专利名称：生物标记物在制备预测5-氨基水杨酸治疗溃疡性结肠炎的反馈响应药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物医学技术领域，具体涉及生物标记物在制备预测5-氨基水杨酸治疗溃疡性结肠炎的反馈响应药物中的应用。
背景技术：
溃瘍性结肠炎(ulcerative colitis, UC,简称溃结)是一种出现在大肠或结肠中的反复发作的炎性肠道疾病(IBD)。UC患者通常表现出与肠易激综合征(IBS)患者相同的症状，只不过IBS患者的情况要轻微一些，这也使得UC的确诊十分复杂。同样地，病人所患的不确定性大肠炎也有可能不是溃疡性结肠炎，而更类似于另一种炎性肠道疾病克罗思大肠炎。从解剖学的角度看，每个UC病人的病症表现是不同的，病灶可仅位于乙状结肠，也可延伸至整个结肠。起初，UC患者主要采用非特异性广谱抗炎症药物5-氨基水杨酸(5-ASA)进行治疗。当这种治疗方法无效时，将对患者采取更进一步的基于细胞毒性或生物学的治疗方法。这种采用5-ASA治疗UC的逐步疗法，在治疗中度溃疡性结肠炎时会遇到60%的失败，而采用安慰剂治疗时失败的几率达到了 80%。此外，临床上使用的大于2.5克/天的5-ASA有效剂量也未能很好地获得证明。相对于口服的抗炎症药物，生物制剂价格十分昂贵，因此，如何在早期快速确认患者对5-ASA或者其他治疗方法有响应就变得十分重要了。目前采取的UC逐步疗法并未考虑病人的性别差异以及病灶在结肠中的具体位置。对所有的UC患者采取相同的用药策略被认为是临床治疗失败闻发生率的关键因素。许多与IBD有关的生物标记物系统已经被成功开发，其中包括利用粪便钙卫蛋白和乳铁蛋白确认炎性肠道疾病患者，并对病症严重程度和复发状态进行评价；利用血清抗酵母抗体(ASCA)和核周抗中性粒细胞胞浆抗体(pANCA)等生物标记物来区分UC和克罗思疾病(⑶)；以及利用血清C型外膜孔蛋白抗体(ant1-OmpC)、免疫球蛋白A (IgA)和抗鞭毛蛋白抗体(ant1-CBirl)等生物标记物与ASCA和其他生物标记物检测一起诊断IBD和区分UC及⑶等疾病。目前已被确认的IBD疾病生物标记物包括抗粒-巨噬细胞集落刺激因子(ant1-GM-CSF)抗体，粘附分子整合素CDllb，肿瘤坏死因子a (TNF-a), C反应蛋白(CRP)，醛-酮还原酶家族I成员BIO(AKRIBIO)，穿孔蛋白(perforin)，k基因结合核因子(NF-kB)，CXC趋化因子，水通道蛋白，驱动蛋白，衔接因子蛋白(AP-1 )，补体蛋白C5a，白细胞介素2受体(IL-2R)，整合素，巨噬细胞炎性蛋白(HCC-4)，白细胞介素7 (IL-7)，单核细胞趋化蛋白
I(MCP-1)，人巨噬细胞刺激蛋白(MSP protein)，白细胞介素11 (IL-11)，粒细胞集落刺激因子(G-CSF)，肾上腺素受体，人基质裂解素(ST2)，上皮钙粘附素(E-cadhein)，皮片表皮内角质形成细胞(KC)，白细胞介素-12/23p40 (IL-12/23p40)，白细胞介素17 (IL-17)，氯代酪氨酸，多克隆兔抗人胰腺炎相关蛋白(PAP/REG3)，巨噬细胞移动抑制因子(MIF)，脑恶性肿瘤缺失基因I (DMBTl)，人脂质运载蛋白2 (LCN2)，白细胞介素22 (IL-22)，结合珠蛋白，趋化因子配体20 (CCL20)，白细胞介素6 (IL-6)，白细胞介素33 (IL-33)，天青杀素(CAP37)，泛素因子E4A (E4A(UBE4A))，CXC趋化因子配体16 (CXCL16)，抵抗素，阿朴脂蛋白A-1V，P -防御素，克罗思病易感基因NOD2/CARD15和N0D1/CARD4，Toll样受体(TLR) 2和4，瘦素，脂联素，白细胞介素10 (IL-10)，二肽基肽酶IV (DPP-1V)和CXC趋化因子受体4(CXCR4)等。这些生物标记物被用于确定类固醇的响应及生物学治疗。但是迄今为止，尚无相关的生物标记物和系统可用于确定使用5-ASA治疗UC患者时的反馈响应。如上所示，UC传统治疗的主要手段之一就是使用5-ASA，但是5-ASA在治疗活动期UC时的功效仅为30-40%。影响5-ASA治疗响应的UC病理生理学和其他因素尚不明确。从不同性别患者的蛋白谱上已确认的明显差异，以及解剖学上结肠炎发生的不同部位等角度考虑，UC是一种复杂的疾病。因而，我们需要一种可预测在使用5-ASA治疗UC患者时的潜在功效的方法、试剂或药物，也希望能通过这种手段开发一套有效的治疗UC患者的策略，以及一种新型安全有效的，可能依赖于性别和病灶部位的治疗方法。
发明内容
本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种生物标记物在制备预测5-氨基水杨酸治疗溃疡性结肠炎的反馈响应药物中的应用。为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为:生物标记物在制备预测5-氨基水杨酸治疗溃疡性结肠炎的反馈响应药物中的应用，所述生物标记物选自如下如下蛋白中的一种或多种:白细胞介素7 (IL-7)、白细胞介素la (IL-1a )、白细胞介素5 (IL-5)、白细胞介素3 (IL-3)、白细胞介素13 (IL-13)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、细胞巨化病毒、莱姆病毒、线粒体抗体、纤维蛋白原、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3 )、睾丸激素、抗多发性肌炎(PM-1)抗体、增殖细胞核抗原(PCNA)抗体、人T细胞淋巴细胞病毒1.2、癌症抗原19.9、黄体酮蛋白、核周抗中性粒细胞胞浆(pANCA)抗体、核糖核蛋白-C (RNP(c))抗体、水痘(V.zoster)蛋白、铁蛋白、幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白、(促)红细胞生成素、表皮生长因子(EGF)、C-反应蛋白、白细胞介素Ira (IL_lra)、单纯疱疹病毒-2gG、单纯疱疹病毒_2gD、补体Clq抗体、甲状腺球蛋白抗体、a -1抗胰蛋白酶、抵抗素、白细胞介素6 (IL-6)、胰岛细胞(GAD)抗体、瘦素、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、性激素结合球蛋白(SHBG)、胶原质第6类抗体、白细胞介素8 (IL-8)、核糖核蛋白-a (RNP(a))抗体、双链DNA抗体、副流感病毒I蛋白、杜氏利什曼原虫、血管紧张素转换酶(ACE (⑶143 ))、a -1抗胰蛋白酶、克氏锥虫蛋白、Sc 1-70抗体、腮腺炎病毒、基质金属蛋白酶(MMP-3)、基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、促生长因子(IGF-1)蛋白、肌酸激酶-MB、血管紧张素转换酶(ACE(⑶143))、白细胞介素15(IL-15)、白细胞介素7(IL-7)、生长激素、爱泼斯坦-巴尔病毒核抗原、降血钙素、免疫球蛋白A (IgA)、血管假性血友病因子、肿瘤坏死因子-a (TNF-a ),双链DNA抗体、SSA抗体、三碘甲状腺氨酸(T3)抗体、肿瘤坏死因子-a (TNF-a )、胰多肽、C-反应蛋白、补体Clq抗体、脑源神经营养因子、癌症抗原125、白细胞介素10 (IL-10)、蛋白酶3 (cANCA)抗体。上述生物标记物为性别依赖型生物标记物。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:白细胞介素7 (IL-7)、白细胞介素la (IL-1 a )、白细胞介素5 (IL_5)、白细胞介素3 (IL_3)、白细胞介素13(IL-13)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、细胞巨化病毒、莱姆病毒、线粒体抗体、纤维蛋白原、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、睾丸激素、抗多发性肌炎(PM-1)抗体和增殖细胞核抗原(PCNA)抗体。该组生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有全结肠炎和广泛结肠炎的男女性患者在为期6周疗程中的功效。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:人T细胞淋巴细胞病毒
1.2、癌症抗原19.9和黄体酮蛋白。该组生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和
4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有左半结肠炎的女性患者在为期6周疗程中的功效。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:白细胞介素7 (IL-7)、核周抗中性粒细胞胞浆(pANCA)抗体、纤维蛋白原、核糖核蛋白-C (RNP(c))抗体和水痘(V.zoster)蛋白。该组生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有左半结肠炎的男性患者在为期6周疗程中的功效。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:铁蛋白和幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白。该组生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有直肠乙状结肠炎的女性患者在为期6周疗程中的功效。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:(促)红细胞生成素、表皮生长因子(EGF)，C-反应蛋白、白细胞介素Ira (IL_lra)、单纯疱疹病毒_2gG、白细胞介素I a (IL-1 α )、单纯疱疹病毒_2gD、补体Clq抗体和甲状腺球蛋白抗体。该组生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有直肠乙状结肠炎的男性患者在为期6周疗程中的功效。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、α-1抗胰蛋白酶、抵抗素、白细胞介素6 (IL-6)、胰岛细胞(GAD)抗体、瘦素、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、性激素结合球蛋白(SHBG)、胶原质第6类抗体、白细胞介素8(IL-8)、核糖核蛋白-a (RNP(a))抗体、细胞巨化病毒、线粒体抗体、双链DNA抗体和副流感病毒I蛋白。该组生物标记物可有效地诊断所有患有全结肠炎和广泛结肠炎的男女性患者。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、杜氏利什曼原虫、血管紧张素转换酶(ACE (⑶143))、α-1抗胰蛋白酶、线粒体抗体、克氏锥虫蛋白、Scl-70抗体、腮腺炎病毒、基质金属蛋白酶(MMP-3)、幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白、基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、核糖核蛋白_c (RNP(c))抗体和促生长因子(IGF-1)蛋白。该组中一种或更多的目标生物标记物可诊断患有左半结肠炎的女性患者。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肌酸激酶-MB、血管紧张素转换酶(ACE (CD143))、白细胞介素15 (IL-15)、核周抗中性粒细胞胞浆(pANCA)抗体、瘦素、白细胞介素7 (IL-7)、生长激素、爱泼斯坦-巴尔病毒核抗原和促生长因子(IGF-1)蛋白。该组中一种或更多的目标生物标记物来诊断患有左半结肠炎的男性患者。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:降血钙素、白细胞介素8(IL-8)、幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白、免疫球蛋白A (IgA)、血管假性血友病因子、白细胞介素6 (IL-6)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α )、双链DNA抗体、SSA抗体和三碘甲状腺氨酸(T3)抗体。该组中一种或更多的目标生物标记物来诊断患有直肠乙状结肠炎的女性患者。该组生物标记物还可作为开发UC治疗方法的靶点。优选地，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:(促)红细胞生成素、睾丸激素、肿瘤坏死因子-a (TNF-a )、胰多肽、C-反应蛋白、补体Clq抗体、脑源神经营养因子、癌症抗原125、白细胞介素10 (IL-10)、白细胞介素6 (IL-6)和蛋白酶3 (cANCA)抗体。该组中一种或更多的目标生物标记物来诊断患有直肠乙状结肠炎的男性患者。该组生物标记物还可作为开发UC治疗方法的靶点。本发明中确定的生物标记物可作为药物靶点用于开发针对UC患者的新型药物治疗方法。本发明中确定的生物标记物还可用于筛选和确定具有一定疗效，可作为潜在的治疗UC患者药物的治疗性化合物。通过比较本发明中确定的，如上所述的一种或更多目标生物标记物的改变，还可监控针对UC患者的药物的治疗效果。本发明中涉及的方法和系统还可用于确定疾病途径中上游和下游的其他蛋白，以作为额外的目标生物标记物，或用于开发治疗UC患者的药物。本发明中确定的目标生物标记物还可用于监控针对UC患者的药物的治疗效果。在本发明中确认的生物标记物是以UC为目标的，通过一组蛋白生物标记物用于区分不同性别患者对5-ASA的不同响应。因此，本发明主要用于决定使用5-ASA治疗患有不同UC症状的病人时的效力，同时也可用于开发有效的治疗UC患者的策略以及新型安全有效的，可能依赖于性别和结肠炎病灶部位的治疗侧策略。可利用本发明中涉及的生物标记物在UC早期阶段来确定对5-ASA的不响应者，从而开发一种更高效使用5-ASA的临床药物治疗方法。在UC早期阶段来确定对5-ASA的不响应者，从而可使用替代治疗来更快、更有效地控制疾病。发现更多潜在的用于UC药物开发的靶点和靶点代谢途径，同时更好地理解UC的病理。下面结合原理及有益效果对本发明作进一步说明:使用5-ASA治疗中度UC患者时会遇到60%的临床失败，而使用安慰剂时则会遇到80%的临床失败。由于缺乏对疾病的病理生理学的理解，5-ASA疗法并未考虑到性别和结肠中病灶部位的差异。基于临床生物标记物发展的个性化药物治疗将提供更为有效的，考虑到个体的治疗方案。患有左半结肠炎和直肠乙状结肠炎的病人在临床上通常是很难处理的。但是，直肠乙状结肠炎患者发展为结肠癌的几率并未明显增加；而全结肠炎和广泛结肠炎的患者发展为结肠癌的风险则非常高。因此，将UC患者根据性别和解刨学上不同的结肠部位分为子群，然后运用不同批次的生物标记物来特定地预测这些子群对5-ASA治疗的响应就变得十分重要。本发明确定了不同组的蛋白生物标记物(“目标生物标记物”)。通过这些目标生物标记物，5-ASA的不响应者可被更早地确定。同时，利用这些目标生物标记物可以发展一种新的临床药物治疗方法，而这种高效的方法可以更快更有效地控制疾病，并且为那些不响应者寻找替代治疗。本发明具体的十组生物标记物实质分为两类目标生物标记物:第一类包含可预测使用5-ASA治疗轻度至中度UC患者时结果(成功或失败)的性别依赖型血清(或血浆)目标生物标记物。医师们可以使用这些目标生物标记物作为独特的工具来决定最佳的个性化UC治疗策略。这一方法也为在不同结肠部位患有结肠炎的病人创造了不同组的目标生物标记物。第二类血清或血浆目标生物标记物(此处共称为“血清目标生物标记物”)则定义了特定性别的，以及以上提及的特定结肠部位的轻度至中度UC患者。UC目标生物标记物可用于确定和验证新的UC药物祀点。这些目标生物标记物或者本身就是新的药物祀点,或者通过帮助我们理解UC的病理来确定其他分子和蛋白等等作为新的治疗靶点。这些目标生物标记物还可作为筛选UC治疗性化合物的新工具，并可用于诊断轻度至中度的UC。具体说明如下:第一类:预测5-ASA治疗结果的性别依赖型血清目标生物标记物第一类性别依赖型血清目标生物标记物用于预测使用5-ASA治疗在不同结肠部位(左半结肠炎，直肠乙状结肠炎，全结肠炎和广泛结肠炎)患有轻度至中度UC患者时的功效(成功或失败)。本发明中所指的“血清”同时包括血清和血浆。本发明中使用的第一组性别依赖型血清目标生物标记物包含以下蛋白生物标记物:白细胞介素7(IL_7)、白细胞介素la (IL-1a )、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、白细胞介素5 (IL-5)、白细胞介素3 (IL-3)、细胞巨化病毒、莱姆病毒、线粒体抗体、纤维蛋白原、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、睾丸激素、抗多发性肌炎(PM-1)抗体、白细胞介素13 (IL-13)和增殖细胞核抗原(PCNA)抗体蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第一组目标生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有全结肠炎和广泛结肠炎的男女性患者在为期6周疗程中的功效。本发明利用第一组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来预测上述5-ASA的功效。第二组性别依赖型血清目标生物标记物包含以下生物标记物:人T细胞淋巴细胞病毒1.2、癌症抗原19.9和黄体酮蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第二组目标生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有左半结肠炎的女性患者在为期6周疗程中的功效。本发明利用第二组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来预测上述5-ASA的功效。第三组性别依赖型血清目标生物标记物包含以下生物标记物:白细胞介素7(IL-7)、核周抗中性粒细胞胞浆(pANCA)抗体、纤维蛋白原、核糖核蛋白-C (RNP(c))抗体和水痘(V.zoster)蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第三组目标生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有左半结肠炎的男性患者在为期6周疗程中的功效。本发明利用第三组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来预测上述5-ASA的功效。第四组性别依赖型血清目标生物标记物包含以下生物标记物:铁蛋白和幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第四组目标生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有直肠乙状结肠炎的女性患者在为期6周疗程中的功效。本发明利用第四组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来预测上述5-ASA的功效。第五组性别依赖型血清目标生物标记物包含以下生物标记物:(促)红细胞生成素、表皮生长因子(EGF)，C-反应蛋白、白细胞介素Ira (IL_lra)、单纯疱疹病毒_2gG、白细胞介素Ia (IL-Ια )、单纯疱疹病毒-2gD、补体Clq抗体和甲状腺球蛋白抗体蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第五组目标生物标记物可有效地预测使用2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天剂量来治疗患有直肠乙状结肠炎的男性患者在为期6周疗程中的功效。本发明利用第五组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来预测上述5-ASA的功效。第二类:性别依赖型血清目标生物标记物用于轻度至中度UC的诊断和新药开发:本发明中的第二类性别依赖型血清目标生物标记物用于轻度至中度UC的诊断和新药开发。本发明中所指的“血清”同时包括血清和血浆。第六组血清目标生物标记物包含以下生物标记物:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、α-1抗胰蛋白酶、抵抗素、白细胞介素6 (IL-6)、胰岛细胞(GAD)抗体、瘦素、基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、性激素结合球蛋白(SHBG)、胶原质第6类抗体、白细胞介素8(IL-8)、核糖核蛋白-a (RNP(a))抗体、细胞巨化病毒、线粒体抗体、双链DNA抗体和副流感病毒I蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第六组目标生物标记物可有效地诊断所有全结肠炎和广泛结肠炎的患者(包括男性和女性)。本发明利用第六组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来诊断全结肠炎和广泛结肠炎，以及开发新的UC治疗方法。第七组血清目标生物标记物包含以下生物标记物:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、杜氏利什曼原虫、血管紧张素转换酶(ACE (⑶143))、α-1抗胰蛋白酶、线粒体抗体、克氏锥虫蛋白、Scl-70抗体、腮腺炎病毒、基质金属蛋白酶(ΜΜΡ-3)、幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白、基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、核糖核蛋白_c (RNP(c))抗体和促生长因子(IGF-1)蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第七组目标生物标记物可有效地诊断患有左半结肠炎的女性患者。本发明利用第七组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来诊断患有左半结肠炎的女性患者，以及开发新的UC治疗方法。第八组血清目标生物标记物包含以下生物标记物:粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肌酸激酶-MB、血管紧张素转换酶(ACE (CD143))、白细胞介素15 (IL-15)、髓过氧物酶(pANCA)抗体、瘦素、白细胞介素7 (IL-7)、生长激素、爱泼斯坦-巴尔病毒核抗原和促生长因子(IGF-1)蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第八组目标生物标记物可有效地诊断患有左半结肠炎的男性患者。本发明利用第八组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来诊断患有左半结肠炎的男性患者，以及开发新的UC治疗方法。第九组血清目标生物标记物包含以下生物标记物:降血钙素、白细胞介素8(IL-8)、幽门螺旋杆菌(H.pylori)蛋白、免疫球蛋白A (IgA)、血管假性血友病因子、白细胞介素6 (IL-6)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α )、双链DNA抗体、SSA抗体和三碘甲状腺氨酸(T3)抗体蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第九组目标生物标记物可有效地诊断患有直肠乙状结肠炎的女性患者。本发明利用第九组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来诊断患有直肠乙状结肠炎的女性患者，以及开发新的UC治疗方法。第十组血清目标生物标记物包含以下生物标记物:(促)红细胞生成素、睾丸激素、肿瘤坏死因子-a (TNF- a )、胰多肽、C-反应蛋白、补体Clq抗体、脑源神经营养因子、癌症抗原125、白细胞介素10 (IL-10)、白细胞介素6 (IL-6)和蛋白酶3 (cANCA)抗体蛋白。根据统计分析资料评价(P值和差异倍数)，第十组目标生物标记物可有效地诊断患有直肠乙状结肠炎的男性患者。本发明利用第十组目标生物标记物中的某一单独生物标记物或任意组合来诊断患有直肠乙状结肠炎的男性患者，以及开发新的UC治疗方法。本发明对目标生物标记物的应用，可减少使用无效药物进行治疗的可能性，减少病人经历不必要的5-ASA副作用以及因使用无效药物而导致临床恢复延迟的可能性。另夕卜，恢复延迟在临床上具有十分重大的意义，因为全结肠炎患者有很大的风险发展成为结肠癌。因此，本发明中用于UC病人的个性化药物使患者、处方医生以及保险公司均可获益。在特定UC条件以及与其他临床因素联合使用时确定的目标生物标记物，可为单个患者定制特定的药物治疗和管理方案，还可用于开发治疗方法和药物。本发明中确认的目标生物标记物还可作为常规的药物靶点，用于开发可有效治疗UC患者的新型药物和治疗方法。例如，如果病人的目标生物标记物水平出现显著差异，则可确定处方药物是否可以改善病人的状况。本发明中可利用此处确认的目标生物标记物作为一种筛选机制，来确认可能有治疗效果并且非常有前景成为治疗UC的药物的化合物。例如，如果某种化合物在特定的UC条件下可以影响、生产、修饰或者改变一种或多种目标生物标记物，那么这种化合物就可用作在此种UC条件下的治疗药物。可以利用本发明中确认的目标生物标记物，通过比较一种或多种如上所述的生物标记物水平的变化，来监控UC患者给药的疗效。还可确定在特定UC条件下，疾病途径的上游和下游的其他蛋白，而这些蛋白则可当作额外的目标生物标记物来创制在该特定UC条件下的药物。另外，当这些蛋白引起的改变和对其他目标生物标记物的影响被确定后，所获得的信息还可以帮助我们理解该特定UC条件下的疾病机理。可以利用此处确认的目标生物标记物来监控给予UC患者的药物的疗效。
具体实施例方式实施例1本发明提供了性别依赖型血清目标生物标记物，当病人使用一种或多种生物标记物表现出异于正常水平时，可由此预测在使用5-ASA治疗不同结肠部位(左半结肠炎，直肠乙状结肠炎，全结肠炎和广泛结肠炎)的患有轻度至中度UC患者时的疗效。5-ASA不响应血清生物标记物在个性化临床实践中的应用如上所述，使用5-ASA治疗中度UC患者时会遇到60%的临床失败，而使用安慰剂时则会遇到80%的临床失败。由于缺乏对疾病的病理生理学的理解，5-ASA疗法并未考虑到性别和结肠中病灶部位的差异。基于临床生物标记物发展的个性化药物治疗将提供更为有效的，考虑到个体的治疗方案。本发明中已经确定了不同组的蛋白目标生物标记物，并用于区分因性别和结肠炎病灶部位不同而引起的5-ASA治疗响应差异。通过这些目标生物标记物，5-ASA的不响应者可被更早地确定。同时，利用这些目标生物标记物可以充分地发展新型高效的临床药物治疗方法，并且通过对不响应者的替代治疗来更快更有效地控制疾病。通常情况下，不管结肠炎的病灶如何，临床的标准实践中都将5-ASA作为常规药物开给病人。通过以下非限制性实例，本发明例举了如何在患有全结肠炎和广泛结肠炎的患者中预测5-ASA响应的完整过程。该过程首先确定一个确诊患有UC的病人，然后通过常规的结肠镜检查来确定结肠发炎的部位。在对病人的结肠炎进行治疗之前，临床医生从患者处获取一个或更多的血样并制成血清，然后利用以上提及的合适的5-ASA非响应目标生物标记物来测定其相关的水平。将目标生物标记物的水平与如表I所示的标准值进行比较，所得结果即为对5-ASA疗效的预测(剂量为2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天，治疗患有全结肠炎和广泛结肠炎的男女性患者在为期6周疗程中的功效)。例如，如果病人的特异性5-ASA不响应目标生物标记物的水平表现出明显的差异(例如差异倍数的变化，IL-7>-l.57，IL-1 α >-1.34，G_CSF>-1.92，IL_5>-1.36，IL_3>-1.30)，那么 5-ASA 治疗方法很有可能对该病人无效。除了以上提及的通用于患有全结肠炎和广泛结肠炎的男女性患者的目标生物标记物，还可以使用额外的生物标记物进行进一步比较，比如对比女性特异性目标生物标记物的水平(细胞巨化病毒>-1.55，莱姆病毒>-1.54，线粒体抗体〈1.59，纤维蛋白原>-1.57，ΜΜΡ-3>-1.57)，或者男性特异性目标生物标记物的水平(PM-1抗体>-1.26，睾丸激素>-1.42，IL-13>-1.36，PCNA抗体>-1.71)以确定患者是否对5-ASA治疗无响应。最后再可以考虑使用替代药物(例如抗TNF分子)进行治疗。表1.预测性目标生物标记物用于诊断5-ASA非响应的全结肠炎和广泛结肠炎患者
蛋白P值*差异倍数**
IL-70.014-1.57IL-1a0.017-1.34G-CSF0.026-1.93IL-50.026-1.36IL-30.030-1.30
细胞巨化病毒#0.021-1.55
莱姆病毒#0.033-1.54
线粒体抗体#0.0331.59
纤维蛋白原#0.042-1.57
MMP-3#0.048-1.67
PM-1 抗休靜0.0046-1.26
睾丸激素##0.0046-1.42
IL-13##0.013-1.36
PCNA 抗体##0.047-1.71*使用5-ASA治疗全结肠炎和广泛结肠炎时成功组与失败组之间的生物标记物水平P值基准。**使用5-ASA治疗全结肠炎和广泛结肠炎时成功组与失败组之间的生物标记物水平差异倍数基准。#用于全结肠炎和广泛结肠炎女性患者的特异性5-ASA非响应目标生物标记物。##用于全结肠炎和广泛结肠炎男性患者的特异性5-ASA非响应目标生物标记物。实施例2用于在患有左半结肠炎的女性患者中预测5-ASA响应。首先确定一个确诊患有左半结肠炎的病人，然后通过常规的结肠镜检查来确诊左半结肠炎。通常情况下，治疗左半结肠炎时临床上都将5-ASA作为常规药物开给病人。在对病人的结肠炎进行治疗之前，临床医生对进行一次或多次血样检查并获得样本，然后制成血清，最后利用以上提及的合适的5-ASA非响应目标生物标记物来测定其相关的水平。将测得的目标生物标记物水平与如表2所示的标准值进行比较，所得结果即为对5-ASA疗效的预测(剂量为2.4克5-ASA/天和4.8克5-ASA/天，治疗患有左半结肠炎的女性患者在为期6周疗程中的功效)。例如，如果病人的特异性5-ASA不响应目标生物标记物的水平表现出明显的差异(例如差异倍数的变化，人T细胞淋巴细胞病毒1.2>1.71，癌症抗原19.9>-1.33，黄体酮蛋白>2.26)，那么5-ASA治疗方法很有可能对该病人无效。最后可以考虑使用替代药物(例如抗TNF分子)进行治疗。表2.预测性生物标记物用于诊断5-ASA非响应的左半结肠炎女性患者
权利要求
1.生物标记物在制备预测5-氨基水杨酸治疗溃疡性结肠炎的反馈响应药物中的应用，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:白细胞介素7、白细胞介素I α、白细胞介素5、白细胞介素3、白细胞介素13、粒细胞集落刺激因子、细胞巨化病毒、莱姆病毒、线粒体抗体、纤维蛋白原、基质金属蛋白酶-3、睾丸激素、抗多发性肌炎抗体、增殖细胞核抗原抗体、人T细胞淋巴细胞病毒1.2、癌症抗原19.9、黄体酮蛋白、核周抗中性粒细胞胞浆抗体、核糖核蛋白-C抗体、水痘蛋白、铁蛋白、幽门螺旋杆菌蛋白、红细胞生成素、表皮生长因子、C-反应蛋白、白细胞介素Ira、单纯疱疹病毒_2gG、单纯疱疹病毒_2gD、补体Clq抗体、甲状腺球蛋白抗体、α -1抗胰蛋白酶、抵抗素、白细胞介素6、胰岛细胞抗体、瘦素、基质金属蛋白酶-3、性激素结合球蛋白、胶原质第6类抗体、白细胞介素8、核糖核蛋白-a抗体、双链DNA抗体、副流感病毒I蛋白、杜氏利什曼原虫、血管紧张素转换酶、α-l抗胰蛋白酶、克氏锥虫蛋白、Scl-70抗体、腮腺炎病毒、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶_2、促生长因子蛋白、肌酸激酶-MB、血管紧张素转换酶、白细胞介素15、白细胞介素7、生长激素、爱泼斯坦-巴尔病毒核抗原、降血钙素、免疫球蛋白A、血管假性血友病因子、肿瘤坏死因子-α、双链DNA抗体、SSA抗体、三碘甲状腺氨酸抗体、肿瘤坏死因子-α、胰多肽、C-反应蛋白、补体Clq抗体、脑源神经营养因子、癌症抗原125、白细胞介素10、蛋白酶3抗体。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:白细胞介素7、白细胞介素I α、白细胞介素5、白细胞介素3、白细胞介素13、粒细胞集落刺激因子、细胞巨化病毒、莱姆病毒、线粒体抗体、纤维蛋白原、基质金属蛋白酶-3、睾丸激素、抗多发性肌炎抗体和增殖细胞核抗原抗体。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:人T细胞淋巴细胞病毒1.2、癌症抗原19.9和黄体酮蛋白。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:白细胞介素7、核 周抗中性粒细胞胞浆抗体、纤维蛋白原、核糖核蛋白-C抗体和水痘蛋白。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:铁蛋白和幽门螺旋杆菌蛋白。
6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:红细胞生成素、表皮生长因子，C-反应蛋白、白细胞介素Ira、单纯疱疹病毒-2gG、白细胞介素Ia、单纯疱疫病毒_2gD、补体Clq抗体和甲状腺球蛋白抗体。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:粒细胞集落刺激因子、α -1抗胰蛋白酶、抵抗素、白细胞介素6、胰岛细胞抗体、瘦素、基质金属蛋白酶-3、性激素结合球蛋白、胶原质第6类抗体、白细胞介素8、核糖核蛋白-a抗体、细胞巨化病毒、线粒体抗体、双链DNA抗体和副流感病毒I蛋白。
8.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:粒细胞集落刺激因子、杜氏利什曼原虫、血管紧张素转换酶、α -1抗胰蛋白酶、线粒体抗体、克氏锥虫蛋白、Scl-70抗体、腮腺炎病毒、基质金属蛋白酶、幽门螺旋杆菌蛋白、基质金属蛋白酶-2、核糖核蛋白-C抗体和促生长因子蛋白。
9.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:粒细胞集落刺激因子、肌酸激酶-MB、血管紧张素转换酶、白细胞介素15、核周抗中性粒细胞胞浆抗体、瘦素、白细胞介素7、生长激素、爱泼斯坦-巴尔病毒核抗原和促生长因子蛋白。
10.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:降血钙素、白细胞介素8、幽门螺旋杆菌蛋白、免疫球蛋白A、血管假性血友病因子、白细胞介素6、粒细胞集落刺激因子、肿瘤坏死因子-a、双链DNA抗体、SSA抗体和三碘甲状腺氨酸抗体。
11.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标记物选自如下蛋白中的一种或多种:红细胞生成素、睾丸激素、肿瘤坏死因子-a、胰多肽、C-反应蛋白、补体Clq抗体、脑源神经营养因子、 癌症抗原125、白细胞介素10、白细胞介素6和蛋白酶3抗体。
全文摘要
本发明公开了生物标记物在制备预测5-氨基水杨酸治疗溃疡性结肠炎的反馈响应药物中的应用。本发明中确定的生物标记物，是与使用5-氨基水杨酸(5-ASA)治疗UC时的性别差异响应相关联的目标生物标记物的基础。该生物标记物包括一组可以区分不同性别之间5-ASA治疗响应差异，以及确定在不同UC条件下使用5-ASA的疗效的蛋白生物标记物。同时，本发明还利用性别和疾病病灶部位特异性的生物标记物来有效地确定和验证用于UC新疗法的新型药物靶点，并开发新的诊断试剂、药物、方法和诊断标准，用于建立UC治疗策略。
文档编号G01N33/96GK103149371SQ201310059460
公开日2013年6月12日 申请日期2013年2月26日 优先权日2013年2月26日
发明者段燕文, 王 锋, 布鲁斯·亚克欣 申请人:哈药慈航制药股份有限公司, 长沙天赐生物医药科技有限公司