一种用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床的制作方法

本实用新型得到国家自然科学基金国际合作与交流项目（81620108018），国家自然科学基金青年项目（81501899）的资助。

本实用新型涉及医疗器械领域，具体的说是一种用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床。

背景技术：

细胞培养后期，由于细胞增殖密度增加，单层培养细胞相互汇合覆盖整个培养皿底或培养瓶底，此时需要将细胞分离，否则细胞将因为生存空间不足或密度过大，营养供应不足和代谢产物累积，影响细胞生长；同时，在各种细胞功能实验，如质粒转染、mtt、克隆形成等实验前，均需要提前按需要将细胞接种到6孔板、24孔板等中。对于贴壁生长的细胞需采用消化、分散制成悬浮细胞，经新鲜培基稀释后，重新分种到新的培养器皿中。但是在将细胞分种到新的培养器皿后，传统是依靠人工晃动培养皿培养瓶等来实现细胞均匀分布，但是传统人工方法由于受力不均导致细胞接种密度不均匀，不同区域细胞生长速度不同，以及容易导致培养基晃出污染细胞，而且不同细胞晃动方法、晃动时间不一样，对于经验的依赖性较高。对于药物处理实验，由于加药量通常较小，传统人工方法晃动很难使药物分布均匀。因此，设计一种用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床有重要意义。

技术实现要素：

本实用新型针对以上问题的提出，而研究设计一种用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床。与现有人工晃动相比，本实用新型设计的摇床结构简单，使用方便，可按需要调节速度、晃动模式，确保细胞可以均匀接种于培养器皿中，对与药物处理实验，可确保药物均匀分布。

为实现上述目的，本实用新型采用的技术方案是：

一种用于各种贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床，其特征在于该摇床包括四个部分；第一部分1位于最下方，为摇床本体，设有调模旋钮，调温旋钮，调速旋钮和调时旋钮，且设置有蓄电池和可插座两种供电模式，同时有定时报警装置，第二部分2位于第一部分的上方，为可进行热传导的金属装置，与第三部分3凹槽互相卡合，用于放置细胞培养皿、孔细胞培养板；第四部分4位于最上方，为无菌罩子，且与第三部分3互相卡合。

本实用新型所述的用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床，其特征在于：第一部分1摇床本体的尺寸为30×25×10cm（l×w×h），设有摇床启动开关101，摇动开关102，设有调模旋钮103，调温旋钮104，调速旋钮105和调时旋钮106，可调节摇动模式为十字交叉摇动、震荡模式，可设置温度，速度和时间，且设置有蓄电池107和插座108两种供电模式，同时有定时报警装置109，定时闪光，尖叫提示；摇床本体最底端四角有稍突出的防滑装置110。

本实用新型所述的用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床，其特征在于：所述的第二部分2为可进行热传导的金属装置，尺寸为30×25×3cm（l×w×h），装置上设有针对细胞培养皿、细胞培养板的凹槽恒温孔，四周设有一圈针对无菌罩子的凹槽恒温孔；

所述的凹槽恒温孔包括10cm细胞培养皿凹槽恒温孔201，6cm细胞培养皿凹槽恒温孔202，3.5cm细胞培养皿凹槽恒温孔203，6/24/96孔细胞培养板的固定凹槽恒温孔204及无菌罩子凹槽恒温孔205。

本实用新型所述的用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床，其特征在于：第三部分3的材质为聚碳酸酯，尺寸为28×23×3cm（l×w×h），装置上设有细胞培养皿、细胞培养板的承接孔，四周设有一圈无菌罩子的承接缝，用于放置细胞培养皿、细胞培养板；

所述的承接孔包括10cm细胞培养皿承接孔301，6cm细胞培养皿承接孔302，3.5cm细胞培养皿承接孔303，6/24/96孔细胞培养板承接孔304；承接缝为无菌罩子承接缝（305）。

本实用新型所述的用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床，其特征在于：第四部分4为无菌罩子，在转移摇床入细胞间超净台和细胞培养箱时使用，使用时打开无菌罩子401，不使用时关闭无菌罩子402，避免细胞污染。

本实用新型进一步公开了用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床的使用方法，其特征在于按如下的步骤进行：

1)启动摇床开关101，调节温度，预热至37℃；

2）细胞接种实验：贴壁细胞用胰酶消化，制成单细胞悬液后，加入培养器皿中铺板后，将培养器皿置于第三部分3中的承接孔中，调节摇动模式、速度和时间，一般设置时间为1分钟，启动摇动开关102，摇动1分钟，再静置1小时后，细胞均匀分布并贴壁，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养；

3）药物处理实验：培养皿中已经贴壁的细胞，加入药物后，将培养器皿置于第四部分（4）中的承接孔中，调节摇动模式、速度和时间，一般设置时间为1分钟，启动摇动开关（102），摇动1分钟，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养。

本实用新型更进一步公开了所述用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床使用方法在用于提高细胞接种密度均匀度，促进药物分布均一方面的应用。

（1）本实用新型中，摇床本体的材质为聚碳酸酯，化学稳定性好，能耐温度、湿度较高的环境；金属模块采用高密度铝合金材料，可保证优良的导热性，使得金属块的温度均匀。

（2）本实用新型重点解决的是保证全程37℃恒温条件下，贴壁细胞可以均匀接种于培养器皿中，药物处理时药物可均匀分布于培基中。主要的创新在于摇床的设计应用。

在避免传统人工方法由于受力不均导致细胞接种密度不均匀，不同区域细胞生长速度不同，以及容易导致培养基晃出污染细胞，药物分布不均匀的应用。实验结果显示此发明能保证细胞接种密度均匀，药物分布均一，减少由于实验前细胞铺板不均匀导致的实验不能按期开展，避免由于细胞密度不均匀导致的实验结果不一致。

本实用新型公开的用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床的与现有技术相比所具有的积极效果在于：

本实用新型通过设计用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床来用于细胞传代，在各种细胞功能实验前细胞铺板准备，药物处理实验等中，确保细胞接种均匀，药物分布均一，

避免传统人工方法由于受力不均导致细胞接种密度不均匀，药物分布不均一，不同区域细胞生长速度不同，以及容易导致培养基晃出污染细胞。因此，设计一种用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床有重要意义。

附图说明：

图1为本实用新型的整体结构示意图；

图2为本实用新型的整体结构示意图（不含第四部分）；

图3为本实用新型的第一部分结构示意图；

图4为本实用新型的第二部分结构示意图；

图5为本实用新型的第三部分结构示意图；

图6为本实用新型的第四部分结构示意图，401为打开状态，402为关闭状态；

其中，1-第一部分，2-第二部分，3-第三部分，4-第四部分，101-摇床启动开关，

102-摇动开关，103-调模旋钮，104-调温旋钮，105-调速旋钮，106-调时旋钮

107-蓄电池，108-插座，109-定时报警装置，110-防滑装置；

201-10cm细胞培养皿凹槽恒温孔，202-6cm细胞培养皿凹槽恒温孔，203-3.5cm细胞培养皿凹槽恒温孔,204-6/24/96孔细胞培养板凹槽恒温孔，205-无菌罩子凹槽恒温孔；

301-10cm细胞培养皿承接孔，302-6cm细胞培养皿承接孔，303-3.5cm细胞培养皿承接孔，304-6/24/96孔细胞培养板承接孔，305-无菌罩子承接缝；

401-无菌罩子打开状态，402-无菌罩子关闭状态。

具体实施方式

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

实施例1

一种用于各种贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床，其特征在于该摇床包括四个部分；第一部分1位于最下方，为摇床本体，设有调模旋钮，调温旋钮，调速旋钮和调时旋钮，且设置有蓄电池和可插座两种供电模式，同时有定时报警装置，第二部分2位于第一部分的上方，为可进行热传导的金属装置，与第三部分3凹槽互相卡合，用于放置细胞培养皿、孔细胞培养板；第四部分4位于最上方，为无菌罩子，且与第三部分3互相卡合。

其中第一部分1摇床本体的尺寸为30×25×10cm（l×w×h），设有摇床启动开关101，摇动开关102，设有调模旋钮103，调温旋钮104，调速旋钮105和调时旋钮106，可调节摇动模式为十字交叉摇动、震荡模式，可设置温度，速度和时间，且设置有蓄电池107和插座108两种供电模式，同时有定时报警装置109，定时闪光，尖叫提示；摇床本体最底端四角有稍突出的防滑装置110。

第二部分2为可进行热传导的金属装置，尺寸为30×25×3cm（l×w×h），装置上设有针对细胞培养皿、细胞培养板的凹槽恒温孔，四周设有一圈针对无菌罩子的凹槽恒温孔；

所述的凹槽恒温孔包括10cm细胞培养皿凹槽恒温孔201，6cm细胞培养皿凹槽恒温孔202，3.5cm细胞培养皿凹槽恒温孔203，6/24/96孔细胞培养板的固定凹槽恒温孔204及无菌罩子凹槽恒温孔205。

第三部分3的材质为聚碳酸酯，尺寸为28×23×3cm（l×w×h），装置上设有细胞培养皿、细胞培养板的承接孔，四周设有一圈无菌罩子的承接缝，用于放置细胞培养皿、细胞培养板；

所述的承接孔包括10cm细胞培养皿承接孔301，6cm细胞培养皿承接孔302，3.5cm细胞培养皿承接孔303，6/24/96孔细胞培养板承接孔304；承接缝为无菌罩子承接缝（305）。

第四部分4为无菌罩子，在转移摇床入细胞间超净台和细胞培养箱时使用，使用时打开无菌罩子401，不使用时关闭无菌罩子402，避免细胞污染。

实施例2

用于贴壁细胞铺板、药物处理实验中的摇床的使用方法，其特征在于按如下的步骤进行：

1)启动摇床开关101，调节温度，预热至37℃；

2）细胞接种实验：贴壁细胞用胰酶消化，制成单细胞悬液后，加入培养器皿中铺板后，将培养器皿置于第三部分3中的承接孔中，调节摇动模式、速度和时间，一般设置时间为1分钟，启动摇动开关102，摇动1分钟，再静置1小时后，细胞均匀分布并贴壁，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养；

3）药物处理实验：培养皿中已经贴壁的细胞，加入药物后，将培养器皿置于第四部分（4）中的承接孔中，调节摇动模式、速度和时间，一般设置时间为1分钟，启动摇动开关（102），摇动1分钟，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养。本实用新型装配简单可靠、操作简单便利，具有实际操作意义。

下面给出一个典型的结肠癌细胞rko经过瞬时转染a基因表达载体后，检测对b药物的敏感性实验为实例，其操作过程如下：

（1）打开摇床启动开关101，预热至37℃；

（2）将贴壁生长的结肠癌细胞rko消化、分散制成悬浮细胞，经新鲜培基稀释后，依次接种到两个6孔板中，将其中一个6孔板放于摇床第三部分的承接孔304中，设定好摇动模式为十字交叉模式、摇动速度为1档、摇动时间为5分钟后，打开摇动开关102，摇动结束，细胞静置30分钟后，细胞已初步贴壁，将6孔板取出，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养；另一个6孔板采用常规人工混匀的方法，即在超净台内使用十字晃动法，每次晃动10组，每10分钟晃动一次，共晃动3次，然后将6孔板转移入细胞培养箱中。

24小时后从细胞恒温培养箱中取出细胞，观察并对比细胞状态，采用本实用新型的6孔板内细胞均匀分布，细胞状态好；采用常规人工混匀法的6孔板内少量细胞成团生长，分布不均匀的现象。

对两个6孔板进行质粒瞬时转染实验，将质粒和lipo-2000加入6孔板中后，分别将其中一个6孔板放置于摇床第三部分的承接孔（304）中，设定好摇动模式为十字交叉模式、摇动速度为1档、摇动时间为1分钟后，打开摇动开关（102），摇动结束，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养；将另一个6孔板采用常规人工混匀的方法，即在超净台内使用十字晃动法，晃动1分钟，然后将6孔板转移入细胞培养箱中。

48小时后取出，将10ul药物加入各个孔板中，分别将其中一个6孔板放置于摇床第三部分的承接孔中，设定好摇动模式为十字交叉模式、摇动速度为1档、摇动时间为10分钟后，打开摇动开关，摇动结束，可通过带有无菌罩的摇床转移入细胞培养箱中培养；将另一个6孔板采用常规人工混匀的方法，即在超净台内使用十字晃动法，晃动1分钟，然后将6孔板转移入细胞培养箱中。24小时后观察实验结果，交常规人工混匀组，采用本实用新型的6孔板内细胞死亡较少，细胞状态较好，mtt结果较好。

实施例3

本实用新型提供的摇床结构简单，使用方便，用于细胞传代均匀接种，细胞实验前细胞的均匀铺板，药物处理实验中药物的均匀分布。由于传统是依靠人工晃动培养皿培养瓶等来实现细胞均匀分布，但是传统人工方法由于受力不均导致细胞接种密度不均匀，不同区域细胞生长速度不同，以及容易导致培养基晃出污染细胞，而且不同细胞晃动方法、晃动时间不一样，对于经验的依赖性较高。对于药物处理实验，由于加药量通常较小，传统人工方法晃动很难使药物分布均匀。因此，本实用新型设计的摇床避免了人工方法的诸多不可靠因素，通过机械晃动，同时可设置摇动速度、摇动模式、温度和时间，适用于不同细胞、多种使用场景，具有实际操作意义。

最后应说明的是：以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。