专利名称：一种在线全二维hilic/rp液相色谱仪切换接口装置的制作方法
技术领域：
一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置技术领域：
本实用新型涉及液相色谱仪技术领域，具体地说，是一种在线全二维 HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置。
背景技术：
随着蛋白质组学和本草物质组学的发展，样品复杂程度越来越大，全二 维液相色谱技术逐渐显示出比一维液相色谱技术更大的峰容量和分离能力， 在复杂样品的分离分析中获得了广泛应用。二维液相色谱技术获得了快速的 发展，涌现出了多种液相色谱联用模式，如离子交换色谱/反相色谱、体积排 阻色谱/反相色谱、正相色谱/反相色谱等联用模式。以正相色谱/反相色谱联用 技术的正交性最高，峰容量最大。但由于流动相的兼容性问题一直没有获得 很好的发展。近年来出现的亲水相互作用色谱法，样品的保留机理与正相相 近，采用的流动相是水和水溶性的有机试剂，与反相色谱法的流动相兼容。 因此，构建HILIC/RP 二维模式具有较高的正交性和较大的峰容量。
HILIC色谱使用乙腈(或甲醇、乙醇等有机溶剂)为弱洗脱剂，而水为 强洗脱剂。RP色谱法使用水为弱洗脱剂，而乙腈(或甲醇、乙醇等有机溶剂) 为强洗脱剂。在全二维在线液相色谱法的接口中使用捕集柱时容易造成组分 流失，和第一维的馏分进入第二维分离时由于样品溶解于强溶剂造成了峰型 变差。针对以上问题，本实用新型设计了一种装置，可以在构建在线全二维 HILIC/RP液相色谱仪中使用，具有简单、实用和高效的特点。
实用新型内容
本实用新型的目的在于克服现有技术的不足，提供一种在线全二维
HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，具有简单、实用和高效的特点。 本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现的
一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，至少含有混合器； 高压恒流泵以及第一维HILIC色谱柱通过管道与混合器相连，混合器通过管 道与切换阀相连，而在切换阀上分别设有捕集柱和第二检测器；切换阀通过 管道再与第二维RP色谱柱相连，第二维RP色谱柱上设有第一检测器；从第 一维流出的洗脱液与高压恒流泵中的液体混合后到达切换阀，经过切换阀进 一步完成第二维分离；接口装置可以便捷地调整流动相组成，保证样品在捕 集柱上保留；
所述的HILIC是指亲水相互作用色谱法；
所述的RP是指反相色谱法；
所述的HPLC是指高效液相色谱法；
所述的全二维HILIC/RP液相色谱仪，第一维采用亲水作用色谱的分离模 式的色谱柱，第二维采用反相色谱的分离模式的色谱柱；
所述的高压恒流泵为HPLC用高压恒流泵，所使用的溶剂为相对于第二 维色谱柱而言是弱溶剂；
所述的混合器选自三通阀或者HPLC梯度混合器；
所述的切换阀选自十通阀，八通阀，六通阔，两位或者多位切换阀中的 一种；
所述的捕集柱选自两个或者多个捕集柱，捕集柱的填料为与第二维色谱柱的填料相同或相近。
与现有技术相比，本实用新型的积极效果是
(1) 本实用新型简单、实用，可以使用常规尺寸的色谱柱；
(2) 本实用新型灵敏度高，通过混合器后的样品并没有像分流或者第一 维微流量方法等降低第二维的上样量；
(3) 本实用新型在线操作，具有快速和连续操作的优点；
(4) 本实用新型为全二维HILIC/RP液相色谱法切换接口装置，没有损 失样品信息。
图1本实用新型的原理图2本实用新型的实施例1的系统结构图3本实用新型的实施例1的分离效果图。
附图l中的标号分别为1、第一维HILIC色谱柱，2、高压恒流泵，3、 混合器，4、切换阀，5、捕集柱，6、第二维RP色谱柱，7、第一检测器，8、 第一检观!j器o
具体实施方式
以下提供本实用新型一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装 置的具体实施方式
。
实施例l
请参见附图l， 一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，至少含有混合器3;高压恒流泵2以及第一维HILIC色谱柱1通过管道与混合器3相连，混合器3通过管道与切换阀4相连，而在切换阀4上分别设有捕集柱5和第二检测器8;切换阀4通过管道再与第二维RP色谱柱6相连，第二维RP色谱柱6上设有第一检测器7;从第一维流出的洗脱液与高压恒流泵中的液体混合后到达切换阀，经过切换阀进一步完成第二维分离；接口装置可以便捷地调整流动相组成，保证样品在捕集柱上保留。本实施例的准备阶段
第一维ZIC HILIC 250 x 4.6mm;流动相A为ACN/5mM TEAP 90/10;流动相B为ACN/5mMTEAP 30/70;流量0.1mL/min，等度运行。
第二维SinoChrom ODS画BP 50 x 4.6mm;捕集柱SinoChrom ODS-BP 10x4.6mm;流动相A:含0.1%TFA的水溶液；流动相A:含O.P/oTFA的乙腈溶液；梯度程序为0-4.2-4.5min (0-60-0°/。B)。
高压恒流泵流量1.9mL/min;流动相超纯水。
样品尿嘧啶、甲苯和萘，浓度为lXl(T4mol/L;进样量2(^L。本实施例的实验阶段
系统按图2连接后，两维同时开始运行。第二维每5min—个分析周期，即切换阀每5min切阀一次，将捕集柱上捕集到的组分进样到第二维进行分析。在本实施例中，甲苯和萘的亲水性较弱，在HILIC色谱柱上保留较弱，而在RP色谱柱上保留较强，因而可以被捕集柱捕获。同时，高压恒流泵的流量为L9mL/min，第一维的高浓度有机相流量为0.1mL/min，混合后的有机相浓度相当于被稀释了20倍。即以最高有机相浓度(90%乙腈)计算，混合后乙腈的浓度仅为4.5%，对于反相柱而言洗脱能力较弱。因此，混合溶液中的样品到达捕集柱后，能够被有效捕集。当切换十通阀后，进样到第二维色谱柱上，被有效保留而分开。尿嘧啶亲水性强，在HILIC色谱柱上保留较强，而在捕集柱上没有保留，直接通过捕集柱和十通阀，被另外一个检测器检测到。因此本切换接口装置能够检测到样品的全部信息。图3为本实施例1的分离效果图。
以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围内。
权利要求1.一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，至少含有混合器；其特征在于，高压恒流泵以及第一维HILIC色谱柱通过管道与混合器相连，混合器通过管道与切换阀相连，而在切换阀上分别设有捕集柱和第二检测器；切换阀通过管道再与第二维RP色谱柱相连，第二维RP色谱柱上设有第一检测器；其中，所述的HILIC是指亲水相互作用色谱法；所述的RP是指反相色谱法；所述的HPLC是指高效液相色谱法。
2. 如权利要求1所述的一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，其特征在于，所述的全二维HILIC/RP液相色谱仪，第一维采用亲水作 用色谱的分离模式的色谱柱，第二维采用反相色谱的分离模式的色谱柱。
3. 如权利要求1所述的一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，其特征在于，所述的高压恒流泵为HPLC用高压恒流泵，所使用的溶 剂为相对于第二维色谱柱而言是弱溶剂。
4. 如权利要求1所述的一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，其特征在于，所述的混合器选自三通阀或者HPLC梯度混合器。
5. 如权利要求1所述的一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，其特征在于，所述的切换阔选自十通阀，八通阀，六通阀，两位或者 多位切换阀中的一种。
6. 如权利要求1所述的一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，其特征在于，所述的捕集柱选自两个或者多个捕集柱，捕集柱的填料 为与第二维色谱柱的填料相同或相近。
专利摘要本实用新型涉及一种在线全二维HILIC/RP液相色谱仪切换接口装置，至少含有混合器；高压恒流泵以及第一维HILIC色谱柱通过管道与混合器相连，混合器通过管道与切换阀相连，而在切换阀上分别设有捕集柱和第二检测器；切换阀通过管道再与第二维RP色谱柱相连，第二维RP色谱柱上设有第一检测器。本实用新型的优点简单、实用，可以使用常规尺寸的色谱柱；灵敏度高，通过混合器后的样品并没有像分流或者第一维微流量方法等降低第二维的上样量；在线操作，具有快速和连续操作的优点；全二维HILIC/RP液相色谱法切换接口装置，没有损失样品信息。
文档编号G01N30/78GK201397321SQ200920071840
公开日2010年2月3日 申请日期2009年5月8日 优先权日2009年5月8日
发明者伦 宋, 张凌怡, 张维冰, 李笃信, 杜一平 申请人:华东理工大学