技术特征：
1.一种基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：包括盒体(1)，盒体(1)上设有第一柱塞腔，第一柱塞腔内设置有可在第一柱塞腔内移动的第一移动柱塞(2)，所述第一移动柱塞(2)中空并设有活塞(201)，第一移动柱塞(2)上设有进液口(202)和出液口(203)，出液口(203)上设有过滤膜(204)；盒体(1)上设有多个储液仓(3)，储液仓(3)上设有连通至第一柱塞腔的液路，通过将第一移动柱塞(2)移动至不同位置可以将进液口(202)或出液口(203)与储液仓(3)连通，通过活塞(201)的移动可以将储液仓(3)和第一移动柱塞(2)内的液体进行位置转移。2.根据权利要求1所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述储液仓(3)上设有气孔，所述第一移动柱塞(2)上设有连通至外部的气路，储液仓(102)上设有与第一移动柱塞(2)上的气路相连通的气路；当第一移动柱塞(2)移动至与其中一个储液仓(3)液路连通时，第一移动柱塞(2)上的气路与储液仓(3)的液路连通。3.根据权利要求1所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述储液仓(3)中的一个或多个设置有加样口。根据需要可设为样本加入口、pcr反应物加入口及裂解/转化液加入口。4.根据权利要求3所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述加样口的数量为3个，分别为样本加入口(301)、裂解/转化液加入口(302)和pcr反应物加入口(303)。5.根据权利要求4所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述储液仓(3)中包含用于样本预处理的预处理仓(304)、用于pcr反应的pcr反应仓(305)、用于储存结合液的结合液仓(306)、用于储存清洗液的清洗液仓(307)、用于储存洗脱液的洗脱液仓(308)和用于储存废液的废液仓(309)。6.根据权利要求5所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述储液仓(3)中包含用于储存稀释液的稀释液仓(310)。7.根据权利要求1所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述盒体(1)上设有第二柱塞腔，第二柱塞腔内设有第二移动柱塞(4)；盒体(1)上还设有多个用于分别连接外管(5)的转移口(6)；第二柱塞腔上分别设有与第一柱塞腔和转移口连通的液路；第二移动柱塞(4)上设有连接液路(401)，通过第二移动柱塞(4)的位置移动可将第一柱塞腔与不同的转移口(6)连通。8.根据权利要求7所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒，其特征在于：所述第二移动柱塞(4)上设有与外部连通的通气孔(402)，在第一柱塞腔与不同的转移口(6)连通时，通气孔(402)也与相应的转移口(6)连通。9.使用权利要求1-8任一权利要求所述的基于移动柱塞的气动一体式pcr检测试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
①
将样本核酸充分附着在第一移动柱塞(2)的过滤膜(204)上；
②
移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与储存清洗液的清洗液仓(307)连通，抽动活塞(201)，使清洗液进入第一移动柱塞(2)；
③
移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与废液仓(309)连通，下压活塞(201)，使第一移动柱塞(2)内的清洗液进入废液仓(309)，清洗液流经过滤膜(204)，从而对过滤膜(204)上核酸进行清洗；
④
移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与洗脱液仓(308)连通，抽动活塞(201)，使洗脱液进入第一移动柱塞(2)；
⑤
移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与pcr反应仓(305)连通，下压活塞(201)，使第一移动柱塞(2)内的洗脱液进入pcr反应仓(305)，洗脱液流经过滤膜(204)，将过滤膜(204)上核酸洗脱，一并进入pcr反应仓(305)。10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述步骤
①
的具体方法是：1a、移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与用于储存裂解/转化液的储液仓(3)连通，抽动活塞(201)，使裂解/转化液进入第一移动柱塞(2)；1b、移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与用于储存样本溶液的储液仓(3)连通，抽动活塞(201)，使样本溶液进入第一移动柱塞(2)；1c、移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与预处理仓(304)连通，下压活塞(201)，使第一移动柱塞(2)内的所有液体进入预处理仓(304)进行裂解或转化；1d、移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与结合液仓(306)连通，抽动活塞(201)，使结合液进入第一移动柱塞(2)；1e、移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与预处理仓(304)连通，下压活塞(201)，使结合液进入预处理仓(304)；1f、移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与预处理仓(304)连通，抽动活塞(201)，使将预处理仓(304)内的所有液体吸入第一移动柱塞(2)；1g、重复步骤1e和1f多次；1h、移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与废液仓(309)连通，下压活塞(201)，使第一移动柱塞(2)内的所有液体进入废液仓(309)，样本核酸充分附着在过滤膜(204)上。11.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述步骤
②
和
③
重复多次，每次第一移动柱塞(2)与多个不同的清洗液仓(307)相连。12.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述步骤
⑤
后还包括以下步骤：
⑥
移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与储存pcr反应物的储液仓(3)连通，抽动活塞(201)，使pcr反应物进入第一移动柱塞(2)；
⑦
移动第一移动柱塞(2)使出液口(203)与pcr反应仓(305)连通，下压活塞(201)，使pcr反应物进入pcr反应仓(305)与样本核酸进行pcr反应；13.根据权利要求12所述的检测方法，其特征在于，所述步骤
⑦
后还包括以下步骤：
⑧
移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与pcr反应仓(305)连通，抽动活塞(201)，使pcr反应产物进入第一移动柱塞(2)；
⑨
移动第一移动柱塞(2)使进液口(202)与稀释液仓(310)连通，抽动活塞(201)，使稀释液进入第一移动柱塞(2)，对pcr反应产物进行稀释；
⑩
同步移动第一移动柱塞(2)和第二移动柱塞(4)，使第一移动柱塞(2)的出液口(203)与其中一个转移口(6)连通，定量下压活塞(201)，使固定量的稀释后pcr反应产物通过转移口(6)进入外管(5)；重复步骤
⑩
多次，每次只移动第二移动柱塞(4)，使第一移动柱塞(2)的出液口(203依次与各个转移口(6)连通。
技术总结
本发明公开了一种基于移动柱塞的气动一体式PCR检测试剂盒及其检测方法，包括盒体(1)，盒体(1)上设有第一柱塞腔，第一柱塞腔内设置有可在第一柱塞腔内移动的第一移动柱塞(2)，所述第一移动柱塞(2)中空并设有活塞(201)，第一移动柱塞(2)上设有进液口(202)和出液口(203)，出液口(203)上设有过滤膜(204)；盒体(1)上设有多个储液仓(3)，储液仓(3)上设有连通至第一柱塞腔的液路，通过将第一移动柱塞(2)移动至不同位置可以将进液口(202)或出液口(203)与储液仓(3)连通，通过活塞(201)的移动可以将储液仓(3)和第一移动柱塞(2)内的液体进行位置转移。本发明是一种空间利用率高、可控性强、操作简单、不易引入污染、检测精度更高的PCR检测试剂盒及检测方法。度更高的PCR检测试剂盒及检测方法。度更高的PCR检测试剂盒及检测方法。
技术研发人员：王勤 宋倩 叶盛 王欣浩 周睿 王思格 刘文佳 马龙斌 何东华 刘蕊
受保护的技术使用者：上海鹍远生物技术有限公司 杭州遂曾生物技术有限公司 江苏鹍远生物技术有限公司
技术研发日：2021.11.09
技术公布日：2022/2/18