专利名称：一种微生物型时间-温度指示卡的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种微生物型时间-温度指示卡，具体利用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液在生长繁殖中代谢产生还原物质使指示剂逐步还原褪色，记录颜色变化过程，以指示卡颜色变化来指示时间和温度的变化，属于食品质量监测领域。
背景技术：
温度在很大程度上决定着食品的保质期，而食品在生产和流通过程中经常偏离推荐的温度条件，导致食品虽然在产品标贴上所标明的保质期内，但是食品本身已经腐败变质。尤其是对于必须冷链流通的产品，当温度发生偏移时，安全隐患显得更加严重，从而用于监测此过程的TTI (Time-Temperature Indicator,时间-温度指示卡)应运而生。 在过去科学研究和商品开发中所关注的TTI主要有三种类型扩散型、酶型和聚合物型。TTI是ー种简便的装置，可以作为包装的一部分，通过它的机械变形或者是颜色变化，能够反映出被指示产品的全部或部分温度历史，并可指示某些食品在运输、销售的环节脱离了最佳贮存温度、导致食品品质下降的信息。从而确保到达零售商处的食品所经历的处理是正确的，同时也可以便于消费者辨认食品的质量。在实现本发明的过程中，发明人发现现有技术中至少存在以下缺点原料获取成本高，获取的方式复杂，有些原料带有危害性，前期研究复杂。利用微生物的生长繁殖的特性制作TTI是现在研究的新方向。
发明内容
本发明实施例的目的是针对上述现有技术的缺陷，提供了ー种能够通过放置在食品外包装上的时间-温度指示卡颜色变化判定食品在流通过程中是否脱离了最佳贮存温度，从而导致食品品质下降。为了实现上述目，采取的技术方案ー种微生物型时间-温度指示卡，该指示卡包括装反应试剂的载体和温度时间指示对照卡；所述反应试剂包括保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂、8%脱脂乳培养基；所述温度时间指示对照卡设置了固定温度下，时间和顔色对应关系。所使用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液浓度在2. 61 X IO7Cfu/ml-8. 8X107cfu/ml，保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌比例为I : I。所使用的反应指示剂配置方式如下，溴甲酚紫指示剂取O. Ig固体溴甲酚紫溶于100ml20%こ醇中，密封保存；石蕊指示剂取Ig固体石蕊溶于50ml水中，静置一昼夜后过滤，在滤液中加入30ml95%的酒精，再加水稀释到100ml，密封保存。所述的反应试剂按照8%脱脂乳培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂10 15 I 3 I 3的比例放置在灭菌的三角瓶中混合均匀后取O. 5ml均匀的混合液注入透明玻璃试管中用蜡密封标记好序号按组分别放置在室温20-25°C环境下和0-4°C冷藏环境下，每天定时进行颜色记录。重复试验后把每天的颜色记录制成不同的温度时间指示对照卡。所有的操作均在无菌台进行，所有使用的仪器及溶剂都经过严格的灭菌处理，保证指示卡中的菌种仅为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌无其他杂菌。本发明实施例的有益效果是本指示卡制作简单，重复性好，菌种安全无毒，反应指示剂安全，指示卡颜色变化明显，能够通过清楚的顔色变化对照指示卡确定食品在流通过程中是否曾脱离过最佳贮存温度而导致食品品质下降。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进ー步说明，但不作为对本发明的限定。培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、溴甲酚紫指示剂比例为10 15 I 3 I 3。放置在室温20-25°C状态。重复试验得到的温度时间指示对照卡从紫棕色褪色到黄色需要n(n为从紫棕色 褪色到黄色所需要的天数)天，顔色变化每天一记录从第I天到第η天为紫棕色、砖红色……棕绿色、深黄色、黄色。本实施例所述的指示卡捆绑在室温20_25°C贮存并保质期η天的食品的外包装上，从出厂起指示卡开始颜色变化。如果正常的20-25°C的流通中本食品，在保质期内的某一天指示卡的颜色对照对照卡上所对应的那一天应该与食品实际从出厂起到这一天所对应的天数是一致的。反之，则说明食品在流通中曾经脱离过最佳保藏时间，食品品质会有所变化。培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、溴甲酚紫指示剂比例为10 15 I 3 I 3。放置在冷藏0-4°C状态。重复试验得到的温度时间指示对照卡从紫黑色褪色到黄色色需要η天，颜色变化每天ー记录从第I天到第η天为紫黒色、紫棕色、砖红色……棕绿色、棕黄色、深黄色、黄色。本实施例所述的指示卡捆绑在室温0_4°C贮存并保质期η天的食品的外包装上，从出厂起指示卡开始颜色变化。如果正常的0-4°C的流通中本食品，在保质期内的某一天指示卡的颜色对照对照卡上所对应的那一天应该与食品实际从出厂起到这一天所对应的天数是一致的。反之，则说明食品在流通中曾经脱离过最佳保藏时间，食品品质会有所变化。选取当反应指示剂为溴甲酚紫时，实验效果明显的反应试剂比例如表I所示，按照比例添加到三角瓶中并标记好序号，并按照表2中的分组及标号进行制备指示卡，每组指示卡平行做三个样本。表I三角瓶中添加物及其数量
权利要求
1.ー种微生物型时间-温度指示卡，其特征在于，该指示卡包括装反应试剂的载体和温度时间指示对照卡； 所述反应试剂包括保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂、8%脱脂乳培养基； 所述温度时间指示对照卡设置了固定温度下，时间和顔色对应关系。
所述的装反应试剂的载体是透明玻璃试管，所述的反应试剂注入透明玻璃试管内，且用蜡密封。
2.根据权利要求I所述的指示卡，其特征在于所述的反应指示剂为石蕊指示剂或溴甲酚紫指示剂。
3.根据权利要求I所述的指示卡，其特征在于所述的反应试剂8%脱脂乳培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂的比例为10 15 : I 3 : I 3。
4.根据权利要求3所述的指示卡，其特征在于所述的反应试剂8%脱脂乳培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂的比例为10 I I ；10 I 2 ；10 : I : 3。
5.根据权利要求3所述的指示卡，其特征在于所述的反应试剂8%脱脂乳培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂的比例为10 2 I ；10 2 2 ；10こ2こ3。
6.根据权利要求3所述的指示卡，其特征在干所述的8%脱脂乳培养基、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、反应指示剂的比例为10 3 I ；10 3 2 ；10こ3こ3。
7.根据权利要求1-6任一项所述的指示卡，其特征在于所使用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液浓度在2. 61 X 107cfu/ml-8. 8X 107cfu/ml，保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌比例为I : 1，注入透明玻璃试管中的混合均匀的反应试剂的量为O. 5ml，透明玻璃管容积为O. 5ml。
8.根据权利要求I所述的指示卡，其特征在于所述的固定温度为室温20-25°C环境下或0-4°C冷藏环境下两种温度。
9.根据权利要求I所述的指示卡，其特征在于所述的时间和颜色对应关系，是根据不同比例反应试剂在不同环境下，定时记录反应试剂的顔色制作成的。
全文摘要
本发明公开了一种微生物型时间-温度指示卡，该指示卡包括反应试剂和温度时间指示对照卡；所述反应试剂包括保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合活化菌液、石蕊指示剂或溴甲酚紫指示剂、8％脱脂乳培养基的混合物注入透明玻璃管封存；所述温度时间指示对照卡设置了固定温度下，时间和颜色的对应关系。本发明只需通过保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在一定温度下生长繁殖所产生的还原物质使石蕊指示液或溴甲酚紫指示剂逐步还原褪色，根据颜色对照温度时间指示对照卡判定食品在冷链流通过程中是否脱离规定的运输或储藏温度，直观的体现了食品在冷链流通过程中的质量。
文档编号G01N21/77GK102841086SQ201210236279
公开日2012年12月26日 申请日期2012年7月5日 优先权日2012年7月5日
发明者闫文杰, 李兴民, 王婧, 李文文, 宋海波, 吴祥英 申请人:北京联合大学