专利名称：磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测定方法
技术领域：
本发明涉及一种分离与测定方法，具体涉及一种磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁 烷磺酸钠的分离与测定方法。
背景技术：
磺丁基倍他环糊精(sulfobutyl ether-β-cyclodextrin, SBE-β-CD)是 20 世纪90年代由美国CyDex公司开发的β _环糊精衍生物，应用于增加药物溶解度和稳定 性、提高药物生物利用度、调节药物释放速度、防止挥发性成分逸散、改善不良气味、减少刺 激性、降低不良反应等方面。磺丁基倍他环糊精是β-CD与1，4-丁烷磺酸内酯发生取代反 应的产物。常用的SBE-β-⑶是7的SBE7-β-⑶，商品名为Captisol，常用其钠盐。4-羟 基丁烷磺酸是1，4- 丁烷磺酸内酯水解产生的副产物。
磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的测定方法未见国内外文献报道。
磺丁基倍他环糊精是一个离子型的环糊精衍生物，磺丁基倍他环糊精样品中含有 4-羟基丁烷磺酸钠、氯离子等杂质离子。4-羟基丁烷磺酸钠在磺丁基倍他环糊精中的限量 很低，在千分之一以下。因此需要寻找一个能够将样品中磺丁基倍他环糊精、4-羟基丁烷 磺酸钠、氯离子等有效分离，而且有较高的检测灵敏度将4-羟基丁烷磺酸钠检测出来的方 法。
离子色谱法系采用高压输液泵系统将规定的洗脱液泵入装有填充剂的色谱柱进 行分离测定的色谱分析方法。注入的供试品由洗脱液带入色谱柱内进行分离后，经过抑制 器或衍生系统进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录色谱信号。离子色谱法常用与无 机阴离子、无机阳离子、有机酸、醇糖类、氨基糖类、氨基酸、蛋白质、糖蛋白等物质的定性和 定量分析。它的分离机理主要为离子交换，即基于离子交换树脂上可解离的离子与流动相 中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换；离子色谱法其他分离机理还有形成离子 对、离子排阻等。
由于磺丁基倍他环糊精是一个离子型的环糊精衍生物，磺丁基倍他环糊精样品中 还含有氯离子等其他杂质离子。采用合适的洗脱液条件，4-羟基丁烷磺酸钠、磺丁基倍他环 糊精、氯离子等在离子色谱能中实现很好的分离。发明内容
本发明的目的是提供一种磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测定 方法，该方法采用离子色谱法，以阴离子分析柱为分离手段，以电导检测器为检测手段，以 此来解决磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的限度分离与检测问题。4-羟基丁烷磺 酸钠是磺丁基倍他环糊精合成过程中产生的重要副产物，对产品中的4-羟基丁烷磺酸钠 应当进行合理的质量控制和检验，从而提高产品的质量和品质。本方法具有样品用量少、检 测灵敏度高、重现性高、结果可靠的优点。
本发明的技术方案是一种磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测 定方法，其特征在于，步骤如下⑴配制洗脱液；⑵配制磺丁基倍他环糊精样品溶液；⑶配制4-羟基丁烷磺酸钠的对照品溶液，或4-羟基丁烷磺酸的对照品溶液；(4)离子色谱采用阴离子色谱柱为分离手段，采用电导检测器；样品分别进样，用步骤 ⑴配制的洗脱液洗脱磺丁基倍他环糊精样品或对照品溶液；(5)分别检测出4-羟基丁烷磺酸钠的对照品溶液或4-羟基丁烷磺酸的对照品溶液中， 4-羟基丁烷磺酸的峰面积(或者可以认为，该峰面积是反映4-羟基丁烷磺酸根的峰面积)；(6)根据步骤( 的数据计算出磺丁基倍他环糊精样品中4-羟基丁烷磺酸钠的含量。
所述的洗脱液可以是碳酸钠-碳酸氢钠系统、氢氧化钠-碳酸钠系统或者氢氧化 钾-碳酸钾系统；碳酸钠-碳酸氢钠洗脱液中碳酸钠碳酸氢钠=0 30m mol/L 0 40m mol/L ；氢氧 化钠-碳酸钠或氢氧化钾-碳酸钾洗脱液中，氢氧化钠-碳酸钠，或氢氧化钾-碳酸钾=0 15m mol/L :0 15m mol/L。
所述的磺丁基倍他环糊精样品溶液和4-羟基丁烷磺酸钠对照品溶液的浓度可以 为 10mg/ml 禾口 10μ g/ml。
换言之，本发明各步骤的具体操作方法是⑴洗脱液的配制碳酸钠-碳酸氢钠洗脱液配制称取碳酸钠、碳酸氢钠适量，溶于去 离子水，配制成碳酸钠碳酸氢钠=0 30m mol/L 0 40m mol/L的洗脱液；氢氧化钠-碳酸钠，或氢氧化钾-碳酸钾洗脱液的配制称取氢氧化钠、碳酸钠，或氢氧 化钾、碳酸钾适量，溶于去离子水，配制成氢氧化钠碳酸钠，或氢氧化钾碳酸钾=0 15m mol/L 0 15m mol/L 的洗脱液；⑵样品溶液的配制称取磺丁基倍他环糊精，溶于去离子水，配制成适当浓度的样品 溶液；⑶对照品溶液的配制称取4-羟基丁烷磺酸钠，或4-羟基丁烷磺酸，溶于去离子水， 配制成适当浓度的对照品溶液；(4)离子色谱采用阴离子分析柱为分离手段，采用电导检测器，分别将样品溶液和对照 品溶液进样；(5)分别检测出4-羟基丁烷磺酸钠的对照品溶液或4-羟基丁烷磺酸的对照品溶液中， 4-羟基丁烷磺酸根的峰面积；(6)根据步骤( 的数据计算出磺丁基倍他环糊精样品中4-羟基丁烷磺酸钠的含量。
采用本发明的离子色谱系统，样品与杂质直间能够有效分离，检测灵敏度很高， 4-羟基丁烷磺酸钠的最低检测限可达ng/ml的级别。由于样品中4-羟基丁烷磺酸钠的限 量很低，在千分之一以下，所以对检测器的灵敏度有较高的要求。选用电导检测器能够较好 的达到检测要求。
图1为实施例3碳酸钠-碳酸氢钠系统的标准曲线；图2为实施例3浓度10. 007mg/ml的样品溶液进样，色谱图； 图3为实施例3浓度10. 18 μ g/ml对照品色谱图； 图4为实施例4氢氧化钠系统洗脱液的标准曲线； 图5为实施例4浓度5. 011mg/ml的样品溶液进样，色谱图； 图6为实施例4浓度5. 062 μ g/ml对照品色谱图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细论述。
实施例1，碳酸钠-碳酸氢钠洗脱液的配制，称取碳酸钠0. 214g，碳酸氢钠1. 026g，加去离子水2000ml溶解，得浓度为Im mol/L碳 酸钠+6m mol/L碳酸氢钠，总浓度为7m mol/L的洗脱液。
实施例2，氢氧化钠洗脱液的配制，称取氢氧化钠0. 443g，加去离子水2000ml溶解，得浓度为5. 5m mol/L的洗脱液。
实施例3，碳酸钠-碳酸氢钠系统4-羟基丁烷磺酸钠的检测， 离子色谱仪DI0NEX ICS-90型离子色谱仪(美国戴安公司)， IonPac AG23 (4X50謹)阴离子保护柱，ASRS300 (4 mm)阴离子抑制器，色谱柱=Iorfac AS23阴离子分析柱0X250 mm )，电导检测器。
1)4-羟基丁烷磺酸钠对照品溶液的配制精密称取101.81mg的4-羟基丁烷磺酸钠至100ml量瓶，定容得0. 1018mg/ml的4-羟 基丁烷磺酸钠，分别精密移取0. Iml,0. 3ml,0. 5ml,0. 7ml,0. 9ml至50ml容量瓶中，用去离 子水定容，得到浓度分别为2. 036，6. 108,10. 18，14. 25，18. 32 μ g/ml的4-羟基丁烷磺酸 钠。
2)磺丁基倍他环糊精样品溶液的配制精密称取样品500. 36mg，去离子水溶解定容至50ml，得浓度为10. 007mg/ml溶液。
3)标准曲线的绘制将浓度分别为2. 036，6. 108，10. 18，14. 25，18. 32 μ g/ml的4-羟基丁烷磺酸钠进样，洗 脱液为实施例1中的碳酸钠-碳酸氢钠系统溶液，绘制标准曲线，结果线性良好，标准曲线 如图1。
4)样品的检测将浓度为10. 007mg/ml的样品溶液进样，色谱图为图2，浓度为10. 18 μ g/ml对照品色 谱图为图3。
实施例4，氢氧化钠系统4-羟基丁烷磺酸钠的检测， 离子色谱仪DI0NEX ICS2000型离子色谱仪(美国戴安公司)， IonPac AG19 (4X50謹)阴离子保护柱，ASRS300 (4 mm)阴离子抑制器，色谱柱=Iorfac AS19阴离子分析柱0X250 mm )。
电导检测器。
1)4-羟基丁烷磺酸钠对照品溶液的配制精密称取50. 62 mg 4-羟基丁烷磺酸钠至IOOml量瓶，定容得506. 2 μ g/ml 4-羟基 丁烷磺酸钠，分别精密移取0. 25ml，0. 5ml，Iml，2ml，3ml至IOOml容量瓶中，用去离子水定 容，得到浓度分别为1.266,2. 531，5. 062，10. 12，15. 19 μ g/ml的4-羟基丁烷磺酸钠。
2)磺丁基倍他环糊精样品溶液的配制精密称取样品501. lang，去离子水溶解定容至100ml，得浓度为5. 011mg/ml溶液。
3)标准曲线的绘制将浓度分别为2. 036，6. 108，10. 18，14. 25，18. 32 μ g/ml的4-羟基丁烷磺酸钠进样，洗 脱液为实施例2中的氢氧化钠系统溶液，绘制标准曲线，结果线性良好，标准曲线如图4。
4)样品的检测将浓度为5. Ollmg/ml的样品溶液进样，色谱图为图5，浓度为5. 062 μ g/ml对照品色谱 图为图6。
以上对本发明较佳实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本 发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。
权利要求
1.一种磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测定方法，其特征在于，分离 与测定步骤为⑴配制洗脱液；⑵配制磺丁基倍他环糊精样品溶液；⑶配制4-羟基丁烷磺酸钠的对照品溶液，或4-羟基丁烷磺酸的对照品溶液；(4)离子色谱采用阴离子色谱柱为分离手段，采用电导检测器；样品分别进样，用步骤 ⑴配制的洗脱液洗脱磺丁基倍他环糊精样品或对照品溶液；(5)分别检测出4-羟基丁烷磺酸钠的对照品溶液或4-羟基丁烷磺酸的对照品溶液中， 4-羟基丁烷磺酸根的峰面积；(6)根据步骤( 的数据计算出磺丁基倍他环糊精样品中4-羟基丁烷磺酸钠的含量。
2.根据权利要求1所述的磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测定方法， 其特征在于，各步骤的具体操作方法是⑴洗脱液的配制碳酸钠-碳酸氢钠洗脱液配制称取碳酸钠、碳酸氢钠适量，溶于去 离子水，配制成碳酸钠碳酸氢钠=0 30m mol/L 0 40m mol/L的洗脱液；氢氧化钠-碳酸钠，或氢氧化钾-碳酸钾洗脱液的配制称取氢氧化钠、碳酸钠，或氢氧 化钾、碳酸钾适量，溶于去离子水，配制成氢氧化钠碳酸钠，或氢氧化钾碳酸钾=0 15m mol/L 0 15m mol/L 的洗脱液；⑵样品溶液的配制称取磺丁基倍他环糊精，溶于去离子水，配制成适当浓度的样品 溶液；⑶对照品溶液的配制称取4-羟基丁烷磺酸钠，或4-羟基丁烷磺酸，溶于去离子水， 配制成适当浓度的对照品溶液；(4)离子色谱采用阴离子分析柱为分离手段，采用电导检测器，分别将样品溶液和对照 品溶液进样；(5)分别检测出4-羟基丁烷磺酸钠的对照品溶液或4-羟基丁烷磺酸的对照品溶液中， 4-羟基丁烷磺酸根的峰面积；(6)根据步骤( 的数据计算出磺丁基倍他环糊精样品中4-羟基丁烷磺酸钠的含量。
3.根据权利要求2所述的磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测定方法， 其特征在于，所述的碳酸钠-碳酸氢钠洗脱液，碳酸钠碳酸氢钠=0 IOm mol/L 0 15m mol/L0
4.根据权利要求3根据权利要求2所述的磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的 分离与测定方法，其特征在于，所述的氢氧化钠-碳酸钠，或氢氧化钾-碳酸钾洗脱液，氢氧 化钠碳酸钠，或氢氧化钾碳酸钾=3 10m mol/L 0 10m mol/L。
全文摘要
磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸钠的分离与测定方法采用离子色谱法，以阴离子分析柱为分离手段，采用电导检测器，洗脱液为碳酸钠-碳酸氢钠系统或者碳酸钠(钾)-氢氧化钠(钾)系统，以此来解决磺丁基倍他环糊精中4-羟基丁烷磺酸(钠)的限度检测问题。步骤⑴配制适当浓度的洗脱液，洗脱液是碳酸钠-碳酸氢钠系统或者碳酸钠(钾)-氢氧化钠(钾)系统;⑵配制适当浓度的磺丁基倍他环糊精样品溶液和4-羟基丁烷磺酸(钠)对照品溶液;⑶离子色谱采用阴离子色谱柱、电导检测器，样品溶液和对照品溶液分别进样检测，样品溶液中4-羟基丁烷磺酸(钠)的峰面积低于对照品峰面积为样品合格。本检测方法灵敏，样品用量少、重现性高、结果可靠，可对磺丁基倍他环糊精进行质量控制和检验，从而提高产品的品质。
文档编号G01N30/14GK102033115SQ20101053578
公开日2011年4月27日 申请日期2010年11月9日 优先权日2010年11月9日
发明者孙文芳, 孙晓东, 李莉, 王猛, 童文正 申请人:海南和德通医药科技有限公司