一种微生物秸秆腐熟剂及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域，具体为一种用于直接腐熟农作物賴杆的复合微生物 菌剂及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 随着全球粮食产量的增加，作物賴杆产生量增大，据联合国农业与粮食组织调查， 在过去的十年里，全球稻杆产量约6. 643亿吨。賴杆的资源化利用问题关乎到全球能量循 环和物质转换。
[0003] 我国是农业大国，农作物资源总量总体呈不断增长趋势，有研究表明，至2015年 我国主要农作物賴杆产量将达到9亿吨左右。农作物賴杆中含有一定量的碳、氮、憐、钟、 巧、娃等多种元素，同时含有丰富的纤维素、半纤维素、木质素和蛋白质等有机物质。賴杆中 含有可供动植物利用的大量的营养成分，研究表明，賴杆中含碳量约为40%~60%，水稻 賴杆中含氮量约为0. 60%、含憐量约为0. 09%，小麦賴杆含氮量约为0. 50%、含憐量约为 0. 03 %，大豆賴杆含氮量约为1. 93 %、含憐量约为0. 03 %，是具有综合利用价值的可再生 生物资源。
[0004] 但我国没能充分利用运一宝贵的生物资源，2009年，我国直接用作生活燃料的賴 杆约占总量的20%，肥料直接还田约占15%，饲料约占15%，工业原料约占2%，废弃或露 天焚烧的部分高达33 %。大量的賴杆被随便堆搁或直接焚烧，不仅占用±地，污染环境，并 造成生物质能源的严重浪费。另外，由于化学肥料的成本较高，且易引起水体污染、±壤板 结，进一步吸引人们对生物质肥料的研究。賴杆含有大量可利用元素，是最大的固体废弃物 养分资源。因此，通过微生物接种技术强化賴杆腐熟，对农作物賴杆的资源化利用显得极为 重要。
[0005] 目前农作物賴杆腐熟剂往往存在腐熟菌剂单一、功能性菌株偏少、腐熟周期长、腐 熟效果不彻底的缺点，对下一巷农作物没有起到很好的抗病促生的效果。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是为了克服现有腐熟菌剂的不足，提供一种高效快速的賴杆腐熟菌 剂，加快賴杆腐熟效率、缩短腐熟周期、提高腐熟质量、具有抗病促生的腐熟菌剂。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下： 阳00引一种快速高效的微生物賴杆腐熟剂，其特征包括W下内容：黑曲霉（Aspergillus niger)、枯草芽抱杆菌度scillussubiilis)、绿色木霉（Trichodermaviride);
[0009] 上述微生物賴杆腐熟剂各成分的重量比为黑曲霉5-15 %、枯草芽抱杆菌 15-35 %、绿色木霉 15-35%。
[0010] 本发明的另一目的在于提供上述高效賴杆腐熟剂的制备工艺，包括：
[0011] 1)分别制备黑曲霉、枯草芽抱杆菌、绿色木霉菌剂； 阳01引。将制备的；种菌剂干燥粉碎后，混合均匀即可。
[0013] 具体地，上述腐熟剂的制备工艺具体步骤如下：
[0014] 1)斜面培养：在无菌条件下，将黑曲霉、绿色木霉接种在PDA斜面培养基上，在 28°C条件下培养2天；枯草芽抱杆菌接种在LB斜面培养基上，在28°C条件下培养1天； [001引。种子培养：将步骤1)中培养的菌种在无菌条件下分别接种于液体培养基中，其 中黑曲霉、绿色木霉接种在PDA培养基上，在28°C、转速为18化/min摇床中培养2天；将枯 草芽抱杆菌接种在LB培养基上，在28°C、转速为18化/min摇床中培养1天；
[0016] 3)固体增殖培养基：把步骤2)中培养好的液体种子分别在无菌条件下接种到经 高压灭菌的固体培养基中（教皮、慷、稻壳），其中接种量为固体培养基质量的5~15%， 教皮、慷、稻壳质量比为6:3:1，料水比为1:1~1. 5,控制环境溫度在28°C，培养7天使得菌 数量分别达到2~10亿/g;
[0017] 4)干燥处理：3)步骤的固体增殖培养完毕后将其在45°C进行干燥，含水率控制在 5~15%，各成分的重量比为黑曲霉5-15%、枯草芽抱杆菌15-35%、绿色木霉15-35%，干 燥混匀后的菌剂经过粉碎过筛即可使用。
[0018] 本发明的目的之=在于提供上述高效賴杆腐熟剂在賴杆还田的用途，所适用的賴 杆包括玉米賴杆、水稻賴杆、小麦賴杆。
[0019] 具体地，每公斤腐熟剂加入1. 0~2. 0公斤的稻慷或玉米面作为发酵剂，每吨賴杆 加入0. 2~0. 5公斤的发酵剂，加入賴杆质量20~35%的牛粪和果蔬，含水率控制在65~ 80%，混匀后用稻草覆盖发酵25~30天，每隔2~3天翻堆一次。
[0020] 采用该腐熟剂堆制有机肥具有对豆类作物的抗病促生作用W及改善±壤结构的 作用。
[0021] 有益效果：本发明的高效快速賴杆腐熟菌剂，成本低廉，使用方便，尤其有利于在 酸性±壤中使用；腐熟效率高、周期短、质量好，可W解决农业賴杆的焚烧问题，减少賴杆焚 烧对环境的污染；腐熟后的賴杆可W直接还田，改善±壤结构、提升±壤肥力、对豆类农作 物具有抗病促生的效果，有利于农业賴杆的资源化利用。
【附图说明】
[0022] 图1本发明的腐熟菌剂对玉米賴杆腐熟溫度的影响。
[0023]图2本发明的腐熟菌剂对玉米賴杆有机质的影响。
[0024] 图3本发明的腐熟菌剂对玉米賴杆碳氮比的影响。 阳0巧]图4本发明的腐熟菌剂对玉米賴杆E4/E6的影响。
[00%] 图5本发明的腐熟菌剂堆制有机肥对±壤微生物数量的影响。
[0027]图6本发明的腐熟菌剂堆制有机肥对±壤酶活的影响。
【具体实施方式】
[0028]根据下述实施例，可W更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发 明。
[0029] 实施例1:腐熟菌剂的制备。
[0030] (1)斜面培养：在无菌条件下，将黑曲霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号 GIM3. 157)、绿色木霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 141)接种在PDA斜面培养基 上，在28°C条件下培养2天；枯草芽抱杆菌（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM1. 372)接 种在LB斜面培养基上，在28°C条件下培养1天，所用菌种黑曲霉、绿色木霉、枯草芽抱杆菌 购自广东省微生物菌种保藏中屯、；
[0031] (2)种子培养：将斜面培养基的菌种在无菌条件下分别接种于液体培养基中，其 中黑曲霉、绿色木霉接种在PDA培养基上，在28°C、转速为18化/min摇床中培养2天；
[0032] (3)固体培养：将枯草芽抱杆菌接种在LB培养基上，在28°C条件下培养1天，在 28°C、转速为18化/min摇床中培养1天；将培养好的液体种子分别在无菌条件下接种到经 高压灭菌的固体培养基中（教皮、慷、稻壳），其中接种量为固体培养基质量的5~15%，教 皮、慷、稻壳质量比为6:3: 1，料水比为1:1~1. 5,控制环境溫度在28°C，培养7天使得达到 菌数量在2~10亿/g。
[003引（4)菌剂制备：固体增殖培养完毕后将其在45°C进行干燥，含水率控制在5~ 15 %，各成分的重量比为黑曲霉10 %、枯草芽抱杆菌30 %、绿色木霉30 %，干燥混匀后的菌 剂经过粉碎过筛即可使用。
[0034] 实施例2 :腐熟菌剂的制备。
[0035]本实施例采用菌种分别为黑曲霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 148)、 绿色木霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 140)、枯草芽抱杆菌（广东省微生物菌 种保藏中屯、编号GIM1. 372)，各成分的重量比为黑曲霉5%、枯草芽抱杆菌35%、绿色木霉 35%，其余条件同实施例1。
[0036] 实施例3 :腐熟菌剂的制备。
[0037]本实施例采用菌种分别为黑曲霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 156)、 绿色木霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 139)、枯草芽抱杆菌（广东省微生物菌 种保藏中屯、编号GIM3. 157)，各成分的重量比为黑曲霉15%、枯草芽抱杆菌35%、绿色木霉 15%，其余条件同实施例1。 阳03引实施例4 :腐熟菌剂的制备。
[0039] 本实施例采用菌种分别为黑曲霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 152)、 绿色木霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 432)、枯草芽抱杆菌（广东省微生物菌 种保藏中屯、编号GIM3. 157)，各成分的重量比为黑曲霉5%、枯草芽抱杆菌35%、绿色木霉 35%，其余条件同实施例1。 W40] 实施例5 :腐熟菌剂的制备。
[0041] 本实施例采用菌种分别为黑曲霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 150)、 绿色木霉（广东省微生物菌种保藏中屯、编号GIM3. 443)、枯草芽抱杆菌（广东省微生物菌 种保藏中屯、编号GIM3. 157)，各成分的重量比为黑曲霉15%、枯草芽抱杆菌15%、绿色木霉 35%、，其余条件同实施例1。
[0042] 实施例6:本发明腐熟菌剂对玉米賴杆的腐熟效果。 阳0创