本发明涉及培养基，具体地，涉及一种用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基及其制备方法。
背景技术：
：纤维素作为植物光合作用的主要多糖类产物，是高等植物细胞壁的主要成分，是公认的自然界数量最丰富、最廉价的可再生有机物质资源。据初步估计，我国每年农作物秸秆(稻草、玉米秸、麦秸等)中纤维素总量可达2亿吨左右。纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖。该酶在解决当前世界面临的能源、粮食、环境污染等危机方面具有重要意义。然而，迄今为止纤维素酶活和产率均较低、生产周期长、成本高，都严重地阻碍其工业化的应用。纤维素的降解有赖于纤维素酶。自然界中很多微生物可以产生纤维素酶，纤维素的降解是自然界碳素循环的中心环节。但由于纤维素的结构特点，对纤维素的利用仍然非常有限，目前仅有20％的纤维素物质被开发利用，大量的纤维素物质因无法分解利用而废弃，不仅造成资源浪费，而且污染环境。技术实现要素：本发明的目的是提供一种用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基及其制备方法，该用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基能够被产纤维素酶的混合菌剂充分地分解，同时该制备方法具有工序简单和操作简便的特点。为了实现上述目的，本发明提供了一种用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基的制备方法，包括：1)将淤泥与水混合，接着过滤取滤液，然后将滤液灭菌、浓缩去水以制得淤泥提取物；2)将秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕与水混合得到混合物，接着将混合物进行高压密封处理，然后向体系中添加蔗糖、蛋白胨、油酸钠、ph调节剂、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物混合以制得用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基；其中，培养基的ph为5.8-6.4。本发明还提供了一种用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基，该用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基通过上述的制备方法制备而得。通过上述技术方案，本发明首先在淤泥中制得淤泥提取物，然后选择秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕作为主料，选择蔗糖、蛋白胨、油酸钠、ph调节剂、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物作为辅料制成培养基，该培养基能够有利于产纤维素酶的混合菌剂的充分分解制得纤维素酶。本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。本发明提供了一种用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基的制备方法，包括：1)将淤泥与水混合，接着过滤取滤液，然后将滤液灭菌、浓缩去水以制得淤泥提取物；2)将秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕与水混合得到混合物，接着将混合物进行高压密封处理，然后向体系中添加蔗糖、蛋白胨、油酸钠、ph调节剂、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物混合以制得用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基；其中，培养基的ph为5.8-6.4。在本发明的步骤1)中，各物料的用量可以在宽的范围内选择，但是为了能够更高效率地提取出淤泥提取物，优选地，在步骤1)中，淤泥与水的重量比为1：8-10。在本发明的步骤1)中，灭菌以及浓缩的方式可以在宽的范围内选择，但是为了能够更高效率地提取出淤泥提取物，优选地，在步骤1)中，灭菌通过高压灭菌锅进行；浓缩通过旋转浓缩仪进行。在本发明的步骤2)中，各物料的用量可以在宽的范围内选择，但是为了使培养基能够分解出更多地纤维素酶，优选地，在步骤2)中，水、秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕、蔗糖、蛋白胨、油酸钠、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物的重量比为100：8-12：3-4：5-8：5-9：1.5-2.5：0.5-0.9：0.1-0.3：0.4-0.6：0.3-0.6：1-3。在本发明的步骤2)中，秸秆粉的种类可以在宽的范围内选择，但是为了使培养基能够分解出更多地纤维素酶，优选地，在步骤2)中，秸秆粉选自玉米杆粉、高粱杆粉、小麦秸秆粉、稻草秸秆粉中的至少一者。在本发明的步骤2)中，ph调节剂的种类可以在宽的范围内选择，但是为了从成本上考虑，优选地，在步骤2)中，ph调节剂选自草酸、乙酸、柠檬酸、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的至少一者。在本发明的步骤2)中，高压密封处理的方式可以在宽的范围内选择，但是为了使培养基能够分解出更多地纤维素酶，优选地，在步骤2)中，高压密封处理为：于高压灭菌锅中处理15-25min。在本发明中，为了使培养基能够分解出更多地纤维素酶，优选地，在步骤2)之后，该制备方法还包括向体系中通入氧气；更优选地，在步骤2)之后，氧气的通气量为0.4-0.6vvm。在本发明中，混合菌剂的具体种类可以在宽的范围内选择，但是为了使培养基能够分解出更多地纤维素酶，优选地，混合菌剂由康氏木霉菌、黑曲霉、灰绿曲霉、黑曲霉、烟曲霉中的至少两者组成。本发明还提供了一种用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基，该用于产纤维素酶的混合菌剂的培养基通过上述的制备方法制备而得。以下将通过实施例对本发明进行详细描述。在下列实施例中，ph调节剂选自草酸、乙酸、柠檬酸、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的至少一者。实施例11)将淤泥与水按照1：9的重量比混合，接着过滤取滤液，然后将滤液于高压灭菌锅中灭菌、通过旋转浓缩仪浓缩去水以制得淤泥提取物；2)将秸秆粉(玉米杆粉、高粱杆粉、小麦秸秆粉、稻草秸秆粉)、米糠、玉米芯粉、豆粕与水混合得到混合物，接着将混合物于高压灭菌锅中处理20min，然后向体系中添加蔗糖、蛋白胨、油酸钠、ph调节剂、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物混合(水、秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕、蔗糖、蛋白胨、油酸钠、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物的重量比为100：10：3.5：7：7：2：0.8：0.2：0.5：0.4：2)以制得ph为6.0的培养基a1。实施例21)将淤泥与水按照1：8的重量比混合，接着过滤取滤液，然后将滤液于高压灭菌锅中灭菌、通过旋转浓缩仪浓缩去水以制得淤泥提取物；2)将秸秆粉(玉米杆粉、高粱杆粉、小麦秸秆粉、稻草秸秆粉)、米糠、玉米芯粉、豆粕与水混合得到混合物，接着将混合物于高压灭菌锅中处理15min，然后向体系中添加蔗糖、蛋白胨、油酸钠、ph调节剂、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物混合(水、秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕、蔗糖、蛋白胨、油酸钠、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物的重量比为100：8：3：5：5：1.5：0.5：0.1：0.4：0.3：1)以制得ph为5.8的培养基a2。实施例31)将淤泥与水按照1：10的重量比混合，接着过滤取滤液，然后将滤液于高压灭菌锅中灭菌、通过旋转浓缩仪浓缩去水以制得淤泥提取物；2)将秸秆粉(玉米杆粉、高粱杆粉、小麦秸秆粉、稻草秸秆粉)、米糠、玉米芯粉、豆粕与水混合得到混合物，接着将混合物于高压灭菌锅中处理25min，然后向体系中添加蔗糖、蛋白胨、油酸钠、ph调节剂、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物混合(水、秸秆粉、米糠、玉米芯粉、豆粕、蔗糖、蛋白胨、油酸钠、土豆泥、葡萄汁、淤泥提取物的重量比为100：12：4：8：9：2.5：0.9：0.3：0.6：0.6：3)以制得ph为6.4的培养基a3。对比例1按照实施例1的方法制得培养基a4，所不同的是，步骤2)中未使用淤泥提取物。应用例1将混合菌剂(包含康氏木霉菌与黑曲霉)接种于上述培养基中，接种量为5％；然后向上述培养基中通入氧气，通气量为0.5vvm，搅拌速率为360r/min；在30℃下培养65h，最后检测培养基中纤维素酶活，具体结果见表1。表1纤维素酶活(u/g)a1509.0a2515.3a3512.6a4438.8以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。当前第1页12