专利名称：采用高效液相测定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱含量的方法
技术领域：
本发明属于中药制剂技术领域，涉及中成药的质量检测方法，更具体地说是ー种采用高效液相測定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱含量的方法。
背景技术：
在我国，中药鉴定学是较为传统的ー项中药检验技术，伴随我国中医理论的发展而逐步成熟。诸多鉴定法在中药质量检验方面逐渐发挥了其特有优势。在我国2000年版药典当中有五十九种药材以及五十种临床中成药选取了高效液相色谱法进行检验，同时高效液相色谱法也越来越多的被应用于中药成分分析领域。在中药理、化鉴定法中，高效液相色谱法HPLC的应用相对比较广泛。高效液相色谱法具有迅速、敏捷、分离效能相对较高等诸多优势。在对中药进行检验时，应用高效液相色谱法将特殊性成分予以分离后，再通过紫 外检测器或者是质谱检测器对中药进行结构以及定量等相关方面的分析，可以对中药的质量做出合理评价。采用高效液相法用于中成药的质量检测对保障人民的用药安全，将会有很大的实际应用意义。清肺消炎丸是ー种传统的中药制剂，它是由麻黄、石膏、地龙、牛蒡子、葶苈子、人エ牛黄、苦杏仁(妙)、羚羊角组成。主要用于清肺化痰，止咳平喘。用于痰热阻肺，咳嗽气喘，胸胁胀痛，吐痰黄稠，上呼吸道感染、急性支气管炎和慢性支气管炎的急性发作，以及肺部感染引起的咳嗽痰稠、喘息气急等病症。2005年版药典中，清肺消炎丸中使用薄层扫描法測定其中盐酸麻黄碱的含量。但薄层扫描法的重现性相对较差。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种采用高效液相測定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱含量的方法，其中清肺消炎丸由麻黄250g、石膏750g、地龙750g、牛蒡子250g、葶苈子250g、人工牛黄100g、苦杏仁(炒)60g、羚羊角30g八味药组成，按如下的步骤对盐酸麻黄碱的含量进行測定
(1)试验溶液的制备
1)对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Irnl含15Pg的溶液，即得；
2)供试品溶液的制备取本品，研细，取约2g，精密称定，加入5mol/L氢氧化钠溶液120ml、氯化钠7. 5g，超声处理10分钟，保持微沸下蒸馏，用预先盛有O. 5mol/L盐酸溶液5ml量瓶收集蒸馏液90-98ml，优选为接近95ml，加水至刻度，摇匀，即得；
3)阴性对照液的制备按处方和エ艺制备不含麻黄的样品，按供试品制备法制备；
(2)色谱条件
流动相こ腈-O. 02mol/L pH2. 7的磷酸ニ氢钾溶液，其体积比为4:96 ;
检测波长为207nm ；
流速为1· Oml/min色谱柱为迪马5 μ mC18 4. 6 X 250mm ;
柱温为35°C ；
理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算为3000 ;本品每Ig含盐酸麻黄碱(CltlH15NO. HC1)，不得少于O. 65mg ;其中所述本品指的是清肺消炎丸。本发明的測定方法可以检测清肺消炎丸。本发明采用的高效液相測定方法，经试验摸索出合适的色谱条件，使得清肺消炎丸中的盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱峰分离效果好，理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算为3000。本品每Ig含盐酸麻黄碱(C10H15N0.HC1)，不得少于O. 65mg。本发明更加详细的测定方法
I.含量測定
清肺消炎丸由麻黄、石膏、地龙、牛蒡子、葶苈子、人工牛黄、苦杏仁(妙)、羚羊角八味药组成，其中麻黄为君药。麻黄碱是麻黄中的有效成分，2005年版药典一部“麻黄”含量測定项下收入的就是使用高效液相色谱法测定盐酸麻黄碱的含量。清肺消炎丸法定标准中使用薄层扫描法測定其中盐酸麻黄碱的含量。由于薄层扫描法的重现性相对较差，所以拟使用高效液相色谱法測定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱的含量。并进行方法学研究与验证。I. I试验溶液的制备
对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含15Pg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品，研细，取约2g，精密称定，加入5mol/L氢氧化钠溶液120ml、氯化钠7. 5g，超声处理10分钟，蒸馏(保持微沸)，用预先盛有O. 5mol/L盐酸溶液5ml的IOOml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀，即得。阴性对照液的制备按处方和エ艺制备不含麻黄的样品，按供试品制备法制备。1.2色谱条件
流动相こ腈-0.02mol/L磷酸ニ氢钾溶液(磷酸调pH值至2. 7) (4:96)
检测波长207nm
流速I. Oml/min
色谱柱迪马 5 μ mC18 4. 6 X 250mm
柱温35°C
I. 3色谱条件的确定
1.3. I流动相的选择
经实验摸索选取こ腈-O. 02mol/L磷酸ニ氢钾溶液(磷酸调pH值至2. 7) (4:96)为本品含量测定项的流动性条件。在此流动相条件下，盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱峰分离效果好，理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算为3000。本品每Ig含盐酸麻黄碱(CltlH15NO. HC1)，不得少于 O. 65mg。I. 3. 2前处理方法的确定
盐酸麻黄碱最大吸收波长较小，在复方制剂中干扰较多。利用游离麻黄碱具有易升华的特点，采用蒸馏法对样品进行处理，得到的供试品測定无干扰，盐酸麻黄碱的分离效果好。分别加5mol/L氢氧化钠溶液80ml、120m、140ml，考察盐酸麻黄碱转移率，结果见表I。表I 加入不同体积氢氧化钠溶液提取盐酸麻黄碱的含量
权利要求
1.一种采用高效液相测定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱含量的方法，它是由麻黄250g、石膏750g、地龙750g、牛蒡子250g、葶苈子250g、人工牛黄100g、炒苦杏仁60g、羚羊角30g八味药组成，其特征在于它的测定方法按如下的步骤进行 (1)试验溶液的制备 1)对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含15呢的溶液，即得； 2)供试品溶液的制备取本品，研细，取约2g，精密称定，加入5mol/L氢氧化钠溶液80-140ml、氯化钠7. 5g，超声处理10分钟，蒸馏，用预先盛有0. 5mol/L盐酸溶液5ml的IOOml量瓶收集蒸馏液90-98ml，加水至刻度，摇匀，即得； 3)阴性对照液的制备按处方和工艺制备不含麻黄的样品，按供试品制备法制备； (2)色谱条件 流动相乙腈-0. 02mol/L pH2. 7的磷酸二氢钾溶液，其体积比为4:96 ; 检测波长为207nm ； 流速为1. Oml/min 色谱柱为迪马5 u mC18 4. 6 X 250mm ; 柱温为35°C ； 理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算为3000 ;本品每Ig含盐酸麻黄碱(CltlH15NO. HC1)，不得少于0. 65mg ;其中所述本品指的是清肺消炎丸。
2.权利要求I所述的测定方法，其中量瓶收集的蒸馏液为95ml。
3.权利要求I所述的测定方法，其中供试品溶液中加入5mol/L氢氧化钠溶液的量为120mlo
全文摘要
本发明涉及一种采用高效液相测定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱含量的方法，其中的色谱条件流动相为乙腈-0.02mol/LpH2.7的磷酸二氢钾溶液，其体积比为4:96；检测波长为207nm；流速为1.0ml/min；色谱柱迪马5μmC184.6×250mm；柱温30℃；在此流动相条件下，盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱峰分离效果好，理论塔板数按盐酸麻黄碱峰计算为6976。本品每1g含盐酸麻黄碱(C10H15NO.HCl)，不得少于0.65mg。本发明的测定方法提高了药品含量标准的可控性，确保了产品的内在含量，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。
文档编号G01N30/02GK102706984SQ20121022482
公开日2012年10月3日 申请日期2012年7月3日 优先权日2012年7月3日
发明者刘彤, 宋立平, 江永萍, 赵晨, 韩晓辰, 项芳 申请人:天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂