专利名称：龙脑樟叶片粗提物的提取法及所用的响应面法优化法的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种龙脑樟叶片粗提物提取、成分分析及其条件优化，特别是涉及利用响应曲面法优化龙脑樟叶片粗提物提取条件的方法。
背景技术：
冰片又名片脑、桔片、龙脑香，是龙脑香科植物龙脑香的树脂和挥发油加工品提取获得的结晶，是近乎于纯粹的右旋龙脑。其气清香、味苦、辛凉，可用于通诸窍、散郁火、消肿止痛、消热解毒、去翳明目、闭证神昏、用于目赤肿痛，喉痹口疮、疮疡肿痛、溃后不敛等。我国所产的天然冰片主要是从樟科植物龙脑樟的枝叶中提取并通过精制而成，它不含对人体有害的异龙脑，其药用效果远远优于合成冰片和天然左旋龙脑。龙脑樟叶片提取冰片的方法一般为水蒸汽蒸馏提取，蒸馏时间长、温度高、液料比大、装置复杂，提取得率低等不利于大规模生产。目前现有的龙脑樟叶片的提取方法为:龙脑樟叶与水的液料比为:50-70ml/g;提取温度为100°c，提取时间为4-6小时，水蒸气提取，冷凝得到粗提品(龙脑樟叶片粗提物)，得率为1.115-1.242%。该粗提品中，主成分为右旋龙脑(天然冰片)，其含量为71.78%。
发明内容
本发明要解决的技术 问题是提供一种能提高提取率的龙脑樟叶片粗提物的提取法及所用的响应面法优化法。为了解决上述技术问题，本发明提供一种龙脑樟叶片粗提物的提取法，将龙脑樟叶片与石油醚按照3Γ36 ml石油醚/ g龙脑樟叶片的料液比混合，于48 49°C的温度下提取Π.1小时；所得的提取液蒸干作为溶剂的石油醚后，得龙脑樟叶片粗提物。作为本发明的龙脑樟叶片粗提物的提取法的:料液比为35ml石油醚/ g龙脑樟叶片，提取温度为48°C，提取时间为2小时。本发明还同时提供了一种响应面法优化龙脑樟叶片粗提物提取法的方法，设置以下3个变量:龙脑樟叶片与石油醚的液料比、提取温度和提取时间；利用design expert软件根据Box—Behnken设计原则进行优化。本发明是一种运用响应曲面法优化方法所获得的从龙脑樟叶片中提取冰片的提取工艺，本发明对浸提时间、浸提温度以及料液比这些对提取率有显著影响的因素进行优化，并选取了石油醚作为提取用溶剂，从而提高了冰片的提取率，减少溶剂、资源的消耗，减少生产过程中污然物的产生与排放。利用本发明的龙脑樟叶片粗提物的提取法，粗提物的提取率最高可达到7.102%。利用天然冰片具升华的特性，纯化所得的粗制品，就能得到高纯度天然冰片。本发明使用气相色谱一质谱分析龙脑樟叶片粗提物中的主要成分为:右旋龙脑47.32%，1-甲基3-乙基苯4.37%，蛇麻烯3.64%，右旋大根香叶烯3.62%。上述%为质量％。说明:上述龙脑樟叶是指:干燥至含水率彡8% (重量含量)，粉碎，过60目筛的植物龙脑樟(CirmamonunCamphora)叶片。本发明是一种龙脑樟叶片粗提物提取纯化并应用响应面分析法优化提取工艺的一种方法。以石油醚作为溶剂，浸润提取，只通过15组实验可对龙脑樟叶片中含有的天然冰片提取条件进行提取时间、提取温度以及料液比这些影响天然冰片提取率的因素进行优化，获得最佳的提取优化条件，提高了提取效率，降低了能耗，减少了污染物的排放，具有工业化生产的实际意义。本发明利用浸润提取，大大减少了实验步骤，提高了提取率；只通过少量的实验，就可合理有效地优化龙脑樟叶片中天然冰片的提取工艺，简便可行。本发明可适用于工业化生产中龙脑樟叶片中天然冰片的提取工艺及其优化的问题，具有很高的使用价值。本发明具有如下优点和效率:1、以石油醚作为溶剂，浸润提取龙脑樟叶片粗提物的方法步骤简单，提取率高。2、通过升华纯化所得的粗制品，就能轻易得到高纯度的天然冰片。综上所述，本发明采用了石油醚作为溶剂，浸润提取龙脑樟(CirmamonunCamphora)叶片并通过升华得到精制冰片的方法。响应面分析法(RSM)是依据几个变量和一个或多个应变量之间的回归关系，通过回归分析得到提取条件和提取结果的回归关系，从而求得最佳提取工艺的一种数学方法。本发明的提取方法，当提取温度为48°C，提取时间为2小时，料液比为1:35时，叶片粗提物的提取率达到7.102%，通过升华纯化粗制品，得到的高纯度天然冰片。通过气相色谱分析，该粗制品中冰片的含量为47.32%。本发明降低了提取温度，节约了能源；缩短了提取时间，提高了生产效率；降低了料液比，减少了资源的消耗，减少了生产过程中污染物的产生与排放。本发明后续所采用的“升华精制冰片”的过程中降低了冰片升华的损失。
下面结合附图对本发明的具体实施方式
作进一步详细说明。图1是提取因素对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面三维和二维图；(a)中:上图为提取时间与液料比对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面三维图，下图为提取时间与液料比对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面二维图；(b)中:上图为料液比与提取温度对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面三维图，下图为液料比与提取温度对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面二维图；(C)中:上图为提取温度与提取时间对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面三维图，下图为提取温度与提取时间对龙脑樟叶片粗提物提取率影响的响应面二维图。图2是提取时间的变化对龙脑樟叶片粗提物产率(得率)的影响图。图3是提取温度的变化对龙脑樟叶片粗提物产率的影响图。图4是提取液料比的变化对龙脑樟叶片粗提物产率的影响图。图5是龙脑樟叶片粗提物气相色谱-质谱分析图5中:横坐标表不保留时间，纵坐标表不归一法后的相对含量(面积归一化)，右上角数值表示仪器样品编号。图6是龙脑樟提取纯化装置的结构示意图。
具体实施例方式一、样品准备将龙脑樟叶干燥至含水率彡8% (重量含量)，然后粉碎至过60目筛，作为样品。用天平称取样品0.50g，按料液比加入石油醚(沸点60_90°C)，在不同温度下按一定的时间进行提取，提取后的溶液进行离心(转速10000，10分钟，15°C )，上清液回收，再用旋转蒸发仪蒸干溶剂(石油醚)得到粗提物。用公式计算出产率:产率(％) =[测定出的冰片粗提物的重量/样品重量]X100%;得到的粗提取通过气相色谱测定其中化合物的含量。将粗提物放入特制升华装置(为如图6所示的龙脑樟提取纯化装置)中，通过升华作用提纯冰片。 二、实验设计与统计分析1、单因素实验改变提取温度、提取时间、物料比进行单因素实验，测定龙脑樟叶片粗提物的含量，计算龙脑樟叶片粗提物的百分含量。每次处理三次重复。2、响应面法优化设计根据单因素试验结果，选取影响龙脑樟叶片提取的较显著的提取时间、提取温度、物料比这三个因素，利用design expert软件根据Box—Behnken设计原则设计实验,选取提取温度，提取时间和物料比进行实验因素与水平的设定，设定结果见表I。表1、实验因素与水平设定
权利要求
1.脑樟叶片粗提物的提取法，其特征是:将龙脑樟叶片与石油醚按照3Γ36ml石油醚/ g龙脑樟叶片的料液比混合，于48 49°C的温度下提取2 2.1小时；所得的提取液蒸干作为溶剂的石油醚后，得龙脑樟叶片粗提物。
2.根据权利要求1所述的龙脑樟叶片粗提物的提取法，其特征是:所述料液比为35ml石油醚/ g龙脑樟叶片，提取温度为48°C，提取时间为2小时。
3.应面法优化龙脑樟叶片粗提物提取法的方法，其特征是:设置以下3个变量:龙脑樟叶片与石油醚的液料比、提取温度和提取时间；利用design expert软件根据Box—Behnken设 计原则进行优化。
全文摘要
本发明公开了一种龙脑樟叶片粗提物的提取法，将龙脑樟叶片与石油醚按照34~36 ml石油醚 / g龙脑樟叶片的料液比混合，于48~49℃的温度下提取2~2.1小时；所得的提取液蒸干作为溶剂的石油醚后，得龙脑樟叶片粗提物。本发明还同时提供了一种响应面法优化龙脑樟叶片粗提物提取法的方法，设置以下3个变量龙脑樟叶片与石油醚的液料比、提取温度和提取时间；利用design expert软件根据Box—Behnken设计原则进行优化。采用本发明的提取法，能提高冰片的提取率，减少溶剂、资源的消耗，减少生产过程中污然物的产生与排放。
文档编号B01D11/02GK103083939SQ201310052210
公开日2013年5月8日 申请日期2013年2月18日 优先权日2013年2月18日
发明者沈慧珍, 陈绍瑗, 俞玉水 申请人:浙江桐庐百草园中药材开发有限公司