一种抗氧化性椰子多肽及其制备方法与应用与流程

文档序号:17538158发布日期:2019-04-29 14:13阅读:369来源:国知局

本发明属于食品及化妆品技术领域,具体涉及一种抗氧化性椰子多肽及其制备方法与应用。



背景技术:

自由基是人体生命活动中各种化学反应的中间代谢产物,具有高度的化学活性,若不能维持在一定水平则会影响人体的生命活动,但自由基过多则会攻击人机体内的生命大分子以及细胞器,导致脂质过氧化和抗氧化物酶活性的减弱,从而造成细胞损伤,加速人体的衰老过程并诱发各种疾病。因此抗氧化剂对清除人体自由基和预防人类各种疾病具有重要意义。目前市场上使用的主要是以化学合成的2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和叔丁基对苯二酚最为广泛,但毒理实验表明化学合成抗氧化剂毒副作用较大,对人体肝、脾、肺等均有不利影响。所以开发天然无毒的抗氧化剂已成为近年来国内外学者的研究热点。目前已经通过酶解、发酵等技术从猪肉、鸡蛋、牡蛎、大豆、牡丹籽粕、小球藻等多种食源性蛋白中获得了具有抗氧化活性的多肽。其中酶解法成本更低,更易于操作,同时制备的生物活性肽具有良好的溶解性、耐酸和耐热稳定性。

椰子是药食同源蔬果,是一种经济价值和营养价值都很高的植物,除了生产椰子油外,还可加工成椰子汁、椰子糖、椰子糕、椰子饼等营养丰富的特色食品。椰子粕是椰子提取油脂后的副产物,其中蛋白质含量高达20%,蛋白中氨基酸种类齐全,具有一定降血脂、降低胆固醇以及抑制高血脂症等生理功能,是一种优质的蛋白质资源。但由于适口性差,长期以来多被当作饲料使用或自然排放,造成了蛋白质资源的巨大浪费。与椰子蛋白相比,椰子多肽由于分子量小,更容易被人体吸收利用,而且具有抗氧化性和降血脂等生理功能,在食品和化妆品等领域中具有广阔的应用前景。申请号为201210041195.5的中国专利公开了一种采用琉基蛋白酶与复合蛋白酶两种蛋白酶分两步水解椰子蛋白制备椰子多肽工艺,申请号为201710946924.4的中国专利公开了一种采用纤维素酶+糖化酶+胰酶与木瓜蛋白酶+复合风味蛋白酶二次酶解椰子蛋白制备椰子多肽的工艺,但都没有涉及利用复合酶同步酶解来制备抗氧化活性肽的技术,因此研究一种抗氧化性椰子多肽的制备工艺对于提高椰子粕的应用价值具有重要意义。



技术实现要素:

为了克服现有技术的缺点与不足,本发明的首要目的在于提供一种抗氧化性椰子多肽的制备方法。

本发明的另一目的在于提供通过上述制备方法制备得到的抗氧化性椰子多肽。

本发明的再一目的在于提供上述抗氧化性椰子多肽的应用。

本发明通过复合蛋白酶同步酶解提供一种制备简单、抗氧化活性强的椰子粕抗氧化活性多肽,并且可以将抗氧化活性多肽应用于食品和化妆品的研制和开发,实现椰子粕资源的综合利用,提高其应用价值。

本发明的目的通过下述技术方案实现:

一种抗氧化性椰子多肽的制备方法,包括如下步骤:

(1)椰子粕经预处理,得到精椰子粕粉;

(2)将精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:15~25混合后,调节混合液的ph至6~9,按照精椰子粕粉质量的2~3%加入复合蛋白酶在50~60℃条件下进行酶解反应1~4h,得到酶解液;

所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少两种;

(3)步骤(2)获得的酶解液经灭酶活、离心分离,上清液采用分子截留量为5000da以下的超滤膜超滤分离,滤液冷冻干燥得到抗氧化性椰子多肽。

优选的,步骤(1)中所述的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合;

优选的,步骤(1)中所述的复合蛋白酶的用量为按照精椰子粕粉质量的2%加入复合蛋白酶。

优选的,步骤(1)中所述的精椰子粕粉的制备方法,包括如下步骤:

将椰子粕按照质量体积比1:20加入至乙醇中,130℃回流3h,分离干燥得到脱脂椰子粕粉;然后按料液比1:25加入脱脂椰子粕粉和蒸馏水,调节ph至9,高速搅拌下50℃处理2h,离心取上清液,然后调节ph至3.5~3.6,离心收集沉淀,水洗至中性后冷冻干燥,得精椰子粕粉。

优选的,步骤(1)中所述的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶-中性蛋白酶、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶、中性--蛋白酶-菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶-木瓜性蛋白酶-中性蛋白酶。

更优选的,步骤(1)中所述的复合蛋白酶包括以质量比计,碱性蛋白酶-中性蛋白酶=1:0.5~2、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.2~0.8、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶=1:0.25~1、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶=1:0.25~1、中性蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.2~0.8、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.4~1.6、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.5:0.2~0.8、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-中性蛋白酶=1:0.5:0.5~2。

进一步优选的,所述的复合蛋白酶包括以质量比计,碱性蛋白酶-中性蛋白酶=1:1~2、碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.2~0.4、中性蛋白酶-木瓜蛋白酶=1:0.25~1、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶=1:0.25~1、中性蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.4~0.8、木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.8~1.6、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶=1:0.5:0.8、碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-中性蛋白酶=1:0.5:2。

所述的碱性蛋白酶酶活力≥200000u/g,中性蛋白酶酶活力为≥200000u/g,菠萝蛋白酶酶活力≥500000u/g,木瓜蛋白酶酶活力≥400000u/g。

优选的,步骤(3)中所述的灭酶活的条件为90~95℃下灭酶5~10min;更优选为90℃下灭酶10min。

优选的,步骤(3)中所述的离心的条件为8000~10000rpm下离心分离5~10min;更优选为8000rpm下离心分离10min。

优选的,步骤(3)中,采用分子截留量为4000da的超滤膜超滤分离,多肽收率为精椰子粕粉质量的9.6~25.8%,多肽分子量为2547~3126da。

更优选的,多肽收率为精椰子粕粉质量的17.3~25.8%,多肽分子量为2547~2879da。

优选的,所制备的椰子多肽的dpph清除能力为57.3~84.5%,羟基自由基清除率为53.5~74.2%。

更优选的,所制备的椰子多肽的dpph清除能力为70.5~84.5%,羟基自由基清除率为60.4~74.2%。

一种抗氧化性椰子多肽,通过上述制备方法制备得到。

所述的抗氧化性椰子多肽作为食品或化妆品的抗氧化剂的应用。

进一步的,所述的抗氧化性椰子多肽在制备食品或化妆品中的应用。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:

(1)本发明利用椰子粕为原料,获得了通过复合蛋白酶同步酶解制备抗氧化椰子多肽的最佳工艺,为椰子粕的深加工提供了理论依据,并且制备工艺简单,多肽得率(9.6~25.8%)较单一蛋白酶(5.3~8.7%)更高,并且对dpph和羟基自由基都具有较强的清除能力,为食品及化妆品的抗氧化剂提供了一种新原料,并且安全无刺激。

(2)本发明对所得的椰子多肽制成2mg/ml的溶液进行抗氧化性评价,dpph清除能力为57.3~84.5%,羟基自由基清除率为53.5~74.2%。通过本发明的复合酶解工艺,得到椰子多肽的收率高,分子量低,抗氧化性效果明显,可以作为功能性添加剂广泛应用于食品及化妆品领域,对于提高椰子资源的综合应用价值具有重要意义。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。

实施例中所用的精椰子粕粉的制备方法,包括如下步骤:

将0g椰子粕放入索式提取器,加入200ml乙醇130℃回流3h,分离干燥得到脱脂椰子粕粉。按料液比1:25加入脱脂椰子粕粉和蒸馏水,调节ph至9,高速搅拌下50℃处理2h,离心取上清液,然后调节ph至3.5~3.6,离心收集沉淀,水洗至中性后冷冻干燥,得精椰子粕粉。

实施例1

将1g精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-中性蛋白酶,碱性蛋白酶-中性蛋白酶比例为1:2,在温度55℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试:抗氧化活性的测定方法:

(1)dpph自由基清除能力的测定

将制得的抗氧化性椰子多肽用蒸馏水配制成2mg/ml的溶液作为样液,进行测定。

将2ml的样液加入到2ml0.1mmol/ldpph(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)新鲜配制的乙醇溶液中,用力摇匀后,在黑暗中放置30min,用紫外-可见分光光度计在517nm处测定吸光度,用没有加样液的dpph乙醇溶液作为空白对照,清除率可以用以下公式表示:清除率(%)=(a0-ai)*100/a0;

式中,ai为加入样液后放置30min后的吸光度,a0为空白对照的吸光度。

(2)羟基自由基清除能力的测定

将制得的抗氧化性椰子多肽用蒸馏水配制成2mg/ml的溶液作为样液,进行测定。

在10ml试管中依次加入6mmol/l的硫酸亚铁1ml,6mmol/l水杨酸-乙醇1ml后,把样液1ml加入试管中,然后加入0.1%的过氧化氢1ml,总体积5ml,以双蒸水补足体积。其中对照管不加样液,样底管不加过氧化氢,摇匀后在37℃水浴中保温30min,测510nm处的吸光度值。清除率计算公式为:

清除率(%)=[b0-(b-bi)]*100/b0

式中,b0为不加样液时羟自由基体系的吸光度值;b为加入样液的羟自由基体系的吸光度值;bi为羟自由基反应体系中不加过氧化氢而加样液的吸光度值。

(3)多肽得率的测定

取适量抗氧化活性椰子多肽溶液,以5000r/min的速度离心10min,取上清液加入5ml10%三氯乙酸反应20min,再以5000r/min的速度离心10min,然后取上清液2ml,加入双缩脲试剂6ml,37℃水浴中反应30min,在540nm波长下测定吸光值,根据标准曲线回归方程计算出多肽的含量。

(4)多肽分子量的测定

将冷冻干燥后所得的多肽粉溶于水,用微孔过滤膜过滤,采用高效液相色谱法测定酶解产物分子量分布。实验在waters600高效液相色谱仪(配2487紫外检测器和m32工作站)上进行,工作条件如下:色谱柱:tskgelg2000sw×l(300×7.8mm);流动相:乙腈/水/tfa=45/55/0.1(v:v:v);检测波长为220nm;柱温30℃;流速0.5ml/min;

分子量校正曲线所用标准品:细胞色素c(mw12500);抑肽酶(mw6500);杆菌肽(mw1450);乙氨酰胺-乙氨酰胺-精氨酸(mw451);乙氨酰胺-乙氨酰胺-乙氨酸(mw189)。

本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的23.8%,dpph清除能力为79.2%,羟基自由基清除能力为74.2%,分子量为2736da。

实施例2

将1g精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至8,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-中性蛋白酶,碱性蛋白酶-中性蛋白酶比例为1:1,在温度55℃下搅拌反应3h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的20.6%,dpph清除能力为72.1%,羟基自由基清除能力为69.4%,分子量为2865da。

实施例3

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶,碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:0.4,在温度50℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的19.2%,dpph清除能力为75.2%,羟基自由基清除能力为65.3%,分子量为2742da。

实施例4

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至7,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶,碱性蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:0.2,在温度60℃下搅拌反应2h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的17.3%,dpph清除能力为70.5%,羟基自由基清除能力为60.4%,分子量为2879da。

实施例5

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至6,加入精椰子粕粉质量2%的中性蛋白酶-木瓜蛋白酶,中性蛋白酶-木瓜蛋白酶比例为1:1,在温度50℃下搅拌反应1h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的10.8%,dpph清除能力为59.4%,羟基自由基清除能力为62.8%,分子量为3094da。

实施例6

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至8,加入精椰子粕粉质量2%的中性蛋白酶-木瓜蛋白酶,中性蛋白酶-木瓜蛋白酶比例为1:0.25,在温度55℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的16.5%,dpph清除能力为68.2%,羟基自由基清除能力为67.9%,分子量为2981da。

实施例7

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶,碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶比例为1:0.5,在温度55℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的25.8%,dpph清除能力为84.5%,羟基自由基清除能力为71.6%,分子量为2547da。

实施例8

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至8,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶,碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶比例为1:1,在温度60℃下搅拌反应3h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的24.9%,dpph清除能力为82.7%,羟基自由基清除能力为69.8%,分子量为2683da。

实施例9

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶,碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶比例为1:0.25,在温度50℃下搅拌反应2h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的19.9%,dpph清除能力为74.9%,羟基自由基清除能力为62.7%,分子量为2806da。

实施例10

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至6,加入精椰子粕粉质量2%的中性蛋白酶-菠萝蛋白酶,中性蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:0.8,在温度55℃下搅拌反应1h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的9.6%,dpph清除能力为57.3%,羟基自由基清除能力为53.5%,分子量为3126da。

实施例11

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至6,加入精椰子粕粉质量2%的中性蛋白酶-菠萝蛋白酶,中性蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:0.4,在温度50℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化椰子活性多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的12.1%,dpph清除能力为64.5%,羟基自由基清除能力为59.2%,分子量为3058da。

实施例12

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至7,加入精椰子粕粉质量2%的木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶,木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:1.6,在温度55℃下搅拌反应2h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的14.7%,dpph清除能力为73.2%,羟基自由基清除能力为64.8%,分子量为2864da。

实施例13

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至8,加入精椰子粕粉质量2%的木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶,木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:0.8,在温度50℃下搅拌反应3h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的13.6%,dpph清除能力为69.4%,羟基自由基清除能力为61.3%,分子量为2942da。

实施例14

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶,碱性蛋白酶-木瓜蛋白酶-菠萝蛋白酶比例为1:0.5:0.8,在温度55℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的23.5%,dpph清除能力为82.6%,羟基自由基清除能力为64.3%,分子量为2673da。

实施例15

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶-木瓜性蛋白酶-中性蛋白酶,碱性蛋白酶-木瓜性蛋白酶-中性蛋白酶比例为1:0.5:2,在温度60℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的22.6%,dpph清除能力为76.2%,羟基自由基清除能力为71.6%,分子量为2749da。

对比例1

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶,在温度55℃下搅拌反应1h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的5.3%,dpph清除能力为40.6%,羟基自由基清除能力为38.3%,分子量为3379da。

对比例2

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶,在温度55℃下搅拌反应2h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的8.1%,dpph清除能力为51.4%,羟基自由基清除能力为45.1%,分子量为3182da。

对比例3

将1g的精椰子粕粉与蒸馏水按照质量比1:20混合后,调节混合液的ph至9,加入精椰子粕粉质量2%的碱性蛋白酶,在温度55℃下搅拌反应4h,90℃下灭酶10min,将酶解液在8000rpm下离心分离10min,取上清液用超滤膜(分子截留量是4000da)进行分离提纯,得抗氧化活性椰子多肽溶液,冷冻干燥后得到抗氧化性椰子多肽。

测试方法同实施例1的测试方法,本实施例测试结果为:酶解制备的多肽得率为精椰子粕粉质量的8.7%,dpph清除能力为56.2%,羟基自由基清除能力为49.6%,分子量为3041da。

上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。

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