专利名称：一种鉴别真伪驴皮阿胶的方法
技术领域：
本发明涉及真伪驴皮阿胶的鉴别技术，具体地，本发明涉及一种高效液相色谱法鉴别真伪驴皮阿胶的技术。本发明还涉及驴皮阿胶和杂皮胶混合样品中驴皮阿胶百分含量的测定以及样品胶中的马皮胶组分百分含量的测定。
背景技术：
阿胶作为常用的补益中药，具有悠久的历史，被历年中国药典收载。阿胶是由驴皮经去毛后等预处理后再经过煎煮浓缩熬制而成的固体胶，味甘、性平、滋阴润肺，补血、止血，主治血虚萎黄、眩晕心悸、肌萎无力、心烦不眠、虚风内动、肺燥咳嗽、吐血尿血、便血崩漏，妊娠胎漏等。正品阿胶为驴皮阿胶，而其它动物皮熬制的胶均为伪阿胶(假阿胶)。伪胶功效与阿胶不同，甚至有严重的副作用，不但给市场带来了混乱，而且危害消费者的身心健康。由于各种伪阿胶的制备工艺及胶的外观性状与阿胶相似，又因其成分复杂，所以鉴别真伪十分困难。传统的鉴别方法(如查看胶断面色泽，手感，水试，胶悬浮液性状等)多根据胶的理化性质或表观性状进行鉴别而且需要相当的经验，因此准确性差；尤其是在胶的形态和色泽十分相似的情况下更难以根据胶的形态学特征进行真伪区分。虽然也有人利用紫外，红外等方式进行鉴别，但胶溶液含有不同种类物质，这种分析方式对于阿胶中不同物质的混合物没有针对性，而且准确性也不高，重现性非常低。另外，对于熬胶过程中利用杂皮加入驴皮方式得到杂皮胶，这种利用混合物直接光谱扫描鉴别阿胶真伪的方式准确性极差。
本发明的目的在于提供一种鉴别阿胶真伪的方法，这种方法能够快速而准确地鉴别阿胶地真伪，而且鉴别所需样品量少，预处理简单，具有重复性高，操作简单等特点，发展的真伪鉴别方法不但能够鉴别阿胶的真伪，而且还可以测定样品胶中杂皮胶的百分含量。
发明内容
本发明的上述目的是通过将胶溶解后得到的溶液进行预处理，以去除在制胶过程中加入的豆油、冰糖等辅料以及胶中的不溶物，将得到的阿胶溶液进行沉淀操作，离心去除沉淀物，收集上清液，将该上清液通过高效液相色谱直接分析，确定驴皮阿胶以及杂皮胶的特征组分及其含量。
本发明的具体方法如下一种鉴别真伪驴皮阿胶的方法，其具体步骤如下1取一定量的样品胶加入一定量的蒸馏水，在室温下振荡6～10小时。
2将1得到的阿胶溶液离心，去除上层白色物质和下层沉淀物，留中间黄色透明溶液。
3向2得到的透明溶液中加入一定浓度的沉淀剂，振荡数分钟后低温保存2～4小时，离心收集上层清液。
4将3得到的清液进行高效液相色谱分析。
5积分样品胶中驴皮阿胶特征峰面积，计算其与纯驴皮阿胶特征组分峰面积之比，即为样品胶中驴皮阿胶的百分含量。
6积分样品胶中马皮胶特征峰面积，计算其与纯马皮阿胶特征组分峰面积之比，即为样品胶中马皮胶的百分含量。
待鉴别样品胶的处理过程如图1所示，当样品胶中检测到驴皮胶的特征组分的峰面积与标准阿胶的驴皮特征组分峰面积相等时，样品胶为真阿胶，否则，样品胶为假阿胶或混有杂皮的伪阿胶，其中杂皮的含量通过驴皮胶特征峰的面积确定。
图1待鉴别胶的预处理过程示意2纯驴皮阿胶特征峰(RT＝11.70)图370％驴皮阿胶的混合样品的高效液相色谱4待测样品胶的高效液相色谱5样品D-纯马皮胶高效液相色谱6样品E-纯驴皮阿胶高效液相色谱7样品F-待测样品胶高效液相色谱图以下结合具体实施例说明本发明的方法实施例一1样品样品A纯驴皮阿胶，样品B含70％驴皮阿胶的混合胶，样品C待测样品胶2所需仪器(1)离心机(2)高效液相色谱仪
(3)可变波长紫外检测器3样品处理(1)分别取2.00g胶加入18.00g去离子水，超声振荡至胶全部溶解；(2)在12000rpm下离心15min，收集中间清澈部分溶液；(3)取(2)收集的溶液0.5ml，加入0.5ml沉淀剂，混合均匀；(4)将(3)混合液在4℃下存放3小时，10000rpm下离心10min离心；(5)取上清液高效液相色谱分析。
(6)其它胶样品按(1)-(5)相同的方法处理。
4高效液相色谱分析液相系统Agilent 1100，四元泵，自动进样器，在线脱气机检测器二极管阵列检测器(Finnigan UV6000)色谱柱Agilent SB C-18(4.6×250mm)流动相A双蒸水(0.1％TFA)B乙睛(0.1％TFA)进样量20μl流速0.5ml/min检测波长318nm梯度条件 AB0min100％0％30min 10％ 90％5分析结果，图2为样品A-真阿胶的高效液相色谱图，其中RT＝11.70的组分为驴皮阿胶的特征组分，峰面积从＝8015。图3为样品B-含70％驴皮阿胶的混合样品的高效液相色谱图，驴皮特征组分峰面积为AA＝5707。图4为样品C-待测样品胶的高效液相色谱图，驴皮特征组分峰面积为AA＝6829，因此其驴皮胶含量为85％。
实施例二1样品样品D纯马皮阿胶样品E纯驴皮阿胶，样品F待测样品胶2所需仪器(1)离心机(2)高效液相色谱仪(3)可变波长紫外检测器3样品处理(1)分别取2.00g样品胶加入18.00g去离子水，超声振荡至胶全部溶解；(2)在12000rpm下离心15min，收集中间清澈部分溶液；(3)取(2)收集的溶液0.5ml，加入0.5ml沉淀剂，混合均匀；(4)将(3)混合液在4℃下存放3小时，10000rpm下离心10min离心；(5)取上清液高效液相色谱分析。
(6)其它胶样品按(1)-(5)相同的方法处理。
4高效液相色谱分析液相系统Agilent 1100，四元泵，自动进样器，在线脱气机检测器二极管阵列检测器(Finnigan UV6000)色谱柱Agilent SB C-18(4.6×250mm)流动相A双蒸水(0.1％TFA)B乙睛(0.1％TFA)进样量20μl流速0.5ml/min检测波长296nm
梯度条件A B0min 95％5％40min 10％85％5分析结果，图5为样品D-纯马皮胶的高效液相色谱图，其中RT＝10.9的组分为马皮胶的特征组分，峰面积MA＝24286。图6为样品E-驴皮阿胶的高效液相色谱图，马皮特征组分峰面积为MA＝0。图7为待测样品胶的高效液相色谱图，马皮特征组分峰面积为AA＝3739，因此其马皮胶含量为15.4％。
权利要求
1.一种鉴别真伪驴皮阿胶的方法，其特征在于，该方法包括(1)取待测样品，用适当的溶液溶解，(2)(1)得到的溶液经离心后取中间的清液，(3)向(2)得到的清液中加入沉淀剂，离心后收集上清液，(4)将(3)得到的清液通过高效液相色谱分析，(5)样品的真伪通过驴皮阿胶特征组分的峰面积确定，
2.根据权利要求1所述的方法，胶溶液离心后收集的是中间的清液。
3.根据权利要求1的要求，向权利要求2的清液中加入的沉淀剂可以是三氯乙酸，丙酮，甲醇，硫酸铵等。
4.根据权利要求1所述的方法，高效液相色谱法分析的是(3)得到的清液。
5.根据权利要求1所述的方法，当待测样品中驴皮特征组分的峰面积等于纯驴皮阿胶的高效液相色谱中的特征峰的峰面积时，待测样品为真驴皮阿胶。反之，根据此峰面积与纯驴皮阿胶的高效液相色谱中的特征峰的峰面积之百分比计算样品胶中的驴皮胶百分含量。
全文摘要
本发明涉及一种真伪阿胶的鉴别方法，具体地，该方法将胶溶解后得到的溶液进行预处理，以去除人为加入的辅料以及不溶物，然后再通过沉淀操作去除沉淀，将其上清夜通过高效液相色谱分析，根据液相色谱结果中驴皮特征组分的含量确定阿胶的真伪及杂皮含量。本发明鉴定阿胶真伪具有重复性好、操作简单、成本低，简便快捷的优点。
文档编号G01N30/00GK1635374SQ20031012348
公开日2005年7月6日 申请日期2003年12月29日 优先权日2003年12月29日
发明者张贵锋, 苏志国 申请人:中国科学院过程工程研究所