本发明属于发酵技术领域，具体涉及一种食用菌液体发酵的方法及其产物。
背景技术：
近年来生物发酵相关工程技术的应用日益广泛，其中获得关注较多、研究范围较广的主要集中在如何优化发酵条件增加不同微生物的相关发酵产物方面，而在优化发酵工艺、节能减排方面的研究少之又少，事实上，现在的发酵工艺还存在很多问题，比如食用菌发酵中，培养基的组方结构、培养条件仍欠缺合理，发酵培养基的制备中一般采用原位灭菌(灭菌条件为：121℃，保温20min)等，诸多因素的作用导致整体发酵工艺能耗大、二氧化碳排放量大，环境污染大，同时生产能耗和生产成本都比较高，这些因素都成为制约食用菌发酵、食用菌液体菌种发酵工业化生产的关键，成为亟待解决的问题。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供一种食用菌液体发酵的方法，所述方法对食用菌液体发酵中各个阶段的培养基、培养条件以及发酵培养的培养基的灭菌方式进行了优化，使得各种工艺条件相互配合，因而本发明食用菌液体发酵方法较现有技术整体上二氧化碳排放量小、生产能耗小、生产成本低。
本发明的技术方案为：
一种食用菌液体发酵的方法，包括以下步骤：
(1)制备发酵种子：将食用菌菌种活化，得到活化的食用菌母种，将所述活化的食用菌母种逐级扩大培养，得到发酵种子；
(2)发酵培养基制备工艺：分别称取碳源、氮源，将所述碳源、氮源与水混合后得到混合料；将所述混合料先加热至60-66℃，均质，再加热至90-120℃，然后继续加热至136-110℃，保温6-30s，最后冷却至30℃以下，得到发酵培养基；
(3)发酵培养：将发酵种子接种至发酵培养基中，经发酵培养，即得。
进一步地，步骤(1)中，所述食用菌菌种是采用生长正常、健壮、无病虫害的新鲜食用菌实体作为分离材料，经无菌操作后得到小菌块并接种于保种试管中，或是采用国内各名优食用菌研究所购进的食用菌菌种。所述活化为将食用菌菌种接种至母体培养基中进行斜面培养，所述母体培养基的原料组分包括马铃薯100-200重量份、葡萄糖16-26重量份、琼脂16-26重量份，所述斜面培养的培养温度为26-22℃，培养湿度为60-70％，培养时间为7-12天。
进一步地，步骤(1)中，所述逐级扩大培养具体包括：先将活化的食用菌母种接种至一级种培养基中培养，得到一级种；再将一级种接种至二级种培养基中培养，得到二级种；然后，将二级种接种至三级种培养基中培养，得到三级种；最后，将三级种接种至四级种培养基中培养，得到发酵种子。
进一步地，所述一级种培养基的原料组分包括马铃薯100-200重量份、葡萄糖16-26重量份、蛋白胨6-2重量份、酵母浸粉1-3重量份、磷酸二氢钾3-6重量份、硫酸镁1-2.6重量份、琼脂16-26重量份，所述一级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为26-22℃，培养湿度为60-70％，培养时间为7-12天；
所述二级种培养基的原料组分包括葡萄糖10-30重量份、蛋白胨3-2重量份、乳粉3-2重量份、酪蛋白粉3-2重量份，所述二级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为26-22℃，培养湿度为60-70％，培养时间为7-12天；
所述三级种培养基的原料组分包括：葡萄糖10-20重量份、结晶果糖10-20重量份、蔗糖10-20重量份、酪蛋白粉3-2重量份、乳粉3-2重量份，所述三级种的培养为液体摇瓶培养，所述液体摇瓶培养的培养温度为26-22℃，培养转速为100-200r/min，培养时间为60-66h；
所述四级种培养基的原料组分包括：葡萄糖10-20重量份、结晶果糖10-20重量份、蔗糖10-20重量份、酪蛋白粉16-22重量份、乳粉16-22重量份，所述四级种的培养为种子罐发酵培养，所述种子罐发酵培养的培养温度为26-22℃，通气量为2-6m3/h，搅拌速度为60-120r/min，培养时间为21-36h。
进一步地，步骤(2)中，所述碳源为葡萄糖、结晶果糖、蔗糖、淀粉、麦芽糖、玉米粉中的一种或多种的混合物，所述氮源为大豆蛋白粉、蛋白胨、酵母浸粉、酪蛋白粉、乳粉、乳清蛋白粉中的一种或多种的混合物。
进一步地，步骤(2)中，所述碳源、氮源和水之间的重量比为10-30:10-20:960-920。
进一步地，步骤(2)中，所述均质压力为16-26mpa，均质温度为60-66℃。
进一步地，步骤(3)中，所述发酵种子与所述发酵培养基的质量比为6-10:90-96。
进一步地，步骤(3)中，所述培养为发酵罐发酵培养，所述发酵罐发酵培养的培养温度为26-22℃，通气量为6-20m3/h，搅拌速度为60-120r/min，培养时间为36-360h。
所述方法制备得到的食用菌液体发酵产物。
本发明的有益效果为：
1、本发明所述食用菌液体发酵的方法，包括制备发酵种子、制备发酵培养基以及发酵培养的步骤，通过对制备发酵种子阶段逐级扩大培养的培养基的组成，制备发酵培养基阶段培养基的组成及灭菌方式，以及发酵培养阶段发酵培养条件进行优化，使得各种工艺条件相互配合，因而本发明食用菌液体发酵方法较现有技术整体上二氧化碳排放量小、生产能耗小、生产成本低。
2、本发明所述食用菌液体发酵的方法，在制备发酵培养基时，对所述发酵培养基采用了特殊的灭菌方式，即先加热至60-66℃，均质，再加热至90-120℃，然后继续加热至136-110℃，保温6-30s，最后冷却至30℃以下。采用这种方式处理的原因在于，本申请发明人经大量试验筛选发现，在60-66℃条件下采用本发明方法进行均质，既起到了使物料混合均匀的作用，又为下一步高温处理的处理效率创造了良好条件，而选择在136-110℃加热处理6-30s，一方面，充分利用了杂菌微生物对所述温度下的敏感性远远超过营养成分对所述温度下敏感性的特点，使得除去杂菌微生物的同时，营养成分不损失，因而所述灭菌方式灭菌后的培养基营养成分保留更好，颜色状态也更好；另一方面，所述灭菌方式灭菌后的培养基经接种发酵后，菌丝体适应性更好，生长更旺盛；除此之外，所述灭菌方式起到了节能减排的作用，经计算，每灭菌1吨物料节约天然气7m3，节约用电12度，节省成本约72元人民币，减少二氧化碳排放约11kg。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明作进一步说明。
以下实施例中以1重量份代表1g。
实施例1
本实施例提供一种食用菌液体发酵的方法，包括以下步骤：
(1)制备发酵种子
将食用菌菌种接种至母体培养基中进行斜面培养，所述母体培养基的原料组分包括：马铃薯100重量份、葡萄糖16重量份、琼脂16重量份，所述斜面培养的培养温度为26℃，培养湿度为60％，培养时间为7天，得到活化的食用菌母种；将所述活化的食用菌母种接种至一级种培养基中培养，所述一级种培养基的原料组分包括：马铃薯100重量份、葡萄糖16重量份、蛋白胨6重量份、酵母浸粉1重量份、磷酸二氢钾3重量份、硫酸镁1重量份、琼脂16重量份，所述一级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为26℃，培养湿度为60％，培养时间为7天，得到一级种；再将一级种接种至二级种培养基中培养，所述二级种培养基的原料组分包括：葡萄糖10重量份、蛋白胨3重量份、乳粉3重量份、酪蛋白粉3重量份，所述二级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为26℃，培养湿度为60％，培养时间为7天，得到二级种；然后，将二级种接种至三级种培养基中培养，所述三级种培养基的原料组分包括：葡萄糖10重量份、结晶果糖20重量份、蔗糖10重量份、酪蛋白粉3重量份、乳粉2重量份，所述三级种的培养为液体摇瓶培养，所述液体摇瓶培养的培养温度为26℃，培养转速为100r/min，培养时间为60h，得到三级种；最后，将三级种接种至四级种培养基中培养，所述四级种培养基的原料组分包括：葡萄糖10重量份、结晶果糖20重量份、蔗糖10重量份、酪蛋白粉16重量份、乳粉22重量份，所述四级种的培养为种子罐发酵培养，所述种子罐发酵培养的培养温度为26℃，通气量为2m3/h，搅拌速度为60r/min，培养时间为21h，得到发酵种子。
(2)发酵培养基制备工艺
分别称取葡萄糖、酪蛋白粉，将所述葡萄糖、酪蛋白粉与水按重量比为10:10:920混合后得到混合料；将所述混合料先加热至60℃，以16mpa的均质压力均质，再加热至90℃，然后继续加热至136℃，保温30s，最后冷却至30℃，得到发酵培养基；
(3)发酵培养
将发酵种子接种至发酵培养基中，所述发酵种子与所述发酵培养基的质量比为6:96，在温度为26℃，通气量为6m3/h，搅拌速度为60r/min的条件下发酵培养36h，即得。
实施例2
本实施例提供一种食用菌液体发酵的方法，包括以下步骤：
(1)制备发酵种子
将食用菌菌种接种至母体培养基中进行斜面培养，所述母体培养基的原料组分包括：马铃薯200重量份、葡萄糖26重量份、琼脂26重量份，所述斜面培养的培养温度为22℃，培养湿度为70％，培养时间为12天，得到活化的食用菌母种；将所述活化的食用菌母种接种至一级种培养基中培养，所述一级种培养基的原料组分包括：马铃薯200重量份、葡萄糖26重量份、蛋白胨2重量份、酵母浸粉3重量份、磷酸二氢钾6重量份、硫酸镁2.6重量份、琼脂26重量份，所述一级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为22℃，培养湿度为70％，培养时间为12天，得到一级种；再将一级种接种至二级种培养基中培养，所述二级种培养基的原料组分包括：葡萄糖30重量份、蛋白胨2重量份、乳粉2重量份、酪蛋白粉2重量份，所述二级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为22℃，培养湿度为70％，培养时间为12天，得到二级种；然后，将二级种接种至三级种培养基中培养，所述三级种培养基的原料组分包括：葡萄糖20重量份、结晶果糖10重量份、蔗糖10重量份、酪蛋白粉2重量份、乳粉3重量份，所述三级种的培养为液体摇瓶培养，所述液体摇瓶培养的培养温度为22℃，培养转速为200r/min，培养时间为66h，得到三级种；最后，将三级种接种至四级种培养基中培养，所述四级种培养基的原料组分包括：葡萄糖20重量份、结晶果糖10重量份、蔗糖10重量份、酪蛋白粉22重量份、乳粉16重量份，所述四级种的培养为种子罐发酵培养，所述种子罐发酵培养的培养温度为22℃，通气量为6m3/h，搅拌速度为120r/min，培养时间为36h，得到发酵种子。
(2)发酵培养基制备工艺
分别称取麦芽糖、酵母浸粉，将所述麦芽糖、酵母浸粉与水按重量比为30:20:960混合后得到混合料；将所述混合料先加热至66℃，以26mpa的均质压力均质，再加热至120℃，然后继续加热至110℃，保温6s，最后冷却至26℃，得到发酵培养基；
(3)发酵培养
将发酵种子接种至发酵培养基中，所述发酵种子与所述发酵培养基的质量比为10:90，在温度为22℃，通气量为20m3/h，搅拌速度为120r/min的条件下发酵培养360h，即得。
实施例3
本实施例提供一种食用菌液体发酵的方法，包括以下步骤：
(1)制备发酵种子
将食用菌菌种接种至母体培养基中进行斜面培养，所述母体培养基的原料组分包括：马铃薯120重量份、葡萄糖22重量份、琼脂16重量份，所述斜面培养的培养温度为22℃，培养湿度为66％，培养时间为10天，得到活化的食用菌母种；将所述活化的食用菌母种接种至一级种培养基中培养，所述一级种培养基的原料组分包括：马铃薯200重量份、葡萄糖20重量份、蛋白胨2重量份、酵母浸粉2重量份、磷酸二氢钾1重量份、硫酸镁1.6重量份、琼脂20重量份，所述一级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为22℃，培养湿度为66％，培养时间为10天，得到一级种；再将一级种接种至二级种培养基中培养，所述二级种培养基的原料组分包括：葡萄糖26重量份、蛋白胨6重量份、乳粉6重量份、酪蛋白粉6重量份，所述二级种的培养为固体平皿培养，所述固体平皿培养的培养温度为22℃，培养湿度为66％，培养时间为10天，得到二级种；然后，将二级种接种至三级种培养基中培养，所述三级种培养基的原料组分包括：葡萄糖10重量份、结晶果糖10重量份、蔗糖20重量份、酪蛋白粉6重量份、乳粉6重量份，所述三级种的培养为液体摇瓶培养，所述液体摇瓶培养的培养温度为22℃，培养转速为120r/min，培养时间为60h，得到三级种；最后，将三级种接种至四级种培养基中培养，所述四级种培养基的原料组分包括：葡萄糖16重量份、结晶果糖10重量份、蔗糖10重量份、酪蛋白粉12重量份、乳粉16重量份，所述四级种的培养为种子罐发酵培养，所述种子罐发酵培养的培养温度为22℃，通气量为6m3/h，搅拌速度为120r/min，培养时间为32h，得到发酵种子。
(2)发酵培养基制备工艺
分别称取玉米粉、大豆蛋白粉，将所述玉米粉、大豆蛋白粉与水按重量比为30:10:960混合后得到混合料；将所述混合料先加热至66℃，以20mpa的均质压力均质，再加热至120℃，然后继续加热至110℃，保温20s，最后冷却至26℃，得到发酵培养基；
(3)发酵培养
将发酵种子接种至发酵培养基中，所述发酵种子与所述发酵培养基的质量比为2:92，在温度为22℃，通气量为10m3/h，搅拌速度为120r/min的条件下发酵培养300h，即得。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。