专利名称：一种肝炎用药组合物的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种肝炎用药组合物的质量控制方法，特指九味肝泰中药的质量控制方法。
背景技术：
九味肝泰是采用九味纯天然中药制成的用于治疗乙型肝炎的药品，其功能主治是化淤通络，疏肝健脾。用于气滞血瘀兼肝郁脾虚所致的胁肋痛或刺痛，抑郁烦闷，食欲不振，食后腹胀脘痞，大便不调，或胁下痞块等乙肝症状。该产品是一种纯天然治疗乙肝的中成药制剂，在治疗乙肝诸多药方中独树一帜，市场前景广阔。而本品现行使用的质量标准不能有效地控制产品质量,仅仅对九味药材中三味药材进行了鉴别(三七、大黄、黄芩)，只对其中一味药材进行含量测定(大黄中的大黄素)，其 他六味药材未有鉴定或含量限制，如成品中是否能检测出姜黄素等有效含量不得而知。如通过抽检市场上销售的九味肝泰，进行姜黄薄层鉴别研究及姜黄素含量测定，其含量结果几乎为0，其薄层鉴别未检出，而现行质量控制方法中未有这些指标，严重不利于产品质量和疗效，严重不利于老百姓健康。
发明内容
为了克服现有技术中存在的对姜黄素等不进行鉴别的缺陷，本发明提供一种新的肝炎用药组合物的质量检测方法，采用本发明的质量检测方法，能够清楚的鉴别组分是否存在，含量多少。本发明是采用如下技术方案实现的一种肝炎用药组合物的质量控制方法，其步骤包括对三七、大黄、黄芩的薄层色谱鉴别，通过高效液相色谱法测定大黄素(C15HltlO5)和大黄酚(C15HltlO4)的总量，每粒或每片中不得低于70μ g ;其中还包括对姜黄进行鉴别，测定姜黄素含量。上述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其中所述的对姜黄进行鉴别是指对姜黄进行薄层色谱鉴别，具体步骤为取本品内容物适量，加入甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取姜黄素对照品加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，三氯甲烷甲醇甲酸的重量比为96:4:0. 7，展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或是突光斑点。上述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其中所述的测定姜黄素的含量是指采用高效液相色谱法测定，具体步骤为(I)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈一4%冰醋酸溶液为流动相，乙腈4%冰醋酸的重量比为48 52 ;检测波长430nm，理论板数按姜黄素计算应不低于4000。(2)对照品溶液的制备取姜黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含姜黄素IOyg的溶液，即得。(3)供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，精密称定，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取继滤液，即得。(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪中，测定，即得。采用本发明的方法，新增姜黄素的薄层鉴别控制方法及姜黄素的含量限度控制方法。提高了产品质量，临床观察结果表明，含有姜黄素的九味肝泰治疗慢性乙肝疗效显著，该药能明显改善慢性乙肝病人的临床症状，临床总显效率和总有效率分别为55. 0%和93. 0%, HBsAg 阴转率为 31. 58%, HBeAg 阴转率为 47. 83 %、抗-HBc 阳转率为 39. 62%,抗-HBe阳转率为37. 14%，高于对照组，有抑制乙肝病毒的作用和增强机体对乙肝病毒感 染的免疫作用。
I、图I为本发明所述的肝炎用药组合物的质量控制方法中实施例I的姜黄素薄层鉴别图，其中I、3为姜黄素对照品，2为阴性样品，4为样品(120303 )。2、图2为本发明所述的肝炎用药组合物的质量控制方法中实施例I的姜黄素线性关系图。
具体实施例方式实施例II、新增姜黄的薄层鉴别控制方法姜黄素薄层鉴别方法学考察研究取本品内容物适量，加入甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取姜黄素对照品加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸(96:4:0. 7)为展开剂，展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或是荧光斑点(见图I)。2、新增姜黄素的含量限度控制方法姜黄素含量限度控制方法学研究如下a、对照品溶液的制备精密称取姜黄素对照品，加甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液，即得。b、供试品溶液的制备取装量差异项下的本品20粒，取内容物，研细，精密称重，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，精密称定，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取继滤液，即得。c线性关系考查精密吸取浓度为9.56 μ g /ml的姜黄素对照品溶液2、4、8、10、15 μ I注入液相色谱仪，测定其峰面积积分值，以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y = 83417X+28476 r = O. 9996。结果表明，姜黄素在
O.01912 O. 143mg范围内具有良好的线性关系。数据见表1，标准曲线图见图2。表6线性关系考察结果
权利要求
1.一种肝炎用药组合物的质量控制方法，其步骤包括对三七、大黄、黄芩的薄层色谱鉴另|J，通过高效液相色谱法测定大黄素(C15HltlO5)和大黄酚(C15HltlO4)的总量，每粒或每片中不得低于70μ g ;其特征在于还包括对姜黄进行鉴别，测定姜黄素含量。
2.如权利要求I所述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其特征在于所述的对姜黄进行鉴别是指对姜黄进行薄层色谱鉴别，具体步骤为取本品内容物适量，加入甲醇50ml，力口热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取姜黄素对照品加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂，三氯甲烷甲醇甲酸的重量比为96:4:0. 7展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或是荧光斑点。
3.如权利要求I所述的肝炎用药组合物的质量控制方法，其特征在于所述的测定姜黄素的含量是指采用高效液相色谱法测定，具体步骤为 (1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈一4%冰醋酸溶液为流动相，乙腈4%冰醋酸的重量比为48 52 ;检测波长430nm ;理论板数按姜黄素计算应不低于4000。
(2)对照品溶液的制备取姜黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含姜黄素IOyg的溶液，即得； (3)供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，精密称定，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取继滤液，即得； (4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪中，测定，即得。
全文摘要
本发明涉及一种肝炎用药组合物的质量控制方法，特指九味肝泰中药的质量控制方法。本发明是采用如下技术方案实现的一种肝炎用药组合物的质量控制方法，其步骤包括对三七、大黄、黄芩的薄层色谱鉴别，通过高效液相色谱法测定大黄素(C15H10O5)和大黄酚(C15H10O4)的总量，每粒或每片中不得低于70μg；其中还包括对姜黄进行鉴别，测定姜黄素含量。采用本发明的方法，新增姜黄素的薄层鉴别控制方法及姜黄素的含量限度控制方法，提高了产品质量。
文档编号G01N30/02GK102879515SQ20121027933
公开日2013年1月16日 申请日期2012年8月7日 优先权日2012年8月7日
发明者何述金, 周准, 周代俊 申请人:何述金