技术特征：
1.一种对胃癌具有治疗作用的过表达rnu12载体，其特征在于：命名为pcmv6-r：正义:5
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cacgcctaaaaagtagactgac-3’反义:5
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taacggagaaaacaacgaaaaaa-3’。2.根据权利要求1所述的一种对胃癌具有治疗作用的过表达rnu12载体，其特征在于：rnu12抑制胃癌细胞的增殖体外实验：在两个胃癌细胞系hgc-27和mgc-803中，构建了一个包含rnu12-orf的脂质载体(pcmv6-r)，分别转染到两个细胞中，通过cck8(cellcountingkit-8)实验，在0、12、24、48、72和96h后，与空载脂质体(pcmv6-nc)进行比较，发现过表达rnu12能显著抑制hgc-27和mgc-803细胞增殖；体内实验：用携带rnu12-orf的慢病毒感染hgc-27和mgc-803细胞，在免疫缺陷裸鼠后侧皮下注射(3
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106细胞/只)，在7周后发现注射过表达rnu12(pcmv6-r)的裸鼠肿瘤体积明显小于对照组(pcmv6-nc)的裸鼠。3.根据权利要求1所述的一种对胃癌具有治疗作用的过表达rnu12载体，其特征在于：rnu12抑制胃癌细胞的侵袭体外实验：在两个胃癌细胞系hgc-27和mgc-803中，构建了一个包含rnu12-orf的过表达脂质载体(pcmv6)，分别转染到两个细胞中进行侵袭实验，在transwell滤膜上加入40μlmatrigel(0.5g/l)；收集转染空载体pcmv6-nc以及pcmv6-r的hgc-27和mgc-803细胞，离心重悬细胞，计数调整为2
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105cell/ml，在transwell小室中加入400μl细胞悬液，下室沿侧壁加入600μl含10％胎牛血清的dmem培养基，37℃、5％co2恒温箱中培养24h，取出小室，吸干上室固定液，甲醇固定后移到预先加入800μl的结晶紫染液的孔中染色；显微镜下拍照并计数侵袭细胞数，发现过表达rnu12能显著抑制hgc-27和mgc-803细胞侵袭；体内实验：用携带rnu12-orf的慢病毒感染hgc-27和mgc-803细胞，通过免疫缺陷裸鼠尾静脉注射到体内，5周后处死裸鼠发现，注射过表达rnu12(pcmv6-r)的裸鼠肝脏肿瘤细胞转移数量明显低于注射对照组(pcmv6-nc)的裸鼠。4.根据权利要求1所述的一种对胃癌具有治疗作用的过表达rnu12载体，其特征在于：rnu12促进胃癌细胞的凋亡在hgc-27和mgc-803细胞中，通过流式细胞术分析表明，与空载脂质体(pcmv6-nc)相比，过表达rnu12(pcmv6-r)能显著促进hgc-27和mgc-803细胞早期和晚期凋亡；而rnu12在mapk通路中能介导许多分子mrna稳定性与肿瘤的发生发展相关。
技术总结
本发明属于医药科技技术领域，具体为一种对胃癌具有治疗作用的过表达RNU12载体，能够抑制胃癌细胞的增殖、迁移和促进胃癌细胞的凋亡。发明了一种pCMV6-R，可化学合成，具有促进RNU12表达，对胃癌具有潜在的治疗作用。对胃癌具有潜在的治疗作用。对胃癌具有潜在的治疗作用。
技术研发人员：李峰 陈允清 张铭 吕永强 赵晋炜 张勇
受保护的技术使用者：山西省肿瘤医院
技术研发日：2021.12.23
技术公布日：2022/3/29