一种禽畜粪便除臭活性菌剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生态养殖领域，具体涉及一种禽畜粪便等废弃物的除臭活性菌剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]随着我国畜禽养殖业的发展和“菜篮子工程”的实施，规模化、集约化畜禽养殖业迅速崛起，畜禽粪便的产生量逐年增加。刚排放的禽畜粪便含有NH3，H2S和吲哚等有害气体，若未能及时清除或清除后不能及时处理，臭味会成倍增加，产生甲基硫醉、二甲二硫醚、甲硫醚、二甲胺及低级脂肪酸等恶臭气体。测算表明，年出栏5000头的猪场每天氨气产生量达0.SKg以上。恶臭气体会对现场及周围人们的健康产生不良影响，如引起精神不振、烦躁、记忆力下降和心理状况不良，也会使禽畜的抗病力和生产力降低。因此，及时处理禽畜粪便，清除其产生的恶臭和有害气体，是我国发展绿色养殖、生态养殖的亟需解决的重要问题之一O
[0003]禽畜粪便的处理方法很多，目前主要通过粪尿分离并分别进行处理。对于液体的处理主要有厌氧产沼法、厌氧消化法、接触氧化法、序批式活性污泥法、光合细菌法、人工湿地法等等几种，对于粪便固体则主要有干燥法、化学法、生物堆肥法等。各种处理方法中，干燥法和化学法虽然处理速度快，但所需的能耗或药品的成本都比较高。生物堆肥法虽然成本较低，但是需专门设备，污水和粪便固体分别处理，操作起来步骤繁琐。因此，研发不需要专门设备进行粪尿分离，在好氧条件下可直接分解禽畜粪便和污水、清除恶臭的除臭菌剂和除臭工艺，对于解决养殖场臭味对人体和环境的危害，提高禽畜粪便的处理利用率和经济价值，具有重要意义。
【发明内容】
[0004]本发明针对现有技术的不足，提供一种禽畜粪便等废弃物的除臭活性菌剂及其制备方法。
[0005]本发明采用以下技术手段解决上述技术问题的:一种禽畜粪便除臭活性菌剂，包括枯草芽抱杆菌BaciIIus subtilisCZ9、錯样芽抱杆菌Bacillus cereus SZ2、节杆菌Arthrobacter sp.SZ16、链霉菌 Streptomycessp.SZ36、酉孝母菌SporobolomycesroseusCZ13、乳酸链球菌Streptococcus lactis CZ15六株菌。
[0006]本发明还公开一种制备上述禽畜粪便除臭活性菌剂的方法，包括如下步骤:
[0007]I)单株菌发酵:将枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisCZ9、蜡样芽孢杆菌BacilluscereusSZ2、节杆菌Arthrobacter sp.SZ16、链霉菌Streptomyces sp.SZ36、酵母菌Sporobo1mycesroseusCZl3、乳酸链球菌Streptococcus lactis CZ15六株菌分别进行发酵，获得发酵菌液；
[0008]2)除臭复合菌剂制备:上述各单菌株发酵结束后，将枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、节杆菌、链霉菌、酵母菌、乳酸菌混合，制得除臭复合菌剂；
[0009]3)新鲜培养基添加:向复合菌剂中加入新鲜培养基质；
[0010]4)保护剂添加:向步骤3)中得到的液体中加入山梨酸钾，搅拌均匀；
[0011]5)载体添加:向步骤4)中得到的液体中添加凹凸棒土，搅拌均匀，即制得禽畜粪便除臭活性菌剂。
[0012]优选地，枯草芽孢杆菌B.subtilis CZ9和蜡样芽孢杆菌B.cereus SZ2采用LBG培养基培养;所述LBG培养基包括0.5 %葡萄糖，I %蛋白胨，0.5 %酵母膏，I %氯化钠;接种量为 1%-2%，180-200rpm，培养24-36h。
[0013]优选地，链霉菌Streptomyces sp.SZ36采用SCP培养基培养;所述SCP培养基包括
1.0 %蔗糖，2.0%玉米粉，蛋白胨0.3%，豆饼粉3.0%，0.1 %磷酸二氢钾，硫酸铵0.5%，0.1%氯化钠，0.3%碳酸钙;接种量为I %-2%，180-200rpm，培养24_36h。
[0014]优选地，节杆菌Arthrobacter sp.SZ16采用LB培养基培养;所述LB培养基包括1%胰蛋白胨，0.5 %酵母膏，I %氯化钠;接种量为I % -2 %，180-200rpm，培养24_36h。
[0015]优选地，酵母菌S.roseus CZ13采用YPD培养基培养;所述YPD培养基包括1%酵母提取物，2 %蛋白胨，2 %右旋葡萄糖;接种量为I % -2 %，180-200rpm，培养24_36h。
[0016]优选地，乳酸链球菌S.lactis CZ15采用发酵培养基培养，所述发酵培养基包括蔗糖 1%，蛋白胨 2%，酵母膏 1%，KH2P04 3%, NaCl 0.2%,MgSO4 0.02%，接种量为 I，180-200rpm，培养 24_36h。
[0017]优选地，上述各单菌株发酵结束后，将枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、节杆菌、链霉菌、酵母菌、乳酸菌按照2-5:0.5-2:1-2:1-3:0.5-3:3_8的体积比混合，制得除臭复合菌剂；所制得的复合菌剂的有效活菌数为8.0 X 108-2.3 X 109cfu/ml。
[0018]优选地，按质量浓度2% -5 %向复合菌剂中加入新鲜培养基质-甘蔗糖蜜;所述糖蜜含糖分50%以上，锤度(Bx)85%以上。
[0019]优选地，按质量浓度1-1.5%。向3)中得到的液体中加入1-1.5%。比例的山梨酸钾，搅拌参数为:120rpm，搅拌Ih;向4)添加凹凸棒土的量为0.4-1.0g/L，搅拌参数:40-1 OOrpm，搅拌 4-1 Omin。
[0020]本发明的优点在于:本发明提供的禽畜粪便除臭活性菌剂利用六种粪便降解菌/除臭菌之间的协同作用，具有菌株组合新、结构稳、酶活强、菌数高等特点，同时解决了传统禽畜粪便堆肥处理需粪尿分离、粪便降解慢、除臭效果不明显等问题，提高了禽畜粪便的处理速度和利用率，经过除臭处理的粪便还可做有机肥施用到农田中，提高土壤肥力，具有良好的生态效益和经济效益。本发明提供的复合菌剂其工艺简单，且制备过程中采用的保护剂均是无毒物质，能保证菌剂的安全。
【具体实施方式】
[0021]以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
[0022]实施例1
[0023]除臭活性菌剂的构成
[0024]枯草芽抱杆菌B.subtilisCZ9、2.0 X 108cfu/ml ；
[0025]錯样芽抱杆菌B.cereusSZ2、5.0X 107cfu/ml
[0026]节杆菌Arthrobactersp.SZ16、I.0 X 108cfu/ml
[0027]链霉菌Streptomycessp.SZ36、I.0 X 108cfu/ml。
[0028]酵母菌S.roseusCZ13、5.0X 107cfu/ml。
[0029]乳酸链球菌S.lactis CZ15、3.0 X 108cfu/ml。
[0030]构成方式如上的菌剂由以下步骤制得:
[0031]I)单株菌发酵:将枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisCZ9、蜡样芽孢杆菌BacilluscereusSZ2、节杆菌Arthrobacter sp.SZ16、链霉菌Streptomyces sp.SZ36和酵母菌Sporobo1mycesroseusCZl3、乳酸链球菌Streptococcus lactis CZ15六株菌分别进行发酵，获得发酵菌液。
[0032]枯草芽孢杆菌B.subtilis CZ9和蜡样芽孢杆菌B.cereus SZ2采用LBG培养基(0.5%葡萄糖，1%蛋白胨，0.5%酵母膏，I %氯化钠)培养；I %接种量接种，180rpm，培养24h0
[0033]链霉菌Streptomyces sp.SZ36采用SCP培养基(I.0 %蔗糖，2.0%玉米粉，蛋白胨0.3%,豆饼粉3.0%,0.1%磷酸二氢钾，硫酸铵0.5%,0.1%氯化钠，0.3 %碳酸钙)培养；I %接种量接种，180rpm，培养24h。
[0034]节杆菌Arthrobacter sp.SZ16采用LB培养基(I %胰蛋白胨，0.5%酵母膏，I %氯化钠)培养。分别以I %接种量接种，180rpm，培养24h。
[0035]酵母菌S.roseusCZ13采用YPD培养基(I %酵母提取物，2%蛋白胨，2%右旋葡萄糖)培养;I %接种量接种，180rpm，培养24h。
[0036]乳酸链球菌S.lactis CZ15采用发酵培养基(I %蔗糖，2%蛋白胨，I %酵母膏，3%10^04，0.2%他(:1，0.02%]\%504)培养。1%接种量接种，180印111，培养2411。本发明实施例中所有培养基的其他成份均为纯水。
[0037]2)除臭复合菌剂制备:上述各单菌株发酵结束后，将枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、节杆菌、链霉菌、酵母菌、乳酸菌按照2:0.5:1:1:0.5: 3的体积比混合，制得除臭复合菌剂。所制得的复合菌剂的有效活菌数为8.0 X 108cfu/ml。
[0038]3)新鲜培养基添加:按质量浓度2%向复合菌剂中加入的新鲜培养基质-甘蔗糖蜜(含糖分50%以上，锤度(Bx)85%以上)。
[0039]4)保护剂添加:按质量浓度1%。向3)中得到的液体中加入山梨酸钾(纯度98 %以上)，搅拌均勾(120rpm，搅拌Ih)。
[°04°] 5)载体添加:向4)中得到的液体中添加凹凸棒土(0.4g/L)，并搅拌均勾(40rpm，4分钟)，即制得禽畜粪便除臭活性菌剂。
[0041]猪场中应用实施例1制备的除臭菌剂处理猪粪便试验效果研究
[0042]试验地点:浙江省衢州市衢江区欣祥生猪养殖场
[0043]试验材料:猪粪便，实施例1制备的禽畜粪便除臭活性菌剂。
[0044]试验设计:设置两个处理，每个化粪池处理量为100吨。
[0045]处理1:化粪池中不加禽畜粪便除臭活性菌剂，禽畜粪便直接排入化粪池中。
[0046]处理2:禽畜粪便排入化粪池后，往化粪池中按1%。体积比添加该除臭活性菌剂。
[0047]施用方法:将禽畜粪便除臭活性菌剂添加入化粪池中后，采用移动式鼓风机供氧，每天充氧lh，充氧量200m3，其余时间静置，分不同时段分别测定对粪便臭味的去除效果。
[0048]试验结果:施用实施例1制备的禽畜粪便除臭活性菌剂处理粪便，24h臭味已经明显下降，48h后氨气、硫化氢、甲硫醇去除率分别为70.5、75.7%和80.1%，除臭效果非常显著。
[0049]实施例2
[0050]除臭活性菌剂的构成
[0051 ]枯草芽抱杆菌B.subtilisCZ9、3.0 X 108cfu/ml ；
[0052]錯样芽抱杆菌B.cereus SZ2、I.0 X 108cfu/ml
[0053]节杆菌Arthrobactersp.SZ16、I.5 X 108cfu/ml
[0054]链霉菌Streptomycessp.SZ36、2.0X 108cfu/ml。
[0055]酵母菌S.roseusCZ13、I.5 X 108cfu/ml。
[0056]乳酸链球菌S.lactis CZ15、5.0 X 108cfu/ml。
[0057]I)单株菌发酵:将枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisCZ9、蜡样芽孢杆菌BacilluscereusSZ2、节杆菌Arthrobacter sp.SZ16、链霉菌Streptomyces sp.SZ36和酵母菌Sporobo1mycesroseusCZl3、乳酸链球菌Streptococcus lactis CZ15六株菌分别进行发酵，获得发酵菌液。
[0058]枯草芽孢杆菌B.subtilis CZ9和蜡样芽孢杆菌B.cereus SZ2采用LBG培养基(0.5%葡萄糖，1%蛋白胨，0.5%酵母膏，1%氯化钠)培养;1.5%接种量，190印111，培养3011。
[0059]链霉菌Streptomyces sp.SZ36采用SCP