专利名称：精乌胶囊的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物的检测方法，特别是一种用于主治失眠多梦、耳鸣健忘、头发脱落及须发早白的中药胶囊剂(通用名称或药品名称精乌胶囊)的检测方法，属于制药技术领域。
背景技术：
精乌胶囊是一种比较受市场欢迎的产品，具有补肝肾、益精血及壮筋骨的功效，可用于失眠多梦，耳鸣健忘，头发脱落及须发早白等症状。精乌胶囊配方中的制何首乌、黄精(制)、女贞子(酒蒸)和墨旱莲分别是精乌胶囊的特征性指标成份。在现有的精乌胶囊质量标准中，不包含对何首乌和女贞子的鉴别以及游离蒽醌和结合蒽醌的含量限度，而且对黄精和墨旱莲的鉴别以及对2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷(C20H2209)含量测定方法也 有不足，因此对产品质量的控制存在不足。为了更进一步保证该产品的质量及更有利于对该产品质量的监督、管理，所以有必要对该产品的检测方法进行改进，从而更进一步保证该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于，提供一种精乌胶囊的检测方法。本发明在现有质量检测基础上增加了对何首乌和女贞子的鉴别以及对游离蒽醌和结合蒽醌的含量测定，改进了对黄精和墨旱莲的鉴别以及对2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷(C20H2209)含量测定，可以对精乌胶囊的主要药物成分进行更有效控制。本发明的目的可通过下列技术方案来实现:精乌胶囊的检测方法，它包括以下步骤:
性状:本品为胶囊剂，内容物为棕黄色粉末；气微香，味微苦潘;
鉴别:(I)取本品内容物0.2g，加乙醇50ml，加热回流I小时，滤过，滤液挥干，残渣加水IOml使溶解，通过大孔树脂柱(内径1.2cm，柱高15cm)，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液 ’另取何首乌对照药材0.25g，加乙醇50ml，加热回流I小时，取下，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7: 3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开至3.5cm，取出，晾干，再以20: I的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开至7.5cm，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(2)取本品内容物2.7g，加70%乙醇30ml，加热回流I小时，取出，放冷，滤过，滤液挥干，残渣加水IOml使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，正丁醇液浓缩至干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取黄精对照药材3g，同法制备对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:4:1:1的60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以用50%硫酸乙醇配制的5%香草醛溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)取本品内容物2.1g,加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液置水浴上挥干，残渣加3: 2的无水乙醇-三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取女贞子对照药材0.5g，加水50ml，加热微沸I小时，滤过，蒸干，残渣加3: 2的无水乙醇-三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以50: I的环已烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取本品内容物5.4g，加70%甲醇25ml，用功率为250W，频率为40kHz的超声波超声处理45分钟,滤过,滤液蒸至无醇味,加水15ml,搅勻,滤过,滤液置分液漏斗中,用60 90°C的石油醚振 摇提取3次，每次20ml，合并石油醚提取液，置水浴上挥干，残渣加甲醇
0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取墨旱莲对照药材0.5g，加水50ml，加热微沸I小时，取下，放冷，滤过，滤液浓缩至30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 10 μ 1，对照药材溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20: 5:1的30-600C的石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。前述的精乌胶囊的检测方法还包括:
检查:应符合胶囊剂项下有关的各项规定；
含量测定:
(1)2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷，照高效液相色谱法测定，避光操作；
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30: 70的甲醇-水为流动相；检测波长320nm ;理论板数以2，3，5，4!-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷峰计算应不低于3000 ；
对照品溶液的制备:取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷对照品，力口稀乙醇制成每Iml含30 μ g的溶液，即得；
供试品溶液的制备:取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.5g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加稀乙醇45ml，用功率为250W，频率为40kHz的超声波超声处理45分钟，取下，放冷，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法:分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每粒含制何首乌以2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷(C2tlH22O9)计，不得少于6.0mg ；
(2)游离蒽醌和结合蒽醌，照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以80: 20的甲醇-0.1%磷酸为流动相；检测波长254nm ;理论板数以大黄素峰计算应不低于3000 ；
对照品溶液的制备:取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品，加甲醇制成每Iml含大黄素20μ g、含大黄素甲醚8μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备:取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.7 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流I小时，取下，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液A (测游离蒽醌用)；另精密吸取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，水浴蒸干，加8%盐酸溶液20ml，用功率为250W，频率为40kHz的超声波超声处理5分钟，加三氯甲烷20ml，水浴中加热回流I小时，取出，立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷液，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液B(测总蒽醌用)；
测定法:分别精密吸取上述对照品溶液与两种供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每粒游离蒽醌含量以大黄素(C15HltlO5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计，不得少于
0.25mg/粒；本品每粒结合蒽醌含量(结合蒽醌含量为总蒽醌含量减去游离蒽醌含量)以大黄素(C15HltlO5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计，不得少于0.25mg/粒。前述的精乌胶囊的检测方法中，所述精乌胶囊，按照重量份计，是用制何首乌500g、制黄精500 g、酒蒸女贞子704 g和墨旱莲250 g，按下述方法制备成1000粒胶囊剂；以上四味，取制何首乌200g，粉碎成细粉，剩余制何首乌与其余黄精等三味加水煎煮三次，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.1，加入乙醇使含醇量达60%，充分搅拌，静置24小时，取上清液回收乙醇并浓缩至稠膏，冷 后加入制何首乌细粉，搅匀后，烘干，粉碎，装入胶囊，制成1000粒，即得；
与现有技术比较，本发明在现有质量检测基础上增加了对何首乌和女贞子的鉴别以及对游离蒽醌和结合蒽醌的含量测测定，改进了对黄精和墨旱莲的鉴别以及对2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷(C20H2209)含量测定，可以对精乌胶囊的主要药物成分进行更有效控制，使得精乌胶囊的质量监控水平有了很大的提高。既更有利于生产厂家和监督管理部门对产品质量的监测，也可以为医疗部门和患者的治疗提供更好的保障。申请人:经过多次对何首乌药材、黄精药材、女贞子药材、墨旱莲药材进行摸索试验，最后确定为以上鉴别方法。对何首乌药材进行摸索试验，试验记录如表I所示:
试验结果表明，本发明提供的对何首乌的鉴定方法(对应试验号3)可行，斑点重现性好，分离效果好，无拖尾现象。对黄精药材进行摸索试验，试验记录如表2所示:
试验结果表明:本发明提供的对黄精的鉴别方法(对应试验号3)可行，斑点重现性好，分离效果好，无拖尾现象。对女贞子药材进行摸索试验，试验记录如表3所示:试验结果表明:本发明提供的对女贞子的鉴别方法(对应试验号3)可行，斑点重现性好，分离效果好，无拖尾现象。对墨旱连材进彳了摸索试验，试验记录如表4所不:
试验结果表明:本发明提供的对墨旱莲的鉴别方法(对应试验号3)可行，斑点重现性好，分离效果好，无拖尾现象。为了验证本发明提供的含量测定方法的合理性，申请人对该方法进行了试验研究。2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷的含量测定:
1、仪器:LC-10AVP系列高效液相色谱仪(双泵，日本岛津)，LC-10AVP系列高效液相色谱仪(单泵，日本岛津)，CH-250型超声波清洗机(北京创新德超声电子研究所220V、50HZ-60HZ), AUW220D电子天平(日本岛津)。2、试药:2，3，5，4 ' _四轻基_■苯乙稀~2~0~ β -D-甸萄糖昔对照品(批号1241-201102，中国药品生物制品检定所)，乙醇为分析纯，甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水(自制)。3、专属性:按处方量配制缺制黄精药材的阴性对照品，依照本发明提供的含量测定方法测定，从阴性对照样品溶液的检测图谱分析，其它成分对2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷的测定无干扰。4、线性关系考察:精密称取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2_0_β-D-葡萄糖苷对照品31.6821mg置25ml容量瓶中，加稀乙醇至刻度，溶解摇匀，再分别精密量取0.2ml,0.4ml,0.6ml,0.8ml、l.0ml置25ml容量瓶中加稀乙醇稀释至刻度摇匀，制成10.138272 μ g/ml、20.276544 μ g/ml、30.414816 μ g/ml、40.553088 μ g/ml、50.69136 μ g/ml的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2_0_β -D-葡萄糖苷对照品溶液，分别取上述5种对照品溶液各10 μ I注入高效液相色谱仪，进行2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷测定，以2，3，5，4 '-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷峰面积A对2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷浓度C进行线性回归，线性回归方程:y=2.4818X 104C+29714.44842，线性范围:10.138272 μ g/ml 50.69136 μ g/ml，相关系数r=0.99969，实验结果见表I。表I线性关系
实验结果表明，以2，3，5，4 '-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷浓度在10.138272 μ g/ml 50.69136 μ g/ml范围内，峰面积与进样量呈良好线性关系。5、重复性实验:取同一供试品(批号110207)，按本发明提供的供试品溶液的制备方法平行制备供试品溶液6份，按本发明所提供的2，3，5，4'-四羟基二苯乙稀-2-0-β -D-匍萄糖昔含量测定方法对2，3，5，4'-四轻基二苯乙稀-2-0- β -D-匍萄糖苷含量进行测定，结果见表2。6、中间精密度实验:取同一供试品(批号110208)依本发明提供的供试品溶液的制备方法平行制备供试品溶液6份，在同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同仪器分别按本发明所提供的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷含量测定方法对2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷含量进行测定，结果见见表3和4。
根据上述12份实验结果，计算在同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同仪器分别测定的平均含量为:8.49975 mg/粒，相对标准差(RSD%)为0.12%，表明本发明所提供的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷含量测定方法中间精密度良好。7、稳定性试验:精密量取同一供试品(批号110209)依本发明提供的供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，按规定的时间进样，共测6次，以2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷峰面积计，结果见表5。结果表明，供试品在IOh内，2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2_0_ β-D-葡萄糖苷峰面积积分值前后无明显变化。8、回收率试验:采用加样回收法。精密称取批号:100201的精乌胶囊(含量为8.07 mg/粒)供试品9份，按供试品含2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷量的80%、100%、120%，精密加入2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷对照溶液(1.267284mg/ml)分别0.8ml、1.0ml、1.2ml。各浓度平均3份，每份检测2次，按本发明提供的供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，各取10 μ I注入液相色谱仪，进行2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷测定，结果见表6。表6加样回收率测定(η=9)
结果表明，2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷的回收率为99.62%，RSD=0.31%。9、样品测定:分别精密称取供试品(批号:081001、090601、090701、090901、090902、091101、091102、100201、100401、100402)，依照本发明提供的供试品溶液的制备方
法制成供试品溶液，分别对10批精乌胶囊中2，3，5，4/ -四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷的含量进行测定，结果见表7。
表7 10批样品测定结果(η=2)
根据上述10批样品测定结果，规定本品每粒含制何首乌以2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷(C2tlH22O9)计,不得少于6.0mg/粒。游离蒽醌和结合蒽醌:
1、仪器:LC-10AVP系列高效液相色谱仪(双泵，日本岛津)，LC-10AVP系列高效液相色谱仪(单泵，日本岛津)，CH-250型超声波清洗机(北京创新德超声电子研究所220V、50HZ-60HZ), AUW220D电子天平(日本岛津)。2、试药:大黄素对照品(批号110752-200912，中国药品生物制品检定所)，大黄素甲醚对照品(批号10543-200909，中国药品生物制品检定所)，三氯甲烷和磷酸为分析纯，甲醇为色谱纯，水为重蒸懼水(自制)。3、专属性:按处方量配制缺制何首乌药材的阴性对照品，依照本发明提供的含量测定方法测定，从阴性对照样品溶液的检测图谱分析，其它成分对大黄素、大黄素甲醚的测定无干扰。4、线性关系考察:精密分别称取大黄素对照品31.5279mg、大黄素甲醚对照品12.568 Img置25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，溶解摇匀，再分别精密量取0.2ml、
0.3ml,0.4ml,0.5ml,0.6ml，置25ml容量瓶中加甲醇稀释至刻度摇匀，制成大黄素含量为10.088928 μ g/ml、15.133392 μ g/ml、20.177856 μ g/ml、25.22232 μ g/ml、30.266784 μ g/ml,大黄素甲醚含量为 4.021792 μ g/ml,6.032688 μ g/ml、8.043584 μ g/ml、10.05448 μ g/ml、12.065376 μ g/ml的混合对照品溶液，各取10 μ I注入高效液相色谱仪，进行大黄素、大黄素甲醚测定，以大黄素、大黄素甲醚峰面积A对大黄素、大黄素甲醚浓度C进行线性回归，线性回归方程:大黄素I二2.6187X 104C+36512.4786，线性范围:10.088928 μ g/ml 30.266784 μ g/ml，相关系数 r=0.99989 ;大黄素甲醚 y=l.3641 X 104C+27432.6627，线性范围:4.021792 μ g/ml 12.065376 μ g/ml，相关系数 r=0.99993，实验结果见表 I 和 2。表I大黄素线性关系
权利要求
1.精乌胶囊的检测方法，其特征在于，它包括以下步骤: 性状:本品为胶囊剂，内容物为棕黄色粉末；气微香，味微苦潘; 鉴别:(1)取本品内容物0.2g，加乙醇50ml，加热回流I小时，滤过，滤液挥干，残渣加水IOml使溶解，通过大孔树脂柱，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取何首乌对照药材0.25g，加乙醇50ml，加热回流I小时，取下，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7: 3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开至3.5cm，取出，晾干，再以20: I的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开至7.5cm，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (2)取本品内容物2.1g,加70%乙醇30ml，加热回流I小时，取出，放冷，滤过，滤液挥干，残渣加水IOml使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，正丁醇液浓缩至干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取黄精对照药材3g，同法制备对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:4:1:1的60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以用50%硫酸乙醇配制的5%香草醛溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)取本品内容物2.1g,加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液置水浴上挥干，残渣加3: 2的无水乙醇-三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取女贞子对照药材0.5g，加水50ml，加热微沸I小时，滤过，蒸干，残渣加3: 2的无水乙醇-三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以50: I的环已烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取本品内容物5.4g，加70%甲醇25ml，用功率为250W，频率为40kHz的超声波超声处理45分钟,滤过,滤液蒸至无醇味,加水15ml,搅勻,滤过,滤液置分液漏斗中,用60 900C的石油醚振摇提取3次，每次20ml，合并石油醚提取液，置水浴上挥干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取墨旱莲对照药材0.5g，加水50ml，加热微沸I小时，取下，放冷，滤过，滤液浓缩至30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 10 μ 1，对照药材溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以20: 5:1的30 600C的石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的精乌胶囊的检测方法，其特征在于，该检测方法还包括: 检查:应符合胶囊剂项下有关的各项规定； 含量测定: (I)2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷，照高效液相色谱法测定，避光操作； 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30: 70的甲醇-水为流动相；检测波长320nm ;理论板数以2，3，5，4r -四羟基二苯乙烯-2_0_ β -D-葡萄糖苷峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备:取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-Ο-β -D-葡萄糖苷对照品，力口稀乙醇制成每Iml含30 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备:取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.5g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加稀乙醇45ml，用功率为250W，频率为40kHz的超声波超声处理45分钟，取下，放冷，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得； 测定法:分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 本品每粒含制何首乌以2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-Ο-β -D-葡萄糖苷(C2tlH22O9)计，不得少于6.0mg ； (2)游离蒽醌和结合蒽醌，照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以80: 20的甲醇-0.1%磷酸为流动相；检测波长254nm ;理论板数以大黄素峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备:取大黄素对照品和大黄素甲醚对照品，加甲醇制成每Iml含大黄素20 μ g、含大黄素甲醚8 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备:取本品装量差异项下的内容物，混匀，取0.7 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流I小时，取下，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液A ;另精密吸取续滤液5ml，置具塞锥形瓶中，水浴蒸干，加8%盐酸溶液20ml，用功率为250W，频率为40kHz的超声波超声处理5分钟，加三氯甲烷20ml， 水浴中加热回流I小时，取出，立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷液，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液B ； 测定法:分别精密吸取上述对照品溶液与两种供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 本品每粒游离蒽醌含量以大黄素(C15HltlO5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计，不得少于.0.25mg/粒；本品每粒结合蒽醌含量以大黄素(C15HltlO5)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计，不得少于0.25mg/粒。
3.根据权利要求1或2所述的精乌胶囊的检测方法，其特征在于:按照重量份计，所述精乌胶囊是用制何首乌500 g、制黄精500 g、酒蒸女贞子704 g和墨旱莲250 g，按下述方法制备成1000粒胶囊剂；以上四味，取制何首乌200g，粉碎成细粉，剩余制何首乌与其余黄精等三味加水煎煮三次，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.1，加入乙醇使含醇量达.60%，充分搅拌，静置24小时，取上清液回收乙醇并浓缩至稠膏，冷后加入制何首乌细粉，搅匀后，烘干，粉碎，装入胶 囊，制成1000粒。
全文摘要
本发明公开了一种胶囊剂的检测方法，该胶囊剂是用何首乌、制黄精、酒蒸女贞子和墨旱莲制备而成。本发明在现有质量检测基础上增加了对何首乌和女贞子的鉴别以及对游离蒽醌和结合蒽醌的含量测测定，改进了对黄精和墨旱莲的鉴别以及对2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C20H22O9)含量测定，可以对精乌胶囊的主要药物成分进行更有效控制，使得精乌胶囊的质量监控水平有了很大的提高。既更有利于生产厂家和监督管理部门对产品质量的监测，也可以为医疗部门和患者的治疗提供更好的保障。
文档编号G01N30/02GK103235082SQ20131015103
公开日2013年8月7日 申请日期2013年4月27日 优先权日2013年4月27日
发明者张沛 申请人:贵州盛世龙方制药股份有限公司