专利名称：小孔径过滤装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种小孔径过滤装置，用于膜片过滤富集样品。
背景技术：
某些膜片本身对某些物质具有较强的吸附能力，或将膜片进行处理也可增强或增加对某些物质的吸附能力。因此采用膜片吸附原理已经建立了很多检测方法。很多“试纸检测”多利用此原理，如采用试纸进行酶联吸附免疫检测等。为了进一步提高膜片法检测某些物质的灵敏度，目前采用的常见方式有三1)将某些稀薄的样品进行浓缩后再点样检测；2)在膜上同一位置反复点样，使样品得到富集后再检测；3)将整张膜片浸泡在样品溶液中，进行样品富集后再检测。以上第一种方法需要一定的浓缩设备和浓缩操作，如冷冻干燥机等，增加了操作难度和操作时间，不利于不稳定物质的检测；第二种方法由于在膜片的同一位置反复点样， 需要对样品进行着色处理，否则同一位置不好确定，加入着色剂本身就是对样品的一种污染，同时经验表明，在同一位置反复点样或出现渗透现象，导致检测斑点不均一，不利于结果观察；第三种方法将整张膜片浸泡在样品溶液中，为了达到富集效果，吸附平衡需要的时间长，常需要过夜，同时由于整张膜片均吸附了样品，导致整张膜片均显色，信号对比差，常需另设阴性对照，不利于检测结果判断。对于采用膜片吸附或富集原理进行的物质检测，为了提高检测的灵敏度和检测限，克服以上不足，特发明一种小孔径过滤装置。
发明内容本实用新型发明一种小孔径过滤装置，特别适用于将样品富集到某些膜片上。本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是本装置由带小孔的上下两块光滑平整的盖板和固定夹构成。上盖板通过过滤小孔连接一盛液斗，下盖板通过过滤小孔连接下盖板小孔乳头进而连接负压导管，为了方便上盖板过滤小孔和下盖板过滤小孔的对接，上下盖板之间有相互匹配的固定孔和固定栓。为了控制过滤膜片的斑点大小，两块光滑平整的盖板上的小孔直径为l_5mm，较佳孔径为2mm。本实用新型的效果是，由于采用过滤接触方式，样品溶液与吸附膜片的小块圆形区域接触，增加了吸附效率，能够将较多体积样品的特定成分富集在膜片的特定小块圆形区域中，起到高浓度样品点样的效果。本装置能显著增加膜片吸附检测方法的灵敏度。
以下结合附图和实施例对本实用新型进一步说明。
图1是本实用新型的示意图；图2是本实用新型的使用方法示意图。[0014]以上图中1.盛液斗，2.固定夹，3.上盖板，4.固定孔，5.上盖板过滤小孔，6.下盖板过滤小孔，7.固定栓，8.下盖板，9.下盖板小孔乳头，10.负压导管，11.膜片，12.真空泵。
具体实施方式
参见图2。使用时，先将负压导管(10)连接到下盖板(8)上的下盖板小孔乳头(9) 上，随后将与盛液斗(1)连接的上盖板C3)与下盖板(8)重叠，在两块盖板之间放入一张膜片(11)，确保上盖板过滤小孔(5)和下盖板过滤小孔(6)对准并将膜片(11)夹住。对准上盖板上的两个固定孔(4)和下盖板上的固定栓(7)有助于两块盖板过滤小孔的对准。两块盖板和膜片摆放好后，用两个固定夹( 将两块盖板夹紧固定。随后将液体样品加入到盛液斗(1)中，启动与负压导管(10)相连的真空泵(12)，由于负压作用，盛液斗(1)中的液体样品慢慢通过小孔透过膜片(11)，液体样品中某些物质会在膜片(11)的小孔区域上发生富集(吸附富集作用由膜片的特性决定)，由于上盖板(3)和下盖板(8)光滑平整，与膜片 (11)接触好，因表面张力作用不易发生侧渗，因此膜片(11)的非小孔区域则无样品吸附或很少有品吸附。实施示例PVDF膜对蛋白质有很强的亲和力，现比较PVDF膜点样法、浸泡法和采用本过滤装置过滤截留法对蛋白质(牛血清白蛋白BSA)的检查限。点样法将PVDF膜用甲醇湿润，在PVDF膜上点样1 μ 1蛋白质(BSA)溶液，用 0. 25%考马斯亮蓝染色液染色5min，在转移脱色摇床上用脱色液(甲醇-水-冰醋酸= 4.5 4.5 DlOml洗脱3次，每次5min，脱去背景色，可见第6个斑点，样品中蛋白质的检查限量约为12μ g/ml。(点样方法从左至右蛋白质(牛血清白蛋白)浓度依次均为9mg/ ml、3mg/ml、lmg/ml、0. 33mg/ml、0. lmg/ml>37 μ g/ml、12 μ g/ml、4μ g/ml、1· 3 μ g/ml、0μ g/ ml，点样量为1 μ 1。)浸泡法将PVDF膜裁成9mm2大小的膜片，用甲醇湿润后浸泡在Iml蛋白质(BSA) 样品溶液中，于转移脱色摇床上振摇(30rpm，20-25°C)过夜(15小时)。随后将PVDF膜片取出，用0.25%考马斯亮蓝染色液(用脱色液配制)染色5min。再用脱色液(甲醇-水-冰醋酸=4.5 4.5 1)在转移脱色摇床上脱色3-5次，每次5min，脱去背景色，以阴性对照膜片基本无色为度。结果表明PVDF膜浸泡法对微量蛋白质的检查限量为1.4yg/ml。采用本发明装置过滤截留法将PVDF膜用甲醇湿润后安装在滤过孔径为2mm的小孔径过滤装置上，连接真空泵。随后将蛋白质(BSA)样品溶液0.5ml加到滤器上，启动真空泵，样品溶液从滤孔穿过PVDF膜。之后用0. 25%考马斯亮蓝染色液染色5分钟，在转移脱色摇床上用脱色液(甲醇-水-冰醋酸=4. 5 4.5 DlOml洗脱3次，每次5分钟，脱去背景色，结果表明，当过滤体积为0. 5ml时，本法的蛋白质检测限量为(点7)137ng/ml。以上结果表明，在本发明装置的帮助下，PVDF膜检查蛋白质的灵敏度显著提高，约是点样法的100倍，浸泡法的10倍，且检测过程中不需要将样品进行浓缩处理，滤过所耗时间短，具有简单快捷的特点。
权利要求1.一种小孔径过滤装置，由带小孔的上下两块光滑平整的盖板和固定夹构成。
2.根据权利要求1所述的小孔径过滤装置，其特征是两块光滑平整的盖板上的小孔直径为l-5mm。
3.根据权利要求1所述的小孔径过滤装置，其特征是上盖板连有盛液斗。
4.根据权利要求1所述的小孔径过滤装置，其特征是下盖板通过过滤小孔连接下盖板小孔乳头进而连接负压导管。
5.根据权利要求1所述的小孔径过滤装置，其特征是上下盖板之间有相互匹配的固定孔和固定栓。
专利摘要一种操作简便的小孔径过滤装置。它由带小孔的上下两块光滑平整的盖板和固定夹构成，上盖板通过过滤小孔连接一盛液斗，下盖板通过过滤小孔连接下盖板小孔乳头进而连接负压导管，为了方便上盖板过滤小孔和下盖板过滤小孔对接，在上下盖板分别设有固定孔和固定栓。两块光滑平整的盖板上的小孔直径为1-5mm。将特异吸附膜片夹在上下盖板的小孔中间进行抽滤，样品中某些物质被膜片吸附富集，能显著增加采用膜片吸附检测方法的灵敏度。
文档编号G01N1/40GK202177540SQ201120097448
公开日2012年3月28日 申请日期2011年4月6日 优先权日2011年4月6日
发明者云宇, 段为钢 申请人:云宇