一种聚（l-谷氨酸）接枝肉桂醇、制备方法及纳米载药材料的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种聚(L?谷氨酸)接枝肉桂醇、制备方法及纳米载药材料，属于高分子化学领域。该聚(L?谷氨酸)接枝肉桂醇，其结构式为式Ⅰ所示。本发明还提供一种聚(L?谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，该方法将γ?苄基?L?谷氨酸苄酯和三光气反应，得到γ?苄基?L?谷氨酸苄酯NCA，然后以三乙胺为引发剂，引发BLG?NCA开环聚合，脱掉苄基制得PLGA，将肉桂醇接枝到PLGA上得到PLGA?g?CA。本发明还提供一种载药纳米材料，通过光交联合成的微凝胶具有更好的稳定性，进入生物体内不会因为破裂释放药物，使更多的药物可以积累到目标区域，达到更好的治疗效果。
【专利说明】
一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇、制备方法及纳米载药材料
技术领域
[0001] 本发明属于高分子化学领域，具体涉及一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇、制备方法 及纳米载药材料。
【背景技术】
[0002] 影响人类的疾病种类越来越多，其中恶性肿瘤是危害力最大的疾病之一。因此，抗 肿瘤药成为药物市场的领头羊，抗肿瘤药物的需求量每年递增，表明肿瘤患者日益增多，因 其快速的增长率及过高的死亡率，癌症的控制已经成为各国卫生组织的首要任务，癌症治 疗成为全球所关注的热点课题。常用的临床治疗恶性肿瘤的手段有化学治疗、放射治疗和 手术治疗等。其中，化学治疗简称化疗是最普遍也是最有效的治疗癌症的方法。然而，它的 应用中却隐藏着诸多问题，如毒性大，药物释放速度快，不能达到最好的治疗效果。缺少专 一性，当抗癌药物进入人体，因其没有选择性，会对所有细胞进行攻击，最后作用到癌细胞 的药物与预期相比有所减少。当癌细胞产生耐药性，需加大药量的投入，从而导致更大的损 伤出现。以三乙胺为引发剂，引发BLG-NCA开环聚合，脱掉苄基制得PLGA，将肉桂醇接枝到 PLGA上得到PLGA-g-CA，因其具有紫外光敏感性，因此所合成的共聚物可以在紫外光照交联 下得到微凝胶，并用于负载抗肿瘤模型药物D0X，与纯药物D0X相比，载药微凝胶有效的增加 了药物释放率，大大降低了其毒副作用。此外，通过光交联合成的微凝胶具有更好的稳定 性，进入生物体内不会因为破裂释放药物，使更多的药物可以积累到目标区域，达到更好的 治疗效果。该研究还存在进一步发展空间，、引入主动靶向基团使药物精准的作用到目标细 胞。因此，微凝胶PLGA-g-CA可以作为一种潜在的体内药物传输载体用于恶性肿瘤治疗，并 具有很大的发展空间。
[0003] 尽管研究了几十年，对不健全的组织给药仍然是一个巨大的挑战。经常用到的小 分子药物具有低溶解性、快速的新陈代谢以及盲目的扩散到健康细胞或不健康细胞等缺 点。因此，大分子药物载体的应用是必不可少的，因为这些药物载体在血液中的流动半衰期 长以及可以增多肿瘤区域的积累量。以氨基酸为基础的材料在药物传输系统中是很理想的 材料，因为这些材料具有良好的生物相容性、生物可降解性以及可控的二级结构。两性的多 肽材料可以通过非共价键相互作用在不同结构中自组装，可以对药物进行负载和释放。以 氨基酸为基础的材料因其具有有序的结构如α-螺旋线和β-折叠线可以控制纳米结构形成。 两亲性聚合物的自组装可以控制化学、物理参数，例如疏水和亲水的比例，分子量以及化学 性质。合成聚氨基酸材料的最简单的方法是通过对NCA的开环聚合。因为其经济实用并且可 以大量生产，另外，NCA可以直接合成。
[0004]在过去的几十年中，许多关于通过光照交联的方法制备新奇的聚合物被报道，光 照交联与传统的物理或化学方法相比，展现出很大的优势。如温和的反应条件、副产物形成 的最小化、快速的反应时间以及对聚合反应的控制。光照交联方法制备的聚合物的物理化 学性能可以通过改变光的强度轻易改变;光照交联制备的水凝胶的溶胀性可以通过调整照 射时间来达到实验目的。光照交联反应包括（1)丙烯酸酯的自由基聚合以及在引发剂或催 化剂存在的条件下甲基丙烯酸酯与亲水聚合物的聚合。（2)肉桂酸盐作为聚合物末端的光 二聚作用。
[0005] 研究者们通过快速光照凝胶化在没有引发剂和催化剂的条件下合成了 PEG-ΑΝ大 分子单体，并证明了其具有光可逆性。其物理化学性质如可溶胀性及紫外吸收等均可以通 过交替照射波长(365或者254nm)来控制。PEG-ΑΝ的这种可逆性对凝胶的性能作调整提供了 独特简单的方法。
[0006] 在2012年，通过紫外光交联的方法制备了基于聚乙二醇单甲醚一聚（L-谷氨酸-co-γ-3-苯丙烯基-L-谷氨酸酯)两嵌段和三嵌段共聚物的pH响应性纳米凝胶(λ = 254ηπι)。 该纳米凝胶具有良好的生物相容性，负载和控制释放药物的能力，显示出通过紫外光交联 的方法制备智能型纳米凝胶作为药物载体的可行性。但用光照交联法制备聚氨基酸纳米载 药材料，可以更好地应用到药物传输体系中。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇、制备方法及纳米载药材料， 该纳米载药材料具有良好的生物稳定性。
[0008] 本发明首先提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇，其结构式为式I所示，
[0010] 式I 中，χ = 84 ~310，y = 5 ~100
[0011] 本发明还提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，该方法包括：
[0012]步骤一：将γ -苄基-L-谷氨酸苄酯和三光气反应，得到γ -苄基-L-谷氨酸苄酯 NCA；
[0013] 步骤二：以三乙胺做为引发剂，引发步骤一得到的γ -苄基-L-谷氨酸苄酯NCA开环 聚合，得到聚（γ -苯甲基-L-谷氨酸酯），然后脱掉苄基制得产物聚(L-谷氨酸）；
[0014] 步骤三:将步骤二合成的聚（L-谷氨酸）、肉桂醇和4-二甲氨基吡啶溶解在二甲基 亚砜中，然后加入Ν，Ν'_二环己基碳酰亚胺，得到聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇。
[0015] 优选的是，所述步骤一中γ-苄基-L-谷氨酸苄酯与三光气的摩尔比为5:3。
[0016] 优选的是，所述步骤一的反应温度为55-60°C，反应时间为2h。
[0017] 优选的是，所述步骤二中三乙胺与γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA的摩尔比为7: (24000-26000)〇
[0018] 优选的是，所述步骤二的反应温度为25°C，反应时间优选为3-4天。
[0019]优选的是，所述步骤三中聚(L-谷氨酸）、肉桂醇和4-二甲氨基吡啶摩尔比为2:10: Ιο
[0020] 优选的是，所述步骤三的反应温度为室温，反应时间优选为36-48小时。
[0021 ]本发明还提供上述聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇制备得到的纳米载药材料。
[0022]本发明还提供一种纳米载药材料的制备方法，包括将聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇溶 于柠檬酸盐缓冲溶液，在室温紫外光照下搅拌，经透析冻干，得到纳米载药材料。
[0023]本发明的有益效果
[0024] 本发明首先提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇(PLGA-g-CA)，其结构式为式I所 示，其简式为PLGA-g-CA，式中:PLGA为聚(L-谷氨酸），g为接枝，CA为肉桂醇，本发明的聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇具有紫外光敏感性，因此所合成的共聚物可以在紫外光照交联下得到 微凝胶，并用于负载抗肿瘤模型药物D0X。
[0025] 本发明还提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，该方法将γ-苄基-L-谷 氨酸苄酯和三光气反应，得到γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA，然后以三乙胺为引发剂，引发 BLG-NCA开环聚合，脱掉苄基制得PLGA，将肉桂醇接枝到PLGA上得到PLGA-g-CA，本发明的制 备方法简单，原料易得。
[0026] 本发明还提供一种载药纳米材料，通过光交联合成的微凝胶具有更好的稳定性， 进入生物体内不会因为破裂释放药物，使更多的药物可以积累到目标区域，达到更好的治 疗效果。该研究还存在进一步发展空间，包括在其链段上加入新的集团改变其水溶性、引入 主动靶向基团使药物精准的作用到目标细胞。因此，微凝胶PLGA-g-CA可以作为一种潜在的 体内药物传输载体用于恶性肿瘤治疗，并具有很大的发展空间。与纯药物D0X相比，载药微 凝胶有效的增加了药物释放率，大大降低了其毒副作用。
【附图说明】
[0027] 图1为聚合物PLGA(a)与本发明实施例1制备得到的PLGA-g-CA(b)的的红外光谱谱 图；
[0028] 图2为本发明实施例1制备得到的PLGA-g-CA的核磁氢谱图；
[0029] 图3为实施例1-3得到的PLGA-g-CA不同聚合度的GPC分析图；
[0030] 图4为实施例4得到的纳米载药材料的透射电镜图；
[0031]图5为实施例4得到的纳米载药材料在不同pH值下的药物释放率。
【具体实施方式】
[0032]本发明首先提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇(PLGA-g-CA)，其结构式为式I所 示，
[0034] 式I 中，x = 84 ~310，y = 5 ~100，
[0035] 按照本发明，所述的聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇(PLGA-g-CA)是一种具有紫外光敏 感性的聚合物，其所合成的共聚物可以在紫外光照交联下得到微凝胶，并用于负载抗肿瘤 模型药物D0X，与纯药物D0X相比，载药微凝胶有效的增加了药物释放率，大大降低了其毒副 作用。此外，通过光交联合成的微凝胶具有更好的稳定性，进入生物体内不会因为破裂释放 药物，使更多的药物可以积累到目标区域，达到更好的治疗效果。该研究还存在进一步发展 空间，包括在其链段上加入新的基团改变其水溶性、引入主动靶向基团使药物精准的作用 到目标细胞。因此，微凝胶PLGA-g-CA可以作为一种潜在的体内药物传输载体用于恶性肿瘤 治疗，并具有很大的发展空间。
[0036] 本发明还提供一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，该方法包括：
[0037]步骤一：将γ -苄基-L-谷氨酸苄酯和三光气反应，得到γ -苄基-L-谷氨酸苄酯 NCA；
[0038]步骤二：以三乙胺做为引发剂，引发步骤一得到的γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA (BLG-NCA)开环聚合，得到聚（γ-苯甲基-L-谷氨酸酯）（PBLG)，然后脱掉苄基制得产物 PLGA；
[0039]步骤三:将步骤二合成的PLGA、肉桂醇和4-二甲氨基吡啶溶解在二甲基亚砜中，然 后加入N，N'_二环己基碳酰亚胺，得到聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇。
[0040] 按照本发明，将γ -苄基-L-谷氨酸苄酯与四氢呋喃加入三口瓶中，在氮气保护的 条件下加入三光气反应，所述的反应温度优选为55°C_60°C，反应时间优选为2小时，得到的 粗产品优选置入冷的正己烷中沉降，抽滤，用乙酸乙酯溶液溶解粗产物，然后用碳酸氢钠水 溶液洗，无水硫酸镁干燥，最后除去乙酸乙酯，得到γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA(BLG-NCA)。 所述γ -苄基-L-谷氨酸苄酯与三光气的摩尔比优选为5: 3。
[0041] 按照本发明，所述的γ-苄基-L-谷氨酸苄酯的制备方法，优选包括:将L-谷氨酸、 苯甲醇加入反应瓶中机械搅拌，温度优选为60°C_65°C，所述L-谷氨酸与苯甲醇的摩尔比优 选为1:1.2，然后将120mL浓H 2S〇4逐滴加入反应瓶，待反应澄清后持续搅拌30min-45min后冷 却至室温，将反应液倒入NaHC0 3冰水溶液并控制搅拌速度，之后封□置于冰箱中过夜，冰箱 温度优选为4°C。对产物进行重结晶(三次)后抽滤并用乙醇、乙醚洗涤，真空抽干备用。 [0042] 按照本发明，将上述BLG-NCA和三乙胺(TEA)置于干燥的安瓿瓶中，加入干燥的DMF 反应，所述的反应温度优选为25°C，反应时间优选为3-4天，溶液用过量的乙醚/乙醇（2/1， v/v)沉降，得到产物PBLG，用乙醚清洗两次，室温下真空干燥随后在25 °C_30 °C下将PBLG溶 解在二氯乙酸中，加入HBr/乙酸(33%，质量百分数），溶液优选在30°C-35°C下缓慢搅拌1-2 小时，终产物在过量的丙酮中沉降，并且用丙酮洗两次，沉降物在室温下真空干燥至恒重， 得到聚（L-谷氨酸）（PLGA)所述的三乙胺与γ-苄基-L-谷氨酸苄酯的摩尔比优选为7: (24000-26000)〇
[0043]按照本发明，将PLGA、肉桂醇和吡啶溶解在干燥的二甲基亚砜(DMS0)，吡啶优选为 4_二甲氨基吡啶(DMAP)，在搅拌的情况下，将Ν，Ν'_二环己基碳酰亚胺(DCC)缓慢滴加到溶 液中反应，所述的反应温度优选为室温，反应时间优选为36-48小时，得到的副产物二环己 基脲(DCU)过滤除掉，滤液用过量的乙醚沉降，得到产物用乙醚洗两次，在室温下真空干燥 24h-36h，得到聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇(PLGA-g-CA)。
[0044] 本发明还提供上述聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇制备得到的纳米载药材料。
[0045] 本发明还提供一种纳米载药材料的制备方法，包括:将PLGA-g-CA溶于柠檬酸盐缓 冲溶液，在室温紫外光照下搅拌，用去离子水透析，冻干，得到载药材料。
[0046] 按照本发明，先将PLGA-g-CA溶于柠檬酸盐缓冲溶液，柠檬酸盐缓冲溶液优选为pH = 7.0的柠檬酸盐缓冲溶液(0.01m〇l/L)。在室温紫外光照下搅拌，紫外光优选为EF-180C/ FE紫外灯，光强为1.29mWcnf2，λ= 254nm，搅拌时间优选为6小时，用去离子水透析24h，冻干， 得到纳米载药材料。
[0047] 下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的说明，实施例中所涉及到原料均为 市售。
[0048] 实施例1
[0049] 将L-谷氨酸150g、苯甲醇125mL加入反应瓶中在60 °C下机械搅拌，然后将120mL浓 H2S〇4l20mL逐滴加入反应瓶，待反应澄清后持续搅拌30min后冷却至室温，将反应液倒入 NaHC03冰水溶液并控制搅拌速度，之后封口置于4 °C的冰箱中过夜。对产物进行重结晶（三 次)后抽滤并用乙醇、乙醚洗涤，真空抽干备用。将γ-苄基-L-谷氨酸苄酯(20g，0.08mol)与 四氢呋喃240ml加入三口瓶中，在氮气保护的条件下加入三光气（14.2g，0.048mol)60°Ci 应2小时。粗产品置入冷的正己烷中沉降，抽滤，用乙酸乙酯溶液溶解粗产物，然后用碳酸氢 钠水溶液洗，无水硫酸镁干燥，最后除去乙酸乙酯，得到γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA。反应过 程如下：
[0051]先用三乙胺(TEA)做为引发剂，引发（γ-苄基-L-谷氨酸苄酯的NCA)BLG-NCA开环 聚合，得到聚（γ-苯甲基-L-谷氨酸酯）（PBLG)然后脱掉苄基制得产物PLGA。将BLG-NCA (26 · 33g，lOOmmol)，ΤΕΑ(Ο · 03g，Ο · 028mmol)置于干燥的安瓿瓶中，加入270mL干燥的DMF，25 °C反应3天，溶液用过量的乙醚/乙醇（2/l，v/v)沉降。得到的产物PBLG用乙醚清洗两次，室 温下真空干燥24小时(产率:87%)。随后在25°C下将roLG(2.50g)溶解在25mL二氯乙酸中。 加入7.5mL HBr/乙酸（33 %，质量百分数），溶液在30 °C下缓慢搅拌1小时。终产物在过量的 丙酮中沉降，并且用丙酮洗两次。沉降物在室温下真空干燥至恒重。反应过程如下：
[0053]将PLGA( 1 · 6g，0 · 8mmol)、肉桂醇（0 · 54g，4 · Ommo 1)和4-二甲氨基吡啶（DMAP) (0.05g，0.40mmol)溶解在25mL干燥的二甲基亚砜(DMS0)。在搅拌的情况下，将N，N'_二环己 基碳酰亚胺(DCC)缓慢滴加到溶液中，室温反应48小时。副产物二环己基脲(DCU)过滤除掉。 滤液用过量的乙醚沉降，得到产物用乙醚洗两次，在室温下真空干燥24h。反应过程如下：
[0055]图1是聚合物PLGA (a)与本发明实施例1制备得到的PLGA-g-CA (b)的红外光谱谱 图，根据Wen等报道了PBLG在747和698CHT1有苯环的特征峰，（a)中苯环的特征峰基本消失， 证明脱保护成功，（b)中，688,446〇1^处为苯环面外变形振动特征吸收频率，3055CHT 1处为 苯环C一Η伸缩振动吸收频率，说明肉桂醇成功修饰到PLGA上。图2是本发明实施例1制备得 到的PLGA-g-CA在7.18ppm(g)处的核磁共振峰信号为CA上苯环的氢(-C6H5，5Η); 5. Oppm(d) 处的核磁共振峰信号为CA上亚甲基的氢(-CH2,2H) ;6.8ppm(e)和7.0ppm(f)处的核磁共振 峰信号分别为CA上乙烯基上的氢(_CH=CH-，1H, 1H) ;0.5ppm(b)、3.5ppm(c)和2.8ppm(i)处 的核磁共振峰信号分别是PLGA上亚甲基的氢（-CH2，-CH 2，-CH2，2H，2H，2H); 3 · 4ppm(a)和 3 · 8ppm(h)处的核磁共振峰信号是PLGA上次甲基的氢(-CH-，1H); 4 · 2ppm(j)处的核磁共振 峰信号是PLGA上亚甲基的氢(-CH2，2H)。图2表明聚合物PLGA-g-CA聚合成功。图3为本发明 实施例1制备得到的PLGA 2Q5-g-CA68(a)的GPC谱图。通过对聚合物的GPC测试，可以得出聚合 物的分子量(Μη)、分散度(PDI)。
[0056] 实施例2
[0057] 将L-谷氨酸250g、苯甲醇125mL加入反应瓶中在60°C下机械搅拌，然后将120mL浓 H2S〇4l20mL逐滴加入反应瓶，待反应澄清后持续搅拌30min后冷却至室温，将反应液倒入 NaHC03冰水溶液并控制搅拌速度，之后封口置于4 °C的冰箱中过夜。对产物进行重结晶（三 次)后抽滤并用乙醇、乙醚洗涤，真空抽干备用。将γ-苄基-L-谷氨酸苄酯(20g，0.08mol)与 四氢呋喃240ml加入三口瓶中，在氮气保护的条件下加入三光气（14.2g，0.048mol)60°Ci 应2小时。粗产品置入冷的正己烷中沉降，抽滤，用乙酸乙酯溶液溶解粗产物，然后用碳酸氢 钠水溶液洗，无水硫酸镁干燥，最后除去乙酸乙酯，得到γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA。
[0058]先用三乙胺(TEA)做为引发剂，引发（γ-苄基-L-谷氨酸苄酯的NCA)BLG-NCA开环 聚合，得到聚（γ-苯甲基-L-谷氨酸酯）（PBLG)然后脱掉苄基制得产物PLGA。将BLG-NCA (26 · 33g，lOOmmol)，TEA(0 · 06g，0 · 028mmol)置于干燥的安瓿瓶中，加入270mL干燥的DMF，25 °C反应3天，溶液用过量的乙醚/乙醇（2/l，v/v)沉降。得到的产物PBLG用乙醚清洗两次，室 温下真空干燥24小时(产率:87%)。随后在25°C下将roLG(2.50g)溶解在25mL二氯乙酸中。 加入7.5mL HBr/乙酸（33 %，质量百分数），溶液在30 °C下缓慢搅拌1小时。终产物在过量的 丙酮中沉降，并且用丙酮洗两次。沉降物在室温下真空干燥至恒重。
[0059] 将PLGA(2 · 0g，0 · 8mmo 1)、肉桂醇（0 · 54g，4 · Ommo 1)和4-二甲氨基吡啶（DMAP) (0.05g，0.40mmol)溶解在25mL干燥的二甲基亚砜(DMS0)。在搅拌的情况下，将N，N'_二环己 基碳酰亚胺(DCC)缓慢滴加到溶液中，室温反应48小时。副产物二环己基脲(DCU)过滤除掉。 滤液用过量的乙醚沉降，得到产物用乙醚洗两次，在室温下真空干燥24h。
[0060] 图3为本发明实施例2制备得到的PLGA274-g-CA34(b)的GPC谱图。通过对聚合物的 GPC测试，可以得出聚合物的分子量(Mn)、分散度(PDI)。
[0061 ] 实施例3
[0062] 将L-谷氨酸400g、苯甲醇125mL加入反应瓶中在60 °C下机械搅拌，然后将120mL浓 H2S〇4l20mL逐滴加入反应瓶，待反应澄清后持续搅拌30min后冷却至室温，将反应液倒入 NaHC03冰水溶液并控制搅拌速度，之后封口置于4 °C的冰箱中过夜。对产物进行重结晶（三 次)后抽滤并用乙醇、乙醚洗涤，真空抽干备用。将γ-苄基-L-谷氨酸苄酯(20g，0.08mol)与 四氢呋喃240ml加入三口瓶中，在氮气保护的条件下加入三光气（14.2g，0.048mol)60°Ci 应2小时。粗产品置入冷的正己烷中沉降，抽滤，用乙酸乙酯溶液溶解粗产物，然后用碳酸氢 钠水溶液洗，无水硫酸镁干燥，最后除去乙酸乙酯，得到γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA。
[0063]先用三乙胺(TEA)做为引发剂，引发（γ-苄基-L-谷氨酸苄酯的NCA)BLG-NCA开环 聚合，得到聚（γ-苯甲基-L-谷氨酸酯）（PBLG)然后脱掉苄基制得产物PLGA。将BLG-NCA (26·33g，100mmol)，TEA(0·12g，0·028mmol)置于干燥的安瓿瓶中，加入270mL干燥的DMF，25 °C反应3天，溶液用过量的乙醚/乙醇（2/l，v/v)沉降。得到的产物PBLG用乙醚清洗两次，室 温下真空干燥24小时(产率:87%)。随后在25°C下将roLG(2.50g)溶解在25mL二氯乙酸中。 加入7.5mL HBr/乙酸（33 %，质量百分数），溶液在30 °C下缓慢搅拌1小时。终产物在过量的 丙酮中沉降，并且用丙酮洗两次。沉降物在室温下真空干燥至恒重。将PLGA( 3.2g， 0.8mmo 1)、肉桂醇（0 · 54g，4 · Ommol)和4-二甲氨基吡啶（DMAP) (0 · 05g，0 · 40mmol)溶解在 25mL干燥的二甲基亚砜(DMS0)。在搅拌的情况下，将N，N'_二环己基碳酰亚胺(DCC)缓慢滴 加到溶液中，室温反应48小时。副产物二环己基脲(D⑶)过滤除掉。滤液用过量的乙醚沉降， 得到产物用乙醚洗两次，在室温下真空干燥24h。
[0064]图3为本发明实施例3制备得到的PLGAsos-g-CAWc)的GPC谱图，通过对聚合物的 GPC测试，可以得出聚合物的分子量(Mn)、分散度(PDI)。
[0065] 实施例4
[0066]将实施例1得到的PLGA-g-CA溶于pH=7.0的柠檬酸盐缓冲溶液(0.01m〇l/L)，在室 温紫外光照下(EF-180C/FE紫外灯，光强为1.29mWcm-2，λ = 254ηπι)搅拌，6小时后，用去离子 水透析24h，冻干，得到纳米载药材料。
[0067] 图4为实施例4得到的纳米载药材料的透射电镜图，图4说明，本发明制备得到的微 凝胶呈现为单分散的球型形貌。
[0068] 图5为实施例4得到的纳米载药材料在不同pH值下的药物释放率，图5说明载药微 凝胶的药物释放速率随pH的降低而加快。
[0069] 实施例5
[0070]将实施例2得到的PLGA-g-CA溶于pH = 5.3的柠檬酸盐缓冲溶液(0.0 lmo 1 /L )，在室 温紫外光照下(EF-180C/FE紫外灯，光强为1.29mWcm-2，λ = 254ηπι)搅拌，6小时后，用去离子 水透析24h，冻干，得到纳米载药材料。
[0071] 实施例6
[0072]将实施例3得到的PLGA-g-CA溶于pH=6.8的柠檬酸盐缓冲溶液(0.0 lmo 1 /L )，在室 温紫外光照下(EF-180C/FE紫外灯，光强为1.29mWcm-2，λ = 254ηπι)搅拌，6小时后，用去离子 水透析24h，冻干，得到纳米载药材料。
【主权项】
1. 一种聚α-谷氨酸)接枝肉桂醇，其特征在于，其结构式如式i所示，式I 中，χ = 84~310，y = 5~100。2. 根据权利要求1所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，该方 法包括： 步骤一:将γ -苄基-L-谷氨酸苄酯和三光气反应，得到γ -苄基-L-谷氨酸苄酯NCA; 步骤二：以三乙胺做为引发剂，引发步骤一得到的γ-苄基-L-谷氨酸苄酯NCA开环聚 合，得到聚（γ -苯甲基-L-谷氨酸酯），然后脱掉苄基制得产物聚(L-谷氨酸）； 步骤三:将步骤二合成的聚（L-谷氨酸）、肉桂醇和4-二甲氨基吡啶溶解在二甲基亚砜 中，然后加入Ν，Ν'_二环己基碳酰亚胺，得到聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇。3. 根据权利要求2所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，所述 步骤一中γ-苄基-L-谷氨酸苄酯与三光气的摩尔比为5:3。4. 根据权利要求1所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，所述 步骤一的反应温度为55-60°C，反应时间为2h。5. 根据权利要求1所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，所述 步骤二中三乙胺与γ -苄基-L-谷氨酸苄酯NCA的摩尔比为7: (24000-26000)。6. 根据权利要求1所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，所述 步骤二的反应温度为25 °C，反应时间优选为3-4天。7. 根据权利要求1所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，所述 步骤三中聚(L-谷氨酸）、肉桂醇和4-二甲氨基吡啶摩尔比为2:10:1。8. 根据权利要求1所述的一种聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇的制备方法，其特征在于，所述 步骤三的反应温度为室温，反应时间优选为36-48小时。9. 权利要求1所述的聚(L-谷氨酸)接枝肉桂醇制备得到的纳米载药材料。10. 根据权利要求9所述的一种纳米载药材料的制备方法，其特征在于，包括将聚(L-谷 氨酸)接枝肉桂醇溶于柠檬酸盐缓冲溶液，在室温紫外光照下搅拌，经透析冻干，得到纳米 载药材料。
【文档编号】A61K47/34GK105949458SQ201610403604
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年6月8日
【发明人】王薇, 葛育廷, 王丽波, 马鹏飞, 陈裕杰
【申请人】长春理工大学