专利名称：一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法
技术领域：
本发明属于化学领域，适用于酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的测定。
背景技术：
亚硝酸盐，英文名Nitrite，缩写NIT，俗称硝盐，是一种白色不透明晶体，形状与食盐相似。亚硝酸盐是致癌物质，有剧毒，中毒症状为肠原性青紫病、紫绀症、乌嘴病，食入 O. 3 O. 5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡。亚硝酸盐中毒发病急速，一般潜伏期I 3小时，中毒的主要特点是由于组织缺氧引起紫绀现象，如口唇、舌尖、指尖青紫，重者眼结膜、面部及全身皮肤青紫，出现头晕、头疼、乏力、心跳加速、嗜睡或烦躁、呼吸困难、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状，严重者出现昏迷、惊厥、大小便失禁，直至死亡。腌制蔬菜、储存过久的熟剩菜等易产生亚硝酸盐，蔬菜中含有多种硝酸盐，特别是施氮肥量大的蔬菜，含较多硝酸盐。蔬菜自身的酶能还原硝酸盐，转化成亚硝酸盐；烹制过的蔬菜或剩菜放置过久，在细菌的作用下也能产生亚硝酸盐。由于原料及加工工艺的原因，任何腌制品中均不可避免地含有一定量的亚硝酸盐和硝酸盐，酸腌菜是一种植物腌制品，也含有亚硝酸盐、硝酸盐，如何监测、控制酸腌菜中的亚硝酸盐、硝酸盐，普通家庭、市民难以做到。本发明通过检测酸腌菜腌制过程中的亚硝酸盐、硝酸盐的含量，寻找酸腌菜腌制过程中的亚硝酸盐、硝酸盐变化规律，确定酸腌菜最佳安全食用期，减少酸腌菜中的亚硝酸盐、硝酸盐对人体的伤害。酸腌菜中的亚硝酸盐主要以亚硝酸钠形态存在，亚硝酸钠分子式NaNO2,亚硝酸钠是极强的致癌物质；硝酸盐主要以硝酸钠形态存在，分子式NaNO3，腌制品中的硝酸盐极易转化为亚硝酸盐，从而对人体产生危害。酸腌菜口感酸爽，味道独特，是居家旅行、地方特色小吃的常用配料，也是大众生活的必需品。酸腌菜制作工艺简单，用青菜(云南等地称苦菜)腌制而成，新鲜青菜经太阳晒一、二天后，洗净、晾干，视需要切短或者切细，添加食盐、辣椒粉、茴香籽、草角、八角等辛香料，拌匀，喷洒少许食用酒，移至缸内，压紧、密封，25天后即可开罐食用。本发明提供了一种监测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，能快速、准确检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的含量。本发明使用全自动流动注射分析仪，测定酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐，技术领先、测定速度快、结果准确，尤其适用于酸腌菜中致癌物质亚硝酸钠、硝酸钠含量的检测，属于科技创新项目。目前，国内外尚未发现有关检测酸腌菜中亚硝酸盐、 硝酸盐方法的报道。本发明旨在克服现有技术的缺陷，提供一种采用全自动流动注射分析仪，测定酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，检出限亚硝酸钠O. 14mg/kg、硝酸钠O. 17mg/kg。国家标准 《食品安全卫生标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》GB5009. 33-2010规定了亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法，离子色谱法(第一法)、分光光度法(第二法)、乳及乳制品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定(第三法)；国家标准《酱腌菜卫生标准》GB2714-2003、《酱腌菜卫生标准的分析方法》GB/T5009. 54-2003规定了酱腌菜中亚硝酸盐的限量与测定方法，亚硝酸盐含量(以NaNO2计)(20mg/kg，测定方法为GB5009. 33规定的方法。现有检测亚硝酸盐、硝酸盐的标准、方法，均与本发明所用的仪器及测定步骤不同，本发明具有鲜明的创新性和实用性。
发明内容
本发明所述测定酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐方法，由以下步骤组成一、定量称取酸腌菜样品，置于均质器中捣碎、混匀，用超声波萃取酸腌菜中的亚硝酸盐、硝酸盐。二、绘制亚硝酸盐校准曲线使用亚硝基氮(N02_)标准溶液，配制成浓度为O. O、
2.0,5. O、10. 0,20. 0,50. 0,100. O μ g/L的标准工作溶液，以亚硝基氮浓度为横坐标，亚硝基氮峰面积为纵坐标，计算机自动绘制校准曲线。使用硝基氮(NO3O标准溶液，配制成浓度为O. 0,2. 0,20. 0,100. 0,200. 0,500. O、
1000. O μ g/L的标准工作溶液，以硝基氮浓度为横坐标，硝基氮峰面积为纵坐标，计算机自动绘制校准曲线。三、按照每I. O克酸腌菜中亚硝酸盐定量加入对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸 N-(I-萘基)乙二胺偶合，生成玫瑰红色偶氮染料，在540nm测定亚硝酸盐含量。酸腌菜试样中亚硝酸盐含量按(I)式计算
V-C01)xF0xFxlO'3 ,X1=^——^~^-Xki .................. (I)
m X V1式中X1—酸腌菜中亚硝酸盐含量(以NaNO2计)，单位为毫克每千克(mg/kg)；Cxl—试样溶液中亚硝基氮浓度，单位为微克每升(μ g/L)；C01—空白试液中亚硝基氮浓度，单位为微克每升(μ g/L)；V——试样溶液测定体积，单位为毫升(mL)；V1——试样溶液分取体积，单位为毫升(mL)；V0——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)；m——试样质量,单位为克(g)；Ic1——亚硝基氮换算为亚硝酸钠的系数，4. 929。结果保留小数点后2位有效数字。四、按照每I. O克酸腌菜样品中的硝酸盐经镉柱还原为亚硝酸盐，定量加入对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸N-(I-萘基)乙二胺偶合，生成玫瑰红色偶氮染料，在540nm测定亚硝酸盐，减去同一样品中已测定的亚硝酸盐含量，换算得硝酸盐含量。酸腌菜试样中硝酸盐含量按(2)式计算I2 = [(Cjc2 _Co2)xroX 厂 x10 3 XK1-X1^XK2 ......... (2)
mx. V 2式中X2—酸腌菜中硝酸盐含量(以NaNO3计)，单位为毫克每千克(mg/kg)；X1—酸腌菜中亚硝酸盐含量(以NaNO3计)，单位为毫克每千克(mg/kg)；
Cx2—试样溶液中亚硝基氮浓度，单位为微克每升(μ g/L)；C02—空白试液中亚硝基氮浓度，单位为微克每升(μ g/L)；V——试样溶液测定体积，单位为毫升(mL)；V2——试样溶液分取体积，单位为毫升(mL)；V0——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)；m——试样质量,单位为克(g)；Ic1——亚硝基氮换算为亚硝酸钠的系数，4. 929 ；k2—亚硝酸钠换算为硝酸钠的系数，I. 232。结果保留小数点后2位有效数字。本发明克服了现有技术的缺陷，使用全自动流动注射分析仪，测定酸腌菜中致癌物质亚硝酸盐、硝酸盐，技术领先、测定速度快、结果准确，适用于食品安全项目的检测，填补了酸腌菜检验的空白，对保护消费者健康和食品安全工作有重要意义。本发明的主要特点I、使用全自动流动注射分析仪测定酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐含量，样品一次处理，测定二次完成。2、测量检出限低，测定酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐含量检出限亚硝酸盐(以 NaNO2 计)0. 14mg/kg、硝酸盐(以 NaNO3 计)0. 17mg/kg。3、测量准确度满足要求，测定酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐含量加标回收率亚硝基氮加标回收率93. I 109. 2%，硝基氮加标回收率82. I 118. 8%，测定结果准确。4、测量重复性符合要求，测定酸腌菜中亚硝酸钠测量相对标准偏差 (RSD) O. 74 3. 34%，硝酸钠测量相对标准偏差(RSD) O. 59 3. 90%，测量相对标准偏差 (RSD) < 4. 00%，测定误差小，结果准确。
具体实施例方式实施例I :I测定原理I. I亚硝酸盐测定原理酸腌菜试样中的亚硝酸盐经对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸N-(I-萘基)乙二胺偶合，生成玫瑰红色偶氮染料，在540nm测定亚硝酸盐含量。I. 2硝酸盐测定原理酸腌菜试样中的硝酸盐经镉柱还原为亚硝酸盐，经对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸 N-(l-萘基)乙二胺偶合，生成玫瑰红色偶氮染料，在540nm测定亚硝酸盐，减去同一样品中已测定的亚硝酸盐含量，换算得硝酸盐含量。2使用仪器及试剂2. I 仪器全自动流动注射分析仪，型号FIA-6000+，北京吉天仪器有限公司生产，仪器使用条件见表I。表I全自动流动注射分析仪工作条件
权利要求
1.一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，其特征在于由以下步骤组成一、定量称取酸腌菜样品，置于均质器中捣碎、混匀，用超声波萃取酸腌菜中的亚硝酸盐、硝酸盐。二、使用亚硝基氮(N02_)标准溶液，配制成浓度为O.0、2. 0、5. 0、10. 0、20. 0、50. O、 100. 0 μ g/L的标准工作溶液，全自动流动注射分析仪绘制校准曲线。使用硝基氮(N03_)标准溶液，配制成浓度为O. 0,2. 0,20. 0,100. 0,200. 0,500. 0,1000. O μ g/L的标准工作溶液，绘制校准曲线。三、酸腌菜样品中亚硝基氮经对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸N-(l-萘基)乙二胺偶合， 生成玫瑰红色偶氮染料，在540nm测定亚硝酸盐含量。四、酸腌中硝酸盐经镉柱还原为亚硝酸盐，经对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸N-(l-萘基)乙二胺偶合，生成玫瑰红色偶氮染料测定亚硝酸盐，减去同一样品中亚硝酸盐，得到硝酸盐含量。
2.如权利要求I所述一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，其特征在于使用全自动流动注射分析仪测定酸腌菜中致癌物质亚硝酸盐、硝酸盐含量。
3.如权利要求I所述一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法,其特征在于通过检测实验找到规律常温(20°C )下，酸腌菜在腌制过程中亚硝酸盐含量逐渐增加，9 13天亚硝酸盐含量最高，腌制15天后，酸腌菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，25天后可安全食用。
4.如权利要求I所述一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，其特征在于检出限低亚硝酸盐检出限(以NaNO2计)0. 14mg/kg、硝酸盐检出限(以NaNO3计)0. 17mg/kg。
5.如权利要求I所述一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，其特征在于亚硝基氮加标回收率93. I 109. 2%，测定硝基氮加标回收率82. I 118. 8%，测定结果准确。
6.如权利要求I所述一种检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的方法，其特征在于测量重复性符合要求，测定酸腌菜中亚硝酸钠测量相对标准偏差(RSD)O. 74 3. 34%，硝酸钠测量相对标准偏差(RSD)O. 59 3. 90%，测量相对标准偏差(RSD) ^ 4. 00%,测定误差小，结果准确。
全文摘要
本发明属于化学领域，适用于酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐的检测。本发明所述快速检测酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐方法，由以下步骤组成一、超声波萃取酸腌菜中亚硝酸盐、硝酸盐。二、使用亚硝基氮(NO2-)标准溶液，绘制校准曲线。使用硝基氮(NO3-)标准溶液，绘制校准曲线。三、酸腌菜中亚硝酸盐经对氨基磺酰胺重氮化，与盐酸N-(1-萘基)乙二胺偶合，生成玫瑰红色偶氮染料，在540nm测定亚硝酸盐含量。四、酸腌菜中硝酸盐经镉柱还原为亚硝酸盐，测定亚硝酸盐，减去同一样品中已测定的亚硝酸盐，换算得硝酸盐含量。
文档编号G01N21/78GK102590195SQ201210014139
公开日2012年7月18日 申请日期2012年1月18日 优先权日2012年1月18日
发明者刘佳, 张禹红, 朱奎, 李松飞, 梁文君, 梅春芬, 谢爱群, 陈洁 申请人:云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心