一种化瘀通淋胶囊hplc指纹图谱的建立方法
【专利摘要】一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，涉及中药制剂质量控制方法。本发明将前列舒乐胶囊用甲醇溶液超声后，用甲醇定容后过滤，再取淫羊藿苷对照品，加甲醇溶解，用高效液相色谱法建立指纹图谱，洗脱程序为梯度洗脱程序。与现有技术相比，本发明的有益效果是：能有效表征产品质量，更有利监控产品的质量，确保产品质量的稳定性。本发明采用高效液相建立标准指纹图谱，通过多指标成分控制产品及药材质量，能更有效的保证产品质量的长期稳定性，进而保障疗效的安全性和有效性。本发明具有快捷、稳定、精密度高、重现性强及适用范围广等优点，有利于全方位的控制前列舒乐胶囊的质量稳定性。
【专利说明】一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药制剂质量控制方法，具体属于一种用高效色谱法对化瘀通淋胶 囊指纹图谱的建立方法。
【背景技术】
[0002] 前列舒乐颗粒收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十二册，前列舒乐胶囊是 在不改变生产工艺的前提下，由前列舒乐颗粒改剂型制成的新药。前列舒乐胶囊具有补肾 益气，化瘀通淋之效，用于肾脾双虚，气滞血瘀，前列腺增生，慢性前列腺炎；面色晃白，神疲 乏力，腰膝疲软无力，小腹坠胀，小便不爽，点滴不出，或尿频，尿急，尿道涩痛。随着现代医 药的高速发展，由于现阶段中药的有效成分绝大多数没有明确，现行的前列舒乐胶囊的质 量控制标准已不能真实反映前列舒乐胶囊的内在品质及批与批之间产品质量的一致性。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是针对上面所述不足，提供一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建 立方法，该方法将前列舒乐胶囊处方中君药淫羊蕾所含主要有效成分淫羊藿苷做为对照 品，用高效液相色谱法对前列舒乐胶囊的多种指标成分进行检测，获得指纹图谱，用于评价 和控制前列舒乐胶囊的质量，确保前列舒乐胶囊的安全性和有效性。
[0004] 为了解决上述技术问题，本发明采用以下的技术方案。
[0005]本发明将前列舒乐胶囊用甲醇溶液超声后，用甲醇定容后过滤，再取淫羊蕾苷对 照品，加甲醇溶解，用高效液相色谱法建立指纹图谱，洗脱程序为梯度洗脱程序。
[0006]进一步的，一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，依次采用 如下步骤： (a) 供试品溶液制备：称取前列舒乐胶囊粉末〇· 3-lg,置10-50ml量瓶中，加入 3〇-70% 甲醇10-30ml，超声处理2〇-40分钟，加入30_7〇%甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，临用前用微 孔滤膜滤过，即得供试品溶液； (b) 色谱条件：依利特〇DS C18 (4· 6mmX 25〇mm，5 μ m);流动相：乙腈-〇· 2%甲酸，检测 波长268nm ;柱温：25°C ;流速：1. 〇ml/min ;洗脱程序为梯度洗脱程序； (c) 测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到化瘀通淋胶 囊的指纹图谱。
[0007]具体的，一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，依次釆用如 下步骤： (a) 供试品溶液制备：称取前列舒乐胶囊粉末〇· 4g，置25ml量瓶中，加入50%甲醇 2〇ml，超声处理3〇分钟，加入 5〇%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，临用前用〇· 45 μ m微孔滤膜 滤过，即得供试品溶液； (b) 色谱条件：依利特ODS C18 (4. 6mmX 250mm，5 μ m);流动相：乙腈-〇· 2%甲酸，检测 波长268nm ;柱温：25°C ;流速：1. Qml/min ;洗脱程序为梯度洗脱程序； (c)测定：吸取供试品溶液5-10 μ m注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到化 瘀通淋胶囊的指纹图谱。
[0008] 所述梯度洗脱程序的体积比浓度为： 洗脱时间 乙腈 0.2%甲酸 Omin 15% 85% 5min 23% 77% lOmin 27% 73% 17min 27% 73% 30min 40% 60% 60rain 80% 20%〇
[0009] 与现有技术相比，本发明的有益效果是： a.将用前述方法建立的前列舒乐胶囊的指纹图谱与相应的对照图谱进行相似度评价， 运用国家药典委员会制定的《中药指纹图谱相似度计算软件》（2004版)，经过多点校正，色 谱峰的匹配，计算供试品溶液指纹图谱与相应的对照图谱的相似度；指纹图谱相似度计算 参数设置为：时间宽度为0. 5秒；校正方式采用多点校正，校正色谱峰的匹配点为共有峰； 对指纹图谱主要特征峰的面积和比例的控制，其相似度大于0. 900,能有效表征产品质量， 更有利监控产品的质量，确保产品质量的稳定性。
[0010] b.本发明采用高效液相建立标准指纹图谱，通过多指标成分控制产品及药材质 量，能更有效的保证产品质量的长期稳定性，进而保障疗效的安全性和有效性。
[0011] C.本发明具有快捷、稳定、精密度高、重现性强及适用范围广等优点，有利于全方 位的控制前列舒乐胶囊的质量稳定性。
【专利附图】
【附图说明】
[0012] 图1为指纹图谱检测波长选择附图。
[0013] 图2为淫羊藿苷对照品溶液附图。
[0014] 图3为10批前列舒乐胶囊指纹图谱叠加图。
[0015] 图4为前列舒乐胶囊对照指纹图谱。
【具体实施方式】
[0016] 实施例1 :前列舒乐胶囊指纹图谱控制方法。
[0017] 仪器：Waters 2695高效液相色谱仪；Waters 2996 PAD检测器。
[0018] 试药：淫羊藿苷对照品由江西普正制药有限公司对照品事业部提供；前列舒乐胶 囊由江西普正制药有限公司对照品事业部提供；供流动相甲醇及乙腈为色谱纯，水为超纯 水，其余试剂均为分析纯。
[0019] 供试品溶液制备：精密称取前列舒乐胶囊粉末〇· 4g，置25ml量瓶中，加入50%甲 醇约20ml，超声处理3〇分钟，加入50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，临用前用0. 45 μ m微孔 滤膜滤过，即得供试品溶液。
[0020] 色谱条件：依利特ODS C18 (4· 6mmX 25〇mm, 5 μ m);流动相：乙腈-0· 2%甲酸，检测 波长 268nm ;柱温：25°C ;流速：1. Oml/min。
[0021] 梯度洗脱程序的体积比浓度为： 洗脱时间 乙腈 0.2%甲酸 0-5min 15 - 23% 85 - 77% 5-10min 23 - 73% 77 - 73% 10-17min 27% 73% 17-30min 27 - 40% 73 - 60% 30-60min 40 - 80% 60 - 20% 测定：精密吸取供试品溶液10 μ m注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到前列 舒乐胶囊的指纹图谱。
[0022] 实施例2 :前列舒乐胶囊指纹图谱建立。
[0023] 采用实施例1所述述的方法测定共1〇个不同批次前列舒乐胶囊供试品溶液进 行测定（批号：20100601、20100 602、20100701、20100 801、20100903、20100 904、20101001、 20101002、20101101、20101201)。
[0024] 使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"2〇〇4版对10批次的前列舒乐胶囊进行 相似度评价，10批前列舒乐胶囊指纹图谱相似度计算结果见下表。
【权利要求】
1. 一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，依次采用如下步骤： (a) 供试品溶液制备：称取前列舒乐胶囊粉末0. 3-lg，置10-50ml量瓶中，加入30-70% 甲醇10-30ml，超声处理20-40分钟，加入30-70%甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，临用前用微 孔滤膜滤过，即得供试品溶液； (b) 色谱条件：依利特ODS C18 (4. 6mmX 250mm，5 μ m);流动相：乙腈-0· 2%甲酸，检测 波长268nm ;柱温：25°C ;流速：1. Oml/min ;洗脱程序为梯度洗脱程序； (c) 测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到化瘀通淋胶 囊的指纹图谱。
2. 根据权利要求1所述的一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于， 依次采用如下步骤： (a) 供试品溶液制备：称取前列舒乐胶囊粉末0. 4g，置25ml量瓶中，加入50%甲醇 20ml，超声处理30分钟，加入50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，临用前用0. 45 μ m微孔滤膜 滤过，即得供试品溶液； (b) 色谱条件：依利特ODS C18 (4. 6mmX 250mm，5 μ m);流动相：乙腈-0· 2%甲酸，检测 波长268nm ;柱温：25°C ;流速：1. Oml/min ;洗脱程序为梯度洗脱程序； (c) 测定：吸取供试品溶液5-10 μ m注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到化 瘀通淋胶囊的指纹图谱。
3. 根据权利要求1或2所述的一种化瘀通淋胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在 于，所述梯度洗脱程序的体积比浓度为： 洗脱时间 乙腈 0. 2%甲酸 Omin 15% 85% 5min 23% 77% lOmin 27% 73% 17min 27% 73% 30min 40% 60% 60min 80% 20%。
【文档编号】G01N30/36GK104297353SQ201310298670
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2013年7月17日 优先权日:2013年7月17日
【发明者】康兴东, 杨伟庆, 尹文娟, 邹贵阳, 刘立鼎 申请人:江西普正制药有限公司