技术特征:
技术总结
本发明公开了一种荧光素酶报告基因法犬干扰素α生物学活性检测方法及其应用。该方法包括以下步骤:采用PCR扩增获取犬Mx1蛋白的pMx1的基因片段;将pMx1的基因片段插入pGL3‑basic载体luc基因的5'端,再采用PCR扩增得到pMx1‑luc融合基因片段;用pMx1‑luc融合基因片段替代pEGFP‑N1载体中的pCMV和EGFP的基因片段,构建pMx1‑luc质粒,转染细胞,并选出稳定转染细胞株;对筛选出的稳定转染细胞株进行克隆化培养;以梯度稀释的犬干扰素α标准品制备标准曲线,将待检犬干扰素α样品加入克隆化培养后的细胞中共孵育,然后检测荧光强度,结合标准曲线评价待检犬干扰素α样品的效价。
技术研发人员:单雪芹;徐文俊;王亚男;李雅森;赵雨;蒋敏之;郭志燕
受保护的技术使用者:安徽九川生物科技有限公司
技术研发日:2018.06.21
技术公布日:2018.11.06