技术特征：
1.一种生成包含中央型记忆t淋巴细胞(tcm)表型的非移植物抗宿主病(gvhd)诱导细胞的分离群体的方法，所述细胞是耐受性诱导细胞和/或被赋予抗疾病活性，并且能够在移植之后归巢到淋巴结，所述方法包括：(a)使来自供体受试者的外周血单核细胞(pbmc)的第一群体与能够结合cd14
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表达细胞的抗体接触，并且选择能够成熟为抗原呈递细胞的cd14
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表达细胞；(b)用病毒肽装载所述抗原呈递细胞；(c)用能够耗尽cd4
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、cd56
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和cd45ra
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表达细胞的一种或多种试剂处理与pbmc的所述第一群体属于同一供体受试者的pbmc的第二群体，以便获得包含表达cd45ra-cd8
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表型的记忆t细胞的细胞群体；(d)在il-21的存在下，使包含所述记忆t细胞的所述细胞群体与步骤(b)的用所述病毒肽装载的所述抗原呈递细胞接触，以便允许病毒反应性记忆t细胞的富集；和(e)在il-21、il-15和/或il-7的存在下，培养起因于步骤(d)的所述细胞，以便允许包含所述tcm表型的细胞增殖，从而生成包含所述tcm表型的非gvhd诱导细胞的分离群体。2.一种生成包含中央型记忆t淋巴细胞(tcm)表型的非移植物抗宿主病(gvhd)诱导细胞的分离群体的方法，所述细胞是耐受性诱导细胞和/或被赋予抗疾病活性，并且能够在移植之后归巢到淋巴结，所述方法包括：(a)提供包含t细胞的细胞群体，其中所述细胞群体中的所述t细胞包含至少40%的表达cd45ra-cd8
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表型并且耗尽cd4
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、cd56
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和cd45ra
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表达细胞的记忆t细胞；和(b)在il-21的存在下，使包含所述记忆t细胞的所述细胞群体与衍生自4-10种类型的病毒的病毒肽接触，以便允许病毒反应性记忆t细胞的富集，其中所述病毒中的至少一种包含bk病毒；和(c)在il-21、il-15和/或il-7的存在下，培养起因于步骤(b)的所述细胞，以便允许包含所述tcm表型的细胞增殖，从而生成包含所述tcm表型的非gvhd诱导细胞的分离群体。3.一种生成包含中央型记忆t淋巴细胞(tcm)表型的非移植物抗宿主病(gvhd)诱导细胞的分离群体的方法，所述细胞是耐受性诱导细胞和/或被赋予抗疾病活性，并且能够在移植之后归巢到淋巴结，所述方法包括：(a)使来自供体受试者的外周血单核细胞(pbmc)的第一群体与能够选择cd14
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表达细胞的抗体接触，并且选择能够成熟为树突状细胞的cd14
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表达细胞；(b)用衍生自4-10种类型的病毒的病毒肽装载所述树突状细胞，其中所述病毒中的至少一种包含bk病毒；(c)用能够耗尽cd4
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、cd56
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和cd45ra
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表达细胞的一种或多种试剂处理与pbmc的所述第一群体属于同一供体受试者的pbmc的第二群体，以便获得包含表达cd45ra-cd8
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表型的记忆t细胞的细胞群体；(d)在il-21的存在下，使包含所述记忆t细胞的所述细胞群体与步骤(b)的用所述病毒肽装载的所述树突状细胞接触，以便允许病毒反应性记忆t细胞的富集；和(e)在il-21、il-15和/或il-7的存在下，培养起因于步骤(d)的所述细胞，以便允许包含所述tcm表型的细胞增殖，从而生成包含所述tcm表型的非gvhd诱导细胞的分离群体。4.权利要求1或3的方法，其中所述pbmc的所述第一群体和所述pbmc的所述第二群体来自同一批次。
5.权利要求1、3或4中任一项的方法，其中表达所述cd45ra-cd8
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表型的所述记忆t细胞构成所述细胞群体中至少40%的t细胞。6.权利要求1-5中任一项的方法，其中在il-21的存在下的所述接触进行12小时至6天。7.权利要求1-6中任一项的方法，其中在il-21的存在下的所述接触进行3天。8.权利要求1-7中任一项的方法，其中在il-21、il-15和/或il-7中的任一种的所述存在下的所述培养进行6至12天。9.权利要求1-8中任一项的方法，其中在il-21、il-15和/或il-7中的任一种的所述存在下的所述培养进行9天。10.权利要求1-9中任一项的方法，其中所述培养进一步包含将葡萄糖加入到至少50 mg/dl的浓度。11.权利要求2或6-10中任一项的方法，其中所述病毒肽在抗原呈递细胞上呈递。12.权利要求1或4-11中任一项的方法，其中所述抗原呈递细胞与包含所述记忆t细胞的所述细胞群体属于同一供体受试者。13.权利要求1或3-10中任一项的方法，其中所述选择cd14
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表达细胞不受塑料粘附的影响。14.权利要求1或4-13中任一项的方法，其中所述抗原呈递细胞包含树突状细胞。15.权利要求1、4-10或13-14中任一项的方法，其中所述病毒肽衍生自4-10种类型的病毒。16.权利要求1、4-10、13-14或15中任一项的方法，其中所述病毒肽包含来自bk病毒的至少一种肽。17.权利要求2-16中任一项的方法，其中所述病毒肽包含eb病毒(ebv)肽、巨细胞病毒(cmv)肽、bk病毒肽和腺病毒(adv)肽。18.权利要求2-17中任一项的方法，其中所述病毒肽包含ebv-lmp2、ebv-bzlf1、ebv-ebna1、ebv选择、cmv-pp65、cmv-ie-1、adv五邻体、adv六邻体、bkv lt、bkv (衣壳 vp1)、bkv (衣壳蛋白 vp2)、bkv (衣壳蛋白 vp2、同种型 vp3)和bkv (小 t 抗原)中的至少一种。19.权利要求2-18中任一项的方法，其中所述病毒肽包含adv5六邻体、hcmv pp65、ebv选择和bkv lt中的至少一种。20.权利要求1-19中任一项的方法，其中所述病毒肽进一步包含至少一种类型的细菌肽、真菌肽或肿瘤肽。21.权利要求1、3-10或13-20中任一项的方法，其中所述pbmc相对于受试者是非同基因的。22.权利要求2、6-12或17-20中任一项的方法，其中包含t细胞的所述细胞群体相对于受试者是非同基因的。23.权利要求1-22中任一项的方法，其中具有所述tcm表型的所述细胞构成至少30%的所述非gvhd诱导细胞的分离群体。24.一种根据权利要求1-23中任一项的方法生成、包含具有中央型记忆t淋巴细胞(tcm)表型的细胞的非gvhd诱导细胞的分离群体，所述细胞是耐受性诱导细胞和/或被赋予抗疾病活性，并且能够在移植之后归巢到淋巴结。25.一种药物组合物，其包含作为活性成分的权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群
体和药学上可接受的载体。26.一种治疗有此需要的受试者中的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体，从而治疗受试者中的疾病。27.权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体用于制造药物的用途，所述药物经鉴定用于治疗有此需要的受试者中的疾病。28.权利要求26的方法，其进一步包括将细胞或组织移植物移植到受试者内。29.权利要求27的用途，其中所述药物进一步包含细胞或组织移植物。30.权利要求26或28的方法，其进一步包括向受试者施用遗传修饰的t细胞。31.权利要求27或29的用途，其中所述药物进一步包含遗传修饰的t细胞。32.权利要求30的方法或权利要求31的用途，其中所述遗传修饰的t细胞包含car-t细胞或tcr-转基因t细胞。33.权利要求26、28、30或32中任一项的方法，或者权利要求27、29、31或32中任一项的用途，其中所述疾病是恶性疾病。34.权利要求33的方法或用途，其中所述恶性疾病是实体瘤、肿瘤转移或血液恶性肿瘤。35.权利要求26、28、30或32中任一项的方法，或者权利要求27、29、31或32中任一项的用途，其中所述疾病是非恶性疾病。36.一种在有此需要的受试者中减少移植物排斥和/或移植物抗宿主病(gvhd)和/或诱导供体特异性耐受的方法，其中所述受试者需要非同基因细胞或组织移植，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体，从而减少受试者中的移植物排斥和/或gvhd。37.权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体用于制造药物的用途，所述药物经鉴定用于在有此需要的受试者中减少移植物排斥和/或移植物抗宿主病(gvhd)和/或诱导供体特异性耐受，其中所述受试者需要所述非同基因细胞或组织移植。38.一种治疗需要非同基因细胞或组织移植的受试者的方法，所述方法包括：(a)将细胞或组织移植物移植到受试者内；和(b)向受试者施用治疗有效量的权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体，从而治疗需要细胞或组织移植的受试者。39.权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体用于制造药物的用途，所述药物经鉴定为用于非同基因细胞或组织移植到受试者内的辅助治疗，其中所述受试者需要所述非同基因细胞或组织移植。40.权利要求28、30、32-36或38中任一项的方法，或者权利要求29、31-35、37或39中任一项的用途，其中所述非gvhd诱导细胞的分离群体用于在所述细胞或组织移植之后施用。41.权利要求28、30、32-36、38或40中任一项的方法，或者权利要求29、31-35、37、39或40中任一项的用途，其中所述非gvhd诱导细胞的分离群体用于在所述细胞或组织移植之后的第6-9天时施用。42.权利要求28、30、32-36、38或40-41中任一项的方法，或者权利要求29、31-35、37或39-41中任一项的用途，其中所述非gvhd诱导细胞的分离群体用于以至少2.5 x 106个cd8
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细胞/kg理想体重的剂量施用。
43.权利要求28、30、32-36、38或40-42中任一项的方法，或者权利要求29、31-35、37或39-42中任一项的用途，其中所述细胞或组织移植包含未成熟造血细胞。44.权利要求43中任一项的方法或用途，其中所述未成熟造血细胞：包含至少5 x 106个cd34
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细胞/千克受试者的理想体重；和/或耗尽cd3
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和/或cd19
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表达细胞；和/或包含少于5 x 105个cd3
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表达细胞/kg受试者的理想体重。45.权利要求28、30、32-36、38或40-44中任一项的方法，其进一步包括在所述移植之前在非清髓性调理方案下调理受试者。46.权利要求29、31-35、37或39-44中任一项的用途，其进一步包含非清髓性移植前调理方案。47.权利要求45的方法或权利要求46的用途，其中所述非清髓性调理方案包含全身照射(tbi)、身体局部照射(tli)、化学治疗剂、抗体免疫疗法或共刺激阻断中的至少一种。48.权利要求28、30、32-36、38、40-45或47中任一项的方法，其进一步包括在所述移植后向受试者施用治疗有效量的环磷酰胺。49.权利要求29、31-35、37、39-44或46-47中任一项的用途，其进一步包含治疗有效量的环磷酰胺，其中所述环磷酰胺待在所述非同基因细胞或组织移植之后施用于受试者。50.权利要求48的方法或权利要求49的用途，其中所述治疗有效量的所述环磷酰胺：包含25-200 mg环磷酰胺/千克受试者的理想体重；和/或待在移植后3和4天以两个剂量施用于受试者。51.一种治疗需要未成熟造血细胞移植的受试者的方法，所述方法包括：(a)在非清髓性移植前调理方案下调理受试者，其中所述非清髓性调理包含全身照射(tbi)和化学治疗剂，其中所述tbi和所述化学治疗剂在移植之前的第-7至-1天时施用；(b)将一定剂量的t细胞耗尽的未成熟造血细胞移植到受试者内，其中所述t细胞耗尽的未成熟造血细胞包含少于5 x 105个cd3
+ t细胞/千克受试者的理想体重，并且其中所述t细胞耗尽的未成熟造血细胞包含至少5 x 106个cd34
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细胞/千克受试者的理想体重；(c)向受试者施用治疗有效量的环磷酰胺，其中所述环磷酰胺的所述治疗有效量包含25-200 mg环磷酰胺/千克受试者的理想体重，并且其中所述治疗有效量的所述环磷酰胺待在所述t细胞耗尽的未成熟造血细胞的所述移植之后3和4天以两个剂量施用于受试者；和(d)向受试者施用治疗有效量的权利要求24的非gvhd诱导细胞的分离群体，其中所述非gvhd诱导细胞的分离群体在所述t细胞耗尽的未成熟造血细胞的所述移植之后的第6-9天时施用，从而治疗需要未成熟造血细胞移植的受试者。52.权利要求48、50或51中任一项的方法，或者权利要求49-50中任一项的用途，其中不施用皮质类固醇。53.权利要求48、50或51-52中任一项的方法，或者权利要求49-50或52中任一项的用途，其中所述受试者在移植之后不用gvhd预防进行长期治疗。
技术总结
公开了生成包含中央型记忆T淋巴细胞(Tcm)表型的非移植物抗宿主病(GVHD)诱导细胞的分离群体的方法，该细胞是耐受性诱导细胞和/或被赋予抗疾病活性，并且能够在移植之后归巢到淋巴结。还公开了由该方法生成的细胞、药物组合物和治疗方法。药物组合物和治疗方法。
技术研发人员：Y
受保护的技术使用者：得克萨斯系统大学评议会
技术研发日：2020.08.06
技术公布日：2022/5/10