一种微绿球藻培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种藻类培养基，尤其涉及一种微绿球藻培养基。
【背景技术】
[0002] 微拟球藻（Nannochloropsis oculata)又称微绿球藻，是一种广泛分布的海水藻 类，直径为2?4微米，细胞球形，淡绿色，富含不饱和脂肪酸及其它营养元素，其中EPA含 量占脂肪酸总量的30%。EPA能降低胆固醇和甘油三酯的含量，促进体内饱和脂肪酸代谢， 从而降低血液粘稠度，增进血液循环，提高组织供氧而消除疲劳，并防止脂肪在血管壁的沉 积，预防动脉粥样硬化的形成和发展，预防脑血栓、脑溢血、高血压等心脑血管疾病。EPA在 减轻炎症方面也起着重要的作用。另外，微拟球藻油脂含量占干重的68%以上，是提炼生物 柴油的理想微藻。
[0003]目前，微拟球藻规模化培养存在的主要问题是生长缓慢，生物量低，不利于大规模 培养。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种利于提高微绿球藻生长速率、增大细胞密 度，从而提高培养效率，特别适于规模化培养的微绿球藻培养基。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：微绿球藻培养基，所述微绿球藻培 养基的配方包括以下质量浓度的组分：NaN0 380-120mg/L，NaH2P048-12mg/L，柠檬酸铁铵 2. 5-3. 5mg/L，Na2EDTA 10-12mg/L，VB1O. 005-0. 007mg/L，VB12O. 04-0. 06mg/L，ZnSO4 ? 4H20 22-24 y g/L,MnCl2 *4H20 175-180 y g/L,CuSO4 *5H20 9-11 y g/L,Na2MoO4 *2H207. 0-7. 5 y g/ L，CoCl2 ? 6H20 11-13 y g/L ;还包括植物生长调节因子0? 1-lmg/L和镥盐0? 1-lmg/L。
[0006] 作为优选的技术方案，所述微绿球藻培养基的配方包括以下质量浓度的组分： NaN0 3100-120mg/L，NaH2P0410-12mg/L，柠檬酸铁铵 2. 5-3. 5mg/L，Na2EDTA 10-12mg/L， VB1O. 006mg/L，VB12O. 05mg/L，ZnSO4 ? 4H20 23 y g/L，MnCl2 ? 4H20 178 y g/L，CuSO4 ? 5H20 10 y g/L，Na2MoO4 ? 2H20 7. 3 y g/L，CoCl2 ? 6H20 12 y g/L，还包括植物生长调节因子 0? 5-lmg/L 和镥盐 0? 5-lmg/L。
[0007] 其中，所述植物生长调节因子优选采用吲哚乙酸，所述镥盐优选采用氯化镥。
[0008] 本发明所述微绿球藻培养基利于藻细胞快速生长，培养出的微绿球藻细胞密度 大，特别是由于添加了植物生长调节因子吲哚乙酸0. 5-lmg/L和镥盐0. 1-lmg/L，配方配伍 合理，利于促进藻细胞快速增殖，使得藻细胞浓度增大，适于大批量规模化培养生产。
【具体实施方式】
[0009] 下面结合具体实施例，对本发明提供的微绿球藻培养基进行详细的说明。
[0010] 实施例一：
[0011] ⑴用自然海水配置如下配方的微绿球藻培养基：NaN0380mg/L，NaH 2P048mg/L， 柠檬酸铁铵 2. 5mg/L，Na2EDTA 12mg/L，氯化镥 0? 5mg/L，吲哚乙酸 0? 5mg/L，VB1O. 006mg/ L，VB12O. 05mg/L，ZnSO4 ? 4H20 23 y g/L，MnCl2 ? 4H20 178 y g/L，CuSO4 ? 5H20 10 y g/L， Na2MoO4 ? 2H20 7. 3 y g/L，CoCl2 ? 6H20 12 y g/L。
[0012] (2)取对数生长期的微绿球藻接种到该培养基中进行培养，每天光照10小时，光 照强度约为50 ymoVOii2 *s)，培箱温度控制在25摄氏度左右，每隔一段时间记录培养基中 微绿球藻的细胞浓度，详见表1。
[0013] 实施例二：
[0014] (1)用自然海水配置如下配方的微绿球藻培养基：NaN03120mg/L，NaH 2P0412mg/ L，柠檬酸铁铵 3. 5mg/L，Na2EDTA 12mg/L，氯化镥 lmg/L，吲哚乙酸 0? 5mg/L，VB1O. 006mg/ L，VB12O. 05mg/L，ZnSO4 ? 4H20 23 y g/L，MnCl2 ? 4H20 178 y g/L，CuSO4 ? 5H20 10 y g/L， Na2MoO4 ? 2H20 7. 3 y g/L，CoCl2 ? 6H20 12 y g/L。
[0015] (2)取对数生长期的微绿球藻接种到该培养基中进行培养，每天光照10小时，光 照强度约为50 ymoVOii2 *s)，培箱温度控制在25摄氏度左右，每隔一段时间记录培养基中 微绿球藻的细胞浓度，详见表1。
[0016] 对比实施例
[0017] 使用海水f/2培养基作为对照培养基，取对数生长期的微绿球藻接种到该培养基 中进行培养，每天光照10小时，光照强度约为50 y mo V (m2 *s)，培箱温度控制在25摄氏度 左右，每隔一段时间记录培养基中微绿球藻的细胞浓度。
[0018] 对比实施例与实施例一、实施例二进行对比，对比的结果如表1所示：
[0019] 表1 :不同培养基培养的微绿球藻的细胞浓度对比表
[0020]
【主权项】
1. 一种微绿球藻培养基，其特征在于：所述微绿球藻培养基的配方包括以下质量浓度 的组分： NaN03 8〇-120rag/L； Nall.PO； 8-12tng/L； 柠檬酸铁铵 2.5-3.5mg/L; Na2EDTAl〇-12tng/L; VB 0. 005-0. 007mg/L； VB；, 0. 04-0. 06nig/l.,； ZnSO：, ? 411,0 22-24 ug/L； MnCl,? 4IU) 175-180Pg/LCuSO,? 5IU) 9-11ug/L； Na,Mo(), ? 211,0 7. 〇-7. 5ug/L； CoCl, ? 611,0 11-13ug-/L； 还包括植物生长调节因子0. 1-lmg/L和镥盐0. 1-lmg/L。
2. 如权利要求1所述的微绿球藻培养基，其特征在于：所述微绿球藻培养基的配方包 括以下质量浓度的组分： NaN03 100-120tng/L： Nall.PO, 10-12tng-/L； 柠檬酸铁铵2.5-3. 5mg/L; Na,FJ)TA 10-12mg/L； VBi 0. 006mg/L； VB., 0. 05mg-/L； ZnS04 ? 4H20 23 ug/L； MnCu? 4IU) 178ug/L； CuSO, ? 511,0 10 ug/L; Na,Mo(), ? 211,0 7. 3ug/L； CoCl, ? 611,0 12 ug./L； 还包括植物生长调节因子0. 5-lmg/L和镥盐0. 5-lmg/L。
3. 如权利要求1或2所述的微绿球藻培养基，其特征在于：所述植物生长调节因子为 吲哚乙酸。
4.如权利要求1或2所述的微绿球藻培养基，其特征在于：所述镥盐为氯化镥。
【专利摘要】本发明公开了一种微绿球藻培养基，所述微绿球藻培养基的配方包括以下质量浓度的组分：NaNO3 80-120mg/L，NaH2PO4 8-12mg/L，柠檬酸铁铵2.5-3.5mg/L，Na2EDTA 10-12mg/L，VB1 0.005-0.007mg/L，VB120.04-0.06mg/L，ZnSO4·4H2O 22-24μg/L，MnCl2·4H2O 175-180μg/L，CuSO4·5H2O 9-11μg/L，Na2MoO4·2H2O 7.0-7.5μg/L，CoCl2·6H2O11-13μg/L；还包括植物生长调节因子0.1-1mg/L和镥盐0.1-1mg/L。本发明所述的培养基在培养微绿球藻时具有生长速率快、细胞密度大的优点，适于规模化批量生产。
【IPC分类】C12N1-12, C12R1-89
【公开号】CN104611230
【申请号】CN201510056169
【发明人】王兆伟, 彭小伟, 王 琦, 王弢, 靳立兵, 张君纲, 张云
【申请人】宁波浮田生物技术有限公司
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年2月3日