一种尖尾枫种子精油、其制备方法及应用

本发明涉及一种尖尾枫种子精油、其制备方法及应用，属于天然活性成分提取
技术领域：
。
背景技术：
：植物精油是从植物中萃取的芳香物质，具有抗菌防腐、提高免疫力、抵抗病毒的攻击、清洁皮肤、控制油分、祛除眼袋黑眼圈、促进受损组织再生等生理活性，是一种具有广泛应用市场的植物功能提取物。尖尾枫，学名为callicarpalongissima(hemsl.)merr，为马鞭草科紫珠属植物，系广西特色瑶药“虎牛钻风”中七十二风的粘手风，又名雪突、赤药子、起疯晒、穿骨枫(广西)和牛舌广(福建)。该药材性温，入肝、肺二经，味辛且微苦，常常用于治疗小儿麻痹后遗症、跌打损伤、寒积腹痛、风湿病、关节痛、无名肿毒产后风和毒蛇咬伤等病症。但目前，尚未有从尖尾枫种子中高效制备精油的报道。鉴于此，有必要提供一种尖尾枫种子精油的制备方法，以解决现有技术的不足。技术实现要素：本发明的目的之一，是提供一种尖尾枫种子精油的制备方法。本发明的尖尾枫种子精油的制备方法，精油得率高，得率为4.9％-5.24％；精油纯度好，其中活性成分α-红没药醇的相对含量为71.6％－81％；操作条件温和、可控。本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种尖尾枫种子精油的制备方法，包括如下步骤：步骤1：取尖尾枫种子，冷冻干燥后，粉碎，过筛，得到尖尾枫种子粗粉；步骤2：取步骤1得到的尖尾枫种子粗粉，进行超临界co2提取，经分离釜ⅰ和分离釜ⅱ进行分级纯化，收集分离釜ⅱ中的精油，即为尖尾枫种子精油。本发明的尖尾枫种子精油的制备方法的原理是：本发明的步骤1中，将尖尾枫种子进行冷冻干燥，可以避免常规加热烘干方式造成挥发油成分中热敏性、易分解和易氧化成分的损失。本发明的步骤2中，将尖尾枫种子粗粉采用超临界co2提取，精油得率高，得率为4.9％-5.24％；精油纯度好，其中活性成分α-红没药醇的相对含量为71.6％-81％；操作条件温和、可控。本发明的尖尾枫种子精油的制备方法的有益效果是：1、本发明的尖尾枫种子精油的制备方法，精油得率高，得率为4.9％-5.24％；精油纯度好，其中活性成分α-红没药醇的相对含量为71.6％-81％；操作条件温和、可控。2、本发明的尖尾枫种子精油的制备方法，操作简单，成本低廉，市场前景广阔，适合规模化推广应用。在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。进一步，步骤1中，所述冷冻干燥的温度为-55℃至-60℃，时间为24h-48h。采用上述进一步的有益效果是：采用上述参数，冷冻干燥的效果更好。进一步，步骤1中，所述过筛的孔径为40目。采用上述进一步的有益效果是：采用上述参数，得到的尖尾枫种子粗粉更有利于后续的超临界co2提取。进一步，步骤1中，所述尖尾枫种子粗粉的含水量为4wt％-6wt％。采用上述进一步的有益效果是：控制尖尾枫种子粗粉的含水量，破坏细胞与细胞间的水膜连续性，增加提取溶剂与精油的接触，提高精油的溶出。采用上述含水率的种子，与采用新鲜种子进行超临界co2提取相比较，尖尾枫种子精油得率提高1.8％以上。进一步，步骤2中，所述超临界co2提取的具体参数是：以超临界co2为溶剂，以95％体积浓度-100％体积浓度的乙醇为夹带剂，夹带剂与溶剂的流量比为10％-15％，co2流量为20l/h-30l/h，提取压力为12mpa-14mpa，提取温度为35℃-37℃，提取时间为1h-2h；所述分离釜ⅰ的压力为8mpa-10mpa，温度为35℃-37℃；所述分离釜ⅱ的压力为5mpa-7mpa，温度为31℃-33℃。采取上述进一步的有益效果是：本发明采用上述参数，可以提高精油的得率和精油中功能成分α-红没药醇的相对含量，与常规水蒸气提取相比较，精油得率和α-红没药醇的相对含量分别提高1.58％和22.2％。其中，通过加入夹带剂，可以改变超临界co2的极性，拓宽其溶解范围，提高提取能力。α-红没药醇(bisabolol)，又称甜红没药醇、防风根醇，具有抗菌、消炎等药效，能够保护和治愈皮肤，能够加速皮肤的治愈过程。因此，尖尾枫种子精油中的α-红没药醇的相对含量高，更有利于后续的应用。本发明的目的之二，是提供上述尖尾枫种子精油的制备方法制备得到的尖尾枫种子精油。本发明解决上述技术问题的技术方案如下：上述尖尾枫种子精油的制备方法制备得到的尖尾枫种子精油。本发明的尖尾枫种子精油的有益效果是：本发明的尖尾枫种子精油中，α-红没药醇的相对含量高，抗菌、消炎和美白效果好，更有利于后续的应用。本发明的目的之三，是提供上述尖尾枫种子精油的制备方法制备得到的尖尾枫种子精油的应用。上述制备得到的尖尾枫种子精油可以用于制备抗菌消炎药物，具有明显的消炎和美白作用，可用于皮肤毛囊炎、蜂窝组织炎、痤疮等炎性皮肤的治疗与护理。本发明解决上述技术问题的技术方案如下：上述尖尾枫种子精油的制备方法制备得到的尖尾枫种子精油在制备抗菌消炎药物中的应用。本申请的发明人进行了药理学研究，发现上述制备得到的尖尾枫精油在细胞安全浓度下，能显著抑制小鼠巨噬细胞raw264.7细胞分泌no，ic50值为52.4μg/ml，具有抑制酪氨酸酶活性的能力，ic50值为152.4μg/ml，而且对皮肤无毒副作用，表明该尖尾枫种子精油可应用于制备抗菌消炎药物。本发明的尖尾枫种子精油的应用的有益效果是：上述制备得到的尖尾枫种子精油可以用于制备抗菌消炎药物，具有明显的消炎和美白作用，可用于皮肤毛囊炎、蜂窝组织炎、痤疮等炎性皮肤的治疗与护理。在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。进一步，所述抗菌消炎药物包括尖尾枫精油和药物可接受的载体。采用上述进一步的有益效果是：本发明的抗菌消炎药物，可用于皮肤毛囊炎、蜂窝组织炎、痤疮等炎性皮肤的治疗与护理，效果明显，并且无毒副作用。进一步，所述药物可接受的载体为释稀剂、吸收促进剂、赋形剂、表面活性剂、粘合剂、湿润剂、润滑剂和矫味剂中的任意一种或几种。采用上述进一步的有益效果是：采用上述载体，可以获得更多不同剂型的产品，扩大使用范围。进一步，所述抗菌消炎药物的剂型为固体制剂、半固体制剂和液体制剂中任意一种。采用上述进一步的有益效果是：本发明的尖尾枫精油理化性稳定，可制成多种剂型，方便不同人群使用。附图说明图1为本发明实施例1制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图。图2为本发明实施例2制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图。图3为本发明实施例3制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图。图4为本发明对比例1制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图。图5为本发明对比例2制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图。具体实施方式以下结合具体附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。实施例1本实施例的尖尾枫种子精油的制备方法，包括如下步骤：步骤1：取500g尖尾枫种子，置于冷冻干燥仪中，于-60℃减压干燥48h，粉碎，过40目筛，得到尖尾枫种子粗粉205g。经水分分析仪测定，尖尾枫种子粗粉的含水量为5.0wt％。步骤2：取步骤1得到的尖尾枫种子粗粉205g，进行超临界co2提取，具体参数是：以超临界co2为溶剂，以100％体积浓度的乙醇为夹带剂，夹带剂与溶剂的流量比为15％，co2流量为30l/h，提取压力为13mpa，提取温度为36℃，提取时间为2.0h。经分离釜ⅰ和分离釜ⅱ进行分级纯化，所述分离釜ⅰ的压力为9mpa，温度为36℃；所述分离釜ⅱ的压力为6mpa，温度为32℃。收集分离釜ⅱ中的精油26.2g，即为尖尾枫种子精油。本实施例的尖尾枫种子精油的得率，如下式计算：实验例1：尖尾枫种子精油的gc-ms分析gc-ms条件：(1)气相色谱(gc)条件：恒流模式下流速为1ml/min；进样方式为gc自动进样，进样量为3μl，分流比设为10:1；设置250℃的进样口温度；载气：氮气(体积分数99.999％)；程序升温为：起始柱温50℃，以速率为10℃/min升温至150℃，以速率为1℃/min升温至180℃，以速率10℃/min升温至250℃。(2)质谱条件：电子轰击(ei)；离子化能量为70ev；离子源温度为230℃；4min的溶剂延迟时间；ms四极杆的温度为150℃；质谱检索库为nist标准普库。实施例1制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图，如图1所示。检测结果：如表1所示，经过分级纯化后得到尖尾枫精油，成分组成简单，活性成分α-红没药醇的相对含量为81％。表1尖尾枫种子精油成分分析及相对含量实验例2：尖尾枫种子精油抑制酪氨酸酶活性评价采用《t/shrh015-2018化妆品-酪氨酸酶活性抑制实验方法》，测定尖尾枫种子精油对酪氨酸酶活性的抑制作用。称取适量的尖尾枫种子精油和阳性对照曲酸，分别用少量的dmso溶解，然后用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释成系列浓度样品溶液，按照《t/shrh015-2018化妆品-酪氨酸酶活性抑制实验方法》的实验步骤进行检测和计算。结果见表2。表2尖尾枫种子精油对酪氨酸酶活性的抑制结果待测样品ic50(μg/ml)尖尾枫种子精油152.4曲酸68.3由表2可知，曲酸的ic50为68.3μg/ml，在该方法规定的范围内(0.05mg/ml-0.15mg/ml)，表明该试验系统有效。与阳性对比，尖尾枫种子精油对酪氨酸酶显示出较的抑制作用。实验结果表明，本发明实施例1制备得到的尖尾枫种子精油在美白产品的开发利用上具有应用前景。实验例3：尖尾枫种子精油抗炎活性评价本实验采用griess法测定no含量，评价尖尾枫种子精油对lps诱导小鼠巨噬细胞raw264.7产生no的抑制作用。结果表明尖尾枫种子精油能够有效地抑制no生成，抑制作用ic50为52.4μg/ml，阳性对照小白菊内酯ic50为0.45μm。实验结果表明，本发明实施例1制备得到的尖尾枫种子精油具有较好的抗炎活性。实验例4：尖尾枫种子精油经皮给药急性毒性试验本实验按2007版《化妆品安全技术规范-2015》中的急性经皮毒性试验方法，对尖尾枫种子精油皮肤用药的安全性进行评价。步骤1：动物分组取spf级sd大鼠20只，体重为200g-300g，适应性喂养1周后，分成对照组和给药组，每组10只，雌雄各半。步骤2：造模及给药每只大鼠背部剪毛，面积为6cmⅹ6cm，给药组去毛区涂抹尖尾枫种子精油，给药剂为2.2g/kg体重，对照组去毛区涂抹相同剂量的纯水。涂抹区域用无刺激胶布固定，防止动物甜食。给药期间给予常规饲料，饮水不限。观察给药2周内动物的死亡情况及生长情况。步骤3：结果在试验观察期间，在2.2g/kg的给药剂量下，大鼠生长正常，如表3所示，无中毒现象，2周内无一例死亡，根据《化妆品安全技术规范-2015》的皮肤毒性分级，表明尖尾枫种子精油属于无毒级。表3尖尾枫种子精油对大鼠急性经皮毒性试验结果根据上述药理活性评价，本发明实施例1制备得到的尖尾枫种子精油显示出较好的消炎美白作用，而且经皮急性毒性试验也表明尖尾枫种子精油属于无毒级，因此本发明实施例1制备得到的尖尾枫种子精油是可用于制备抗菌消炎药物。所述抗菌消炎药物包括尖尾枫精油和药物可接受的载体。所述药物可接受的载体为释稀剂、吸收促进剂、赋形剂、表面活性剂、粘合剂、湿润剂、润滑剂和矫味剂中的任意一种或几种。所述抗菌消炎药物的剂型为固体制剂、半固体制剂和液体制剂中任意一种。实施例2本实施例的尖尾枫种子精油的制备方法，包括如下步骤：步骤1：取500g尖尾枫种子，置于冷冻干燥仪中，于-55℃减压干燥24h，粉碎，过40目筛，得到尖尾枫种子粗粉209g。经水分分析仪测定，尖尾枫种子粗粉的含水量为5.8wt％。步骤2：取步骤1得到的尖尾枫种子粗粉209g，进行超临界co2提取，具体参数是：以超临界co2为溶剂，以95％体积浓度的乙醇为夹带剂，夹带剂与溶剂的流量比为10％，co2流量为20l/h，提取压力为12mpa，提取温度为35℃，提取时间为1h。经分离釜ⅰ和分离釜ⅱ进行分级纯化，所述分离釜ⅰ的压力为10mpa，温度为37℃；所述分离釜ⅱ的压力为7mpa，温度为33℃。收集分离釜ⅱ中的精油24.5g，即为尖尾枫种子精油。本实施例的尖尾枫种子精油的得率，如下式计算：该尖尾枫种子精油的gc-ms分析同实施例1，结果显示α-红没药醇的相对含量为76％。实施例2制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图，如图2所示。实施例3本实施例的尖尾枫种子精油的制备方法，包括如下步骤：步骤1：取500g尖尾枫种子，置于冷冻干燥仪中，于-57℃减压干燥36h，粉碎，过40目筛，得到尖尾枫种子粗粉210g。经水分分析仪测定，尖尾枫种子粗粉的含水量为6.0wt％。步骤2：取步骤1得到的尖尾枫种子粗粉210g，进行超临界co2提取，具体参数是：以超临界co2为溶剂，以98％体积浓度的乙醇为夹带剂，夹带剂与溶剂的流量比为13％，co2流量为25l/h，提取压力为14mpa，提取温度为37℃，提取时间为1.5h。经分离釜ⅰ和分离釜ⅱ进行分级纯化，所述分离釜ⅰ的压力为8mpa，温度为35℃；所述分离釜ⅱ的压力为5mpa，温度为31℃。收集分离釜ⅱ中的精油25.1g，即为尖尾枫种子精油。本实施例的尖尾枫种子精油的得率，如下式计算：该尖尾枫种子精油的gc-ms分析同实施例1，结果显示α-红没药醇的相对含量为71.6％。实施例3制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图，如图3所示。对比例1对比例1跟实施例1的不同之处在于，步骤1中，尖尾枫种子为新鲜的，含水量为64.3wt％，不经过处理，直接进行步骤2的超临界co2提取，其余都相同。对比例1制备得到尖尾枫种子精油17.2g。对比例1尖尾枫种子精油的得率，如下式计算：对比例1制备得到的尖尾枫种子精油的gc-ms分析同实施例1，结果显示α-红没药醇的相对含量为62.7％。对比例1制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图，如图4所示。实施例1与对比例1与相比，尖尾枫种子精油的得率可以提高1.8％，α-红没药醇的相对含量可以提高18.3％。由此可见，控制尖尾枫种子粗粉的含水量，破坏细胞与细胞间的水膜连续性，增加提取溶剂与精油的接触，可以提高精油的溶出。采用上述含水率的种子，与采用新鲜种子进行超临界co2提取相比较，尖尾枫种子精油得率提高1.8％以上。对比例2对比例2跟实施例1的不同之处在于，步骤2中，不采用超临界co2提取，而是按照《中华人民共和国药典》2020版中“挥发油测定法”进行精油提取，即常规水蒸气提取法，其余都相同。对比例2制备得到尖尾枫种子精油18.3g。对比例2尖尾枫种子精油的得率，如下式计算：对比例2制备得到的尖尾枫种子精油的gc-ms分析同实施例1，结果显示α-红没药醇的相对含量为58.8％。对比例2制备得到的尖尾枫种子精油的总离子色谱图，如图5所示。实施例1与对比例2与相比，尖尾枫种子精油的得率可以提高1.58％，α-红没药醇的相对含量可以提高22.2％。由此可见，本发明采用超临界co2提取，可以提高尖尾枫种子精油得率和精油中功能成分α-红没药醇的相对含量，与常规水蒸气提取相比较，精油得率和α-红没药醇的相对含量分别提高1.58％和22.2％。以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12