高产葡聚糖的富硒裂褶菌的制备方法及其应用与流程

本发明涉及食用菌及其天然产物领域，具体涉及富硒裂褶菌的培养。

背景技术：

白参又称为树花，分类命名为裂褶菌(schizophyllumcommune)，属于真菌门，担子菌亚门，层菌纲，非褶菌目，裂褶菌科，裂褶菌属。广泛分布于世界各地，主要腐生在土壤、腐木、枯枝落叶层上，大多在阔叶林下生长，少数在针叶及竹叶林下生长。裂褶菌能够利用培养基中葡萄糖进行β-葡聚糖的合成，β-葡聚糖作为高效的免疫促进剂在国内外的食品领域内或是医药领域都得到了广泛的应用。

硒元素作为一种人体必需的微量元素，具有多种功能。硒能够增强免疫系统对病毒、异物及体内病变的识别能力，提高免疫系统细胞吞噬、杀菌的能力，提高免疫系统细胞增殖、抗体合成的水平，从而提高机体免疫功能。因此，结合β-葡聚糖和硒元素在提供免疫力方面的作用，开发富硒裂褶菌及其菌粉具有重要意义。

技术实现要素：

本发明以一种海洋裂褶菌，其分类命名为裂褶菌(schizophyllumcommune.)，此菌株已于2016年1月18日保存在位于武汉的中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏编号为：cctccm2016055，为生产和研究菌株，进行高产葡聚糖的富硒裂褶菌的开发，该菌株已在中国专利申请cn20160079964.9中公开。

本发明进一步提供高产葡聚糖的富硒裂褶菌的制备方法，该方法包括以下步骤：以0.5～10％的接种比例将上述裂褶菌接种到发酵培养基，23-30℃，150-250rpm下摇瓶培养1-10天；然后对裂褶菌发酵培养液进行粉碎、均质、杀菌、喷雾干燥得到高含量的β-葡聚糖富硒裂褶菌粉。

所述发酵培养基配方为：葡萄糖30-100g/l，酵母粉1-10g/l，磷酸二氢钾0.1-1g/l，硫酸镁0.1-1g/l，亚硒酸钠0.05-1.5g/l。

本发明的优点和有益效果：本发明通过对海洋裂褶菌cctccm2016055进行富硒培养，得到了高产葡聚糖的富硒裂褶菌，其培养所得的产物中β-葡聚糖总量大于1％，总硒含量100-3000mg/kg，有机硒含量50-2950mg/kg，目标物质含量高，有利于大规模生产；其次培养液可干燥制粉，延长保质时间，同时无论目标物质或是制得的粉状物水溶性均良好；可在食品、药品、化妆品等领域推广应用。

附图说明

图1所示的是本发明实施例1中裂褶菌菌体生长相应指标变化。

图2所示的是本发明实施例2中裂褶菌菌体生长相应指标变化。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步具体描述。应该指出，以下具体说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有说明，本发明使用的所有科学和技术术语具有与本发明所属技术领域人员通常理解的相同含义。

实施例1：富硒裂褶菌的培养

发酵培养基配方为：葡萄糖80g/l，酵母粉5g/l，磷酸二氢钾0.5g/l，硫酸镁0.6g/l，添加不同浓度的亚硒酸钠0.05-3g/l，亚硒酸钠的浓度点如图1横轴所示。分装锥形瓶，加塞、包扎，(115℃)灭菌30分钟。后接种裂褶菌(cctccm2016055)菌种1％左右，160-180rpm/min，26-27℃培养。培养120h检测β-葡聚糖含量，总硒和有机硒含量，计算有机硒转化率。

β-葡聚糖含量的检测方法按照中华人民共和国农业行业标准《谷物及制品中β-葡聚糖含量的测定》(ny/t2006-2011)方法检测，总硒的含量检测参考《食品安全国家标准食品中硒的测定》(gb5009.93)的检测方法，有机硒的含量检测参考《食品安全国家标准食品营养强化剂富硒食用菌粉》(gb1903.22—2016)。

结合图1可知，随着亚硒酸钠的浓度提高，有机硒的含量逐步提高，但当亚硒酸钠浓度达到1.2g/l以上时，尽管有机硒的总量相对较高，但是有机硒转化率逐步降低。葡聚糖的含量也在1.2g/l亚硒酸钠时达到最高的21.5g/l。因此选择1.2g/l浓度的亚硒酸钠作为实施例2的添加浓度。

实施例2：

发酵培养基配方为：葡萄糖80g/l，酵母粉5g/l，磷酸二氢钾0.5g/l，硫酸镁0.6g/l，亚硒酸钠1.2g/l，不同时间段取样分析。分装锥形瓶，加塞、包扎，(115℃)灭菌30分钟。接种裂褶菌菌种1％左右，160-180rpm/min，26-27℃培养。培养过程中检测β-葡聚糖含量，总硒和有机硒含量。

β-葡聚糖含量的检测方法按照中华人民共和国农业行业标准《谷物及制品中β-葡聚糖含量的测定》(ny/t2006-2011)方法检测，总硒的含量检测参考《食品安全国家标准食品中硒的测定》(gb5009.93)的检测方法，有机硒的含量检测参考《食品安全国家标准食品营养强化剂富硒食用菌粉》(gb1903.22—2016)。

结合图2可知，随着培养时间的延长，有机硒的含量逐步提高，在培养时间达到120小时时，有机硒转化率达到98.3％，有机硒含量达到1180mg/l，β-葡聚糖含量达到21.5g/l，此后有机硒转化率和含量以及葡聚糖的含量基本不发生变化，因此优选培养时间为120h。

实施例3：裂褶菌粉的制备

以实施例2的裂褶菌发酵培养物为材料，收集发酵液，采用胶体磨连续重复研磨直到裂褶菌胶体通过100目振动筛，经过振动筛过滤后的均一液体采用高温瞬时杀菌器进行杀菌，杀菌公式为：105-131℃，15-45s。杀菌过后的裂褶菌胶体导入成品罐，进行喷雾干燥，喷雾干燥进风温度180-200℃，出风温度80-90℃，收集喷雾干燥后的粉末，过80目振动筛，得裂褶菌粉粗品。

根据产品对于β-葡聚糖含量和硒含量的技术需求，添加一定的麦芽糊精、淀粉、玉米淀粉等食品用填充剂，生产不同规格的高葡聚糖富硒裂褶菌粉，主要产品β-葡聚糖总量大于1％，总硒含量100-3000mg/kg，有机硒含量50-2950mg/kg。

本发明实施例涉及到的材料、试剂和实验设备，如无特别说明，均为符合微生物领域的市售产品。

以上所述，仅为本发明的优选实施例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的核心技术的前提下，还可以做出改进和润饰，这些改进和润饰也应属于本发明的专利保护范围。与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

技术特征：

技术总结
本发明提供富硒裂褶菌的制备方法，步骤包括以0.5～10％的接种比例将裂褶菌接种到发酵培养基，23‑30℃，150‑250rpm下摇瓶培养1‑10天；本发明以一种海洋裂褶菌，分类命名为裂褶菌(Schizophyllum commune.)，保藏编号为：CCTCC M 2016055，为生产和研究菌株，进行高产葡聚糖的富硒裂褶菌的开发，获得了富含葡聚糖的富硒裂褶菌，融合β‑葡聚糖和硒元素在提高免疫力方面的作用，所得产物可应用于食品、化妆品和医药领域，适合工业化生产，具有极大的应用推广价值。

技术研发人员：田健;吴倩;杨潇;诸辉
受保护的技术使用者：海门颐达医药科技有限公司
技术研发日：2018.11.15
技术公布日：2019.02.19