金霉素预混剂提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了金霉素预混剂提取工艺,包括种子培养、发酵培养及产品提炼三个步骤,产品提炼的步骤包括：取金霉素放罐发酵液，加入氧化钙；使发酵处理液的pH值为7.8～9.5，常温下络合搅拌30min、转速60??80r/min，得钙化络合液；经板框过滤、沸腾烘干得到金霉素预混剂成品。本发明提取工艺可提高金霉素预混剂产品质量、含量和收率，降低生产成本。
【专利说明】
金霉素预混剂提取工艺
技术领域
[0001] 本发明设及抗生素制备工艺，特别是一种高含量金霉素预混剂的提取工艺。
【背景技术】
[0002] 目前金霉素产品主要有金霉素预混剂和盐酸金霉素两种类型，盐酸金霉素因其提 取工艺较复杂，且需要有较大的厂房和较高的设备投入而受到很大限制。而金霉素预混剂 的提取工艺方面也存在很大的不确定性，运样也导致产品批之间的含量(生物效价)和收率 方面存在较大差异。尤其是客户对高生物活性成分含量金霉素预混剂产品的需求。
[0003] 发明专利(CN 102899377 A)公开了一种金霉素预混剂的制备方法，提取时在发酵 液中加入相当于发酵液体积0-12%的碳酸巧，揽拌20-40分钟，板框过滤，压滤完毕后，将板 框滤饼进行旋转闪蒸干燥，干燥物料经振动筛分，得到金霉素预混剂。金霉素预混剂主要活 性成分为金霉素巧盐。金霉素巧盐主要是金霉素与巧离子结合而成的难溶于水的沉淀。若 只按发酵液体积来加入碳酸巧，由于没有考虑到具体发酵液的单位的高低差异，使得制备 出的预混剂生物活性成份含量差异大。另由于碳酸巧难溶于水，且加入碳酸巧后的混合液 呈弱酸性或中性，不能更好地与溶解在发酵液中的金霉素结合成盐而沉淀，使得滤液中残 留金霉素效价偏高，造成提取收低，增加了污水处理成本。且采用加入碳酸巧得到的预混剂 生物活性成份含量较低，不能满足客户对高生物活性成份含量产品的需求。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种金霉素预混剂提取工艺，特别是一种高含量金霉素预 混剂的提取工艺。W提高金霉素预混剂产品质量、生物活性成分含量和收率，降低生产成 本。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用W下技术方案： 金霉素预混剂提取工艺，包括种子培养、发酵培养及产品提炼Ξ个步骤:将金色链霉菌 接种入种子罐进行培养，将培养好的种子培养液接入发酵罐，根据发酵液的总糖浓度控制 指标进行补入糖水及生长因子的发酵培养，产品提炼的步骤如下： 51. 取金霉素放罐发酵液，加入氧化巧，氧化巧的加入量Me。。按下列公式计算： Mcao化g)=U(u/ml) X V(m3)今 1000 X C 其中Mca。为氧化巧的加入质量，U为发酵液化学效价，V为发酵液体积，C为加氧化巧系 数 C=0.11±0.01; 52. 加入氧化巧后使发酵处理液的pH值为7.8~9.5,常溫下络合揽拌30min、转速 60-80r/min，得巧化络合液； 53. 将巧化络合液进行板框过滤，控制压力为0.5~0.75Mpa;过滤后得到滤饼进行破碎 或制粒； 54. 步骤S3得到的颗粒进行沸腾烘干得到金霉素预混剂成品。
[0006] 进一步地，所述的种子罐培养基中各原料的质量配比如下:淀粉20%~35%，玉米浆 ο. 9%~3.8%，轻质碳酸巧ο. 4%~ο. 9%，促进剂Μ ο. ο 1%~ο. 05%，硫酸锭ο. 2%~ο. 5%，淀粉酶 0.03%~0.15%;氯化巧0.2%~0.5%，余量水。
[0007] 进一步地，发酵培养过程中发酵罐溫度26~33°C、通气量1:0.45~0.8巾八/111111、罐 压0.02~0.05 MPa、揽拌速度100~145 r/min，总糖浓度控制指标为:发酵培养0~9小时控 制发酵液总糖质量百分浓度不低于4.5%、发酵培养10~40小时控制发酵液总糖质量百分浓 度4.0~3.0%、发酵培养40~90小时控制发酵液总糖质量百分浓度3.0~2.5%、发酵培养90 ~100小时控制发酵液总糖质量百分浓度2.5~2.0%、发酵培养100小时后控制发酵液总糖 质量百分浓度不低于1.3%。
[000引优选地，发酵放罐效价使金霉素不低于18000 u/ml，滤速不少于8ml/5min。
[0009] 优选地，步骤S4中，沸腾烘干时控制进口溫度为150~160°C、出口溫度为50~70 Γ。
[0010] 采用上述技术方案后，本发明具有如下优点： 1、本发明生产工艺简单，可实现标准化操作和控制。采用氧化巧为络合剂来制备金霉 素预混剂，且采用公式来计算加入氧化巧的量，有利于标准化操作和控制。本发明得到的成 品含量高达25%W上。
[0011] 2、氧化巧加入到发酵液中，使发酵处理液的pH值为7.8~9.5。氧化巧与水反应生 成氨氧化巧，氨氧化巧在水中可W电离出巧离子和氨氧根离子.氨氧根离子使混合液中的 抑呈碱性，在碱性条件下巧离子与金霉素作用生成难溶性的盐。形成馨合物，最主要的馨合 位置是β-11,12-二酬系统。β-二酬是酸性基团，故沉淀应在碱性中进行较完全。 3、氨氧化巧在水中可电离成巧离子。巧离子与发酵液中的游离的金霉素络合成金霉素 巧盐。氧化巧既可作发酵液巧络合时的抑调节剂，又可作金霉素巧盐的络合剂，使金霉素巧 盐巧化络合时在适合的抑下络合较完全，提高了产品生物效价(生物活性成分）、产品质量， 同时降低了滤液中的金霉素含量，降低污水处理成本，提高了收率。
【附图说明】
[0012] 图1为本发明的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0013] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，W下结合附图及实施例，对 本发明进行进一步详细说明。
[0014] 如图1所示，本发明公开了一种金霉素预混剂提取工艺，包括种子培养、发酵培养 及产品提炼Ξ个步骤： (1)种子培养:将金色链霉菌接种入种子罐进行培养，种子罐培养基中各原料的质量配 比如下：淀粉20%~35%，玉米浆0.9%~3.8%，轻质碳酸巧0.4%~0.9%，促进剂Μ 0.01%~ 0.05%，硫酸锭0.2%~0.5%，淀粉酶0.03%~0.15%;氯化巧0.2%~0.5%，余量水。将金色链霉 菌接种入种子罐进行培养。
[0015] (2)发酵培养:将培养好的种子培养液接入发酵罐，根据发酵液的总糖浓度控制指 标进行补入糖水及生长因子的发酵培养，该混合糖水培养基包括碳源、氮源、无机盐和玉米 浆，通过限定培养基中碳源、氮源的浓度来实现。并根据发酵液的总糖浓度控制指标添加补 糖水及生长因子、到金霉素发酵罐的培养基中。
[0016] 发酵罐工况为：发酵罐溫度26~33 °C、通气量1:0.45~0.8v/v/min、罐压0.02~ 0.05 MPa、揽拌速度100~145巧m/min，总糖浓度控制指标为:发酵培养0~9小时控制发酵 液总糖质量百分浓度不低于4.5%、发酵培养10~40小时控制发酵液总糖质量百分浓度4.0 ~3.0%、发酵培养40~90小时控制发酵液总糖质量百分浓度3.0~2.5%、发酵培养90~100 小时控制发酵液总糖质量百分浓度2.5~2.0%、发酵培养100小时后控制发酵液总糖质量百 分浓度不低于1.3%。为了减少溶氧需求，同时利于金霉素合成，发酵时间为90-124h，放罐效 价使金霉素不低于18000 u/ml，滤速不少于8ml/5min。
[0017] (3)产品提炼，步骤如下： 51. 取金霉素放罐发酵液，加入氧化巧，氧化巧的加入量Mea。按下列公式计算： Mcao化g)=U(u/ml) X V(m3)今 1000 X C 其中Mca。为氧化巧的加入质量，U为发酵液化学效价，V为发酵液体积，C为加氧化巧系 数C=0.11 ± 0.01;表1是几个批次的发酵液用公式计算加入氧化巧进行提取的结果表：
52. 加入氧化巧后使发酵处理液的pH值为7.8~9.5，常溫下络合揽拌30min、转速60- 8化/min，得巧化络合液； 53. 将巧化络合液进行板框过滤，控制压力为0.5~0.75Mpa;过滤后得到滤饼进行破碎 或制粒； 54. 步骤S3得到的颗粒进行沸腾烘干得到金霉素预混剂成品。沸腾烘干时控制进口溫 度为150~160°C、出口溫度为50~70°C。
[0018]
【申请人】在提取金霉素预混剂时发现在产品提炼过程中，加入氧化巧与传统制法中 加入碳酸巧的工艺相比较，提高了金霉素预混剂产品质量、生物效价(生物活性成份)和收 率，降低了滤液中金霉素的残留，有利于降低污水处理成本。
[0019] W下结合对比实施说明。
[0020] 实施例一、取金霉素放罐发酵液90m3,等体积分成2份。
[0021] -组:取其中一份金霉素放罐发酵液45m3,用计算公式计算出加入氧化巧的量，常 溫条件下加入氧化巧，得发酵处理液pH为7.8,揽拌30min，转速60~80 r/min，得巧化络合 液;将巧化络合液进行板框过滤，控制压力为0.5~0.75Mpa;过滤后得到滤饼进行破碎;经 破碎的颗粒进行沸腾烘干，控制进口溫度为150~160°C、出口溫度为50~70°C，得到金霉素 预混剂成品。
[0022] -组对照组:取另一份金霉素放罐发酵液45m3,常溫下直接加入相当于发酵液体 积5%的碳酸巧，揽拌30min，转速60~80 r/min，得巧化络合液。料液进行板框过滤，控制压 力为0.5~0.75Mpa;过滤后得到滤饼进行破碎;经破碎的颗粒进行沸腾烘干，控制进口溫度 为150~160°C、出口溫度为50~70°C，得到金霉素预混剂成品。
[0023] 实施例二、取金霉素放罐发酵液89m3,等体积分成2份。
[0024] 二组:取其中一份金霉素放罐发酵液44.5m3，用计算公式计算出加入氧化巧的量， 常溫条件下加入氧化巧，得发酵处理液抑为8.5，其它提取工艺与一组相同。
[0025] 二组对照组：取另一份金霉素放罐发酵液44.5m3，常溫下直接加入相当于发酵液 体积5%的碳酸巧，其它提取工艺与一组对照组相同。
[0026] 实施例Ξ、取金霉素放罐发酵液91m3,等体积分成2份。
[0027] Ξ组:取其中一份金霉素放罐发酵液45.5m3，用计算公式计算出加入氧化巧的量， 常溫条件下加入氧化巧，得发酵处理液抑为9.0，其它提取工艺与一组相同。
[00%] Ξ组对照组:取另一份金霉素放罐发酵液45.5m3，常溫下直接加入相当于发酵液 体积6%的碳酸巧，其它提取工艺与一组对照组相同。
[0029] Ξ个实施例得到的检测结果如表2所示。
[0030] 从W上实施对比可W看出，本发明改进了生产工艺，氧化巧可做为pH调节剂使得 发酵处理液成碱性，同时电离出的巧离子又能在碱性下与金霉素作用生成难溶性的盐而沉 淀，使巧化络合后的处理液板框过滤使产品收率提高2.4%，同时滤液中的金霉素含量降低 32%左右，提高了产品质量和生物活性成分含量(生物效价可达29%W上）。本发明生产工艺 简单，可实现操作标准化和控制、提高了产品质量和活性成分含量、还有利于降低污水处理 成本，实现环境保护。满足客户对高生物活性成分含量金霉素预混剂的需求，也为企业带来 减少产品加工量及减少产品外运运输费用的收益，可降低客户转移和储存产品的费用，W 达到双赢。
[0031] W上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此， 任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明掲露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换， 都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 金霉素预混剂提取工艺，包括种子培养、发酵培养及产品提炼三个步骤:将金色链霉 菌接种入种子罐进行培养，将培养好的种子培养液接入发酵罐，根据发酵液的总糖浓度控 制指标进行补入糖水及生长因子的发酵培养，其特征在于，产品提炼的步骤如下：51. 取金霉素放罐发酵液，加入氧化钙，氧化钙的加入量Mea。按下列公式计算： Mca〇(kg)=U(u/ml) XV(m3)^1000XC 其中MCa。为氧化钙的加入质量，U为发酵液化学效价，V为发酵液体积，C为加氧化钙系 数 C=0.11±0.01;52. 加入氧化钙后使发酵处理液的pH值为7.8~9.5，常温下络合搅拌30min、转速60- 80r/min，得钙化络合液；53. 将钙化络合液进行板框过滤，控制压力为0.5~0.75Mpa;过滤后得到滤饼进行破碎 或制粒；54. 步骤S3得到的颗粒进行沸腾烘干得到金霉素预混剂成品。2. 如权利要求1所述的金霉素预混剂提取工艺，其特征在于，所述的种子罐培养基中各 原料的质量配比如下：淀粉20%~35%，玉米浆0.9%~3.8%，轻质碳酸钙0.4%~0.9%，促进剂Μ 0 · 01%~0 · 05%，硫酸铵0 · 2%~0 · 5%，淀粉酶0 · 03%~0 · 15%;氯化钙0 · 2%~0 · 5%，余量水。3. 如权利要求2所述的金霉素预混剂提取工艺，其特征在于，所述的种子培养的温度为 26~33°C，时间为20~28小时。4. 如权利要求1或2或3所述的金霉素预混剂提取工艺，其特征在于，发酵培养过程中发 酵罐温度26~33°C、通气量1:0 · 45~0 · 8v/v/min、罐压0 · 02~0 · 05 MPa、搅拌速度100~145 r/min，总糖浓度控制指标为：发酵培养0~9小时控制发酵液总糖质量百分浓度不低于 4.5%、发酵培养10~40小时控制发酵液总糖质量百分浓度4.0~3.0%、发酵培养40~90小时 控制发酵液总糖质量百分浓度3.0~2.5%、发酵培养90~100小时控制发酵液总糖质量百分 浓度2.5~2.0%、发酵培养100小时后控制发酵液总糖质量百分浓度不低于1.3%。5. 如权利要求4所述的金霉素预混剂提取工艺，其特征在于，发酵放罐金霉素效价不低 于 18000 u/ml，滤速不少于8ml/5min。6. 如权利要求1所述的金霉素预混剂提取工艺，其特征在于，步骤S4中，沸腾烘干时控 制进口温度为150~160 °C、出口温度为50~70 °C。
【文档编号】C12R1/49GK106011212SQ201610385325
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月3日
【发明人】吴新芝, 冯献, 毛红卫, 徐文雪, 许意锋, 章辉
【申请人】浦城正大生化有限公司