专利名称：对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物及其胶囊制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物，尤其是涉及一种针对缓解酒精肝症状和预防酒精肝的天然植物组合物及其胶囊制剂的制备方法。
背景技术：
据估计，1993年美国约有1530万人酗酒，患有酒精性肝病者有200多万人；许高达90%的患者有酗酒史。在中国，随着生活条件的改善，酗酒有增多趋势，尽管酒精性肝病的发生率尚无精确的统计，但并不少见。据不完全统计，酒精性肝病的发病率呈逐年梯次上升，其病变程度与饮酒总量成正比。酒精肝是酒精性肝病和脂肪肝的重要类型，发病隐匿而且发病率高，持续发展可演变为酒精性肝炎乃至肝硬化。在2000-2004年度中，酒精性肝病发病率占同年其他肝病比例分别为2.4%、2.7%、2.8%、3.4%和4.3% ;中国酒精性肝病患者肝脏损伤严重，其中酒精性肝炎患者占28.8%，酒精性肝硬化患者占37.4%。当前对酒精肝的治疗方法有限，所以酒精肝提倡以预防为主。因此正确认识酒精引起的肝损害，及时诊断和防治具有重要的意义。
一些治疗酒精肝的药物如糖皮质激素，无论口服、外用，还是局部注射，都会产生相应的副作用。长期大 量应用糖皮质激素可引起一系列不良反应。例如引起水、盐、糖、蛋白质及脂肪代谢紊乱，诱发或加重感染，诱发或加重消化性溃疡，可发生激动、失眠，个别病人可诱发精神病，癫痫病人可诱发癫痫发作。故有精神病倾向病人、精神病人及癫痫者应禁用。
因此，寻求一种纯天然保肝护肝的保健品势在必行，避免药物对肝脏造成二次伤害。发明内容
本发明要解决的技术问题，是提供一种纯天然保肝护肝作用的保健品，生产工艺简易，生产安全，对环境无污染，质量指标易控，价格低廉，使用方便，保肝护肝效果明显的天然植物组合物及其制备方法。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是:
—种对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物，包括以下重量份的组分:蜂胶超临界提取物粉30-90份、水飞蓟素5-15份、葛根粉10-20份、β -环糊精5-15份、淀粉10-20份、微粉硅胶5-15份、羧甲基淀粉钠5-15份。
进一步地，包括以下重量份的组分:蜂胶超临界提取物粉45-70份、水飞蓟素8-12份、葛根粉12-18份、β -环糊精5-15份、淀粉10-20份、微粉硅胶5_15份、羧甲基淀粉钠5-15 份。
进一步地，由以下重量份的组分制成:蜂胶超临界提取物粉60份、水飞蓟素10份、葛根粉15份、β -环糊精10份、淀粉15份、微粉硅胶10份、羧甲基淀粉钠10份。
进一步地，所述蜂胶超临界提取物粉通过以下步骤制成:首先，将蜂胶碎成粗粉；接着，采用超临界二氧化碳流体萃取法萃取蜂胶的有效活性成分，萃取工艺条件如下:萃取压力25-35MPa，萃取温度30_37°C，萃取时间150-240分钟，分离器压力6_10MPa，分离器温度40-55°C，二氧化碳流量为200-400L/H ;萃取完毕后，系统压力降为常压，析出被萃取物，获得蜂胶超临界萃取物浸膏；然后，采取超临界二氧化碳流体干燥法对前述蜂胶超临界萃取物浸膏进行干燥处理，过筛即可获得蜂胶超临界提取物粉，干燥参数条件如下:超临界CO2流体压力15-30MPa，流量为10-40L/H，温度为40_60°C，蜂胶超临界萃取物浸膏的初始含固量为15-30%，干燥时间240-540分钟。
本发明的另一技术目的是提供一种上述的对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物的胶囊剂制备方法，包括以下步骤:首先，将蜂胶碎成粗粉；接着，采用超临界二氧化碳流体萃取法萃取蜂胶的有效活性成分，萃取工艺条件如下:萃取压力25-35MPa，萃取温度30-37°C，萃取时间150-240分钟，分离器压力6_10MPa，分离器温度40_55°C，二氧化碳流量为200-400L/H ;萃取完毕后，系统压力降为常压，析出被萃取物，获得蜂胶超临界萃取物浸膏；然后采取超临界二氧化碳流体干燥法对前述蜂胶超临界萃取物浸膏进行干燥处理，过筛即可获得蜂胶超临界提取物粉，干燥参数条件如下:超临界CO2流体压力15-30MPa，流量为10-40L/H，温度为40-60°C，蜂胶超临界萃取物浸膏的初始含固量为15_30%，干燥时间240-540分钟；最后，将蜂胶超临界提取物粉、水飞蓟素、葛根粉、淀粉、微粉硅胶、羧甲基淀粉钠按照配方配比混匀，采用β -环糊精包合，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，即成。
针对以上的技术方案，相对于现有技术，本发明具有以下的有益效果:
1、蜂胶(Propolis)，是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂(树胶)，混入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物，主要活性成分为总黄酮、总酚酸、萜烯类物质。国内外研究和临床证明，蜂胶对四氯化碳、酒精、D-半乳糖胺、药物致肝脏损伤有保护作用。蜂胶能促进化学有毒物代谢分解，转化为无毒物质，通过肾脏和肠道排除体外，从而减轻化学有毒物对正常肝细胞的损害。蜂胶中富含氨基酸，其中脯氨酸进行有丝分裂，修复肝组织细胞的病变损伤，精氨酸可以活化ATP酶，增加ATP的生成量，从而活化肝细胞，肝细胞经修复活化后，生理功能恢复。蜂胶能改善干细胞膜的生物膜活性与通透性，有助于三大营养物质进入肝细胞和将代谢产物及时排出干细胞外，有效改善肝细胞的生态环境。蜂胶能显著 提高SOD的活性，调节肝细胞氧化代谢功能，清除过剩自由基，抗氧化，防止脂质过氧化物细胞的侵袭。蜂胶中的萜烯类物质，可以降低血清谷丙转氨酶，减少肝细胞的大量死亡，从而有效保护肝脏。故本发明组方选用蜂胶为原料。
2、超临界CO2蜂胶是利用高科技超临界流体新技术而得到的纯净天然蜂胶，它具有非常高的活性值，其功效远远高于其他方法萃取的蜂胶；并且其制品也不同于传统的黑色，而是以黄色居多。本发明采用超临界二氧化碳流体萃取技术，具有选择性好，活性成分提取效率高，操作简便等优点，减少了蜂胶的前处理工序，同时因CO2在使用过程中稳定、无毒、不燃烧、安全、不污染环境，从而降低了生产成本；采用β-环糊精包合技术，可提高水飞蓟素中有效成分水飞蓟宾的溶出度，提高生物利用度。
3、本发明所获得的产品，纯度高，溶解快，服用剂量小，同时可克服传统剂型服用时的药物不良口味。另外，本发明采用非化学性原料配方，毒副作用小。
具体实施方式
以下将结合各实施例详细地说明本发明的技术方案。
实施例1
制备蜂胶超临界提取物粉:将蜂胶冷冻后粉碎成粗粉后，采用超临界二氧化碳流体萃取(萃取压力26MPa，萃取温度36°C，萃取时间120分钟，分离器压力4MPa，分离器温度37°C，二氧化碳流量为100L/H);萃取完毕，系统压力降为常压，被萃取物析出，得浸膏；然后再采取超临界二氧化碳流体干燥法获得其粉体，干燥参数条件如下:超临CCV流体压力15-30MPa，流量为10-40L/H，温度为40_60°C，蜂胶提取物的初始含估量为15_30%，整个运行时间控制在240-540分钟，粉碎成200目细粉待用。
制备组合物一:取60重量份(下同)蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素10份、葛根粉15份、淀粉15份、微粉硅胶10份、羧甲基淀粉钠10份混匀，采用β -环糊精10份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
制备组合物二:取30份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素15份、葛根粉20份、淀粉10份、微粉硅胶8份、羧甲基淀粉钠8份混匀，采用β -环糊精10份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
制备组合物三:取80份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素8份、葛根粉13.5份、淀粉20份、微粉硅胶10份、羧甲基淀粉钠10份混匀，采用β -环糊精15份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
实施例2
制备蜂胶超临界提取物粉:将蜂胶冷冻后粉碎成粗粉后，采用超临界二氧化碳流体萃取(萃取压力30MPa，萃取温度33°C，萃取时间200分钟，分离器压力6MPa，分离器温度45°C，二氧化碳流量为350L/H);萃取完毕，系统压力降为常压，被萃取物析出，得浸膏；然后再采取超临界二氧化碳流体干燥法获得其粉体，干燥参数条件如下:超临CCV流体压力15MPa，流量为15L/h，温度为50°C，蜂胶提取物的初始含估量为20%，整个运行时间控制在300分钟，粉碎成200目细粉待用。
制备组合物四:取70份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素12份、葛根粉12份、淀粉20份、微粉硅胶10份、羧甲基淀粉钠10份混匀，采用β -环糊精15份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
制备组合物五:取45份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素8份、葛根粉18份、淀粉20份、微粉硅胶15份、羧甲基淀粉钠15份混匀，采用β -环糊精10份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
实施例3
制备蜂胶超临界提取物粉:将蜂胶冷冻后粉碎成粗粉后，采用超临界二氧化碳流体萃取(萃取压力35MPa，萃取温度30°C，萃取时间250分钟，分离器压力8MPa，分离器温度50°C，二氧化碳流量为400L/H);萃取完毕，系统压力降为常压，被萃取物析出，得浸膏；然后再采取超临界二氧化碳流体干燥法获得其粉体，干燥参数条件如下:超临CO2流体压力IMPa，流量为35L/h，温度为45°C，蜂胶提取物的初始含估量为25%，整个运行时间控制在450分钟，粉碎成200目细粉待用。
制备组合物六:取50份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素10.5份、葛根粉13份、淀粉15份、微粉硅胶6份、羧甲基淀粉钠10份混匀，采用β -环糊精10份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
制备组合物七:取65份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素10份、葛根粉18份、淀粉16份、微粉硅胶12份、羧甲基淀粉钠8份混匀，采用β -环糊精14份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
制备组合物八:取90份蜂胶超临界提取物粉，加入水飞蓟素15份、葛根粉5份、淀粉10份、微粉硅胶15份、羧甲基淀粉钠10份混匀，采用β -环糊精8份包合，制粒、干燥、整粒，制成胶囊。
本发明所述的组合物还可以采用其他的公知方法制成相应剂型(如颗粒剂等)。
检验方法:
(I)取本品内容物约3g，研细，精密称取0.5g，加乙酸乙酯10ml，超声处理20min，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取水飞蓟宾对照品，加甲醇制成每Iml含Img水飞蓟宾的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(10:6:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取鉴别(I)项下的滤液5ml，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取白杨素对照品、高良姜素对照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-丁酮(9.4:0.3:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
取鉴别(I)项下的滤液5ml，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取葛根对照品，同法制成对照药材溶液。再取葛根素对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以三氯甲烷-甲醇-水(7:2.5:0.25)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光条斑。
检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2010年版一部附录IL)。
含量测定`
水飞蓟素:照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(55:45)为流动相；检测波长为287nm ;流速为lml/min ;柱温40°C。理论板数按水飞蓟宾峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备精密称取水飞蓟宾对照品适量，加甲醇制成每Iml含50 μ g溶液，即得。
供试品溶液的制备:取装量差异项下的本品，研细，取细粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入加甲醇1000ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300W，频率25KHz) 30min,放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法:分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每粒含水飞蓟素以水飞蓟宾(C25H22Oltl)计，不得少于5.2mg。蜂胶:照高效液相色谱法(附录VID)测定。(中国药典2010年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇0.15%磷酸溶液(64:36)为流动相；检测波长为268nm。理论板数按白杨素峰计算应不低于6000。对照品溶液的制备:取白杨素对照品、高良姜素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每Iml含白杨素30 μ g、高良姜素20 μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备:取本品粉末(过四号筛)约0.lg，精密称定，置索氏提取器中，加丙酮100ml，加热回流至提取液无色，提取液回收溶剂至于，残渣用甲醇溶解，转移至IOOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法:分别精密吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每粒含蜂胶以总黄酮计，不少于4.2mg0本品按干燥品计算，含白杨素(C15HltlO4)不得少于2.0% ;高良姜素(C15HltlO5)不得少于1.0%。葛根粉:照高效液相色谱法(附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(25:75)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备:取葛根素对照品适量，精密称定，加30%乙醇制成每Iml含80 μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入30%乙醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含葛根素(C21H2tlO9)不得少于2.4%。本发明的胶囊制剂与复方益肝灵片临床疗效比较1、病例选择:酒精性脂肪肝、酒精性肝炎及酒精性肝硬化共150例，设发明的胶囊剂为实验组，复方益肝灵片为对照组。治疗组75例，其中男65例，女10例，平均年龄48岁。对照组75例，其中男68例，女7例，平均年龄47岁。2、观察方法 :实验组用本发明所述的复方蜂胶水飞蓟护肝胶囊，一次3粒，一日3次，饭后服用，持续3个月，停服后随访观察6个月。对照组用市售的复方益肝灵片，一次4片，一日3次，饭后服用，持续3个月，停服后随访观察6个月。由主管医师对治疗组和对照组在治疗前、中、后进行观察相应临床表现、生化指标、B超及出现不良反应并记录。统计学处理:组间数据采用t值检验，P〈0.05为差异有显著性。3、结果
3.1改善自觉症状实验组:服用前肝区不适55例，腹胀47例，食欲不振48例，乏力56例；服用后肝区不适14例，腹胀9例，食欲不振8例，乏力8例。有效率:肝区疼痛74.6%,腹胀80.9%，食欲不振83.3%，乏力85.7%。对照组:服用前肝区不适50例，腹胀40例，食欲不振36例，乏力45例；服用后肝区不适29例，腹胀20例，食欲不振13例，乏力26例。有效率:肝区不适42.0%，腹胀50.0%,食欲不振63.9%，乏力42.2%。用复方蜂胶水飞蓟护肝胶囊实验组对改善上述自觉症状的有效率74.6 85.7%，而对照组有效率42.0 63.9%之间，P〈0.01，二者存在明
显差异。3.2对改善肝功能指标的疗效治疗前后肝动能复常比较
权利要求
1.一种对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分:蜂胶超临界提取物粉30-90份、水飞蓟素5-15份、葛根粉10-20份、β -环糊精5_15份、淀粉10-20份、微粉硅胶5-15份、羧甲基淀粉钠5-15份。
2.根据权利要求1所述的对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物，其特征是，包括以下重量份的组分:蜂胶超临界提取物粉45-70份、水飞蓟素8-12份、葛根粉12-18份、β -环糊精5-15份、淀粉10-20份、微粉硅胶5-15份、羧甲基淀粉钠5_15份。
3.根据权利要求2所述的对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物，其特征是，由以下重量份的组分制成:蜂胶超临界提取物粉60份、水飞蓟素10份、葛根粉15份、β -环糊精10份、淀粉15份、微粉硅胶10份、羧甲基淀粉钠10份。
4.根据权利要求1所述的对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物，其特征是，所述蜂胶超临界提取物粉通过以下步骤制成:首先，将蜂胶碎成粗粉；接着，采用超临界二氧化碳流体萃取法萃取蜂胶的有效活性成分，萃取工艺条件如下:萃取压力25-35MPa，萃取温度30-37°C，萃取时间150-240分钟，分离器压力6_10MPa，分离器温度40-55°C，二氧化碳流量为200-400L/H;萃取完毕后，系统压力降为常压，析出被萃取物，获得蜂胶超临界萃取物浸膏；然后，采取超临界二氧化碳流体干燥法对前述蜂胶超临界萃取物浸膏进行干燥处理，过筛即可获得蜂胶超临界提取物粉，干燥参数条件如下:超临界CO2流体压力15-30MPa，流量为10-40L/H，温度为40_60°C，蜂胶超临界萃取物浸膏的初始含固量为15-30%，干燥时间240-540分钟。
5.一种如权利要求1所述的一种对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物的胶囊剂制备方法，其特征是，包括以下步骤:首先，将蜂胶碎成粗粉；接着，采用超临界二氧化碳流体萃取法萃取蜂胶的有效活性成分，萃取工艺条件如下:萃取压力25-35MPa，萃取温度30-37°C，萃取时间150-240分钟，分离器压力6_10MPa，分离器温度40_55°C，二氧化碳流量为200-400L/H;萃取完毕后，系统压力降为常压，析出被萃取物，获得蜂胶超临界萃取物浸膏；然后采取超临界二氧化碳流体干燥法对前述蜂胶超临界萃取物浸膏进行干燥处理，过筛即可获得蜂胶超临界提取物粉，干燥参数条件如下:超临界CO2流体压力15-30MPa，流量为10-40L/H，温度为40- 60°C，蜂胶超临界萃取物浸膏的初始含固量为15_30%。
全文摘要
本发明公开了一种对化学性肝损伤有辅助保护功能的组合物及其胶囊制剂的制备方法，该组合物包括以下重量份的组分蜂胶超临界提取物粉30-90份、水飞蓟素5-15份、葛根粉10-20份、β-环糊精5-15份、淀粉10-20份、微粉硅胶5-15份、羧甲基淀粉钠5-15份。因此，本发明所获得的产品，纯度高，溶解快，服用剂量小，同时可克服传统剂型服用时的药物不良口味。另外，本发明采用非化学性原料配方，毒副作用小。
文档编号A61K35/64GK103230432SQ201310160559
公开日2013年8月7日 申请日期2013年5月3日 优先权日2013年5月3日
发明者周娟, 毕鑫, 毛日文 申请人:江苏江大源生态生物科技有限公司