施例7中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-7所示结构的化合物；
采用与实施例7中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-16所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-巯基-1h-四氮唑；；所述式ⅰ-16所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为130～131℃，产率为81.9％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.17(d,j＝7.5hz,2h,ar-h),8.07(s,1h,ar-h),7.59–7.55(m,2h,ar-h),4.10(s,3h,-ch3),3.67(d,2h,-ch2-),3.11(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c16h11n7s2,[m+na]+m/z:388.0415,found:388.0415。
实施例17
采用与实施例9中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-9所示结构的化合物；
采用与实施例9中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-9所示结构的化合物；
采用与实施例9中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-17所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-巯基-1h-四氮唑；所述式ⅰ-17所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为213～215℃，产率为62.9％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.87(d,j＝4.0hz,2h,-ch＝),8.04(d,j＝7.6hz,2h,ar-h),7.72(d,j＝7.8hz,2h,ar-h),7.57(s,1h,-ch＝),3.89(s,2h,-ch2-),3.15(s,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c18h10cln5s2,[m+na]+m/z:417.9964,found:417.9960。
实施例18
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-18所示结构的化合物；所述式ⅰ-18所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为176～178℃，产率为32.8％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.62(s,1h,-ch＝),7.38(s,2h,ar-h),7.22(s,1h,-ch＝),3.87(s,6h,-ch3),3.79(s,3h,-ch3),3.68(s,2h,-ch2-),3.67(s,3h,-ch3),3.20(t,j＝2.2hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c21h19n5o3s2,[m+na]+m/z:476.0827,found:476.0828。
实施例19
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-1所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-1所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-19所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-19所示结构的化合物为黄色固体产物，熔点为226～228℃，产率为90.8％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.37(d,j＝1.9hz,1h,ar-h),8.23(d,j＝3.3hz,1h,ar-h),8.22(d,j＝2.5hz,1h,-ch＝),8.20(s,1h,-ch＝),8.13(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),7.64(d,j＝8.7hz,1h,-ch＝),6.62(d,j＝9.6hz,1h,ar-h),3.80(d,j＝2.4hz,2h,-ch2-),3.16(t,j＝2.4hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c20h10n4o2s3,[m+na]+m/z:456.9864,found:456.9862。
实施例20
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-20所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-20所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为172～174℃，产率为72.4％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm),8.20(d,j＝3.2hz,1h,-ch＝),8.11(d,j＝3.2hz,1h,-ch＝),7.42(s,2h,ar-h),3.87(s,6h,-ch3),3.85(s,2h,-ch2-),3.79(s,3h,-ch3),3.18(s,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c20h16n4o3s3,[m+na]+m/z:479.0282,found:479.0284。
实施例21
采用与实施例9中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-9所示结构的化合物；
采用与实施例9中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-9所示结构的化合物；
采用与实施例9中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-21所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-21所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为142～143℃，产率为88.0％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.23(d,j＝3.1hz,2h,ar-h),8.13(d,j＝3.3hz,1h,ar-h),7.98(dd,j＝8.4,1.7hz,1h,-ch＝),7.91(d,j＝8.4hz,1h,-ch＝),3.80(d,j＝2.3hz,2h,-ch2-),3.15(s,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c17h8cl2n4s3,[m+na]+m/z:456.9186,found:456.9187。
实施例22
采用与实施例8中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-8所示结构的化合物；
采用与实施例8中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-8所示结构的化合物；
采用与实施例8中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-22所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-22所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为164～165℃，产率为83.1％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.92(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),7.44(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),4.13(s,3h,-ch3),3.56(t,j＝20.3hz,2h,-ch2-),3.15(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h),2.42(s,3h,-ch3).hr-ms(esi),calcd.c17h13n7s2,[m+na]+m/z:402.0572,found:402.0573。
实施例23
采用与实施例5中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-5所示结构的化合物；
采用与实施例5中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-5所示结构的化合物；
采用与实施例5中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-23所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-23所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为163～164℃，产率为87.7％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.02(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.74(t,j＝19.1hz,2h,ar-h),4.13(s,3h,-ch3),3.59(s,2h,-ch2-),3.15(s,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c16h10cln7s2,[m+na]+m/z:422.0025,found:422.0025。
实施例24
采用与实施例10中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-10所示结构的化合物；
采用与实施例10中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-10所示结构的化合物；
采用与实施例10中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-24所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-24所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为238～239℃，产率为78.1％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.23(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),8.13(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),7.97–7.91(m,2h,ar-h),7.88–7.82(m,2h,ar-h),3.79(d,j＝2.6hz,2h,-ch2-),3.14(t,j＝2.6hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c17h9brn4s3,[m+na]+m/z:466.9070,found:466.9073。
实施例25
采用与实施例1中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-25所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为4-吡啶醛；
采用与实施例1中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-25所示结构的化合物；
采用与实施例1中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-25所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为巯基噻唑；所述式ⅰ-25所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为189～192℃，产率为76.3％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.87(dd,j＝4.5,1.5hz,2h,ar-h),8.24(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),8.14(d,j＝3.3hz,1h,-ch＝),7.91(dd,j＝4.5,1.6hz,2h,ar-h),3.79(d,j＝2.5hz,2h,-ch2-),3.14(t,j＝2.6hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c16h9n5s3,[m+na]+m/z:389.9918,found:389.9919。
实施例26
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物，区别仅在于将香豆素-6-甲醛替换为m,p,m-三甲氧基苯甲醛；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-26所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为5-巯基-1,3,4-噻二唑；所述式ⅰ-26所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为228℃，产率为81.1％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ9.96(s,1h,-ch＝),7.45(s,2h,ar-h),3.94(d,j＝2.5hz,2h,-ch2-),3.87(s,6h,-ch3),3.79(s,3h,-ch3),3.20(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c19h15n5o3s3,[m+h]+m/z:452.0851,found:452.0850。
实施例27
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-27所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为2-巯基-3氨基噻唑；所述式ⅰ-27所示结构的化合物为黄色固体产物，熔点为189～192℃，产率为89.3％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.87(s,2h,-ch＝),7.42(s,2h,ar-h),3.95(d,j＝2.1hz,2h,-ch2-),3.86(s,6h,-ch3),3.79(s,3h,-ch3),3.17(d,j＝2.2hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c21h18n4o3s3,[m+na]+m/z:493.0439,found:493.0438。
实施例28
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-28所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑；所述式ⅰ-28所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为181～182℃，产率为65.1％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.83(s,2h,nh,d2oexchangeable),7.43(d,j＝0.6hz,2h,ar-h),3.94(t,j＝7.4hz,2h,-ch2-),3.87(s,6h,-ch3),3.79(d,j＝0.8hz,3h,-ch3),3.18(dd,j＝2.5,1.6hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c19h16n6o3s3,[m+h]+m/z:458.0415,found:458.0414。
实施例29
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-29所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为氨基嘧啶；所述式ⅰ-29所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为205～206℃，产率为72.7％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.86(d,j＝4.9hz,2h,-ch＝),7.55(t,j＝4.9hz,1h,-ch＝),7.44(s,2h,ar-h),3.94(d,j＝2.5hz,2h,-ch2-),3.87(s,6h,-ch3),3.79(s,3h,-ch3),3.21(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c21h17n5o3s2,[m+h]+m/z:407.0619,found:407.0618。
实施例30
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-30所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-巯基-苯并[d]噻唑；所述式ⅰ-30所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为223～334℃，产率为69.0％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ8.25–8.17(m,1h,ar-h),8.10(d,j＝7.6hz,1h,ar-h),7.58(dtd,j＝16.4,7.3,1.3hz,2h,ar-h),7.47(s,2h,ar-h),3.92(d,j＝2.4hz,2h,-ch2-),3.88(s,6h,-ch3),3.80(s,3h,-ch3),3.15(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c24h18n4o3s3,[m+na]+m/z:529.0439,found:529.0439。
实施例31
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-31所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为1-甲基5-氨基-1h-四氮唑；所述式ⅰ-31所示结构的化合物为黄色固体产物，熔点为205℃，产率为94.1％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ7.38(s,2h,ar-h),3.93(s,3h,-ch3),3.87(s,6h,-ch3),3.85(d,j＝1.8hz,2h,-ch2-),3.78(s,3h,-ch3),3.16(t,j＝2.5hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c19h18n8o3s,[m+na]+m/z:461.1120,found:461.1122。
实施例32
采用与实施例11中式ⅱ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅱ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅲ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅲ-11所示结构的化合物；
采用与实施例11中式ⅰ-1所示结构的化合物相同的制备方法得到式ⅰ-32所示结构的化合物；区别仅在于将1-甲基-5-巯基-1h-四氮唑替换为哌嗪；所述式ⅰ-32所示结构的化合物为白色固体产物，熔点为242℃，产率为89.0％；
分析结果如下：1hnmr(400mhz,dmso-d6,ppm)δ9.72(s,1h,nh,d2oexchangeable),7.30(s,2h,ar-h),4.19(s,4h,-ch2-),4.03(d,j＝2.1hz,2h,-ch2-),3.86(s,6h,-ch3),3.77(s,3h,-ch3),3.34(s,4h,-ch2-),3.21(t,j＝2.3hz,1h,≡c-h).hr-ms(esi),calcd.c21h23n5o3s,[m+h]+m/z:426.1600,found:426.1602。
实施例33
对实施例1～32得到的化合物的dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用的抑制活性进行测定：
将实施例1～32得到的化合物加入4μl的dmso溶液中与测定缓冲液中的预温育的蛋白质/探针复合溶液(196μl)混合；
加入测试平板，在室温下温育30分钟并轻轻摇动。dcn1蛋白和荧光探针的最终浓度分别为50nm和5nm；
每个测试平板含有阴性对照(仅含有蛋白质/探针复合物)和阳性对照(仅含有游离探针)；
通过prism/graphpad软件中的剂量响应抑制方程(四个参数，可变斜率)，使用竞争曲线的非线性回归拟合来确定ic50值；
试验结果如表1所示：
表1实施例1～32得到的化合物对dcn1-ubc12蛋白-蛋白
相互作用的抑制活性数据
由以上实施例可知，本发明提供了一种具有式ⅰ所示结构的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物，本发明所述的2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物对dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用较临床上已使用的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶有更好的抑制作用。根据实施例的记载，所述2-炔丙巯基-5-氰基嘧啶类衍生物对dcn1-ubc12蛋白-蛋白相互作用具有较好的抑制活性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。