技术特征：
1.一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法，其特征在于，包括如下步骤：合成化合物z-β-ala-pro-oh；合成化合物fmoc-dab(z)-nhbzl；脱除化合物fmoc-dab(z)-nhbzl的fmoc保护基，得到化合物nh
2-dab(z)-nhbzl；以化合物z-β-ala-pro-oh和nh
2-dab(z)-nhbzl原料，合成化合物z-β-ala-pro-dab(z)-nhbzl；脱除化合物z-β-ala-pro-dab(z)-nhbzl的z保护基，得到化合物h-β-ala-pro-dab-nhbzl
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2hbr；对h-β-ala-pro-dab-nhbzl
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2hbr进行纯化转盐，得到h-β-ala-pro-dab-nhbzl。2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物z-β-ala-pro-oh的合成方法为：以化合物z-β-ala-oh和honb或z-β-ala-oh和hosu为原料，在非质子性溶剂中，在缩合剂作用下进行活化反应，得到中间体z-β-ala-onb或z-β-ala-osu；在碱的作用下，中间体与h-pro-oh进行偶联反应，得到化合物z-β-ala-pro-oh。3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，所述化合物z-β-ala-pro-oh的合成方法中：所述z-β-ala-oh和honb的摩尔比均为1:1.0～1.2；所述z-β-ala-oh和hosu的摩尔比为1:1.0～1.2；优选地，所述非质子性溶剂为n，n-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二恶烷、二甲基亚砜、乙腈、四氯化碳、甲苯、氯仿或二氯甲烷；优选地，所述非质子性溶剂为自n，n-二甲基甲酰胺；优选地，所述缩合剂为edc
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hcl、dcc或dic；优选地，所述缩合剂为edc
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hcl；优选地，所述活化反应的反应温度为室温，反应时间为2～4h；优选地，所述z-β-ala-onb或z-β-ala-osu和h-pro-oh的摩尔比为1:1.0～1.2；优选地，所述碱为碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾、三乙胺、n-甲基吗啡、dipea或2,4,6-三甲基吡啶；优选地，所述碱为碳酸氢钠；优选地，所述偶联反应的反应温度为室温，反应时间为2～4h。4.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物fmoc-dab(z)-nhbzl的合成方法为：以化合物fmoc-dab(z)-oh和苄胺为原料，在非质子性溶剂中，在偶联剂的作用下进行偶联反应，得到fmoc-dab(z)-nhbzl。5.根据权利要求4所述的合成方法，其特征在于，所述化合物fmoc-dab(z)-nhbzl的合成方法中：所述fmoc-dab(z)-oh和苄胺的摩尔比为1:1.0～1.5；优选地，所述非质子性溶剂为n，n-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二恶烷、二甲基亚砜、乙腈、四氯化碳、甲苯、氯仿或二氯甲烷；优选地，所述非质子性溶剂为n，n-二甲基甲酰胺；优选地，所述偶联剂为化合物a、化合物a和dipea的组合物、化合物a和化合物b的组合物或化合物a和化合物b和dipea的组合物，所述化合物a为edc
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hcl、dcc、dic、hatu、hbtu、
tatu、tbtu、pyaop或pybop，所述化合物b为hoat或hobt；优选地，所述偶联剂为化合物a和dipea的组合物；优选地，所述化合物a和dipea的摩尔比为1:1.0～2.0；优选地，所述偶联剂为hbtu和和dipea的组合物；优选地，所述hbtu和dipea的摩尔比为1:1.0～2.0；优选地，所述偶联反应的反应温度为室温，反应时间为2～4h。6.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物fmoc-dab(z)-nhbzl的fmoc保护基在哌啶/二氯甲烷溶液或二乙胺/二氯甲烷溶液中脱除；优选地，所述哌啶/二氯甲烷溶液的体积分数为8％-20％；优选地，所述二乙胺/二氯甲烷溶液的体积分数为8％-20％；优选地，脱除fmoc保护基时，反应温度为室温，反应时间为1～2h。7.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物z-β-ala-pro-dab(z)-nhbzl的合成方法为：以化合物z-β-ala-pro-oh和nh
2-dab(z)-nhbzl为原料，在非质子性溶剂中，在偶联剂的作用下进行偶联反应，得到z-β-ala-pro-dab(z)-nhbzl。8.根据权利要求7所述的合成方法，其特征在于，所述化合物z-β-ala-pro-dab(z)-nhbzl的合成方法中：所述z-β-ala-pro-oh和nh
2-dab(z)-nhbzl摩尔比为1:0.9～1.1；优选地，所述非质子性溶剂为n，n-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二恶烷、二甲基亚砜、乙腈、四氯化碳、甲苯、氯仿或二氯甲烷；优选地，所述非质子性溶剂为n，n-二甲基甲酰胺；优选地，所述偶联剂为化合物a和化合物b的组合物或化合物a和化合物b和dipea的组合物，其中，所述化合物a为edc
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hcl、dcc、dic、hatu、hbtu、tatu、tbtu、pyaop或pybop，所述化合物b为hoat或hobt；优选地，所述偶联剂为化合物a和化合物b和dipea的组合物；优选地，所述偶联剂为化合物a和化合物b和dipea的组合物；优选地，所述化合物a和化合物b和dipea的摩尔比为1:1:1.0～2.0优选地，所述偶联剂为edc
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hcl、hoat和dipea的组合物；优选地，所述edc
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hcl、hoat和dipea的摩尔比为＝1:1:1.0～2.0；优选地，所述偶联反应的反应温度为室温，反应时间为3～5h。9.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物h-β-ala-pro-dab-nhbzl
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2hbr的z保护基在溴化氢/醋酸溶液中脱除；优选地，所述溴化氢/醋酸溶液的体积分数为33％；优选地，脱除z保护基时，反应温度为室温，反应时间为3～5h。10.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述h-β-ala-pro-dab-nhbzl
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2hbr进行纯化转盐的具体步骤如下：将得到的h-β-ala-pro-dab-nhbzl
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2hbr粗品用水溶解并过滤，采用c18反相柱，以0.3％tfa为a相，纯乙腈为b相进行梯度洗脱，得到流动相，再以0.5％醋酸为a相，纯乙腈为b相进行转盐，收集洗脱液并冻干，即得h-β-ala-pro-dab-nhbzl。
技术总结
本发明公开了一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法，包括：合成化合物Z-β-Ala-Pro-OH；合成化合物Fmoc-DAB(Z)-NHBzl，脱除Fmoc保护基，得到化合物NH
技术研发人员：陈浩明 胡峰 俞金钊 袁慧星 尹传龙 唐洋明 余品香
受保护的技术使用者：深圳翰宇药业股份有限公司
技术研发日：2021.12.09
技术公布日：2022/4/22